玉米須總皂苷降糖作用的藥效學(xué)研究

水稻是水稻科植物中的一個干燥的莖和枕頭。它又平又甜。它具有消腫、利尿、平肝、更正等功能。根據(jù)現(xiàn)代研究，它具有降血糖、止血、利尿、平肝、降壓等功效。玉米須含脂肪油、皂苷、苦味糖苷、揮發(fā)油、多糖、β-谷甾醇、豆甾醇等成分,玉米須水煎劑降糖作用確切,臨床上也有較多應(yīng)用。皂苷在玉米須中約占3.18%,是其主要的水溶性成分之一。本實驗觀察了玉米須總皂苷的降糖作用。1實驗材料1.1總皂苷的提取玉米須總皂苷,干燥玉米須用70%乙醇回流提取,回收乙醇,濃縮,濃縮液以乙醚萃取脫脂,水部位以水飽和正丁醇反復(fù)萃取,正丁醇層減壓回收,得棕色玉米須粗總皂苷粉末;達美康,法國施維雅藥廠與天津華津制藥廠合作生產(chǎn),批號011129。1.2氧吡啶及鏈哌佐菌素鹽酸腎上腺素注射液,上海禾豐制藥有限公司,批號000102;地塞米松酸鈉注射液,廣州市橋制藥廠生產(chǎn),批號020115;四氧嘧啶和鏈脲佐菌素,均為Sigma公司產(chǎn)品;糖化血清蛋白檢測試劑盒,南京建成生物工程研究所生產(chǎn),批號021205;胰島素放免分析藥盒,解放軍總醫(yī)院科技開發(fā)中心放免研究所提供,批號021226。1.3動物昆明種小鼠,雄性,體重19～22g,由河南醫(yī)學(xué)動物實驗中心提供,豫醫(yī)動管(證)字第410115。2實驗方法2.1玉米須總皂苷提取物取小鼠50只,隨機分為5組,分別灌服大、中、小劑量玉米須總皂苷水溶液、達美康混懸液及同體積的0.5%CMC,每天給藥1次,連續(xù)給藥7d,于末次給藥后1h(禁食12h),眼眶取血,分離血清測血糖。2.2給藥4d取雄性小鼠60只,隨機分為6組,給藥同前,每天給藥1次,連續(xù)給藥7d。于第7天灌藥后90min(禁食后12h),給每組小鼠腹腔注射腎上腺素240μg·kg-1,空白對照組注射同體積生理鹽水,于給腎上腺素后30min,小鼠眼眶取血,分離血清測血糖,另取肝臟備用。2.3連續(xù)給藥對小鼠血糖含量測定指標(biāo)取雄性小鼠,禁食(不禁水)12h后,尾靜脈注射80mg·kg-1新配制的四氧嘧啶生理鹽水液,72h后,尾部取血測血糖值,選血糖>11.1mmol·L-1的小鼠60只,隨機分為6組,給藥同上,每天給藥1次,連續(xù)給藥30d,每10天稱體重1次,根據(jù)體重調(diào)整給藥量;分別于第10,20,30天灌胃2h后(禁食12h)小鼠尾部取血測血糖值。2.4分組及分組昆明種小鼠禁食12h后尾靜脈注射鏈脲佐菌素50mg·kg-1,72h后尾部取血測血糖,選血糖>11.1mmol·L-1者小鼠60只,隨機分為6組,給藥同上。每天給藥1次,連續(xù)給藥30d,分別于給藥第10,20天測空腹血糖值,于第30天,灌胃后2h(禁食12h),取血,分離血清,測血清中血糖、胰島素、糖基化血紅蛋白水平。3結(jié)果3.1玉米須皂苷對正常小鼠肝腎糖原的影響正常小鼠血糖值為(4.448±1.228)mmol·L-1,連續(xù)給藥7d,玉米須總皂苷大、中、小劑量組血糖分別為3.361±0.555,3.433±1.922,3.556±1.127mmol·L-1,達美康組為2.692±0.970mmol·L-1。玉米須總皂苷大劑量組空腹血糖值明顯低于空白組(P<0.05),達美康組顯著低于空白組(P<0.01)。提示玉米須總皂苷對正常小鼠有一定的降糖作用。腎上腺素致高血糖小鼠血糖測定按試劑盒法;另精密稱取肝臟200mg,用5%三氯乙酸4mL在勻漿器中制肝勻漿,4℃冰箱中靜置過夜,按文獻法測肝糖原。結(jié)果空白組血糖(mmol·L-1)和肝糖原(mg·g-1肝濕重)水平分別為4.122±1.127,7.229±3.105,模型組分別為14.849±2.735,3.028±1.113,大劑量玉米須皂苷組分別為9.884±2.600,4.625±1.811,中劑量組分別為8.087±2.854,6.032±3.513,小劑量組分別為10.492±2.34,5.025±2.850,達美康組分別為10.403±2.210,4.047±2.681;與空白對照組比,模型組血糖顯著提高、肝糖原水平顯著降低(P<0.01),說明造模成功。與模型組比,大、中、小劑量玉米須總皂苷和達美康均能顯著降低腎上腺素所致的高血糖(P<0.01);中劑量組還可明顯升高肝糖原水平(P<0.05);提示玉米須的降糖作用與促進肝糖原合成有一定的聯(lián)系。3.2尿病模型結(jié)果空腹血糖測定按試劑盒說明書。從表1可看出,與空白對照組比,模型組血糖值顯著低于空白對照組(P<0.01),說明造糖尿病模型成功。與模型組比,在灌胃第10天,各給藥組血糖值無明顯變化;在給藥第20天,達美康組血糖水平顯著降低(P<0.01),大、中、小劑量玉米須總皂苷組血糖水平明顯降低(P<0.05);在給藥第30天,大、中、小劑量玉米須總皂苷組和達美康組均能顯著降低血糖水平(P<0.01)。玉米須總皂苷能降低四氧嘧啶所致高血糖小鼠血糖水平,起效較達美康緩慢。3.3各組大鼠血糖、糖化血清蛋白和血糖指標(biāo)比較空腹血糖測定按試劑盒說明書。從表2可以看出,與空白組比,模型組血糖水平顯著高于空白組(P<0.01),說明造鏈脲佐菌素糖尿病模型成功。與模型組比,在給藥第20天,中劑量玉米須總皂苷組血糖水平明顯降低(P<0.05),在給藥第30天,中劑量組能顯著降低血糖水平(P<0.01),大劑量組和達美康組能明顯降低血糖水平(P<0.05)。空白組胰島素(×10-3μU·L-1)和糖化血清蛋白(HbAlc)水平分別為12.13±2.31,1.631±0.285,模型組分別為3.52±0.98,2.837±0.230,大劑量玉米須組分別為7.51±3.41,2.517±0.282,中劑量組分別為6.79±2.84,2.342±0.385,小劑量組分別為6.97±2.65,2.501±0.307,達美康組分別為8.39±4.77,2.400±0.240。與空白組比,模型組血清胰島素水平顯著降低(P<0.01),糖化血清蛋白水平顯著升高(P<0.01)。與模型組比,大、中、小劑量的玉米須總皂苷及達美康組均能明顯升高血清胰島素水平(P<0.05),中劑量玉米須總皂苷組能顯著降低血清糖化血清蛋白水平(P<0.01),小劑量組和達美康組能明顯降低血清糖化血清蛋白水平(P<0.05)。4玉米須降糖藥的臨床應(yīng)用現(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)玉米須水煎劑能明顯降低四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖,對外源性葡萄糖引起的血糖升高也有明顯的對抗作用,還能降低膽固醇血癥小鼠的血清膽固醇含量。其水提物腹腔給藥,可使正常小鼠血糖水平顯著降低,但對小鼠血漿胰島素水平無明顯影響;可使鏈脲佐菌素誘導(dǎo)的糖尿病小鼠血糖水平明顯降低,抑制腎上腺素誘導(dǎo)的高血糖,升高肝糖原水平。玉米須單獨或與其他藥配伍廣泛用于臨床多種病癥。雖玉米須降糖已有較多