第3章消毒滅菌與病原微生物實驗室生物安全潘建平教授浙江大學醫學院微生物學第03章消毒滅菌與病原微生物實驗室生物安全第一節消毒滅菌常用術語滅菌（sterilization）：殺滅物體上所有微生物的方法。消毒（disinfection）：殺死物體上或環境中的病原微生物的方法。防腐（antisepsis）：防止或抑制皮膚表面細菌生長繁殖的方法。清潔（cleaning）：是指通過除去塵埃和一切污穢以減少微生物數量的過程。無菌（asepsis）和無菌操作：無菌是無活菌的意思，多是滅菌的結果。防止細菌進入人體或其它物品的操作技術，稱為無菌操作。微生物學第03章消毒滅菌與病原微生物實驗室生物安全第二節消毒滅菌的方法一、物理消毒滅菌法（一）熱力滅菌法

1.干熱滅菌法

焚燒；燒灼；干烤；紅外線

2.濕熱滅菌法

巴氏消毒法(pasteurization)；煮沸法；流動蒸汽消毒法；間歇蒸汽滅菌法(fractionalsterilization)；高壓蒸汽滅菌法(autoclaving)微生物學第03章消毒滅菌與病原微生物實驗室生物安全高壓蒸汽滅菌器121.3C15~20min.微生物學第03章消毒滅菌與病原微生物實驗室生物安全（二）輻射殺菌法

1.紫外線：265～266nm最強

可使DNA鏈上兩個相鄰的胸腺嘧啶共價結合，形成二聚體，干擾DNA復制與轉錄。

2.電離輻射

3.微波（microwave）（三）濾過除菌法

1.濾菌器(filter）液體除菌

2.空氣除菌采用生物潔凈技術（四）干燥與低溫抑菌法微生物學第03章消毒滅菌與病原微生物實驗室生物安全濾器和層流室微生物學第03章消毒滅菌與病原微生物實驗室生物安全二、化學消毒滅菌法（一）高效消毒劑（high-leveldisinfectants）

1.含氯消毒劑；2.過氧化物消毒劑；

3.醛類消毒劑；4.環氧乙烷（二）中效消毒劑（intermediate-leveldisinfectants）

1.含碘消毒劑；2.醇類消毒劑（三）低效消毒劑（low-leveldisinfectants）

1.季銨鹽類；2.氯己定；3.高錳酸鉀微生物學第03章消毒滅菌與病原微生物實驗室生物安全固體二氧化氯消毒劑微生物學第03章消毒滅菌與病原微生物實驗室生物安全第三節消毒滅菌的運用（一）高危器械物品

用時需進入無菌組織的物品。所有這些物品都應該滅菌。（二）中危器械物品

用時不進入無菌組織但接觸黏膜的器械。采用消毒即可。（三）低危器械物品

只接觸未損傷皮膚但不進入無菌組織和不接觸黏膜的物品。一般用后清洗、消毒即可。（四）快速周轉的醫療器械

一、醫療器械物品的消毒滅菌微生物學第03章消毒滅菌與病原微生物實驗室生物安全二、室內空氣消毒滅菌

1.物理消毒法

①紫外線照射（1.5W/m3，1h）最常用；②濾過除菌：空氣通過孔徑小于0.2

m的高效過濾裝置以除去細菌和帶菌塵埃。

2．化學消毒法

包括化學消毒劑噴霧和熏蒸：①過氧乙酸噴霧、熏蒸；②過氧化氫噴霧；③二氧化氯溶液噴灑；④中草藥點燃煙熏。三、手和皮膚的消毒用肥皂和流動水經常并正確洗手病原微生物污染時應用消毒劑消毒。微生物學第03章消毒滅菌與病原微生物實驗室生物安全四、黏膜的消毒

五、病人排泄物與分泌物的消毒滅菌

六、病人污染物品的消毒

七、飲水的消毒

八、環境的消毒

微生物學第03章消毒滅菌與病原微生物實驗室生物安全第四節影響消毒滅菌效果的因素一、微生物的種類二、微生物的物理狀態三、微生物的數量四、消毒劑性質、濃度與作用時間五、溫度六、酸堿度七、有機物微生物學第03章消毒滅菌與病原微生物實驗室生物安全第四節病原微生物實驗室生物安全生物安全（biosafety）是生物技術安全（safetyofbiotechnology）的簡稱。

狹義：指現代生物技術的研究、開發、應用及轉基因生物可能對生物多樣性、生態環境和人類健康產生潛在的危害。

廣義：指與生物有關的各種因素對社會、經濟、人類健康及生態環境所產生的危害或潛在風險。微生物學第03章消毒滅菌與病原微生物實驗室生物安全

病原微生物所致的安全問題，如病原微生物實驗室的安全隱患、生物武器、生物恐怖、重大傳染病的暴發流行等，也是人類社會所面臨的最現實的生物安全問題。

病原微生物實驗室生物安全的核心是防擴散和防感染。

關于病原微生物實驗室生物安全，我國法令包括對病原微生物的分類管理，對實驗室的分級管理，實驗室感染的控制以及監督和法律責任等。

微生物學第03章消毒滅菌與病原微生物實驗室生物安全一、病原微生物的分類

根據傳染性、感染后對個體或者群體的危害程度，病原微生物分為四類：

第一類是指能夠引起人類或者動物非常嚴重疾病的微生物，以及我國尚未發現或者已經宣布消滅的微生物（29種）。

第二類是指能夠引起人類或者動物嚴重疾病，比較容易直接或者間接在人與人、動物與人、動物與動物間傳播的微生物（70種）。

微生物學第03章消毒滅菌與病原微生物實驗室生物安全一、病原微生物的分類

第三類是指能夠引起人或動物疾病，但一般情況下對人、動物或環境不構成嚴重危害，傳播風險有限，實驗室感染后很少引起嚴重疾病，并且具備有效治療和預防措施的微生物（275種）。

第四類是指在通常情況下不會引起人或動物疾病的微生物。如小鼠白血病病毒等。

第一類、第二類統稱為高致病性病原微生物。

微生物學第03章消毒滅菌與病原微生物實驗室生物安全二、病原微生物實驗室的分級級別處理對象一級對人體、動植物或環境危害較低，不具有對健康成人、動植物致病的致病因子。二級對人體、動植物或環境具有中等危害或具有潛在危險的致病因子，對健康成人、動植物和環境不會造成嚴重危害，具有有效的預防和治療措施。三級對人體、動植物或環境具有高度危險性，主要通過氣溶膠使人類傳染上嚴重的甚至是致命的疾病，或對動植物和環境具有高度危害的致病因子。通常有預防治療措施。四級對人體、動植物或環境具有高度危險性，通過氣溶膠途徑傳播或傳播途徑不明或未知的危險的致病因子。沒有預防治療措施。微生物學第03章消毒滅菌與病原微生物實驗室生物安全一、二級實驗室不得從事高致病性病原微生物實驗活動。三級、四級實驗室從事高致病性病原微生物實驗活動。

從事高致病性病原微生物相關實驗活動應當有２名以上的工作人員共同進行。在同一個實驗室的同一個獨立安全區域內，只能同時從事一種高致病性病原微生物的相關實驗活動。應有健全安全保衛制度。

微生物學第03章消毒滅菌與病原微生物實驗室生物安全實驗室工作人員應掌握實驗室技術規范、操作規程、生物安全防護知識和實際操作技能。應有符合要求的防護用品，應建立健康檔案；進行預防接種。實驗室應有科學、嚴格的管理制度，定期對實驗室設施設備、材料等進行檢查、維護和更新，應對廢水、廢氣以及其他廢物進行合理處置，防止環境污染。微生物學第03章消毒滅菌與病原微生物實驗室生物安全生物安全微生物學第03章消毒滅菌與病原微生物實驗室生物安全三、實驗室感染的控制以及監督和法律責任

實驗室感染控制工作包括定期檢查實驗室的生物安全防護、病原微生物菌（毒）種和樣本保存與使用、安全操作、實驗室排放的廢水和廢氣以及其他廢物處置等實施情況。

實驗室發生高致病性病原微生物泄漏時，預防、控制措施包括：①封閉被病原微生物污染的實驗室或可能造成病原微生物擴散的場所；②開展流行病學調查；③對病人進行隔離治療，對相關人員進行醫學檢查；④對密切接觸者進行醫學觀察；⑤進行現場消毒；⑥對染疫或者疑似染疫的動物采取隔離、撲殺等措施。微生物學第03章消毒滅菌與病原微生物實驗室生物安全

監督的主要內容是監督病原微生物實驗室執行國家有關法律、行政法規、國家標準和要求的記錄、檔案及報告的情況。

法律責任的核心是承擔造成傳染病傳播、流行或者其他嚴重后果的法律責任。微生物學第03章消毒滅菌與病原微生物實驗室生物安全思考題

常用的消毒劑有哪些種類?

簡述化學消毒劑的殺菌機制。

濕熱滅菌有哪些方法?各有何用途?

筒述紫外線殺菌的作用機制和注意事項。

在溫度和時間相同的情況下，為什么濕熱滅菌法的效果比干熱法好