2024屆湖北省咸寧市高三下學期聯合考試生物試題注意事項：1．答卷前，考生務必將自己的姓名、準考證號、考場號和座位號填寫在試題卷和答題卡上。用2B鉛筆將試卷類型（B）填涂在答題卡相應位置上。將條形碼粘貼在答題卡右上角"條形碼粘貼處"。2．作答選擇題時，選出每小題答案后，用2B鉛筆把答題卡上對應題目選項的答案信息點涂黑；如需改動，用橡皮擦干凈后，再選涂其他答案。答案不能答在試題卷上。3．非選擇題必須用黑色字跡的鋼筆或簽字筆作答，答案必須寫在答題卡各題目指定區域內相應位置上；如需改動，先劃掉原來的答案，然后再寫上新答案；不準使用鉛筆和涂改液。不按以上要求作答無效。4．考生必須保證答題卡的整潔。考試結束后，請將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．葡萄糖轉運載體（GLUT）有多個成員，其中對胰島素敏感的是GLUT4,其作用機理如下圖所示。GLUT1～3幾乎分布于全身所有組織細胞，它們的生理功能不受胰島素的影響，其生理意義在于維持細胞對葡萄糖的基礎轉運量。下列分析錯誤的是A．如果體內產生蛋白M抗體，可能會引發糖尿病B．如果信號轉導障礙，可以加速含GLUT4的囊泡與細胞膜的融合C．GLUT1～3轉運的葡萄糖，可保證細胞生命活動的基本能量需要D．當胰島素與蛋白M結合之后，可以提高細胞對葡萄糖的轉運能力2．關于ATP的敘述，正確的是（）A．葉肉細胞中需要能量的生命活動都是由ATP直接供能B．主動運輸過程要消耗ATP，這樣會導致細胞中大量的ADP積累C．即使在氧氣充足的條件下，豬的成熟紅細胞也只能通過無氧呼吸產生少量的ATPD．洋蔥根尖分生區細胞的兩組中心粒分別移向兩極時需要ATP供能3．塞罕壩地區的生態環境曾經受到過嚴重破壞，多年以來一直是一片高原荒丘。近幾十年經過塞罕壩人的努力，該地森林覆蓋率逐漸升高，生態系統逐漸穩定。下列相關說法錯誤的是（）A．該事例說明人類活動可以改變群落演替的速度和方向B．塞罕壩地區的物種豐富度逐漸增加，群落的結構更加復雜C．塞罕壩地區生態環境恢復后，旅游業得以發展，體現了生物多樣性的間接價值D．塞罕壩地區生態系統穩定性提高與群落中生物種類的增加有關4．下列與細胞相關的敘述中正確的是（）A．動物細胞沒有原生質層，因此不能發生滲透作用B．細胞膜中的磷脂分子是由膽固醇、脂肪酸和磷酸組成的C．組織液中的可以通過自由擴散進入組織細胞中D．真核細胞的遺傳物質徹底水解后可以得到5種堿基5．下列有關細胞結構與生理功能的敘述，正確的是（）A．細胞的分化導致了基因的選擇性表達B．顫藻細胞的衰老與其端粒密切相關C．溶酶體能合成多種水解酶，與細胞凋亡密切相關D．細胞分化，衰老和凋亡都有新蛋白質的合成6．用差速離心法分離出某動物細胞的三種細胞器，經測定其中三種有機物的含量，如圖所示。以下對細胞器的結構和功能，說法不正確的是（）A．乳酸菌細胞也含有細胞器甲B．附著在內質網上的細胞器甲屬于生物膜系統C．細胞器乙含有脂質，所以不是中心體D．細胞器丙是線粒體，在其內膜上可生成H2O二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）2020年2月10日，總書記在北京調研指導新型冠狀病毒肺炎疫情防控工作時強調，以更堅定的信心、更頑強的意志、更果斷的措施，堅決打贏疫情防控的人民戰爭、總體戰、阻擊戰。請回答下列問題：（1）新型冠狀病毒侵入人體內，首先要突破保衛人體的第一道防線和第二道防線，這兩道防線叫做__________免疫。（2）病毒侵入人體后寄生在宿主細胞中，_________能識別被寄生的宿主細胞，并與之密切接觸，使其裂解死亡，新型冠狀病毒被釋放出來后，與_______(填“細胞”或“體液”)免疫產生的________凝集，使之失去侵染能力，最后被吞噬細胞吞噬消化。（3）新型冠狀病毒的檢測可以采用實時熒光RT—PCR(逆轉錄聚合酶鏈式反應)的方法，RT—PCR的具體過程如圖。過程I需要加入緩沖液、原料、_______酶和引物A等；過程Ⅱ擬對單鏈cDNA進行n次循環的擴增，理論上需要________個引物B。（4）疫情發生后，多地緊急啟動封城措施，限制人員進出，對感染者進行隔離治療。從預防傳染病的角度來說，這種措施屬于__________。其他防控措施有：①隔離病人；②使用一次性口罩、手套和防護服；③接種疫苗；④用酒精、84消毒液等對室內外環境進行消毒等；其中屬于切斷傳播途徑的是____________。(填序號)（5）研究人員在研究疫苗的同時，為了臨床快速緩解患者癥狀，需要短時間內大量制備相關抗體，具體步驟為：將減毒新型冠狀病毒多次注射到小鼠體內，取經新型冠狀病毒免疫后小鼠的________，加入__________，使之與小鼠的骨髓瘤細胞進行融合以形成雜交瘤細胞，經培養、篩選，最后得到單克隆抗體，其特點是_______________。8．（10分）胚胎工程應用前景非常廣闊，包含的技術內容也很豐富，請回答以下問題：（1）胚胎移植過程中，首先應對所選的供體、受體使用______________進行同期發情處理，沖卵后的胚胎通常應發育到______________階段才能進行胚胎移植，胚胎移植實質上是早期胚胎在相同生理環境條件下______________。（2）對囊胚階段的胚胎進行分割時，要注意將其中的______________均等分割，對囊胚做DNA分析鑒定性別時通常在___部分取樣。（3）哺乳動物的胚胎干細胞是由______________中分離出來的一類細胞，這類細胞在飼養層細胞上培養時，能夠維持______________狀態，為科學研究提供良好素材。9．（10分）已知只有一條X染色體的果蠅為雄性，而性染色體組成為XXY的果蠅為雌性，果蠅的紅眼（E）對粉色眼（e）為顯性。現準備純種紅眼和粉色眼雌、雄果蠅各若干只，將紅眼雌果蠅與粉色眼雄果蠅雜交，F1全為紅眼，F1自由交配得F2，F2中紅眼雌果蠅：紅眼雄果蠅：粉色眼雄果蠅=2：1：1。分析實驗現象，回答下列問題：（1）該對相對性狀的遺傳所遵循的遺傳定律的細胞學基礎是________________________。（2）實驗發現F2中出現了一只粉色眼雌果蠅，為探究該果蠅出現的原因，研究者取該果蠅體細胞制作了臨時裝片，在光學顯微鏡下觀察處于________期的細胞，發現其變異類型屬于染色體變異，則其性染色體組成應為________，該果蠅出現的最可能的原因是_______________________。（3）為探究控制E、e這對相對性狀的基因是否位于ⅹ、Y染色體的同源區段，研究者將純種紅眼雄果蠅與正常的粉色眼雌果蠅進行雜交：①若F1___________________________，則這對等位基因位于X、Y染色體的非同源區段；②若F1______________________，則這對等位基因位于X、Y染色體的同源區段，若讓F1所有個體自由交配得F2，F2所有個體自由交配得F3，則F3的性狀及分離比為____________________________，雌果蠅中e的基因頻率為___________。10．（10分）乙烯具有促進果實成熟的作用，ACC氧化酶和ACC合成酶是番茄細胞合成乙烯的兩個關鍵酶。利用反義DNA技術（原理如圖1），可以抑制這兩個基因的表達，從而使番茄具有耐儲存、宜運輸的優點。圖2為融合ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因的反義表達載體的結構示意圖。（1）圖2中的2A11為特異性啟動子，則2A11應在番茄的____________（器官）中表達。（2）從番茄成熟果實中提取___________為模板，利用反轉錄法合成ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因，以進行拼接構成融合基因并擴增。（3）合成出的ACC氧化酶基因兩端分別含限制酶BamHⅠ和XbaⅠ的酶切位點，ACC合成酶基因兩端含SacⅠ和XbaⅠ的酶切位點，用限制酶____________對上述兩個基因進行酶切，再串聯成融合基因，相應的Ti質粒應用限制酶_______________進行切割，確保融合基因能夠插入載體中。（4）為了實現圖1中反義基因的效果，應將融合基因_______（正向/反向）插入在啟動子2A11的下游即可構成反義融合基因。將表達載體與農桿菌菌液混合后，接種在含有___的培養基中，可篩選出含有反義融合基因的農桿菌，再利用農桿菌轉化法獲得轉基因番茄。（5）在檢測番茄細胞中是否存在反義融合基因時，____________（填“能”/“不能”）用放射性物質標記的ACC氧化（合成）酶基因片段做探針進行檢測，理由是____________。11．（15分）以下是基因工程四個主要操作程序：①基因表達載體的構建②將目的基因導入受體細胞③目的基因的獲取④目的基因的檢測與鑒定請回答下列問題：（1）進行③操作時，可以從基因文庫中獲取，基因文庫分為_____________兩種，其區別是_____________，PCR擴增也是獲取目的基因常用的方法，進行PCR時，需要向擴增儀中加入熱穩定DNA聚合酶、四種原料、_____________以及引物，合成引物的前提是_____________。PCR擴增時，與引物結合的是_____________。（2）進行操作①時，應先選擇合適的載體，常見的載體是質粒，質粒的本質是______；如圖是常用的質粒載體，基因工程中利用BamHI限制酶識別CCATCC序列，并在GG之間切割，通過BamHI限制酶切割形成的末端屬于___________，科研人員利用該質粒完成基因工程，則通過___________基因供重組DNA的鑒定與選擇。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、B【解題分析】

據圖分析，當胰島素和其受體結合后，一方面促進蛋白質、脂肪、糖原合成，另一方面使細胞膜上的葡萄糖轉運蛋白增加，促進葡萄糖進入細胞，促進葡萄糖的利用，而使血糖濃度降低，激素與受體結合體現了信息的傳遞功能。【題目詳解】A、蛋白M為胰島素受體，而胰島素有降血糖的作用，如果體內產生蛋白M抗體，則使胰島素與其受體的結合機會減少，甚至不能結合，從而使胰島素不能發揮作用，可能會引發糖尿病，A正確；BD、胰島素與蛋白M（胰島素受體）結合后，激活蛋白M，經過細胞內信號轉導，引起含GLUT的囊泡與細胞膜的融合，從而提高了細胞對葡萄糖的轉運能力，如果信號轉導障礙，則不利于含GLUT4的囊泡與細胞膜的融合，B錯誤，D正確；C、GLUT1～3幾乎分布于全身所有組織細胞，它們的生理功能不受胰島素的影響，其生理意義在于維持細胞對葡萄糖的基礎轉運量，因此GLUT1～3轉運的葡萄糖，可保證細胞生命活動的基本能量需要，C正確。故選B。2、C【解題分析】

細胞的代謝都伴隨著能量的轉移和轉化，細胞中的反應可分為吸能反應和放能反應。ATP不僅是細胞中放能反應和吸能反應的紐帶，更是細胞中的能量通貨。ATP在細胞中易于再生，因此可以作為源源不斷的能源，ATP是細胞中普遍使用的能量載體，所含能量不多，易于轉化。【題目詳解】A、葉肉細胞中發生水的光解，不是由ATP直接供能，A錯誤；B、ATP與ADP在細胞中含量很少，它們之間的相互轉化十分迅速，B錯誤；C、豬的成熟紅細胞中沒有線粒體，C正確；D、洋蔥根尖分生區細胞中沒有中心粒，D錯誤。故選C。3、C【解題分析】

生態系統的穩定性是生態系統所具有的保持或恢復自身結構和功能相對穩定的能力。包括抵抗力穩定性和恢復力穩定性。【題目詳解】A、塞罕壩地區多年來一直是高原荒丘，經當地人幾十年的努力，森林覆蓋率逐漸升高，表明人類活動可以改變群落演替的速度和方向，A正確；B、該演替過程中，物種豐富度逐漸增加，群落結構越來越復雜，B正確；C、發展旅游業體現了生物多樣性的直接價值，C錯誤；D、一般來說，生物種類越多，營養結構越復雜，生態系統越穩定，塞罕壩地區生態系統穩定性提高與群落中生物種類的增加有關，D正確。故選C。【題目點撥】本題綜合考查了群落的演替、結構、物種豐富度、生物多樣性的價值、生態系統穩定性的知識，考生需要識記即可。4、C【解題分析】

原生質層包括細胞膜、液泡膜以及它們之間的細胞質，原生質層相當于一層半透膜。細胞生物的遺傳物質是DNA；組織細胞中由于不斷進行有氧呼吸消耗氧氣，因此其中的氧氣濃度是低的，因此組織細胞中的氧氣能通過自由擴散的方式進入細胞。【題目詳解】A、動物細胞沒有原生質層，但有細胞膜，因此能發生滲透作用，A錯誤；B、細胞膜中的磷脂分子是由甘油、脂肪酸和磷酸等組成的，B錯誤；C、細胞內的氧氣濃度是低的，故組織液中的可以通過自由擴散進入組織細胞中，C正確；D、細胞的遺傳物質是DNA，DNA徹底水解后可以得到4種堿基，D錯誤。故選C。5、D【解題分析】

1、細胞分化是指在個體發育中，由一個或一種細胞增殖產生的后代，在形態，結構和生理功能上發生穩定性差異的過程。細胞分化的實質：基因的選擇性表達。2、細胞凋亡是由基因決定的細胞編程序死亡的過程。細胞凋亡是生物體正常的生命歷程，對生物體是有利的，而且細胞凋亡貫穿于整個生命歷程。3、衰老細胞的特征：（1）細胞內水分減少，細胞萎縮，體積變小，但細胞核體積增大，染色質固縮，染色加深；（2）細胞膜通透性功能改變，物質運輸功能降低；（3）細胞色素隨著細胞衰老逐漸累積；（4）有些酶的活性降低；（5）呼吸速度減慢，新陳代謝減慢。【題目詳解】A、基因的選擇性表達導致了細胞的分化，A錯誤；B、端粒位于染色體（質）兩端，顫藻細胞屬于原核細胞，沒有端粒，B錯誤；C、溶酶體含有多種水解酶，與細胞凋亡密切相關，C錯誤；D、細胞分化，衰老和凋亡都有新蛋白質的合成，D正確。故選D。6、B【解題分析】

分析題圖：該細胞為動物細胞，甲的脂質含量為0，說明沒有膜結構，但含有核酸和蛋白質，可推測甲細胞器為核糖體；乙的脂質含量不為0，說明乙細胞器有膜結構，但無核酸，可推斷乙細胞器為內質網、高爾基體、溶酶體；丙有膜結構和核酸，可推斷丙細胞器為線粒體。【題目詳解】A、細胞器甲為核糖體，乳酸菌細胞為原核細胞，原核細胞含有核糖體，A正確；B、細胞器甲為核糖體，不含生物膜，不屬于生物膜系統，B錯誤；C、中心體無膜結構，不含脂質，細胞器乙含有脂質，所以不是中心體，C正確；D、細胞器丙是線粒體，是有氧呼吸的主要場所，在其內膜上可進行有氧呼吸第三階段生成H2O，D正確。故選B。二、綜合題：本大題共4小題7、非特異性效應T細胞體液抗體逆轉錄2n-1控制傳染源②④B淋巴細胞(漿細胞或效應B細胞)聚乙二醇(或滅活的病毒)特異性強、靈敏度高并可大量制備【解題分析】

1、體液免疫過程為：（1）感應階段：除少數抗原可以直接刺激B細胞外，大多數抗原被吞噬細胞攝取和處理，并暴露出其抗原決定簇；吞噬細胞將抗原呈遞給T細胞，再由T細胞呈遞給B細胞；（2）反應階段：B細胞接受抗原刺激后，開始進行一系列的增殖、分化，形成記憶細胞和漿細胞；（3）效應階段：漿細胞分泌抗體與相應的抗原特異性結合，發揮免疫效應。2、細胞免疫過程為：（1）感應階段：吞噬細胞攝取和處理抗原，并暴露出其抗原決定簇，然后將抗原呈遞給T細胞；（2）反應階段：T細胞接受抗原刺激后增殖、分化形成記憶細胞和效應T細胞，同時T細胞能合成并分泌淋巴因子，增強免疫功能。（3）效應階段：效應T細胞發揮效應。【題目詳解】（1）人體的第一道防線和第二道防線是生來就有，對多種病原體都有防御功能，屬于非特異性免疫。（2）病毒侵入人體后寄生在宿主細胞中，效應T細胞能識別被寄生的宿主細胞，并與之密切接觸，使其裂解死亡，新型冠狀病毒被釋放出來后，與體液免疫產生的抗體凝集，使之失去侵染能力，最后被吞噬細胞吞噬消化。（3）過程I是逆轉錄過程，需要加入緩沖液、原料、逆轉錄酶和引物A等；過程Ⅱ擬對單鏈cDNA進行循環的擴增，由圖示可知，第一輪需要1個引物B，第二輪需要2個引物B，第三輪需要4個引物B，故第n輪理論上需要2n-1個引物B。（4）疫情發生后，啟動封城措施，限制人員進出，對感染者進行隔離治療，這種措施屬于控制傳染源。①隔離病人屬于控制傳染源，①錯誤；②使用一次性口罩、手套和防護服屬于切斷傳播途徑，②正確；③接種疫苗屬于保護易感人群，③錯誤；④用酒精、84消毒液等對室內外環境進行消毒等屬于切斷傳播途徑，④正確。故選②④。（5）制備單克隆抗體的具體步驟為：將減毒新型冠狀病毒多次注射到小鼠體內，取經新型冠狀病毒免疫后小鼠的B淋巴細胞(漿細胞或效應B細胞)，加入聚乙二醇(或滅活的病毒)，使之與小鼠的骨髓瘤細胞進行融合以形成雜交瘤細胞，經培養、篩選，最后得到單克隆抗體。單克隆抗體具有特異性強、靈敏度高并可大量制備的特點。【題目點撥】本題結合新冠病毒考查免疫調節、單克隆抗體的制備等相關知識點，掌握相關知識結合題意答題。8、孕激素等桑椹胚或囊胚空間位置的轉移內細胞團滋養層早期胚胎或原始性腺不分化【解題分析】

1、體外受精主要包括：卵母細胞的采集和培養、精子的采集和獲能、受精。（1）卵母細胞的采集和培養：主要方法是用促性腺激素處理，使其超數排卵，然后，從輸卵管中沖取卵子。第二種方法是從已屠宰母畜的卵巢中采集卵母細胞或直接從活體動物的卵巢中吸取卵母細胞。（2）精子的采集和獲能：收集精子的方法：假陰道法、手握法和電刺激法。對精子進行獲能處理：包括培養法和化學誘導法。（3）受精：在獲能溶液或專用的受精溶液中完成受精過程。2、胚胎移植的基本程序主要包括：①對供、受體的選擇和處理（選擇遺傳特性和生產性能優秀的供體，有健康的體質和正常繁殖能力的受體。用激素進行同期發情處理，用促性腺激素對供體母牛做超數排卵處理）；②配種或人工授精；③對胚胎的收集、檢查、培養或保存（對胚胎進行質量檢查，此時的胚胎應發育到桑椹胚或囊胚階段）；④對胚胎進行移植；⑤移植后的檢查。【題目詳解】（1）胚胎移植過程中，首先應對所選的供體、受體使用孕激素等進行同期發情處理，沖卵后的胚胎通常應發育到桑椹胚或囊胚階段才能進行胚胎移植，胚胎移植實質上是早期胚胎在相同生理環境條件下空間位置的轉移。（2）對囊胚階段的胚胎進行分割時，要注意將其中的內細胞團均等分割，否則會影響分割后胚胎的恢復和進一步發育。滋養層的細胞將來發育成胎膜和胎盤，取滋養層細胞不會影響胚胎的發育，故對囊胚做DNA分析鑒定性別時通常在滋養層部分取樣。（3）胚胎干細胞是由早期胚胎或原始性腺中分離出來的一類細胞，這類細胞在飼養層細胞上培養時，能夠維持不分化的狀態，為科學研究提供良好素材。【題目點撥】本題考查胚胎工程的相關知識，要求考生識記胚胎工程的技術及相關的細節，屬于基礎知識的考查。9、減數第一次分裂后期，等位基因隨著同源染色體的分開而分離有絲分裂中XXYF1中雌果蠅減數第二次分裂后期姐妹染色單體未分離雄性全為粉色眼，雌性全為紅眼全為紅眼紅眼雌果蠅：粉色眼雌果蠅：紅眼雄果蠅=5：3：85/8【解題分析】

題意顯示，將紅眼雌果蠅與粉色眼雄果蠅雜交，F1全為紅眼，說明紅眼對粉色眼為顯性，F1自由交配得F2，F2中紅眼雌果蠅：紅眼雄果蠅：粉色眼雄果蠅=2：1：1，顯然子二代中的性狀表現與性別有關，據此可知相關基因位于X染色體上，親本基因型為XEXE、XeY，F1基因型為XEXe、XEY；F2基因型為XEXE、XEXe、XEY、XeY。【題目詳解】（1）該對相對性狀的是由一對等位基因控制的，因此該性狀的遺傳符合基因分離定律，該定律的細胞學基礎是減數第一次分裂后期，等位基因隨著同源染色體的分開而分離。（2）有絲分裂中期是觀察染色體形態和數目的最佳時期，因此研究者應該選取處于有絲分裂中期的細胞進行觀察，發現其變異類型屬于染色體變異，則其性染色體組成應為XXY，由于F1的基因型為XEXe、XEY，因此該果蠅出現的最可能的原因是F1中雌果蠅減數第二次分裂后期姐妹染色單體未分離，產生了基因型為XeXe類型的卵細胞，然后與正常的精子完成受精發育形成的。（3）①若控制這對相對性狀的基因E、e位于X、Y染色體的非同源區段，則親本基因型為XeXe、、XEY，F1雄性全為粉色眼，雌性全為紅眼；②若控制這對相對性狀的基因E、e位于X、Y染色體的同源區段，則親本基因型為XeXe、、XEYE，F1的基因型為XEXe、XeYE，即F1無論雌、雄全為紅眼，若讓F1所有個體自由交配得F2，F2的基因型為XEXe、XeXe、XEYE、XeYE，該群體中卵細胞的種類及比例為XE∶Xe=1∶3，精子的種類與比例為XE∶Xe∶YE=1∶1∶2，列出棋盤可得出F3，則F3的性狀及分離比為紅眼雌果蠅：粉色眼雌果蠅：紅眼雄果蠅=5：3：8，其中雌果蠅的基因型及比例為XEXE∶XEXe∶XeXe=1∶4∶3，可算出該雌蠅e的基因頻率為10/16=5/8。【題目點撥】熟知伴性遺傳的類型及其各自的特點是判斷基因位置的法寶，會用分離定律解答實際計算的問題是解答本題的另一關鍵！10、果實RNAXbalBamHl和Sacl反向卡那霉素不能番茄細胞內本來存在ACC合成酶基因，能與ACC合成酶基因探針發生分子雜交【解題分析】

分析題意和題圖：番茄細胞中原有靶基因控制合成的ACC氧化酶和ACC合成酶是番茄細胞合成乙烯的兩個關鍵酶。圖1所示為反義基因轉錄成的RNA可與靶基因轉錄出的mRNA形成RNA雙鏈，使靶mRNA不能與核糖體結合或被RNA酶降解，從而阻止了ACC氧化酶和ACC合成酶的合成，影響細胞中乙烯的合成，使番茄具有耐儲存、宜運輸的優點。圖2所示的基因表達載體的組成包括復制原點、啟動子、終止子、標記基因和目的基因，目的基因插入點在啟動子和終止子之間。【題目詳解】（1）乙烯具有促進果實成熟的作用，因此圖2中的2A11為特異性啟動子，則2A11應在番茄的果實中表達。（2）從番茄成熟果實中提取RNA為模板，利用反轉錄法合成ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因，以進行拼接構成融合基因并擴增。（3）合成出的ACC氧化酶基因兩端分別含限制酶BamHⅠ和XbaⅠ的酶切位點，ACC合成酶基因兩端含SacⅠ和XbaⅠ的酶切位點，要將兩個基因融合，需用同一種限制酶即XbaⅠ酶對上述兩個基因進行酶切，再用DNA連接酶串聯成融合基因，這樣融合基因上有三個限制酶切點：BamHⅠ、XbaⅠ、SacⅠ，其中限制酶BamHⅠ、SacⅠ分別位于融合基因的兩端，因此相應的Ti質粒應用限制酶BamHl和Sacl進行切割，確保融合基因能夠插入載體中。（4）反義融合基因是由番茄果實細胞中的靶基因轉錄出的mRNA反轉錄形成的，因此為了實現圖1中反義基因的效果，應將融合基因反向插入在啟動子2A11的下游即可構成反義融合基因。將表達載體與農桿菌菌液混合后，接種在含有卡那霉素的培養基中，