《特殊醫學用途配方食品中氨基酸的測定高效液相色譜法》

團體標準編制說明

（征求意見稿）

一、工作簡況

1任務來源

本項目是根據中國生產力促進中心協會標準化工作委員會《關于〈特殊醫

學用途配方食品中氨基酸的測定〉團體標準立項的通知》，項目名稱“特殊醫

學用途配方食品中氨基酸的測定”（中生協標委函〔2022〕07號），項目編

制單位為安捷倫科技(中國)有限公司等。

2標準制定的必要性

氨基酸是構成蛋白質的基本單位，對于生物體的正常生長和發育至關重

要。通過測定蛋白質中的氨基酸組成，可以深入了解食物或蛋白質來源的營養

價值，為膳食推薦和營養補充提供科學依據。同時，測定蛋白質中的氨基酸含

量也可以用于評估產品的質量、新鮮度或加工過程對蛋白質的影響。例如，在

乳制品或肉類產品的質量控制中，氨基酸含量的測定可以提供關于產品品質和

保質期的信息。

使用柱前衍生反向液相色譜法分析氨基酸是目前比較主流的一種氨基酸分

析檢測方案，比較其他分析方法例如電泳法，氨基酸分析儀等手段，此方法具

有低成本，通用性強，易于自動化等優勢，結合超高效液相色譜技術，還可以

顯著提升分析檢測的通量和效率。目前比較常用的竹簽衍生試劑為一級氨基酸

用鄰苯二甲醛（OPA）、二級氨基酸用9-芴甲基氯甲酸酯（FMOC）進行衍生，

這類衍生試劑具有衍生速度快，實驗操作簡單等優勢，可以實現自動化高效率

衍生。

但氨基酸的檢測在食品相關領域已經有了比較成熟的標準，但是目前仍沒

有針對特醫食品中的氨基酸檢測標準，來指導特醫食品中氨基酸檢測所涉及的

樣品前處理及分析檢測過程。本標準項目鑒于特醫食品蛋白質組件所涉及的基

質情況主要為蛋白質類成分，結合不同氨基酸所事宜的處理因素及水解條件，

對其中16種氨基酸（天冬氨酸，絲氨酸，谷氨酸，脯氨酸，羥脯氨酸，甘氨

酸，丙氨酸，纈氨酸，甲硫氨酸，亮氨酸，異亮氨酸，酪氨酸，苯丙氨酸，賴

氨酸，組氨酸，色氨酸）的前處理和測定方法進行了優化。使用堿水解法處理

樣品后采用柱前衍反相液相色譜方法建立一種高效、靈敏、穩定的方法，適用

于特醫食品蛋白質組件中氨基酸的檢測和分析目前，該方法技術已十分穩定，

可作為特醫食品蛋白質組件中氨基酸檢測標準方法發展的基礎。

3主要工作過程

（1）起草（草案、論證）階段：

本標準在2022年6月中國生產力促進中心協會標準化工作委員會下達了

《特殊醫學用途配方食品中氨基酸的測定》團體標準立項計劃后，征集了起草

成員單位，為組建標準起草工作組做好準備，并進行了標準基本框架和具體技

術內容的初步起草研究工作。

2022年7月7月5日，由中國生產力促進中心協會特醫食品與生物活性肽

工作委員會主辦，食品行業生產力促進中心承辦的《特殊醫學用途配方食品中

氨基酸的測定》團體標準啟動會通過線上方式順利召開，來自中國生產力促進

中心協會標準化工作委員會、全國食品工業標準化技術委員會、農業農村部農

產品營養標準專家委員會、中國農業大學的專家、學者及2項標準起草單位代

表、工委會秘書長相關人員近40人參會，會議確定了總體工作方案并制定了

《特殊醫學用途配方食品中氨基酸的測定》團體標準具體的工作方案，初步明

確標準修訂的框架。

2022年7月-2024年1月，標準起草工作組開始對國內外標準及有關技術資

料進行檢索整理，并對生產企業征求了修訂標準的意見，對標準的框架結構、適

用范圍、主要技術指標進行了研究，并進行了主要技術指標樣品收集和驗證工作。

標準起草工作組根據多次內部研討意見，起草形成了《特殊醫學用途配方食品中

氨基酸的測定》團體標（工作組討論稿）和編制說明，之后在征集起草單位意見

基礎上，決議形成《特殊醫學用途配方食品中氨基酸的測定》團體標（征求意見

稿）和編制說明。

4主要參加單位和工作組成員及其所做的工作等

本標準由XXX共同起草。

主要成員：XXX、XXX......。

二、標準編制原則和主要內容

1編制原則

1.1標準文本結構制定原則

按照GB/T1.1《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規

則》的相關要求和內容。

1.2參考國內標準

GB/T6682分析實驗室用規格驗方法

2標準主要內容

2.1標準主要內容及適用范圍

本文件規定了特殊醫學用途配方食品中氨基酸的高效液相色譜測定方法。

本文件適用于特殊醫學用途配方食品蛋白質組件中的16種氨基酸（天冬氨

酸，絲氨酸，谷氨酸，脯氨酸，羥脯氨酸，甘氨酸，丙氨酸，纈氨酸，甲硫氨

酸，亮氨酸，異亮氨酸，酪氨酸，苯丙氨酸，賴氨酸，組氨酸，色氨酸）的測定。

2.2標準主要內容及依據

本文件適用于特殊醫學用途配方食品中氨基酸的高效液相色譜測定，依據原

理為：試樣經氫氧化鋰溶液水解，一級氨基酸用鄰苯二甲醛（OPA）、二級氨基

酸用9-芴甲基氯甲酸酯（FMOC）進行衍生，用具有紫外檢測器/二極管陣列檢測

器的高效液相色譜檢測。

三、主要試驗（或驗證）情況

特醫食品中16種氨基酸測定驗證結果

1標準曲線與線性范圍

表1線性方程

化合物線性方程R線性范圍(nmol/ml)

天冬氨酸Y=5.2509X-18.66570.999790-900

絲氨酸Y=4.4530X-5.44730.999990-900

谷氨酸Y=5.2170X-11.43320.999990-900

脯氨酸Y=8.2485X+0.80240.999790-900

羥脯氨酸Y=4.6051X-20.3140.999990-900

甘氨酸Y=4.1669X+4.23060.999990-900

丙氨酸Y=4.4065X-2.72480.999990-900

纈氨酸Y=4.6357X-9.93210.999990-900

甲硫氨酸Y=4.3234X-2.98021.000090-900

亮氨酸Y=4.4213X-5.37620.999990-900

異亮氨酸Y=4.6854X-7.63000.999990-900

酪氨酸Y=4.7431X-4.21580.999990-900

苯丙氨酸Y=4.7222X-5.53460.999990-900

賴氨酸Y=2.4797X+26.89780.999990-900

組氨酸Y=5.4753X+7.66720.999990-900

色氨酸Y=0.5101X-0.34110.999990-900

2方法的精密度實驗

本方法以特醫食品蛋白質組件樣品中的氨基酸，平行測定三次，計算相對標

準偏差來考察方法的精密度。具體結果如下。

表2方法的密度實驗

測定濃度1測定濃度2測定濃度2相對標準偏

氨基酸名稱

（pmol/mL）（pmol/mL）（pmol/mL）差(%)

天冬氨酸232.48234.17219.993.38

谷氨酸578.04592.85556.493.18

甘氨酸224.99221.74215.582.17

丙氨酸264.53266.20252.502.86

纈氨酸122.51128.68121.913.01

苯丙氨酸94.5396.8089.953.72

亮氨酸255.22261.27246.552.91

脯氨酸355.16341.05352.272.13

絲氨酸260.00242.81253.053.43

組氨酸75.0771.7876.663.34

酪氨酸849.59827.87812.642.24

甲硫氨酸644.19638.57632.860.89

色氨酸23.0621.9022.352.59

異亮氨酸374.56352.12358.863.18

賴氨酸886.96895.31830.154.07

羥脯氨酸850.92741.88867.838.33

3檢出限和定量限的測定

提供標準曲線最低濃度點混標樣品溶液的信噪比圖譜，按響應最低的脯氨酸

峰信噪比S/N=73.73,折算檢出限信噪比≥3,定量限信噪比≥10。

表3檢出限、定量限信噪比

檢出限濃度3.66nmol/mL信噪比3

定量限濃度12.2nmol/mL信噪比10

4結論

按該標準方法處理后所得方法學參數：線性范圍、準確度、精密度、檢出限

和定量限均符合標準要求。

四、標準中涉及專利的情況

本標準不涉及專利問題。

五、預期達到的社會效益、對產業發展的作用等情況

標準起草團隊在對特醫食品蛋白質組件現狀大范圍調研的基礎上，摸清了目

前存在的主要檢測問題難點，同時結合專家經驗及前期試驗結果，研究明確了特

醫食品蛋白質組件中氨基酸含量檢測的方向，為特醫食品蛋白質組件中氨基酸含

量的檢測技術提供理論依據。本標準的實施，有效解決了目前特醫食品蛋白質組

件中氨基酸含量定性、定量檢測技術，迄今在國內外還是空白這一現狀，有重大

的技術必要性。

六、與國際、國外對比情況

本標準沒有