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《儀器分析實驗》分子熒光分析法Molecular

FluorimetryForshort:M-F一、分子熒光分析法簡介(對光的吸收)發生激發態反應分子內的激發和衰變過程1.1熒光的產生激發態能量的躍遷與轉化的形式和速率：A1,A2吸收:10-15sVR振動松弛：10-12sic內轉化：

10-11sisc系間竄越：

10-6

~10-2sF熒光：10-9~10-6sP磷光：10-6~100s激發光譜發射光譜1.2熒光光譜

任何熒光化合物，都具有兩種特征的光譜：激發光譜和發射光譜。組成、結構與衍化信息☆物質的化學結構☆環境與介質條件☆與其它溶質的相互作用☆反應動力學1.4熒光儀的基本構造？問題：熒光光度計與紫外-可見分光光度計在光路設置上有什么不同？為什么？1.5分子熒光分析法的應用簡介★常規分析應用：

☆定性分析：φf；λex；λem；峰形等

☆定量檢測：F=K﹒I0﹒φf﹒C

☆其它（略）★高端生化研究：

☆分子相互作用研究；☆代謝動力學跟蹤；☆顯微成像（物理遷移與化學衍化的原位“顯跡”）二、維生素B6注射液中維生素B6含的

熒光法測定2.1實驗原理★

在近中性的水溶液中有較強的熒光發射:

（323nm/392nm附近）

★在堿性介質中不穩定★易發生光降解VB6的化學結構2.2實驗流程１、試液配制２、VB6的熒光光譜的繪制３、標準工作曲線的制作４、未知液的配制2.3注意事項：☆注射液的移取與稀釋☆系列標液的測定順序☆即放即測，防光降解☆熒光儀的開關機順序2.4數據處理從熒光光譜圖上讀出最大激發（λex）和發射波長（λem）用標準工作曲線法算出所配

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