…………○…………內…………○…………裝…………○…………內…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年滬教版選擇性必修3生物上冊階段測試試卷835考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共8題，共16分)1、雖然人們知道基因和疾病之間存在一定聯系，但有些人仍然反對進行基因檢測。下列哪項不是這些人反對基因檢測的原因A.基因檢測可能破壞自身的基因結構B.存在某種致病基因并不意味著一定患病C.有些遺傳病即使檢測出，也不能得到有效治療D.檢測結果可能會給受檢測的人帶來心理壓力2、藍細菌擬核DNA上有控制葉綠素合成的chlL基因。某科學家通過構建該種生物缺失chlL基因的變異株細胞；以研究chlL基因對葉綠素合成的控制，技術路線如下圖所示，下列相關敘述不正確的是（）

A.①②過程應使用不同的限制性內切核酸酶B.①②過程都要使用DNA連接酶C.終止密碼子是基因表達載體的重要組成部分D.若操作成功，可用含紅霉素的培養基篩選出該變異株3、下列敘述中，不正確的是（）A.每一個B淋巴細胞只能分泌一種特異性抗體B.在動物細胞培養過程中，細胞培養應在含5%CO2的培養箱中進行，CO2的作用是維持培養液的pHC.哺乳動物細胞核移植可分為胚胎細胞核移植和體細胞核移植D.植物組織培養、動物細胞培養、植物體細胞雜交和動物細胞融合得到的都只是細胞或雜交（種）細胞4、印度沙漠貓是一種珍稀貓科動物,通過胚胎工程技術,可以讓家貓代孕而繁育,主要步驟如圖所示。下列相關敘述正確的是()

A.步驟甲、乙分別是指精子獲能、胚胎分割B.誘導超數排卵所注射的激素只能作用于特定細胞C.受精卵發育成早期胚胎所需營養主要來源于培養液D.步驟甲使用的培養液和早期胚胎培養液成分基本相同5、某種轉基因玉米能高效合成一種多肽類的蛋白酶抑制劑，積累于莖葉中，讓取食它的害蟲的消化酶受抑制無法消化食物而死。下列就該玉米對人類安全性的評論中，不符合生物學原理的是()A.不安全。這種玉米的果實(種子)也可能含有蛋白酶抑制劑，食用后使人因無法消化食物而患病B.不安全。該玉米的蛋白酶抑制劑基因可通過食物鏈富集并在人體細胞內表達，使人體無法消化食物而患病C.安全。因為人與害蟲消化酶的結構存在差異，玉米的蛋白酶抑制劑對人體很可能無影響D.安全。人類通常食用煮熟的玉米食品，玉米的蛋白酶抑制劑已被高溫破壞，不會影響人的消化6、如圖是培育“試管嬰兒”的主要過程。2012年中國首例“設計試管嬰兒”誕生；該女嬰出生目的是挽救患有重度致命貧血病的14歲姐姐。

下列敘述錯誤的是（）A.“設計試管嬰兒”需在②時進行遺傳學診斷B.“試管嬰兒”“設計試管嬰兒”均屬有性生殖C.“設計試管嬰兒”的技術不屬于“治療性克隆”D.該女嬰造血干細胞不能挽救其他貧血病患者7、CD47是一種跨膜糖蛋白，它可與巨噬細胞表面的信號調節蛋白結合，從而抑制巨噬細胞的吞噬作用。肺癌、結腸癌等多種腫瘤細胞表面的CD47含量比正常細胞高1．6~5倍，導致吞噬細胞對腫瘤細胞的清除效果減弱。科學家推測，抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對巨噬細胞的抑制作用，為此他們按照如下流程進行了實驗。下列錯誤的是（）

A.多次進行步驟①的目的是獲得更多已免疫的B淋巴細胞B.經多次篩選可得到既能大量增殖又能產生抗CD47抗體的細胞C.實驗組中巨噬細胞和腫瘤細胞的共培養體系需放入CO2培養箱D.對照組中吞噬細胞的吞噬指數顯著高于實驗組可驗證上述推測8、關于DNA的粗提取與鑒定實驗的各步驟操作目的的表述哪項是錯誤的（）A.離心沉淀的血細胞中加水是為了使血細胞破裂從而提取DNAB.加入物質的量濃度為2mol/L的NaCl溶液，是為了溶解DNAC.向溶解有DNA的NaCl溶液中加蒸餾水是為了洗滌DNA，除去雜質D.離心后除去血液中的上清液是為了除去雜質評卷人得分二、多選題(共7題，共14分)9、下列關于傳統發酵技術的敘述，錯誤的是（）A.較高溫度和密閉環境有利于果醋的發酵B.鹽的用量、酒的種類和用量、溫度等均會影響腐乳風味C.果酒、果醋和腐乳制作的微生物細胞呼吸產生CO2的場所都是細胞質基質D.與自然發酵相比，人工接種菌種不易被雜菌污染10、下列關于轉基因生物安全性的敘述中，正確的是（）A.我國已經對轉基因食品和轉基因農產品強制實施了產品標識制度B.國際上大多數國家都在轉基因食品標簽上警示性注明可能的危害C.開展風險評估，預警跟蹤和風險管理是保障轉基因生物安全的前提D.目前對轉基因生物安全性的爭論主要集中在食用安全性和環境安全性上11、營養缺陷型菌株就是在人工誘變或自發突變后，微生物細胞代謝調節機制中的某些酶被破壞，使代謝過程中的某些合成反應不能進行的菌株。這種菌株能積累正常菌株不能積累的某些代謝中間產物，為工業生產提供大量的原料產物。以下是實驗人員利用影印法初檢氨基酸缺陷型菌株的過程。下列說法不合理的是（）

A.過程①的接種方法為稀釋涂布平板法，過程②兩種培養基的成分相同B.進行過程②培養時必須先將絲絨布轉印至基本培養基上順序不能顛倒C.統計菌落種類和數量時要每隔24h觀察統計一次，直到各類菌落數目穩定，以防止培養時間不足導致菌落數目偏大D.營養缺陷型菌株細胞代謝調節機制中的某些酶被破壞，可能與核孔復合體的蛋白質空間結構發生改變有關12、勤洗手是預防病毒感染的有效措施。某公司在防控新型冠狀病毒期間推出一款新型免洗洗手凝膠。為衡量該凝膠的清洗效果；研究人員檢測了用凝膠洗手前后手部細菌的含量。凝膠洗手前的檢測流程見下圖。下列敘述錯誤的是（）

A.統計洗手前手部細菌的數量，選擇的接種方法是平板劃線法B.除圖中操作外，還需要設置一組未接種的空白培養基進行培養C.培養基上的一個菌落只可能來源于樣品稀釋液中的一個活菌D.初步判斷培養基上菌種的類型，需要用顯微鏡觀察菌體的形狀13、生物技術的飛速發展在安全性和倫理道德方面引發了許多爭論，你認為下列說法哪些是正確的？（）A.科學家要對自己的科學研究負責，對社會負責B.科學家應向公眾傳播科學知識C.公眾應該理性地、負責任地對待這些問題D.公眾可以根據自己的價值觀采取不同的態度14、克隆動物常用的核移植方法主要有細胞質內注射法和透明帶下注射法兩種。前者是用微型注射針將供體細胞的細胞核吸出注入去核卵母細胞質內；后者是直接將供體細胞注入去核卵母細胞透明帶內，然后促使兩個細胞融合。世界首例體細胞克隆北極狼的供體細胞來自哈爾濱極地公園的一只野生北極狼的皮膚樣本，卵母細胞來自一只處于發情期的母犬，代孕母體則是一只比格犬。下列敘述錯誤的是（）A.克隆北極狼的性狀由野生北極狼、發情期的母犬和比格犬的基因共同決定B.相比之下，透明帶下注射法對供體細胞核和卵母細胞的損傷更小C.供體細胞注入卵母細胞透明帶內后，就可自行進入卵母細胞D.細胞分裂、分化形成克隆胚胎的過程中發生了基因重組15、原腸胚形成期被稱為人體胚胎發育的“黑匣子”時期。研究人員利用胚胎干細胞，在實驗室中制造出不能發育成完整胚胎的“擬原腸胚”模型，用來揭示人類早期胚胎發育的過程。下列說法正確的是（）A.滋養層細胞將來能發育成胎膜和胎盤B.利用核移植所得胚胎干細胞，可以誘導發育成適合移植的器官C.對原腸胚進行胚胎分割，可以提高移植胚胎的利用率D.該模型可以研究酒精、藥物和病原體對胚胎發育的影響評卷人得分三、填空題(共9題，共18分)16、哺乳動物核移植可以分為______核移植（比較容易）和______核移植（比較難）。17、酶是細胞合成的生物催化劑。隨著生物科學技術的發展；酶已經走出實驗室，走進人們的生產和生活。請回答下面有關酶的問題：

（1）在腐乳制作的過程中；利用毛霉等微生物產生的蛋白酶將豆腐中的蛋白質分解成________，____________將脂肪水解為甘油和脂肪酸。加酶洗衣粉里添加的酶制劑中，應用最廣泛；效果最明顯的是____________。

（2）果膠酶包括_____________________________；生產中如果要固定果膠酶；最好采用______________________________________法固定化。

（3）酶提取和分離原理：需要用__________法去除相對分子質量大的雜質蛋白，以純化酶；利用_________________________法對酶進行純度鑒定。18、基因的“剪刀”是_____，它的化學本質是_____，它只能識別一種特定的_____，并在_____上切割DNA分子；基因的“針線”是______，它能連接DNA骨架上的_____，DNA的骨架由___________構成；基因的運載體是將_____送入_____的運輸工具。目前常用的運載體有_____、________和_____。質粒存在于許多_____和______等生物中，是擬核或_____外能夠_____的很小的環狀_____。19、______——“分子手術刀”20、重組DNA或重組質粒導入受體細胞后，篩選______的依據是______。21、目的：使目的基因在受體細胞中_____，并且可以______，使目的基因能夠______作用。22、假設PCR反應中，只有一個DNA片段作為模板，請計算在30次循環后，反應物中大約有個這樣的_______個DNA片段，一共需要加入______________個引物。23、DNA粗提取與鑒定實驗中，二苯胺要___________。24、基因表達載體的組成及其作用。

一個基因表達載體的組成，除了______________、_______________外，還必須有__________、______________等(如圖所示)。

①______________②______________③______________

④______________⑤______________⑥______________

⑦______________評卷人得分四、判斷題(共1題，共10分)25、治療性克隆是指利用克隆技術產生特定的細胞、組織和器官，用它們來修復或替代受損的細胞、組織和器官，從而達到治療疾病的目的。（選擇性必修3P106）()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共4題，共8分)26、如圖為果酒與果醋發酵裝置示意圖；請據圖回答：

（1）釀造葡萄酒時；在葡萄榨汁前，葡萄要先進行________再除去枝梗，可以避免除去枝梗時引起葡萄破損，增加被雜菌污染的機會。

（2）將發酵裝置放在18～25℃環境中，每天擰開氣閥b多次；排出發酵過程產生的大量________。裝置中d處設計成彎曲形狀的目的是____________________________________________。

（3）10天之后；利用酸性條件下的________對從出料口c取樣的物質進行檢驗，若樣液變為________色，說明產生了酒精。

（4）產生酒精后，若在發酵液中加入醋酸菌，然后將裝置放在________環境中，適時打開______向發酵液中充氣，原因是______________________________________________。27、某興趣小組就“泡菜腌制過程中亞硝酸鹽含量變化”開展了研究；操作如下：1月4日下午選取1；2、3號三只相同的泡菜壇，在每個壇中加入洗凈的新鮮蓮花菜0.6kg，再分別倒入等量煮沸并冷卻的10%的鹽水，將壇密封，置于同一環境中。封壇前進行第一次取樣測定亞硝酸鹽含量，后來定時測定，結果如下圖。

（1）測定亞硝酸鹽含量的方法是_______；其原理是：在鹽酸酸化的條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發生重氮化反應后，與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結合形成_____，將顯色反應后的樣品與已知濃度的標準液進行目測比較，可以大致估算出泡菜中亞硝酸鹽的含量。

（2）實驗中；鹽水加熱煮沸是為了______；冷卻之后再使用是為了保證_______等微生物的生命活動不受影響。

（3）在腌制過程中；壇中溶液量會增加，原因是_____。

（4）圖中數據表明；泡菜在腌制的第_____天亞硝酸鹽含量達到最大值，腌制到第______天以后再食用可以較好地避免亞硝酸鹽對人體健康的危害。

（5）實驗中三只壇中產生的亞硝酸鹽含量存在差異；最可能的原因是__________。

（6）為了讓實驗數據更好地表明泡菜腌制過程中亞硝酸鹽含量變化，對該實驗所獲得的3組數據應進行怎樣的處理才更合理？_________________。28、物質W是一種含氮有機物；會污染土壤。W在培養基中達到一定量時培養基表現為不透明。某研究小組欲從土壤中篩選出能降解W的細菌（目標菌）。回答下列問題。

（1）要從土壤中分離目標菌，所用選擇培養基中的氮源應該是_________。

（2）在從土壤中分離目標菌的過程中，發現培養基上甲、乙兩種細菌都能生長并形成菌落（如圖所示）。如果要得到目標菌，應該選擇________菌落進一步純化，選擇的依據是________。

（3）土壤中的某些微生物可以利用空氣中的氮氣作為氮源。若要設計實驗進一步確定甲、乙菌能否利用空氣中的氮氣作為氮源，請簡要寫出實驗思路、預期結果和結論，即_______。

（4）該小組將人工合成的一段DNA轉入大腸桿菌；使大腸桿菌產生能降解W的酶（酶E）。為了比較酶E與天然酶降解W能力的差異，該小組擬進行如下實驗，請完善相關內容。

①在含有一定濃度W的固體培養基上，A處滴加含有酶E的緩沖液，B處滴加含有相同濃度天然酶的緩沖液，C處滴加_________；三處滴加量相同。

②一段時間后，測量透明圈的直徑。若C處沒有出現透明圈，說明___________；若A、B處形成的透明圈直徑大小相近，說明___________。29、《本草綱目》記載；“蟬花可治療驚癇，夜啼心悸，功同蟬蛻”。蟬花是蟬擬青霉寄生于蟬若蟲后形成的蟲菌復合體，內含蟲草多糖；甘露醇和必需氨基酸等活性成分。研究人員從天然蟬花中分離純化蟬擬青霉菌株進行人工培養。

(1)制備培養基：

①該實驗選擇馬鈴薯葡萄糖瓊脂（PDA）培養基，配方如下：馬鈴薯200g，葡萄糖20g，KH2PO42g，MgSO40.5g，瓊脂20g，用蒸餾水定容至1000mL，自然pH，培養基中的馬鈴薯可為蟬擬青霉生長提供_____等營養成分（至少寫出2種），該培養基的自然pH為______性范圍。

②為了便于篩選蟬擬青霉菌株，培養基中還應加入氯霉素等抗生素以抑制_____的生長。該培養基從功能上分類屬于______培養基。

③配制的培養基必須進行滅菌處理，目的是_______。檢測固體培養基滅菌效果的常用方法是_____。

(2)蟬擬青霉的分離純化：取新鮮蟬花，挑取蟲體胸腔中的少量菌絲采用_______法接種至PDA培養基上進行培養。

(3)發酵生產：發酵生產中常用液體培養基擴大培養。下表為發酵菌絲體和天然蟬花的主要成分及含量的測定結果，據表判斷_______（填“能”或“不能”）用發酵菌絲體替代天然蟬花，判斷的理由是_______。粗蛋白（%）粗纖維（%）灰份（%）水分（%）蟲草多糖（mg/g）甘露醇（mg/g）發酵菌絲體25．388．327．878．9233．278．9天然蟬花19．653．127．849．8128．553．6評卷人得分六、綜合題(共3題，共9分)30、家畜胚胎的性別鑒定技術對畜牧業的發展具有重要意義。巢式PCR擴增反應在兩次PCR反應中使用兩組不同引物；先使用外引物對目標區域DNA片段進行第一次PCR擴增，產生中間產物，然后使用內引物對中間產物進行第二次PCR擴增，產生目標產物。下圖是式PCR工作原理示意圖，請回答：

（1）巢式PCR反應體系中需要加入模板、________、________、引物、Mg2+；緩沖液等。

（2）相比于常規PCR獲得的產物而言，巢式PCR獲得的產物特異性________，原因是如果利用外引物擴增產生了錯誤片段，再利用內引物擴增在錯誤片段上進行引物配對并擴增的概率________。

（3）巢式PCR通常在一個試管中進行第一階段反應，然后將中間產物等轉移到第二試管中進行第二階段反應，不在同一試管完成的主要原因是________。

（4）科研人員利用多重巢式PCR技術同時擴增Y染色體上雄性決定基因（SRY）和常染色體上的酪蛋白基因（CSN1S1）；進行早期胚胎的性別鑒定，并將鑒定后的胚胎進行移植。下表是主要實驗步驟，請完成下表：

。實驗目的方法步驟要點胚胎樣品DNA提取選取囊胚的①________細胞提取DNAPCR引物的設計和合成根據牛的SRY和CSN1S1基因序列設計合成②________對引物PCR過程預變性→③________→退火→延伸觀察擴增結果電泳分析受體牛④________處理對受體牛注射前列腺素胚胎移植將篩選出的胚胎移植到受體牛的子宮內

（5）電泳結果如下圖所示，1~5號為取自不同胚胎的DNA樣品進行巢式PCR的產物。A和B條帶中代表CSN1S1的是________。可以確定1~5號中________號胚胎為雌性。

（6）牛胚胎性別的鑒定除了可以利用PCR外，下列方法也可行的有________。

①差速離心法。

②核酸探針雜交法。

③染色體核型分析法。

④H-Y抗血清免疫學法（H-Y抗原編碼基因位于Y染色體上）31、黃色鐮刀菌污染動物飼料后會產生一種毒性較高的代謝產物—－脫氧雪腐鐮刀菌烯醇（DON）；這給飼養的動物及人類健康帶來巨大威脅。科研人員利用雜交瘤技術制備出抗DON的單克隆抗體，實現了對DON的高效低成本檢測。回答下列問題:

（1）制備單克隆抗體時，首先需要_______，隨后從小鼠脾臟獲得Ｂ淋巴細胞進行培養，進行細胞培養時所需氣體____________。

（2）通過_________技術獲得雜交細胞后，再經過篩選獲得所需的雜交瘤細胞，該細胞具有的特點是______________。

（3）為獲得大量的單克隆抗體，可將雜交瘤細胞進行______，從________中提取;或將雜交瘤細胞注射到小鼠腹腔；從小鼠腹水中提取。

（4）將已知濃度帶熒光標記DON的溶液（標準樣品）、未知濃度不帶熒光標記DoN的溶液（待測樣品）等量混合，加入事先吸附有上述單克隆抗體的固相載體中保溫一段時間，________________________（抗體與兩種DoN的結合能力相同）。得出劃線部分判斷所依據的原理是____________________。32、抗除草劑轉基因作物的推廣可有效減輕除草勞動強度；提高農業生產效率。圖1為抗除草劑轉基因玉米的技術流程。

(1)構建含除草劑抗性基因的表達載體，傳統的方法是目的基因通過____________酶與載體進行重組。載體上目的基因插入位點的限制酶識別序列____________（填“能”或“不能”）出現在目的基因內部，可通過____________技術在目的基因兩側添加相應限制酶識別序列；以便構建表達載體。

(2)為了減少限制酶識別序列的影響，科研人員研發了新的DNA重組方法：無縫克隆In-Fusion技術（圖2），其中In-Fusion酶可以將任何具有相同15bp末端序列的線性DNA分子進行連接；類似同源重組。

①科研人員希望應用以上方法構建含有A和GUS基因的重組DNA分子；首先獲得了3種DNA分子如圖3，然后混合進行In-Fusion反應。

如果引物2上額外添加的片段對應于GUS基因中加粗的e片段，那么引物1和引物4上額外增加的片段分別對應載體中的片段______________。完成重組反應后，將產物表達載體加入經過______________處理的農桿菌中。

②為篩選成功轉入目標重組DNA分子的菌落，可以選取引物______________擴增目的基因并電泳檢測。請在圖4中畫出陽性菌落的電泳結果。

(3)農桿菌轉化愈傷組織時，用含______________的選擇培養基篩選轉化的愈傷組織。轉化過程中，愈傷組織表面常殘留農桿菌，導致未轉化愈傷組織（假陽性）也可能在選擇培養基上生長。已知報告基因GUS表達產物能催化無色物質K呈現藍色，請敘述排除假陽性的原理________。參考答案一、選擇題(共8題，共16分)1、A2、C【分析】【分析】

分析題圖：圖示為變異株的培育過程。①是chIL基因與質粒重組形成質粒1的過程；②是紅霉素抗性基因和質粒1重組形成質粒2的過程；③是將重組質粒2導入有chIL基因的藍藻細胞；并同源替換chIL基因，最終獲得無chIL基因的藍細菌。

【詳解】

A；①②過程切割的位點不同；應該使用不同的限制性核酸內切酶，A正確；

B；①②過程都是形成重組質粒的過程；因此都要使用限制酶和DNA連接酶，B正確；

C；終止子是基因表達載體的重要組成部分；終止密碼子在mRNA上，不在基因上，C錯誤；

D；②過程插入了紅霉素抗性基因；可作為標記基因，若操作成功，可用含紅霉素的培養基篩選出該變異株，D正確。

故選C。

【點睛】

本題以藍細菌為素材，結合變異株的培育過程圖，考查基因工程的原理及技術，要求考生識記基因工程的原理、工具及操作步驟。3、D【分析】【分析】

1；植物細胞工程包括植物組織培養技術和植物體細胞雜交技術；二者均利用了細胞的全能性；

2；動物細胞培養利用了細胞增殖的原理；動物細胞核移植技術只體現了動物細胞核的全能性。

【詳解】

A；每一個效應B淋巴細胞都是受到特定抗原刺激后產生的；只能分泌一種特異性抗體，A正確；

B、動物細胞培養應在CO2的培養箱中進行，5%CO2的作用是調節培養液的pH；B正確；

C；根據核供體的不同；哺乳動物細胞核移植可分為胚胎細胞核移植和體細胞核移植，C正確；

D；植物組織培養可獲得試管苗；植物體細胞雜交可獲得雜種植株，D錯誤。

故選D。4、B【分析】【分析】

分析題圖：步驟甲為受精作用；步驟乙為胚胎移植，其中誘導超數排卵用的是促性腺激素，受精過程使用的培養液是獲能溶液或專用受精溶液，早期胚胎培養的培養液成分，除了一些無機鹽和有機鹽類外，還需添加維生素；激素、氨基酸、核苷酸以及血清等。

【詳解】

A；步驟甲、乙分別指受精作用、胚胎移植；A錯誤；

B；誘導超數排卵所注射的激素是促性腺激素；只能作用于性腺，B正確；

C；受精卵發育成早期胚胎所需營養主要來自受精卵；C錯誤；

D；受精過程使用的培養液是獲能溶液或專用的受精溶液；與早期胚胎培養液有區別，D錯誤。

故選B。

【點睛】

本題是對胚胎工程的考查，解答本題的關鍵在于理解試管動物培養的過程、超數排卵的激素作用特點和早期胚胎培養的營養物質來源以及幾種不同培養液的成分：動物細胞培養液、植物組織培養基成分、體外受精培養液、早期胚胎培養液。5、B【分析】【分析】

1；（1）目前科學家對基因的結構、基因間的相互作用以及基因的調控機制等都了解得相當有限。（2）許多轉移的基因是異種生物的基因。（3）外源基因插入宿住基因組的部位往往是隨機的。因此在轉基因生物中；有時候會出現一些人們意想不到的后果。

2；轉基因食品的安全問題是雙刃劍；既有安全性也有不安全性。基因是有遺傳效應的DNA片段，屬于大分子有機物，外源基因進入動物和人體的消化道后會被消化成小分子物質，不能直接進入動物和人體細胞內，更談不上通過食物鏈的富集和在細胞內表達。

【詳解】

A；該種玉米的果實（種子）也可能含有蛋白酶抑制劑；食用后使人因無法消化食物而患病，不安全，A正確；

B；生物體攝取的蛋白酶抑制劑基因會被生物體消化為小分子核苷酸被吸收；不會在體內表達，是安全的，B錯誤；

C；由于不同物種的酶在結構上有差異；該抑制劑對人體消化酶無影響，因此對人體是安全的，C正確；

D；人類通常食用煮熟的玉米；該抑制劑會被高溫破壞，因此不會影響人體，是安全的，D正確。

故選B。6、D【分析】【分析】

試管嬰兒技術是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精；并通過培養發育為早期胚胎后，再經移植后產生后代的技術。設計試管嬰兒技術是通過體外受精獲得許多胚胎，然后從中選擇符合要求的胚胎，再經移植后產生后代的技術。

【詳解】

A；“設計試管嬰兒”的目的是用于治療某些疾病；需在②胚胎移植前進行遺傳學診斷，A正確；

B；“試管嬰兒”和“設計試管嬰兒”均涉及精卵細胞在體外受精；所以均屬有性生殖，B正確；

C；“設計試管嬰兒”也是利用體外授精和胚胎移植的方法；培育新生命，屬于有性生殖，不屬于克隆，C正確；

D；只要供者和受者的主要HLA有一半以上相同；即可進行器官移植，因此該女嬰造血干細胞也能挽救其他貧血病患者，D錯誤。

故選D。7、D【分析】【分析】

單克隆抗體制備過程需要用到動物細胞融合技術和動物細胞培養技術；該過程中需要對融合細胞進行兩次篩選，第一次篩選的目的是獲得雜交瘤細胞，第二次篩選的目的是獲得能產生特異性抗體的雜交瘤細胞。

單克隆抗體特異性強；靈敏度高；并能大量制備。

【詳解】

A；由圖可知；①過程為用CD47免疫小鼠，此過程需要多次進行，目的是使小鼠產生更多已免疫的B淋巴細胞，A正確；

B；經多次篩選得到的雜交瘤細胞即具有B淋巴細胞能產生抗CD47抗體的特性；又具有骨髓瘤細胞能大量增殖的特性，B正確；

C、動物細胞培養需要放到含95%空氣和5%CO2混合氣體的CO2培養箱中培養；C正確；

D；由題干“抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對巨噬細胞的抑制作用”可知；若實驗組中抗CD47的單克隆抗體與腫瘤細胞表面的CD47結合，從而解除了CD47對巨噬細胞的抑制作用，最終導致巨噬細胞對腫瘤細胞的吞噬指數高于對照組，才可以驗證科學家們推測，D錯誤。

故選D。8、C【分析】【分析】

①DNA在氯化鈉溶液中的溶解度；是隨著氯化鈉濃度的變化而變化的。當氯化鈉的物質的量濃度為0.14mol/L時。DNA的溶解度最低。利用這一原理，可以使溶解在氯化鈉溶液中的DNA析出。

②DNA不溶于酒精溶液；但是細胞中的某些物質則可以溶于酒精。利用這一原理，可以進一步提取出含雜質較少的DNA。

③DNA遇二苯胺（沸水浴）會染成藍色；因此，二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。

【詳解】

A；離心沉淀的血細胞中加水是為了使血細胞破裂釋放DNA；從而提取DNA，A正確；

B；氯化鈉溶液的物質的量濃度為2mol/L時；DNA溶解，B正確；

C；向溶解DNA的燒杯中加蒸餾水是為了降低氯化鈉溶液的濃度；從而是DNA析出，C錯誤；

D；離心后除去血液中的上清液是為了除去雜質；獲取血細胞，D正確。

故選C。二、多選題(共7題，共14分)9、A:C【分析】【分析】

1；在利用酵母菌發酵時最好是先通入足夠的無菌空氣在有氧環境下一段時間使其繁殖；再隔絕氧氣進行發酵；酒精發酵的最佳溫度是在18℃～25℃，pH最好是弱酸性。

2；醋酸菌是好氧性細菌；當缺少糖源時和有氧條件下，可將乙醇（酒精）氧化成醋酸；當氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；醋酸菌生長的最佳溫度是在30℃～35℃。

3；豆腐的主要營養成分是蛋白質和脂肪；都是大分子有機化合物，難以消化、吸收，毛霉、酵母菌等多種微生物分泌的蛋白酶，能將蛋白質分解成小分子的肽和氨基酸，脂肪酶可將脂肪分解成甘油和脂肪酸，在多種微生物的協同下，豆腐轉變成腐乳。

【詳解】

A；果醋制作的菌種是醋酸菌；屬于好氧菌，故密閉環境不利于果醋的發酵，A錯誤；

B；腐乳制作過程中；鹽的用量、酒的種類和用量、溫度等均會影響腐乳風味，B正確；

C、參與果酒制作的酵母菌是兼性厭氧型真核生物，參與果醋制作的醋酸菌是需氧型原核生物，參與腐乳制作的毛霉是需氧型真核生物，所以果酒制作的微生物細胞呼吸產生CO2的場所是細胞質基質或線粒體、果醋制作的微生物細胞呼吸產生CO2的場所是細胞質基質，而腐乳制作的微生物細胞呼吸產生CO2的場所是線粒體；C錯誤；

D；與自然發酵相比；人工接種過程中利用了嚴格的滅菌措施，可以防止其它雜菌污染，且發酵獲得的產品品質更好，D正確。

故選AC。

【點睛】10、A:C:D【分析】【分析】

轉基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應；過敏源、營養成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環境安全（對生態系統穩定性的影響）。轉基因食品、產品上都要標注原料來自轉基因生物；如“轉基因××”“轉基因××加工品（制成品）”“加工原料為轉基因××”“本產品為轉基因××加工制成”．對于轉基因食物潛在隱患要進行開展風險評估、預警跟蹤等措施多環節、嚴謹的安全性評價，保障了現代生物技術的安全性。

【詳解】

A；為了加強對業轉基因生物的標識管理；保護消費者的知情權，我國對農業轉基因生物實行了標識制度，A正確；

B；轉基因食品上只標明原料來自轉基因生物；并未標明其危害，B錯誤；

C；為了保障現代生物技術的安全性；需要開展風險評估、預警跟蹤等措施，C正確；

D；生物安全是指擔心轉基因生物會影響到生物多樣性；D正確。

故選ACD。11、A:C:D【分析】【分析】

完全培養基中含有微生物生長所需要的各種營養成分；基本培養基缺少某種營養成分，通過影印培養法，二者接種的菌種相同，基本培養基上不能生長的菌株即為營養缺陷型菌株。

【詳解】

A；過程①得到的菌落均勻分布；接種方法為稀釋涂布平板法，過程②兩種培養基的成分不同，基本培養基中缺乏某種氨基酸，A錯誤；

B；進行過程②培養時先將絲絨布轉印至完全培養基上；可能會攜帶某種氨基酸進入基本培養基，因此順序不能顛倒，B正確；

C；統計菌落種類和數量時要每隔24h觀察統計一次；直到各類菌落數目穩定，以防止培養時間不足導致菌落數目偏小，C錯誤；

D；若該菌株為原核細胞；則不存在核孔復合體，營養缺陷型菌株細胞代謝調節機制中的某些酶被破壞，應是控制該酶合成的基因發生突變，D錯誤。

故選ACD。

【點睛】12、A:C:D【分析】微生物常見的接種方法（稀釋涂布平板法可用于微生物的計數）：

①平板劃線法：將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后；均勻涂布在培養皿表面，經培養后可形成單個菌落。

【詳解】

A；平板劃線無法得知稀釋倍數；不能用于活菌計數，故統計洗手前手部細菌的數量，選擇的接種方法是稀釋涂布平板法，A錯誤；

B；除圖中操作外；還需要設置一組未接種的空白培養基進行培養，以驗證培養基是否被雜菌污染，B正確；

C；由于當兩個或多個細胞連在一起時；平板上顯示的只是一個菌落，故培養基上的一個菌落可能來源于樣品稀釋液中的一個、甚至幾個活菌，C錯誤；

D；由于菌落肉眼可見；故初步判斷培養基上菌種的類型，可用肉眼觀察菌體的形態特征，D錯誤。

故選ACD。13、A:B:C【分析】【分析】

1；轉基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應、過敏源、營養成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環境安全（對生態系統穩定性的影響）．對待轉基因技術的正確做法是趨利避害；不能因噎廢食.

2；對生物技術中的倫理問題的爭論；中國政府的態度：禁止生殖性克隆人，堅持四不原則（不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實驗），不反對治療性克隆人.

【詳解】

A；科學家要對自己的科學研究負責；對社會負責，重視轉基因生物的安全性等問題，A正確；

B；科學家應向公眾傳播科學知識；使人們正確認識生物技術的安全性和倫理道德問題，B正確；

C；公眾應科學理性地對待轉基因生物和轉基因食品等生物技術問題；正確的做法應該是趨利避害，不能因噎廢食，C正確；

D；公眾應該理性地、負責任地對待這些問題；不可以根據自己的價值觀采取不同的態度，D錯誤。

故選ABC。14、A:C:D【分析】【分析】

動物核移植是指將動物的一個細胞的細胞核；移入一個已經去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發育成為動物個體。

【詳解】

A；克隆北極狼的供體細胞來自野生北極狼；卵母細胞來自發情期的母犬，因此性狀由野生北極狼、發情期的母犬的基因共同決定，比格犬只是代孕母體，不提供遺傳物質，A錯誤；

B；透明帶下注射法不抽取供體細胞的細胞核；操作簡單且對供體細胞核損傷小，同時注射的位置是卵母細胞外的透明帶，然后誘導兩個細胞融合，對卵母細胞的損傷小，B正確；

C；供體細胞注入卵母細胞透明帶內后；還需要電融合法等誘導才能使供體細胞進入卵母細胞形成重構胚，C錯誤；

D；細胞分裂、分化形成克隆胚胎的過程是有絲分裂過程；而基因重組發生在減數分裂過程，D錯誤。

故選ACD。15、A:B:D【分析】【分析】

胚胎干細胞：

1；哺乳動物的胚胎干細胞簡稱ES或EK細胞；來源于早期胚胎或從原始性腺中分離出來；

2；具有胚胎細胞的特性；在形態上表現為體積小，細胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發育的全能性，可分化為成年動物體內任何一種組織細胞；另外，在體外培養的條件下，可以增殖而不發生分化，可進行冷凍保存，也可進行遺傳改造。

【詳解】

A；滋養層細胞將來能發育成胎膜和胎盤；A正確；

B；利用核移植所得胚胎干細胞；可以誘導發育成適合移植的器官，可減少免疫排斥反應，B正確；

C；胚胎分割時應該選擇形態正常、發育良好的桑葚胚或囊胚；C錯誤；

D；“擬原腸胚”模型可以研究酒精、藥物和病原體對胚胎發育的影響；D正確。

故選ABD。三、填空題(共9題，共18分)16、略

【解析】①.胚胎細胞②.體細胞17、略

【分析】【分析】

1；腐乳制作過程中多種微生物參與了發酵；其中起主要作用的是毛霉，毛霉等微生物產生蛋白酶能將豆腐中的蛋白質轉化成小分子肽和氨基酸，脂肪酶將脂肪轉化成甘油和脂肪酸。

2；果膠酶能夠分解果膠；瓦解植物的細胞壁及胞間層，使榨取果汁變得容易，而果膠分解成可溶性的半乳糖醛酸，也使得渾濁的果汁變得澄清。果膠酶并不特指某一種酶，而是分解果膠的一類酶的總稱，包括多聚半乳糖醛酸酶、果膠分解酶和果膠酯酶。

【詳解】

（1）在腐乳制作的過程中；利用毛霉等微生物產生的蛋白酶將豆腐中的蛋白質分解成小分子肽和氨基酸，脂肪酶將脂肪水解為甘油和脂肪酸；加酶洗衣粉里添加的酶制劑中，應用最廣泛；效果最明顯的是堿性蛋白酶和堿性脂肪酶。

（2）果膠酶并不特指某一種酶；而是分解果膠的一類酶的總稱，包括多聚半乳糖醛酸酶；果膠分解酶和果膠酯酶；在果汁生產過程中如果要固定果膠酶，最好采用化學結合和物理吸附法固定化，這是因為酶分子小，體積小的酶容易從包埋材料中漏出。

（3）酶提取和分離原理：需要用凝膠色譜法去除相對分子質量大的雜質蛋白；以純化酶；利用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法對酶進行純度鑒定。

【點睛】

本題考查腐乳制作和酶提取等知識，對于此類試題，需要考生注意的細節較多，如實驗的原理、實驗步驟、實驗采用的試劑及試劑的作用等，需要考生在平時的學習過程中注意積累。【解析】小分子肽和氨基酸脂肪酶堿性蛋白酶和堿性脂肪酶半乳糖醛酸酶、果膠分解酶、果膠酯酶化學結合法和物理吸附凝膠色譜（分配色譜）聚丙烯酰胺凝膠電泳18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】限制酶蛋白質核苷酸序列特定的切點DNA連接酶缺口磷酸-脫氧核糖外源基因受體細胞質粒噬菌體動植物病毒細菌酵母菌細胞核自主復制DNA分子19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】限制性核酸內切酶（限制酶20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】含有基因表達載體受體細胞標記基因是否表達。21、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】穩定存在遺傳至下一代表達和發揮22、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】2030×22030×2－223、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】現配現用24、略

【分析】略【解析】目的基因標記基因啟動子終止子啟動子上游RNA聚合酶終止子下游轉錄標記四、判斷題(共1題，共10分)25、A【分析】【詳解】

治療性克隆是指利用克隆技術產生特定的細胞、組織和器官，用它們來修復或替代受損的細胞、組織和器官，從而達到治療疾病的目的。本說法正確。五、實驗題(共4題，共8分)26、略

【分析】【分析】

1；果酒制作過程中的相關實驗操作：

（1）材料的選擇與處理：選擇新鮮的葡萄；榨汁前先將葡萄進行沖洗，除去枝梗。

（2）滅菌：①榨汁機要清洗干凈；并晾干；②發酵裝置要清洗干凈，并用70%的酒精消毒。

（3）榨汁：將沖洗除枝梗的葡萄放入榨汁機榨取葡萄汁。

（4）發酵：①將葡萄汁裝人發酵瓶；要留要大約1/3的空間，并封閉充氣口；②制葡萄酒的過程中，將溫度嚴格控制在18℃～25℃，時間控制在10～12d左右，可通過出料口對發酵的情況進行，及時的監測。③制葡萄醋的過程中，將溫度嚴格控制在30℃～35℃，時間控制在前7～8d左右，并注意適時通過充氣口充氣。

2；參與果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陳代謝類型是異養需氧型，果醋制作的原理：當氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸；當缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變為乙醛，再將乙醛變為醋酸。

【詳解】

（1）釀造葡萄酒時；在葡萄榨汁前，葡萄要先進行進行沖洗，然后再除去枝梗，可以避免除去枝梗時引起葡萄破損，增加被雜菌污染的機會。

（2）榨汁機要清洗干凈，并晾干，發酵裝置要清洗干凈，并用70%的酒精消毒，再裝入葡萄汁，將發酵裝置放在18～23℃環境中，發酵過程中由于酵母菌呼吸作用會產生二氧化碳，因此每天擰開氣閥b多次；排出發酵過程產生的大量二氧化碳。裝置中d處設計成彎曲形狀利用了巴斯德的鵝頸瓶的原理，即為了防止排氣時空氣中微生物的污染。

（3）酵母菌發酵的產物中會產生酒精；利用橙色的重鉻酸鉀可以檢測酒精的存在，酒精遇到橙色的重鉻酸鉀會變為灰綠色，從而鑒定酒精的存在。

（4）溫度是酵母菌生長和發酵的重要條件；20℃左右最適合酵母菌繁殖，因此需要將溫度控制在其最適溫度范圍內。而醋酸菌是嗜溫菌，最適生長溫度為30℃～35℃，因此要將溫度控制在30℃～35℃。醋酸菌是好氧菌，在將酒精變為醋酸時需要氧的參與，因此要適時向發酵裝置中充氣，需要打開a閥通入空氣。

【點睛】

本題考查果酒和果醋的制作過程的知識點，要求學生掌握果酒的制作的原理、過程以及發酵過程中的注意事項是該題的重點，識記果酒的制作過程是解決重點的關鍵。理解并識記果醋的發酵過程和原理是解決第（4）問的關鍵。【解析】沖洗CO2防止排氣時空氣中微生物的污染重鉻酸鉀灰綠30～35℃氣閥a醋酸菌是好氧細菌，酒精轉變為醋酸需要氧氣才能進行27、略

【分析】試題分析：本題考查泡菜的制作；考查對泡菜制作原理；亞硝酸鹽含量檢測原理的理解和識記。解答此題，可根據圖中曲線升降規律判斷泡菜制作過程中亞硝酸鹽含量變化趨勢，分析其升降原因，確定適合食用的發酵時間。

（1）測定亞硝酸鹽含量可用比色法；其原理是：在鹽酸酸化的條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發生重氮化反應后，與N—1—萘基乙二胺鹽酸鹽結合形成玫瑰紅色染料，將顯色反應后的樣品與已知濃度的標準液進行目測比較，可以大致估算出泡菜中亞硝酸鹽的含量。

（2）高溫可使微生物中的蛋白質變性；殺死微生物，實驗中鹽水加熱煮沸可殺滅雜菌；冷卻之后再使用是為了避免高溫使乳酸菌死亡。

（3）在腌制過程中；由于鹽水溶液濃度過高，細胞滲透失水，使壇中溶液量會增加。

（4）據圖可知；1；2、3號泡菜壇中，在腌制的第7天亞硝酸鹽含量均達到最大值，腌制到第14天以后亞硝酸鹽含量降到較低水平，可以避免亞硝酸鹽對人體健康的危害。

（5）泡菜制作過程中亞硝酸鹽含量變化與微生物的數量和代謝強度有關；實驗中三只壇中產生的亞硝酸鹽含量存在差異，最可能的原因是各壇中微生物種類和數量可能存在差異。

（6）為讓實驗數據更好的表明泡菜腌制過程中亞硝酸鹽含量變化，避免偶然因素造成的數據誤差，應對該實驗所獲得的三組數據先求平均值，再繪制一條曲線(將三個壇中每次測定的亞硝酸鹽的含量分別記錄，求出平均值，然后以日期為橫坐標，亞硝酸鹽的平均含量為縱坐標畫出一條曲線)。【解析】比色法玫瑰紅色染料殺滅雜菌乳酸菌外界溶液濃度過高使細胞滲透失水814各壇中微生物種類和數量可能存在差異(或其他合理答案)先求平均值，再繪制一條曲線（將三個壇中每次測定的亞硝酸鹽的含量分別記錄，求出平均值，然后以日期為橫坐標，亞硝酸鹽的平均含量為縱坐標畫出一條曲線）28、略

【分析】【分析】

篩選培養基是指根據某種微生物的特殊營養要求或對某些化學；物理因素的抗性而設計的；能選擇性地區分這種微生物的培養基。利用選擇培養基，可使混合菌群中的目標菌種變成優勢種群，從而提高該種微生物的篩選效率。

【詳解】

（1）該研究小組的目標菌是能夠降解物質W的細菌；而物質W是一種含氮有機物，故可作篩選培養基中的氮源。

（2）研究小組的目標菌；是能夠降解物質W的細菌，培養基中乙菌落的周圍出現透明圈，說明乙菌落能夠降解物質W，故乙菌落為該小組的目標細菌。

（3）目標菌能夠利用空氣中的氮氣作為氮源；故選用的篩選培養基不添加氮源，能夠在無氮源的培養基上生存的細菌便是目的細菌，故實驗操作為：將甲；乙菌分別接種在無氮源培養基上，若細菌能生長，則說明該細菌能利用空氣中的氮氣作為氮源。

（4）①C處作為空白對照；要排除作為溶劑的緩沖液對實驗可能造成的影響，故需要在C處滴加緩沖液，且保持滴加量相同；②培養基中的透明圈表示物質W被降解的情況，若C處不出現透明圈，則說明緩沖液不能降解物質W；若A；B處形成的透明圈直徑大小相近，說明物質W被降解的程度相近，即酶E與天然酶降解物質W的能力相近。

【點睛】

本題考查篩選培養基的配置和使用，針對不同要求的目標菌種，選擇不同物質配制不同篩選作用的培養基。并且要求學生理解識別目標菌種篩選的現象，判斷篩選結果。【解析】①.W②.乙③.乙菌落周圍出現透明圈，說明乙菌能降解W④.將甲、乙菌分別接種在無氮源培養基上，若細菌能生長，則說明該細菌能利用空氣中的氮氣作為氮源⑤.緩沖液⑥.緩沖液不能降解W⑦.酶E與天然酶降解W的能力相近29、略

【分析】【分析】

為了殺滅培養基中的微生物；實驗所配制的培養基必須進行滅菌處理；可將滅菌后的固體培養基放置在適宜的溫度下培養一段時間，以檢測培養基的滅菌效果，若培養基中無菌落長出，說明培養基的滅菌是合格的；在固體培養基上接種微生物的方法有平板劃線法或稀釋涂布平板法。

【詳解】

（1）①馬鈴薯中含有淀粉；蛋白質和無機鹽等物質；故培養基中的馬鈴薯可為蟬擬青霉生長提供碳源、氮源、無機鹽等營養成分；

培養霉菌時需將培養基的pH調至酸性；培養細菌時需將pH調至中性或微堿性，即培養蟬擬青霉的培養基的自然pH為酸性范圍。

②氯霉素等抗生素可以通過抑制肽聚糖（細菌細胞壁的主要成分）的合成來抑制細菌的生長；而對真菌的生長無影響。為了便于篩選蟬擬青霉（真菌）菌株，培養基中還應加入氯霉素等抗生素以抑制細菌的生長，該培養基從功能上分類屬于選擇培養基。

③為了殺滅培養基中的微生物；配制的培養基必須進行滅菌處理；將滅菌后的固體培養基放置在適宜的溫度下培養一段時間，若培養基中無菌落長出，說明固體培養基的滅菌是合格的。

（2）蟬擬青霉的分離純化：由（1）的題干信息可知；PDA為固體培養基，在固體培養基上接種微生物的方法有平板劃線法或稀釋涂布平板法。

（3）根據題意“蟬花是蟬擬青霉寄生于蟬若蟲后形成的蟲菌復合體，內含蟲草多糖、甘露醇和必需氨基酸等活性成分”，并結合表格信息可知，發酵菌絲體中各種活性成分的含量明顯高于天然蟬花，故能用發酵菌絲體來替代天然蟬花。【解析】(1)碳源；氮源、無機鹽酸細菌選擇殺滅培養基中的微生物將滅菌的固體培養基放置在適宜的溫度下培養一段時間；觀察是否長出菌落。

(2)平板劃線（稀釋涂布平板）

(3)能發酵菌絲體活性成分的含量明顯高于天然蟬花六、綜合題(共3題，共9分)30、略

【分析】【分析】

PCR全稱為聚合酶鏈式反應，是一項在生物體外復制特定DNA的核酸合成技術，所利用的原理為DNA分子的復制，因此PCR技術一般用于基因擴增。PCR技術：①概念：PCR全稱為聚合酶鏈式反應，是一項在生物體外復制特定DNA的核酸合成技術；②原理：DNA復制；③條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩定DNA聚合酶（Taq酶）；④方式：以指數的方式擴增，即約2n；⑤過程：高溫變性；低溫復性、中溫延伸。

（1）

PCR(聚合酶鏈式反應)反應包括三個基本步驟，即：模板DNA的變性、模板DNA與引物的退火復性、引物的延伸。PCR反應體系包括5種基本成分，依次為：引物、DNA聚合酶、dNTP（原料）、模板DNA、Mg2+。

（2）

巢式PCR通過兩輪PCR反應；使用兩套引物擴增特異性的DNA片斷，第二對引物的功能是特異性的擴增位于首輪PCR產物內的一段DNA片斷。第一輪擴增中，外引物用以產生擴增產物，此產物在內引物的存在下進行第二輪擴增，從而提高反應的特異性，獲得的產物特異性更強。利用內引物擴增在錯誤片段上進行引物配對并擴增的概率提高。

（3）

巢式PCR兩次擴增所用的引物是不同的；因此兩個階段反應不在同一試管完成的主要原因是防止引物配對特異性不強造成的非特異性擴增的污染。

（4）

對胚胎進行性別鑒定時；宜取囊胚期的滋養層細胞進行鑒定。本實驗用巢式PCR技術，用的是兩輪PCR，因此需要設計2對引物。PCR過程一般是預變性→變性→退火→延伸。在胚胎移植前需要對受體牛進行同期發情處理，便于移植。

（5）

題中利用多重巢式PCR技術同時擴增Y染色體上雄性決定基因（SRY）和常染色體上的酪蛋白基因（CSN1S1）進行電泳；雌性個體沒有SRY，只有一條帶，雄性有兩條帶，因此1，2，4是雌性，3，5是雄性，雌性和雄性共有的是常染色體上的酪蛋白基因（CSN1S1），因此A是CSN1S1，B是SRY。

（6）

①差速離心法是分離各種細胞器的方法；不能性別鑒定；②核酸探針雜交法，Y染色體上雄性決定基因（SRY）制成探針可以鑒定性別；③染色體核型分析法，XY染色體形態不同，因此也可以進行性別鑒定；④H-Y抗血清免疫學法（H-Y抗原編碼基因位于Y染色體上），也可以性別鑒定。因此可行的是②③④。

【點睛】

本題主要考查PCR技術、胚胎分割移植的相關知識，要求考生識記PCR技術的條件；識記胚胎分割的特點及注意事項，能結合圖中信息答題，屬于考綱識記和理解層次的考查。【解析】（1）TaqDNA聚合酶dNTP

（2）更強升高。

（3）防止引物配對特異性不強造成的非特異性擴增的污染。

（4）滋養層2變性同期發情。

（5）A1；2，4

（6）②③④31、略

【分析】1、動物細胞培養的條件：（1）無菌、無毒的環境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；③定期更換培養液，以清除代謝廢物；