…………○…………內…………○…………裝…………○…………內…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年人教版（2024）選擇性必修3生物上冊月考試卷174考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共8題，共16分)1、下列關于蛋白質工程的說法，錯誤的是（）A.蛋白質工程能定向改造蛋白質分子的結構，使之更加符合人類需要B.蛋白質工程是在分子水平上對蛋白質分子直接進行操作，定向改變分子的結構C.蛋白質工程能產生自然界中不曾存在的新型蛋白質分子D.蛋白質工程的操作起點是從預期的蛋白質功能出發，設計出相應的基因，并借助基因工程實現2、注射胰島素是治療Ⅱ型糖尿病的主要手段。下圖是利用基因工程生產人胰島素的操作示意圖，下列敘述錯誤的是（）

A.通過過程⑤的重復進行，可以短時間內獲得大量的胰島素基因B.以細胞1中提取的mRNA為模板，也可擴增出胰高血糖素的基因C.過程⑦將目的基因與基因載體相連，這是基因工程的核心步驟D.C中往往含有標記基因，便于篩選含有胰島素基因的受體細胞3、下列關于高等哺乳動物胚胎工程的相關敘述,錯誤的是（）A.早期胚胎培養通常需要加入動物血清B.胚胎移植可移植到其他任一經同期發情處理過的雌性哺乳動物體內C.胚胎干細胞具有體積小、細胞核大、核仁明顯等特點D.從動物體內獲取的精子不能直接與卵細胞結合完成受精過程4、用于哺乳動物早期胚胎培養的培養液所含的成分包括（）

①無機鹽類②有機鹽類③膠原蛋白酶④維生素和氨基酸、核苷酸等⑤一定濃度的肝素溶液⑥血清⑦激素A.①④⑤⑥⑦B.②③④⑤⑥C.①②④⑤⑦D.①②④⑥⑦5、下圖表示抗人體胃癌的單克隆抗體的制備過程；有關敘述不正確的是（）

A.用特定的選擇培養基對乙篩選，融合細胞均能生長，未融合細胞均不能生長B.圖中實驗小鼠注射的甲是能與抗人體胃癌抗體特異性結合的抗原C.利用PEG融合法、電融合法和滅活病毒誘導法等方法均可誘導細胞融合獲得乙D.丙需進行克隆化培養和抗體檢測，經多次篩選后可獲得大量能分泌所需抗體的丁6、如圖是將人的生長激素基因導入細菌B細胞內制造“工程菌”的示意圖。已知細菌B細胞內不含質粒A，也不含質粒A上的基因。判斷下列說法正確的是（）

A.將重組質粒導入細菌B常用的方法是顯微注射法B.導入了重組質粒的細菌B能在涂布四環素的培養基生長C.導入了質粒A的細菌B能在涂布氨芐青霉素的培養基生長D.目的基因成功表達的標志是細菌B能在涂布氨芐青霉素的培養基上生長7、某課題組為得到青蒿素產量高的新品系，通過一定的技術，使青蒿素合成過程的某一關鍵酶基因fps在野生青蒿中得到了過量表達，其過程如圖所示。下列敘述錯誤的是（）

A.PCR過程中，溫度需要控制在90C以上的目的是破壞氫鍵B.構建重組質粒過程中，目的基因需插入Ti質粒的T-DNA上C.農桿菌的作用是感染植物、并將目的基因轉移到受體細胞中D.用熒光標記的fps基因作為探針可以檢測目的基因是否表達8、藍莓酒工業化生產的大致流程如下：藍莓→破碎→酶解→榨汁過濾→滅菌→主發酵→后發酵→分離提純。下列說法錯誤的是（）A.將藍莓破碎后加果膠酶可提高出汁率B.對培養基和發酵設備滅菌的目的是防止雜菌污染C.菌種繁殖和酒精生成均在主發酵階段完成D.用顯微鏡檢測發酵過程中活菌數量，結果比實際值偏低評卷人得分二、多選題(共9題，共18分)9、營養缺陷性菌株是野生型菌株經過人工誘變或自發突變失去合成某種成長因子的能力；只能在補充了相應的生長因子的基本培養基中才能正常生長的變異菌株。某研究小組對酵母菌用紫外線照射后將其接種到甲培養皿的培養基上，一段時間后將甲培養皿的菌落影印接種（不改變菌落位置）到乙；丙兩培養皿的培養基中，進一步培養得到如下圖所示結果。

下列分析正確的是（）A.接種到甲培養皿采用的是稀釋涂布平板法B.甲、丙兩培養皿中的培養基是基本培養基C.甲培養皿中菌落數有可能比接種的酵母菌數少D.甲、乙、丙三個培養皿都可能存在營養缺陷型10、限制酶BamHⅠ和BglⅡ是兩種常見的工具酶，它們的識別序列及切割位點依次為G↓GATCC和A↓GATCT。研究中用BamHⅠ切割DNA獲得目的基因，用BglⅡ切割質粒，并連接得到重組質粒。相關敘述錯誤的是（）A.酶切過程中，需控制好酶濃度、溫度和反應時間等因素B.目的基因經BamHⅠ切割后形成的黏性末端是—CTAGC.分別用兩種限制酶切割，保證了目的基因定向插入質粒D.經兩種酶處理得到的重組質粒不能再被這兩種酶所識別11、下列說法錯誤的是（）A.因為土壤中各類微生物的數量不同，所以為獲得不同類型的微生物，要按不同的稀釋倍數進行分離B.測定土壤中細菌的總量和測定土壤中能分解尿素的細菌的數量，選用的稀釋范圍相同C.只有得到了3個或3個以上菌落數目在30～300的平板，才說明稀釋操作比較成功，并能夠進行菌落的計數D.牛肉膏蛋白胨培養基的菌落數明顯大于選擇培養基的數目，說明選擇培養基已篩選出一些細菌菌落12、長春花是野生花卉，其所含的長春堿具有良好的抗腫瘤作用。研究人員利用已免疫的B淋巴細胞和雜交瘤細胞通過雜交技術生產出能夠同時特異性識別癌胚抗原和長春堿的雙特異性單克隆抗體，制備過程如圖所示。下列說法錯誤的是（）

A.①過程要多次注射抗原，其目的是刺激小鼠產生更多的抗體B.經③過程獲得的雜交瘤細胞都能產生抗癌胚抗原的特異性抗體C.圖中“?”處只能使用PEG融合法和電融合法來誘導細胞融合D.制備雙特異性抗體的目的是使長春堿能定向地作用于癌細胞13、以純化鑒定后的重組大腸桿菌RecQ解旋酶免疫小鼠（2n=40），融合免疫小鼠的脾細胞及骨髓瘤細胞（2n=62-68），篩選雜交瘤細胞，制備抗RecQ解旋酶單克隆抗體（mAb），相關檢測結果如圖A、B所示。有關說法正確的是（）

圖A雜交瘤細胞染色體數目圖B不同濃度mAb對RecQ蛋白結合DNA活性的影響A.重組大腸桿菌RecQ解旋酶可刺激相應B淋巴細胞增殖分化B.單克隆抗體的制備過程中需要進行2次篩選和2次抗原檢測C.雜交瘤細胞在融合的過程中可能會發生染色體數目的丟失D.該mAb能特異性與RecQ解旋酶結合，在稀釋度為1/800時可顯著抑制RecQ解旋酶與DNA的結合14、2022年6月10日；世界首例體細胞克隆北極狼在北京呱呱墜地。克隆北極狼的供體細胞來自哈爾濱極地公園引進的一只野生北極狼的皮膚樣本，卵母細胞來自一只處于發情期的母犬，代孕母體則是一只比格犬。克隆過程如圖所示，下列有關敘述正確的是（）

A.體細胞核移植技術比胚胎干細胞核移植技術更易成功B.用電刺激、Ca2+載體等方法激活重構胚，促進其分裂發育C.圖中細胞分裂、分化形成克隆胚胎的過程中發生了基因重組D.體細胞核移植技術有望用于增加瀕危動物的種群數量15、剛果紅是一種染料，可以與纖維素形成紅色復合物，當紅色復合物中的纖維素被分解后紅色消失。表中是篩選纖維素分解菌的培養基，利用此培養基可從土壤中篩選纖維素分解菌，結果如圖。下列說法正確的是（）。培養基的成分：纖維素15gFeSO40．5gKH2PO41gZnSO40．5gK2HPO41gCaCl20．5g尿素0．5g剛果紅適量MgSO40．5g瓊脂20g定容1L

A.培養基中纖維素和尿素分別提供碳源和氮源B.KH2PO4和K2HPO4在提供無機鹽的同時還能維持培養基的pHC.將土壤稀釋液接種在平板上的方法為稀釋涂布平板法D.平板上5個菌落都有透明圈，說明5個菌落都能分解纖維素16、全球首個鼻噴新冠肺炎疫苗已獲準臨床試驗，該疫苗是在流感病毒載體上，插入新冠病毒基因片段，制成活病毒載體疫苗，模擬呼吸道病毒天然感染途徑，激活局部免疫應答和全身性免疫應答，從而發揮保護作用。下列相關敘述正確的是（）A.疫苗制備過程中，對流感病毒進行改造利用的原理是基因突變B.從接種方式來看，該疫苗的優點是通過鼻噴接種，無針、無痛C.該疫苗需侵入人體細胞中經基因表達后才能發揮作用D.該疫苗可通過激活淋巴細胞，產生細胞免疫和體液免疫17、據統計，從20世紀90年代至今，全世界包括基因制藥在內的生物技術藥物的銷售額以年均30%的速度增長，生物制藥已成為21世紀的朝陽產業。下列有關說法正確的是（）A.利用轉基因技術還可以進行基因治療，現在技術已經完全成熟B.對于基因制藥，我們應該科學地認識和評估，保障公眾的知情權C.由于轉基因產品的安全問題，國家應建立相應的評估及預警機制D.我們可以利用轉基因工程技術使哺乳動物本身變成“批量生產藥物的工廠”評卷人得分三、填空題(共9題，共18分)18、下圖表示哺乳動物精子和卵細胞發生和成熟的示意圖。請據圖回答下列問題：

（1）③過程中精子頭部的頂體是由__________發育來的；④過程在__________內完成。

（2）在④過程中發生頂體反應；釋放頂體酶，溶解卵丘細胞之間的物質和透明帶。為了阻止多精入卵，會發生__________反應和__________反應。

（3）精子的發生開始的時期是__________；雌性動物卵泡的形成的時期是__________。

（4）初級卵母細胞進行Ⅰ過程是在__________時期完成的，Ⅱ過程是在__________過程中完成的。19、選用去核______的原因：卵（母）細胞______；卵（母）細胞______。20、1.基因檢測引發的倫理問題。

（1）基因身份證：基因身份證指把個人的_____和_____檢測出來；記錄在磁卡上，而做成的個人基因身份證。

（2）基因檢測引發的爭論①_____②_____③_____④_____⑤_____⑥_____

。項目。

反對。

支持。

技術方面。

目前人類對①及基因間的相互作用尚缺乏足夠的認識；通過基因檢測達到②的目的是很困難的；基因檢測結果會給受檢者帶來巨大的③。

通過基因檢測可以對遺傳性疾病及早采取④；適時進行治療，達到挽救患者生命的目的。

道德方面。

基因資訊的泄露造成⑤；如個人婚姻困難；人際關系疏遠，更明顯的是造成一支遺傳性失業大軍。

對于基因歧視現象；可以通過正確的科學知識傳播；⑥教育和立法得以解決。

2.試管嬰兒與設計試管嬰兒的比較①_____②_____③_____④_____

。項目。

設計試管嬰兒。

試管嬰兒。

技術手段。

胚胎移植前①（填“需要”或“不需要”）進行遺傳學診斷這一環節。

②（填“需要”或‘不需要”）進行遺傳學診斷。

實踐應用。

用于白血病；貧血病等遺傳性疾病的預測。

解決不孕不育問題。

聯系。

二者都是③受精；體外進行早期胚胎發育，再進行胚胎移植，從生殖方式上都為④

21、DNA連接酶與DNA聚合酶作用的異同:

DNA聚合酶只能將______加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯鍵。DNA連接酶是連接_____的末端，形成磷酸二酯鍵。22、酵母菌是______________微生物。酵母菌進行有氧呼吸的反應式如下：______________________；酵母菌進行無氧呼吸的反應式如下：_________________。23、通常將DNAD的羥基（—OH）成為_______________端，而磷酸基團的末端成為___________端。由于_______________，因此DNA需要引物，因此DNA的合成方向總是從_________________延伸。24、DNA粗提取與鑒定實驗中，二苯胺要___________。25、蛋白質工程在生物制藥上有廣泛的應用。如果已經確認某種新蛋白質可能具有特殊的抗癌功能，其氨基酸序列也已經確認，如何通過蛋白質工程生產這種新藥？如果回答有困難，可以向老師請教或通過互聯網查找答案。_____26、應用分析與比較的方法，對生殖性克隆與治療性克隆進行列表闡述?

生殖性克隆與治療性克隆的比較。比較項目生殖性克隆治療性克隆含義__________用到的技術__________目的__________評卷人得分四、判斷題(共3題，共12分)27、制備單克隆抗體時，2次篩選的目的不同。()____A.正確B.錯誤28、雄性動物剛剛排出的精子并不具有受精能力，必須獲能后才具備受精能力()A.正確B.錯誤29、要對蛋白質的結構進行設計改造，最終必須通過改造氨基酸序列來完成。()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共3題，共27分)30、為生產具有特定性能的α-淀粉酶；研究人員從某種海洋細菌中克隆了α-淀粉酶基因（1656個堿基對），利用基因工程大量制備琢α-淀粉酶，實驗流程見下圖。請回答下列問題：

（1）利用PCR技術擴增α-淀粉酶基因前；需先獲得細菌的_________。

（2）為了便于擴增的DNA片段與表達載體連接；需在引物的____端加上限制性酶切位點，且常在兩條引物上設計加入不同的限制性酶切位點，主要目的是________________。

（3）進行擴增時；反應的溫度和時間需根據具體情況進行設定，下列選項中_______的設定與引物有關，________的設定與擴增片段的長度有關。（填序號）

①變性溫度②退火溫度③延伸溫度④變性時間⑤退火時間⑥延伸時間。

（4）下圖表示篩選獲得的工程菌中編碼α-淀粉酶的mRNA的部分堿基序列：

圖中虛線框內mRNA片段包含___個密碼子；如虛線框后的序列未知，預測虛線框后的第一個密碼子最多有__種。

（5）獲得工程菌表達的α-淀粉酶后；為探究影響酶活性的因素，以濃度為1%的可溶性淀粉為底物測定酶活性，結果如下：

。緩沖液。

50mmol/LNa2HPO4-KH2PO4

50mmol/LTris-HCl

50mmol/LGly-NaOH

pH

6．0

6．5

7．0

7．5

7．5

8．0

8．5

9．0

9．0

9．5

10．0

10．5

酶相對活性%

25．4

40．2

49．8

63．2

70．1

95．5

99．5

85．3

68．1

63．7

41．5

20．8

根據上述實驗結果，初步判斷該α-淀粉酶活性最高的條件為______。31、甘蔗是華南地區一種重要的經濟作物。某研究團隊從甘蔗根際土壤中分離出了幾種固氮菌；實驗方案如下。

回答下列問題：

（1）Ashby培養基的營養成分主要包括水、無機鹽_________等。實驗中第一次在Ashby培養基上接種的方法是________，在Ashy平板上進行多次接種的目的是_________________________

（2）固氮菌能產生固氮酶。為評估固氮酶的活性，可以檢測____________．

（3）研究發現，上述固氮菌還能產生IAA。取一定體積的固氮菌菌液離心，獲得上清液，現欲測定上清液中IAA的含量，請利用以下試劑，寫出實驗思路。_______

供選試劑：標準的1g/L的IAA母液，蒸餾水，S試劑(與IAA反應顯紅色，且顏色深淺與IAA濃度成正相關）32、有研究表明CDKN2B基因與小鼠的壽命有關；科學家將該基因導入小鼠體內，統計其壽命是否高于正常小鼠。圖1表示CDKN2B基因與相關限制酶酶切位點，該基因轉錄出的mRNA堿基序列與A鏈的堿基序列相同（T；U視為相同的堿基），圖2為質粒簡圖，請回答下列有關問題：

（1）科學家首先采用PCR技術對目的基因進行擴增。PCR過程中每一循環有兩次升溫一次降溫，其中降溫的目的是_______________________________________________________。

（2）科學家在構建基因表達載體過程時，目的基因應插在___________和___________之間才能正常表達。單獨使用限制酶HindⅢ分別切割目的基因和載體后產生黏性末端。攜帶CDKN2B基因的重組質粒成功導入細胞后，發現約一半的細胞中沒有檢測到CDKN2B蛋白，原因是___________。為了避免這種現象的發生，應對以上方法進行改進，改進措施為___________。

（3）若想讓一個轉入了目的基因的受精卵發育成多個個體，可以采用___________技術，操作時應注意做到_______________________________________________________。評卷人得分六、綜合題(共1題，共6分)33、如圖所示為家庭制作腐乳的簡易流程。回答下列問題：

(1)制作腐乳的原理是______________。

(2)前期發酵階段，豆腐上的毛霉來自_____________。然而，現代化生產腐乳，需在嚴格無菌條件下，將_____________直接接種到豆腐上，這樣可避免_____________；保證產品的質量。

(3)加鹽腌制階段，“加鹽”的正確做法是_____________。

(4)加鹽不僅可以析出豆腐中的水分，同時，鹽還具有_____________的作用。

(5)后期發酵階段，向發酵瓶中加入的鹵湯是由_____________配制而成的，鹵湯中主要成分所起的作用分別是_____________。參考答案一、選擇題(共8題，共16分)1、B【分析】【分析】

1；蛋白質工程指以蛋白質的結構規律及其與生物功能的關系作為基礎；通過基因修飾或基因合成，對現有蛋白質進行基因改造，或制造一種新的蛋白質，以滿足人類的生產和生活的需要。

2；蛋白質工程的過程：

（1）根據中心法則逆推以確定目的基因的堿基序列：預期蛋白質功能→設計預期的蛋白質結構→推測應有氨基酸序列→找到對應的脫氧核苷酸序列（基因）。

（2）最終還是回到基因工程上來解決蛋白質的合成。

3；蛋白質工程的應用：

（1）通過改造酶的結構；有目的地提高酶的熱穩定性；

（2）生物工程制藥。

【詳解】

A；蛋白質工程能按照人們的意愿定向改造蛋白質分子的結構；使之更加符合人類需要，A正確；

B；基因的結構決定蛋白質的結構；因此，要對蛋白質的結構進行設計改造，最終還必須通過改造基因來完成，而不是直接對蛋白質分子進行操作，B錯誤；

C；蛋白質工程能產生出自然界中不曾存在過的新型蛋白質分子；C正確；

D；蛋白質工程是在分子水平上對基因直接進行操作；進而改變蛋白質的分子結構，D正確。

故選B。

【點睛】2、B【分析】【分析】

分析題圖：圖中①表示從胰島B細胞中獲取胰島素mRNA的過程；②為逆轉錄過程；A為胰島素基因；③④⑤為PCR過程，表示目的基因的擴增過程﹔⑦為基因表達載體的構建，⑧為重組質粒導入大腸桿菌，⑨為目的基因的增殖，⑩為目的基因的表達。

【詳解】

A；③④⑤為PCR過程；表示目的基因的擴增過程，通過過程⑤的重復進行，可以短時間內獲得大量的胰島素基因，A正確；

B；細胞1中含有胰島素mRNA；可知細胞1是胰島B細胞，由于基因的選擇性表達，細胞1中不含有胰高血糖素mRNA，不能擴增出胰高血糖素的基因，B錯誤；

C；過程⑦將目的基因與基因載體相連；⑦為基因表達載體的構建，這是基因工程的核心步驟，C正確；

D；C重組質粒中往往含有標記基因；便于篩選含有胰島素基因的受體細胞，D正確。

故選B。3、B【分析】【分析】

1；體外受精包括精子的采集和獲能、卵母細胞的采集和培養、受精。

2；胚胎移植是指將雌性動物的早期胚胎；或者通過體外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態相同的其它雌性動物的體內，使之繼續發育為新個體的技術。

【詳解】

A；早期胚胎培養通常需要加入動物血清；以補充合成培養基缺乏的物質，A正確；

B；胚胎移植需要移植到同種的、生理狀態相同的其它雌性哺乳動物的體內；B錯誤；

C；胚胎干細胞由于分化程度低、細胞代謝旺盛；具有體積小、細胞核大、核仁明顯等特點，C正確；

D；從動物體內獲取的精子經過獲能處理后；才能與卵子結合完成受精作用，D正確。

故選B。

【點睛】4、D【分析】【分析】

動物細胞培養原理是細胞增殖。動物細胞培養就是從動物機體中取出相關的組織；將它分散成單個細胞（使用胰蛋白酶或膠原蛋白酶），放在適宜的培養基中，讓這些細胞生長和增殖。

【詳解】

膠原蛋白酶可水解細胞間的蛋白質；使細胞間的黏著度下降，用于制備細胞懸液；一定濃度的肝素溶液可作為精子獲能的化學誘導劑，故③⑤均不需要，ABC錯誤，D正確；

故選D。5、A【分析】【分析】

甲表示抗原；乙表示雜種細胞，丙表示雜交瘤細胞，丁表示能產生特異性抗體的雜交瘤細胞。單克隆抗體的兩次篩選：①篩選得到雜交瘤細胞（去掉未雜交的細胞以及自身融合的細胞）；②篩選出能夠產生特異性抗體的細胞群，兩次抗體檢測：專一抗體檢驗陽性。

【詳解】

A；用特定的選擇培養基對乙篩選；自身融合的細胞以及未融合的細胞均不能生長，A錯誤；

B；實驗目的是制備抗人體胃癌的單克隆抗體；因此給小鼠注射的甲應是能與抗人體胃癌抗體特異性結合的抗原，B正確；

C；誘導動物細胞融合可用PEG融合法、電融合法和滅活病毒誘導法；C正確；

D；丙為雜交瘤細胞；為了篩選能產生所需抗體的雜交瘤細胞，丙需進行克隆化培養和抗體檢測，經多次篩選后可獲得大量能分泌所需抗體的丁，D正確。

故選A。6、C【分析】【分析】

題圖分析：圖示表示將人的生長激素基因導入細菌B細胞內制造“工程菌”的過程。質粒A上含有四環素抗性基因和氨芐青霉素抗性基因；構建基因表達載體后，破壞了質粒A的四環素抗性基因，但氨芐青霉素抗性基因正常，所以導入重組質粒或普通質粒的大腸桿菌都能抗氨芐青霉素，但導入重組質粒的大腸桿菌不能抗四環素。

【詳解】

A、將基因表達載體導入細菌B之前，一般要先用Ca2+處理細菌；使之處于感受態，從而能夠吸收重組質粒，顯微注射法是導入動物細胞的方法，A錯誤；

B；質粒A中含有抗四環素基因和抗氨芐青霉素基因；而重組質粒中抗四環素基因被破壞，只含抗氨芐青霉素基因，則在含有氨芐青霉素的培養基上能生長的是導入質粒A或重組質粒的細菌，能在含有四環素的培養基上生長的是導入了質粒A的細菌，B錯誤；

C；質粒A中含有抗四環素基因和抗氨芐青霉素基因；而重組質粒中抗四環素基因被破壞，只含抗氨芐青霉素基因，則在含有氨芐青霉素的培養基上能生長的是導入質粒A或重組質粒的細菌，能在含有四環素的培養基上生長的是導入了質粒A的細菌，C正確；

D；根據題干信息分析；目的基因（人的生長激素基因）成功表達的標志是受體細胞能產生人的生長激素，D錯誤。

故選C。7、D【分析】【分析】

基因工程技術的基本步驟:

(1)目的基因的獲取:方法有從基因文庫中獲取；利用PCR技術擴增和人工合成。

(2)基因表達載體的構建:是基因工程的核心步驟；基因表達載體包括目的基因；啟動子、終止子和標記基因等。

(3)將目的基因導入受體細胞:根據受體細胞不同；導入的方法也不一樣。

(4)目的基因的檢測與鑒定。

【詳解】

A；利用PCR技術擴增目的基因時；使反應體系中的模板DNA解旋為單鏈的條件是加熱至90℃以上，目的是破壞DNA分子中的氫鍵，A正確；

B；構建重組Ti質粒的過程中；需將目的基因插入Ti質粒的T-DNA上，B正確；

C；將目的基因導入植物細胞常用的方法是農桿菌轉化法；由圖可知，農桿菌的作用是感染植物，將目的基因轉移到受體細胞中，C正確；

D；檢驗目的基因是否格合到青蒿基因組中；可用DNA分子雜交法，即將fps基因制成基因探針，與青萵基因組DNA雜交，而檢測目的基因是否表達，常用抗原-抗體雜交法，D錯誤。

故選D。8、D【分析】【分析】

植物細胞壁主要成分是纖維素和果膠；可在果汁加工過程中加入纖維素酶和果膠酶以破壞細胞壁，提高出汁率。獲得純凈培養物的關鍵是防止雜菌污染，需要對培養基和發酵設備進行滅菌。果酒的發酵過程分為主發酵和后發酵兩個階段，菌種的繁殖；大部分糖的分解和酒精生成在主發酵階段完成。用顯微鏡檢測酵母菌數量時，因為無法區分活菌和死菌，會導致統計結果比實際值偏高。

【詳解】

A；植物細胞壁主要成分是纖維素和果膠；可在果汁加工過程中加入纖維素酶和果膠酶以破壞細胞壁，提高出汁率，A正確；

B；獲得純凈培養物的關鍵是防止雜菌污染；需要對培養基和發酵設備進行滅菌，B正確；

C；果酒的發酵過程分為主發酵和后發酵兩個階段；菌種的繁殖、大部分糖的分解和酒精生成在主發酵階段完成，C正確；

D；用顯微鏡檢測酵母菌數量時；因為無法區分活菌和死菌，會導致統計結果比實際值偏高，D錯誤。

故選D。二、多選題(共9題，共18分)9、A:C【分析】【分析】

①平板劃線法：將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過足夠稀釋后；均勻涂布在培養皿表面，經培養后，可形成單菌落。

【詳解】

A；甲培養皿的菌落均勻分布；接種方法應為稀釋涂布平板法，A正確；

B；甲、丙培養基菌落數目多；包括野生型酵母菌菌株和某種營養缺陷型酵母菌菌株，乙培養皿菌株是某種營養缺陷型酵母菌菌株，乙培養皿的培養基是基本培養基，甲和丙是加入了同種營養成分的培養基，B錯誤；

C；由于基因突變具有不定向性；接種到甲培養皿的酵母菌可能還有其他營養缺陷型，且有些菌落不一定由一個酵母菌形成，所以，甲培養皿中菌落數有可能比接種的酵母菌數少，C正確；

D；乙培養皿的培養基是基本培養基；形成的菌落只可能是野生型菌落，D錯誤。

故選AC。10、B:C【分析】【分析】

關于限制酶；考生可以從以下幾方面把握：（1）來源：主要從原核生物中分離純化出來。（2）特異性：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。（3）結果：形成黏性末端或平末端。

【詳解】

A；影響酶促反應的因素有溫度、pH、酶濃度、底物濃度等；因此酶切過程中，需控制好酶濃度、溫度和反應時間等因素，A正確；

B；根據題意可知；限制酶BamHⅠ的識別序列及切割位點為G↓GATCC，因此目的基因經BamHI切割后形成的黏性末端是是-GATC或CTAG-，B錯誤；

C；由于這兩種酶切割形成的黏性末端相同；因此分別用這兩種限制酶切割，不能保證目的基因定向插入質粒，C錯誤；

D；經兩種酶處理得到的重組質粒的相應部位的序列不能再被這兩種酶識別；D正確。

故選BC。

【點睛】11、B:C【分析】【分析】

1；從土壤中篩選目的微生物的流程一般為：土壤取樣→樣品的稀釋→將稀釋液涂布到以尿素為唯一氮源的培養基上→挑選能生長的菌落→鑒定。當樣品的稀釋庋足夠高時；培養基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。通過統計平板上的菌落數來推測樣品中大約含有的活菌數。

2、統計菌落數目的方法：（1）顯微鏡直接計數法：①原理：利用特定細菌計數板或血細胞計數板，在顯微鏡下計算一定容積的樣品中微生物數量；②方法：用計數板計數；③缺點：不能區分死菌與活菌。（2）間接計數法（活菌計數法）：①原理：當樣品的稀釋度足夠高時，培養基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌．通過統計平板上的菌落數，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。②操作：a、設置重復組，增強實驗的說服力與準確性；b；為了保證結果準確；一般選擇菌落數在30～300的平板進行計數。③計算公式：每克樣品中的菌株數=（c÷V）×M，其中c代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積（mL），M代表稀釋倍數。

【詳解】

AB；樣品的稀釋度直接影響平板上生長的菌落數目；土壤中各類微生物數量不同，所以為獲得不同類型的微生物，要按不同的稀釋倍數進行分離，A正確；B錯誤；

C；在同一稀釋度下只要得到兩個或兩個以上的菌落數目在30～300的平板；就說明稀釋操作比較成功，并能夠進行菌落的計數，C錯誤；

D；驗證選擇培養基是否具有選擇作用；需設立牛肉膏蛋白胨固體培養基作為對照，若后者的菌落數明顯大于前者，說明前者具有篩選作用，D正確。

故選BC。

【點睛】12、A:B:C【分析】【分析】

單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發生免疫反應；之后從小鼠脾臟中獲取已經免疫的B淋巴細胞；誘導B細胞和骨髓瘤細胞融臺，利用選擇培養基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，篩選出能產生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養，即用培養基坮養和注入小鼠腹腔中培養；最后從培養液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

【詳解】

A；①過程要多次注射抗原；其目的是刺激小鼠產生更多的已免疫的B淋巴細胞，A錯誤；

B；③為選擇培養基；經選擇培養基獲得的雜交瘤細胞不一定能產生所需抗體，要產生所需抗體還要進行抗體檢測陽性和克隆化培養，B錯誤；

C；誘導動物細胞融合可以使用PEG融合法、電融合法和滅活病毒誘導法等；C錯誤；

D；雙特異性抗體中的癌胚抗原抗體能將藥物定向引導至和癌細胞結合；從而避免對其他細胞的破壞，D正確。

故選ABC。13、A:C:D【分析】【分析】

單克隆抗體的制備過程是：對小動物注射抗原；從該動物的脾臟中獲取效應B細胞，將效應B細胞與骨髓瘤細胞融合，篩選出能產生單一抗體的雜交瘤細胞，克隆化培養雜交瘤細胞(體內培養和體外培養)，最后獲取單克隆抗體。

【詳解】

A；重組大腸桿菌RecQ解旋酶相當于抗原；能刺激機體產生相應的體液免疫應答，則在人體內可刺激B細胞增殖分化為漿細胞和記憶B細胞，A正確；

B；單克隆抗體的制備過程中需要進行2次篩選和1次抗原檢測；第一次是用選擇性培養基篩選出雜交瘤細胞；第二次是通過克隆化培養和抗體檢測，進一步篩選出能產生人們所需要抗體的雜交瘤細胞，B錯誤；

C；據圖1分析；染色體數目有為80-93的細胞，免疫小鼠中B淋巴細胞染色體數目為40，骨髓瘤細胞染色體數目為62-68，兩者之和大于80-93，故雜交瘤細胞在融合的過程中可能會發生染色體數目的丟失，C正確；

D、據圖2分析，單抗稀釋度為1/800時RecQ解旋酶結合DNA活性最低，可知mAb能特異性與RecQ解旋酶結合可顯著抑制RecQ解旋酶與DNA的結合；D正確。

故選ACD。14、B:D【分析】【分析】

克隆是指生物體通過體細胞進行的無性繁殖；以及由無性繁殖形成的基因型完全相同的后代個體。通常是利用生物技術由無性生殖產生與原個體有完全相同基因的個體或種群。

【詳解】

A；體細胞的分化程度比胚胎干細胞的分化程度高；與體細胞核移植技術相比，胚胎干細胞核移植技術更易成功，A錯誤；

B；在體細胞核移植過程中；用物理方法或化學方法（如電脈沖、鈣離子載體、乙醇、蛋白質合成酶抑制劑等）激活受體細胞，使其完成細胞分裂和發育進程，B正確；

C；基因重組發生在有性生殖的生物進行減數分裂產生配子的過程中(狹義上的基因重組)以及基因工程技術中（包含在廣義的基因重組內）；而細胞分裂、分化的過程一般不會發生基因重組，C錯誤；

D；體細胞核移植技術是無性繁殖；有望用于增加瀕危動物的種群數量，D正確。

故選BD。15、A:B:C【分析】【分析】

本題知識點為剛果紅染色法篩選纖維素分解菌的原理、培養基中各物質的作用。剛果紅是一種染料，它可以與像纖維素這樣的多糖物質形成紅色復合物，但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發生這種反應。當我們在含有纖維素的培養基中加入剛果紅時，剛果紅能與培養基中的纖維素形成紅色復合物。當纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅-纖維素的復合物就無法形成，培養基中會出現以纖維素分解菌為中心的透明圈。纖維素為纖維素分解菌提供碳源，尿素為纖維素分解菌提供氮源，KH2PO4和K2HPO4具有緩沖作用；在提供無機鹽的同時還能維持培養基的pH。獲取單個菌落的方法可通過稀釋涂布平板或平板劃線等技術完成。

【詳解】

A；在此培養基中；纖維素為纖維素分解菌提供碳源，尿素為纖維素分解菌提供氮源，A正確；

B、KH2PO4和K2HPO4具有緩沖作用；在提供無機鹽的同時還能維持培養基的pH，B正確；

C；從平板上纖維素分解菌的菌落分布可以看出（菌落較均勻）；接種方法為稀釋涂布平板法，C正確；

D；菌落周圍有透明圈不一定是細胞分解了纖維素；還有可能是分解了剛果紅染料，D錯誤；

故選ABC。16、B:C:D【分析】【分析】

分析題文描述：題述的疫苗是借助基因工程研制而成的；改造利用的原理是基因重組。疫苗屬于抗原，在抗原的刺激下，機體可以產生特異性免疫反應。特異性免疫包括體液免疫與細胞免疫。

【詳解】

A；該疫苗是在流感病毒載體上；插入新冠病毒基因片段制成的，改造利用的原理是屬于基因重組，A錯誤；

B；鼻噴疫苗都配有鼻噴裝置；以鼻噴接種方式外用，是一種無針、無痛的接種方式，B正確；

C；該疫苗插入的新冠病毒基因片段；需要在細胞內經表達產生蛋白質后，才能發揮作用，C正確；

D；該疫苗可以侵入到人體細胞中；使機體既能產生細胞免疫，又能產生體液免疫，D正確。

故選BCD。17、B:C:D【分析】【分析】

轉基因動物生產藥物中基因來源是藥用蛋白基因和乳腺組織特異性表達的啟動子；成果是乳腺生物反應器。基因治療是把正常基因導入病人體內有缺陷的細胞中，使該基因的表達產物發揮功能，從而達到治療疾病的目的，目前還處于初期的臨床試驗階段。轉基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應；過敏源、營養成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環境安全（對生態系統穩定性的影響）。

【詳解】

A；轉基因技術可以進行基因治療；但現在技術還不成熟，A錯誤；

B；由于人們對基因藥物持不同觀點；所以應科學地認識和評估，保障公眾的知情權，B正確；

C；轉基因生物的安全性包括食物安全、生物安全和環境安全問題；國家應該設立多環節、嚴謹的安全性評價機制，C正確；

D；利用轉基因工程技術可以使哺乳動物本身變成“批量生產藥物的工廠”；如有人將α-抗胰蛋白酶基因轉到羊體內生產α-抗胰蛋白酶，D正確；

故選BCD。

【點睛】三、填空題(共9題，共18分)18、略

【分析】【分析】

1；分析題圖：①表示染色體復制；②是減數分裂，③是精細胞變形為精子過程，④是受精作用；

2；哺乳動物精子和卵子發生的不同點：（1）精子的減數兩次分裂是連續的；場所唯一（MⅠ和MⅡ的場所都是睪丸）；而卵子的兩次分裂是不連續的，場所不唯一，（MⅠ場所在卵巢，MⅡ場所在輸卵管中）；（2）精子和卵子發生的時間不同：精子的發生是從初情期一直到生殖機能衰退；多數哺乳動物卵子的形成和在卵巢內的貯備是胎兒出生前完成的；MⅠ是在雌性動物排卵前后完成的，MⅡ是在受精過程中完成的。

【詳解】

（1）精子變形③過程中精子頭部的頂體是由高爾基體發育來的；④過程是受精過程，在輸卵管內完成。

（2）在④過程中發生頂體反應；釋放頂體酶，溶解卵丘細胞之間的物質和透明帶，透明帶反應和卵細胞膜反應是阻止多精入卵的兩道防線。

（3）雄性動物精子產生的時期是初情期；雌性動物卵泡細胞的形成是在胚胎期性別分化以后完成的，這是精子和卵子在發生上的重要區別。

（4）初級卵母細胞進行減數第一次分裂是在排卵前后時期完成的；減數第二次分裂是在受精作用過程中完成的。

【點睛】

本題考查卵細胞的形成過程和受精作用等相關知識，意在考查學生識記相關細節和解決問題的能力。【解析】高爾基體輸卵管透明帶反應卵細胞膜反應初情期胚胎期性別分化以后排卵前后受精作用19、略

【解析】①.卵（母）細胞②.比較大，容易操作③.細胞質多，營養豐富。20、略

【分析】【分析】

1.基因檢測可以把人體內的致病基因和易感基因檢測出來；通過采取一定的預防措施預防遺傳病的發生，但同時可能會帶來基因歧視等倫理道德方面的問題。

2.設計試管嬰兒不同于試管嬰兒；試管嬰兒是為了解決不孕不育的問題，而設計試管嬰兒是為了解決器官移植方面的醫療問題。

【詳解】

1.（1）基因身份證是指把每個人的致病基因和易感基因都檢測出來；并記錄在磁卡上，這樣到醫院看病時，只要帶上這種身份證，醫生就可以“對證”治療。

（2）反對基因檢測的人認為：目前人類對基因結構及基因間相互作用尚缺乏足夠的認識；要想通過基因檢測達到預防疾病的目的是困難的；況且人類的多基因病，既與基因有關，又與環境和生活習慣有關，有某種致病基因的人不見得就會患病。但是，基因檢測結果本身就已經足以給受檢者帶來巨大的心理壓力。個人基因資訊的泄露所造成的基因歧視，勢必造成奇特的失業大軍，即遺傳性失業大軍。個人基因資訊被暴露之后，還會造成個人婚姻困難；人際關系疏遠等嚴重后果。支持基因檢測的人認為：通過基因檢測可以對遺傳性疾病及早采取預防措施，適時進行治療，達到挽救患者生命的目的。對于基因歧視現象，可以通過正確的科學知識傳播、倫理道德教育和立法得以解決。

2.設計試管嬰兒需要因而具有特定的性別或遺傳性狀；因此胚胎移植前需要進行遺傳學診斷這一環節，而試管嬰兒是為了解決不孕不育問題，不需要考慮嬰兒的性別等問題，不需要進行遺傳學診斷。二者的共同點是：兩者都是體外受精，并進行體外早期胚胎培養，都要經過胚胎移植，都是有性生殖。

【點睛】

1.基因與疾病的關系：具有致病基因的個體不一定患遺傳病；因為生物的性狀還受到環境因素的影響；沒有致病基因也可能患病，因為基因表達的蛋白質，在加工或修飾過程中出現錯誤，也會出現癥狀。

2.明確設計試管嬰兒和試管嬰兒目的的不同是解答本題的關鍵之一。【解析】致病基因易感基因基因結構預防疾病心理壓力預防措施基因歧視倫理道德需要不需要體外有性生殖21、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】單個核苷酸兩個DNA片段22、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】兼性厭氧C6H12O6+6H2O+6O2→6CO2+12H2OC6H12O6→2C2H5OH+2CO223、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】3，5，DNA聚合酶不能從頭開始合成，而只能從3，端延伸DNA子鏈的5，端向3，端24、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】現配現用25、略

【分析】【詳解】

蛋白質工程的基本途徑：從預期的蛋白質功能出發，設計預期的蛋白質結構，推測應有的氨基酸序列，找到相對應的脫氧核苷酸序列，以下按照基因工程的一般步驟進行。該蛋白質的氨基酸序列已知，因此通過蛋白質工程，生產該蛋白質新藥的基本過程為：根據已知的氨基酸序列→找到相對應的脫氧核苷酸序列→合成該蛋白質新藥基因→將獲得的目的基因與質粒構建形成基因表達載體→將重組質粒導入受體菌→獲得工程菌→生產該蛋白質新藥。【解析】根據已知的氨基酸序列→找到相對應的脫氧核苷酸序列→合成該蛋白質新藥基因→將獲得的目的基因與質粒構建形成基因表達載體→將重組質粒導入受體菌→獲得工程菌→生產該蛋白質新藥26、略

【分析】【詳解】

生殖性克隆指利用克隆技術獲得胚胎；并將胚胎孕育成為人類個體的克隆性技術，其目的是用于生育，獲得人的復制品；治療性克隆是指利用克隆技術產生特定細胞或組織等，用于治療性移植的克隆性技術，其目的是用于醫學研究和疾病的治療。

據概念可知，實現生殖性克隆和治療性克隆都會用到的技術有體細胞核移植技術、動物細胞培養技術、早期胚胎培養技術、胚胎移植技術等；治療性克隆在獲取胚胎干細胞后，根據治療目的誘導干細胞分化形成各種組織和器官，供患者移植用，故治療性克隆還會應用到的技術為干細胞培養技術。【解析】生殖性克隆指利用克隆技術獲得胚胎，并將胚胎孕育成為人類個體的克隆性技術治療性克隆是指利用克隆技術產生特定細胞或組織等，用于治療性移植的克隆性技術體細胞核移植技術、動物細胞培養技術、早期胚胎培養技術、胚胎移植技術等體細胞核移植技術，早期胚胎培養技術、動物細胞培養技術、胚胎移植技術、干細胞培養技術等用于生育，獲得人的復制品用于醫學研究和疾病的治療四、判斷題(共3題，共12分)27、A【分析】【詳解】

制備單克隆抗體時，第一次篩選的目的是獲得雜交瘤細胞，第二次篩選目的是獲得能產生特異性抗體的雜交瘤細胞，故正確。28、A【分析】【詳解】

雄性動物剛剛排出的精子并不具有受精能力，必須獲能后才具備受精能力，精子獲能的過程不是獲得能量的過程，是獲得受精能力的過程，可在獲能液或受精液中完成，故正確。29、B【分析】【詳解】

要對蛋白質的結構進行設計改造；最終必須通過改造基因中的堿基序列來完成，因為基因能指導蛋白質的生物合成。

故錯誤。五、實驗題(共3題，共27分)30、略

【分析】【分析】據圖分析；圖示為利用基因工程大量制備α-淀粉酶的過程，目的基因是α-淀粉酶基因，與體構建基因表達載體，然后將目的基因導入大腸桿菌，接著對目的基因進行檢測與鑒定，最后利用工程菌培養獲得大量的α-淀粉酶產品。

【詳解】（1）α-淀粉酶基因來自于海洋細菌；因此為了利用PCR技術擴增α-淀粉酶基因，必須先獲得細菌的基因組DNA。

（2）目的基因與運載體結合前需要用限制酶對兩者進行切割；延伸是在引物的3’端延伸，為了保證目的基因的完整性，因此需在引物的5’端加上限制性酶切位點，且為了使DNA片段能定向插入表達載體，減少自連，常在兩條引物上設計加入不同的限制性酶切位點。

（3）進行擴增時；退火溫度的設定與引物有關，延伸時間的設定與擴增片段的長度有關。

（4）根據題意分析；虛線框內mRNA片段內含有24個堿基，每3個堿基構成一個密碼子，因此包含24÷3=8個密碼子；構成mRNA的堿基有4種，若虛線框后的序列未知，預測虛線框后的第一個密碼子最多有4×4-3=13種。

（5）根據表格數據分析可知，在pH為8.5，緩沖液為50mmol/LTris-HCl的條件下；α-淀粉酶相對活性為99.5%，活性最高。

【點睛】解答本題的關鍵是基因工程的四個基本步驟以及PCR技術的過程、條件，回憶相關知識點和注意事項，結合提示分析答題。【解析】基因組DNA5’使DNA片段能定向插入表達載體，減少自連②⑥813pH為8．5，緩沖液為50mmol/LTris-HCl31、略

【分析】【分析】

培養基是人們按照微生物對營養物質的不同需求；配制出供其生長繁殖的營養基質，培養基中一般含有水；碳源、氮源和無機鹽。在提供上述幾種主要營養物質的基礎上，培養基還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養物種和氧氣的要求。固氮微生物可利用空氣中的氮氣，故培養基無需再加入氮源。純化微生物時常用的接種方法是平板劃線法和稀