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文檔簡介

病原菌多基因調控機制研究蔗糖酶的專一性研究（P69）實驗目的通過對酵母蔗糖酶專一性的研究，加深對酶專一性的理解了解酵母蔗糖酶催化水解何種糖苷鍵實驗原理1、酶的專一性酶的專一性是指一種酶只能對一種底物或一類底物起催化作用，并生成具有確定結構的產物，而對其他底物無催化作用。酶的專一性可分為：鍵的專一性：只作用與一定類型的化學鍵，對鍵兩端的集團無嚴格要求。如核酶、酯酶等基團專一性：對鍵兩端或一段的基團具有嚴格要求，如β-葡萄糖苷酶、轉移酶等絕對專一性：只作用于一種底物立體異構專一性：旋光異構專一性和幾何異構專一性2、葡萄糖、果糖和半乳糖D/αL/β3、淀粉的結構與其水解產物直鏈淀粉：200~300個α-葡萄糖以α-1，4糖苷鍵相連支鏈淀粉：由α-1，4糖苷鍵和α-1，6糖苷鍵在直鏈淀粉的基礎上，分支而成還原性：無水解產物：人體內，在淀粉酶的催化下生成麥芽糖；麥芽糖在麥芽糖酶的催化下，徹底水解成解成葡萄糖。1234564、棉籽糖的結構與其水解產物分子組成：α-半乳糖、α-葡萄糖和α-呋喃果糖聚合而成還原性：無徹底水解產物：α-半乳糖、α-葡萄糖和α-呋喃果糖β-1，6糖苷鍵→→α-1，2糖苷鍵1234561234565、蔗糖的結構與其水解產物分子組成：α-葡萄糖和α-呋喃果糖縮合而成的二糖還原性：無徹底水解產物：α-葡萄糖和α-呋喃果糖α-1，2糖苷鍵1234561234566、本尼迪特（Benedict）反應本尼迪特試劑（班氏試劑）：堿性硫酸銅溶液，具有一定的氧化能力，能與還原性單糖的半縮醛羥基發生氧化還原反應，生成氧化亞銅沉淀，磚紅色或黃綠色。淀粉、蔗糖和棉籽糖都不能反應，而它們的水解產物（如葡萄糖和果糖）能夠發生本尼迪特反應。因此，可以利用觀察有無顏色沉淀，判定蔗糖酶是否對淀粉、蔗糖和棉籽糖具有水解作用。實驗材料器材：50和1000μL可調移液槍、試管、水浴鍋等。試劑：（略，見教材）操作步驟（1）蔗糖酶液的制備：秤取1g干酵母粉，分次加入7ml水，研磨5min，過濾后，濾液用水稀釋三倍（蔗糖酶液），待用。（2）取7支大試管，標號，按下列表格操作：混勻后，40oC溫育30min，再加入2ml班氏試劑，沸水浴中作用3min，觀察各管顏色變化，并作記錄。注意事項：（1）充分研磨酵母（2）脫脂棉先用蒸餾水浸濕（3）沸水時間不可過長思考題：（1）試管5經長時

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