羅格列酮對髂動脈球囊損傷兔

血管內皮的保護作用

廣州軍區武漢總醫院心內科丁世芳曹選超盧青

研究背景SMC過度增殖遷移血管內皮損傷血管負性重塑炎癥細胞激活血管彈性回縮血栓形成、機化再狹窄

血管內皮損傷平滑肌細胞的過度增殖、遷移脂肪組織：內分泌器官？分泌多種物質，如纖溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)、瘦素、腫瘤壞死因子-a、抵抗素及脂聯素(adiponectin，APN)等改善胰島素抵抗、調節脂肪代謝、防止動脈粥樣硬化等方面有著重要作用脂聯素也被稱為apM1、Acrp30或AdipoQ，是一種脂肪細胞特異的細胞因子脂聯素(adiponectinAPN)

生物學作用抗AS抗炎抗氧化胰島素增敏噻唑烷二酮類(TZDs)藥物是高選擇性過氧化物酶體增殖物激活受體（PPAR）γ激動劑，是治療2型糖尿病的一類新藥該類藥物與體內受體結合后激活，從而改善2型糖尿病患者的胰島素抵抗、高胰島素血癥和高糖血癥代謝紊亂羅格列酮就是其中有代表性的一種改善2型糖尿病患者的胰島素抵抗、改善高胰島素血癥和高糖血癥代謝紊亂調節脂質代謝紊亂抑制過度的炎癥反應抗動脈粥樣硬化腎臟保護作用研究目的羅格列酮(ROS)脂聯素(APN)內膜增殖再狹窄（RS）實驗設計羅格列酮對髂動脈球囊損傷兔

血管內皮的保護作用隨機分組模型制備血清學指標病理形態學研究內容1.實驗動物及分組手術對照組1僅行右側股動脈結扎術，普通飲食喂養2高脂飲食喂養8周后，行右側髂動脈球囊內膜剝脫術模型組3高脂飲食8周+右側髂動脈球囊內膜剝脫術+術前3天羅格列酮（2mg1/日）羅格列酮組2.兔腹-髂動脈血管內膜損傷模型制作

麻醉—速麻安肌肉注射右側膝上大腿內側股動脈搏動最明顯處縱行切開皮膚，鈍性分離皮下組織及肌肉

股動脈、股靜脈、股神經游離完畢股動脈遠端結扎，近端用無創血管夾暫時夾閉阻斷血流模型制備所用的球囊和壓力泵5.免疫組化及細胞凋亡檢測免疫組化（SABC法）烤片，脫蠟，水化→封閉內源性過氧化物酶→熱修復抗原→BSA封閉→滴加一抗→滴加二抗→滴加SABC→DAB顯色→蘇木素復染→脫水，透明，封固陽性表達分析：每份標本分別選取5個高倍視野（×400倍），染色完成后在光鏡下觀察結果，以細胞漿內棕黃色粗大顆粒為陽性。HPAIS1000高清晰度彩色病理圖像分析系統采集圖像，

Image-ProPlusversion6.0軟件對圖像進行分析。細胞凋亡檢測（TUNEL法）19烤片，脫蠟，水化→封閉內源性過氧化物酶→蛋白酶消化→標記緩沖液→滴加生物素化地高辛抗體→滴加SABC→DAB顯色→蘇木素復染→脫水，透明，封固陽性表達分析：每份標本分別選取5個高倍視野（×400倍），染色完成后在光鏡下觀察結果，細胞核中有棕黃色顆粒者為陽性細胞。計算細胞凋亡的陽性率=（陽性細胞數/觀察細胞總數）×100%6.統計分析

以SPSS13.0統計軟件包進行分析，計量資料用均數±標準差表示，兩組資料間的比較采用t檢驗，多組間差異的顯著性比較用方差分析，P<0.05有統計學意義制表、攝片描述實驗結果組別時間FPGTCTGHDL-CLDL-C正常對照組08.44±0.401.43±0.090.73±0.130.91±0.140.71±0.0818.29±0.341.37±0.630.69±0.130.86±0.160.68±0.3448.26±0.451.41±0.290.74±0.140.88±0.130.74±0.09模型組08.41±0.461.38±0.070.81±0.200.92±0.150.69±0.0918.33±0.4228.71±1.72b1.08±0.25b0.87±0.1418.32±0.92b48.31±0.1927.62±4.83b1.21±0.17b0.90±0.1419.27±1.26b羅格列酮組08.56±0.431.42±0.100.78±0.110.85±0.120.73±0.1018.41±0.1719.75±1.66bd0.89±0.14ac0.83±0.098.34±0.58bd48.37±0.2618.52±2.13bd0.84±0.06d0.87±0.127.58±0.71bd1.羅格列酮對血脂、血糖及APN表達的影響實驗結果

各組不同時間點APN水平的比較（ug/ml）2.292.322.352.371.441.622.351.171.85

各組不同時間點hs-CRP水平的比較(mg/l)1.721.691.741.754.874.321.676.393.272.病理形態學改變對照組100×模型組100×羅格列酮100×3.免疫組化染色結果各組髂動脈標本細胞凋亡檢測結果1.3621.8436.251.4018.6424.79結論1.高膽固醇飲食加髂動脈球囊內膜損傷的方法可以較好的模擬血管再狹窄的病理生理過程2.高脂飲食加球囊損傷后血漿APN水平明顯減低，且與內膜增殖程度呈明顯負相關；羅格列酮干預后APN水平明顯升高，血管管腔狹窄程度亦相應減輕3.羅格列酮可有效抑制血管損傷后內膜平滑肌細胞