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文檔簡介
關于細菌數量的測定細菌數量的測定實驗目的:1.學習微生物數量測定中常用的基本原理2.掌握幾種測定細菌數量的方法3.學會使用血細胞計數板進行計數。第2頁,共12頁,2024年2月25日,星期天細菌數量的測定測定方法1
顯微鏡直接計數(計數板計數、載玻片計數)2平板菌落計數3比濁法材料用具菌種:酵母菌儀器:顯微鏡、血細胞計數板、計數器、無菌吸管、濾紙、蓋玻片第3頁,共12頁,2024年2月25日,星期天計數室計數室(中間大方格)的長和寬各為1mm,深度為0.1mm,其體積為______mm3,合_________mL。1mm0.11×10-4
血細胞計數板(希里格式25×16、,麥式16×25)載玻片蓋玻片計數室正面圖B側面圖第4頁,共12頁,2024年2月25日,星期天計數室計數室分為25中格(雙線邊)每一中格又分為16小格計數室是由___________個小格組成25×16=400第5頁,共12頁,2024年2月25日,星期天細菌數量的測定操作步驟1
菌液稀釋2加樣
將計數板水平放置試驗臺上,蓋上蓋玻片于計數室上方,用吸管將菌液吹吸均勻,然后吸取少量菌液,從計數板一側中間平臺與蓋玻片接觸的邊緣處加樣,讓菌液自行滲入并充滿計數室,多余的菌液用濾紙吸去
加樣一氣呵成,不可有氣泡產生,不可使蓋玻片懸浮第6頁,共12頁,2024年2月25日,星期天細菌數量的測定3
定位計數室
現在低倍鏡下找到計數板大方格的位置,轉換高倍鏡后,適當調暗光線至計數室線條清晰為止第7頁,共12頁,2024年2月25日,星期天4計數A1A2A5A3A4選取如圖5個中方格,進行計數。當遇上細胞位于分界線上時,按如下規則計數:
記上不記下,記左不計右第8頁,共12頁,2024年2月25日,星期天記上不記下,記左不計右第9頁,共12頁,2024年2月25日,星期天計數室細胞數量太多,則菌液需要稀釋再計數,每個中方格細胞數量不超過50個為宜。第10頁,共12頁,2024年2月25日,星期天細菌數量的測定計算菌液濃度1ml培養液中酵母菌數量(個/ml)=平均每個中格酵母細胞數×25×10480小格內酵母細胞個數/80×400×104×稀釋倍數×稀釋倍數第11頁,共12頁
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