肝功效中各檢測項目的測定辦法、測定原理和臨床意義血清總膽汁酸TBA：測定辦法：A、酶循環法，B、3a-HDS法（3-a羥類固醇脫氧酶）測定原理辦法A：膽汁酸被3α羥基類固醇脫氫酶（3a-HSDH）及口-硫代煙酰胺嘌呤二核苷酸氧化型特異性的氧化，生成3酮類固醇及}硫代煙酰胺嘌呤二核苷酸還原型。另外，生成的3酮類固醇在3α羥基類固醇脫氫酶及β硫代煙酰胺嘌呤二核苷酸還原型存在下，生成膽汁酸及β煙酰胺嘌呤二核苷酸氧化型。以上根據循環酶而放大量的膽汁酸測定生成的β-硫代煙酰胺嘌呤二核苷酸還原型的吸光度，計算血清中膽汁酸的量。辦法B：在3-a羥類固醇脫氧酶作用下，多個膽汁酸C3上α位的羥基脫氧形成羰基，同時氧化型NAD還原成NADH隨即NADH上的氫由黃遞酶催化轉移給硝基四氮唑藍（NTB）產生甲替,用磷酸中斷反映,甲替的產量與總膽汁酸成正比，在波長540nm比色,與同樣解決的原則品比較，計算其含量。（3）臨床意義1.測定血清中膽汁酸可提供肝膽系統與否正常，肝、膽疾病時周邊血循環中的膽汁酸水平明顯升高。急性肝炎早期和肝外阻塞性黃疸時可增至正常值的100倍以上。對肝膽系統疾病的診療含有特異性。2．可敏感地反映肝膽系統疾病的病變過程。肝膽疾病時血清膽汁酸濃度的升高與其它肝功效實驗及肝組織學變化極為吻合，在肝細胞僅有輕微壞死時，血清膽汁酸的升高，常比其它檢查更為敏捷。據報道，急性肝炎、肝硬化、原發性肝癌、急性肝內膽汁郁滯、原發性膽汁性肝硬化以及肝外阻塞性黃疸，其血清膽汁酸均100％出現異常。上述疾病時都有血清膽汁酸含量的增高。丙氨酸氨基轉移酶ALT測定辦法：酶偶聯法，賴氏法，持續監測法測定原理：L-丙氨酸

+

α-酮戊二酸---ALT----L-丙酮酸

+

L-谷氨酸

丙酮酸

+NADH+H+---------LD-------L--乳酸+NAD+（3）臨床意義：谷丙轉氨酶升高臨床意義就在于對急性乙型肝炎、慢性肝炎、HBV攜帶者、重型肝炎以及肝硬化、肝癌等一系列病毒性肝炎的診療和分析，ALT的升高只表達肝臟可能受到了損害。除了肝炎，其它諸多疾病都能引發谷丙轉氨酶轉氨酶升高。在急性肝炎及慢性肝炎與肝硬化活動，肝細胞膜的通透性變化，谷丙轉氨酶就從細胞內溢出到循環血液中去，這樣抽血檢查成果就偏高，轉氨酶反映肝細胞損害程度。但谷丙轉氨酶缺少特異性，有多個因素能造成肝細胞膜通透性的變化，如：疲勞、飲酒、感冒甚至情緒因素等等。上述因素造成的轉氨酶增高普通不會高于60個單位，轉氨酶值高于80個單位就有診療價值，需到醫院就診。另外需要注意，谷丙轉氨酶活性變化與肝臟病理組織變化缺少一致性，有的嚴重肝損患者谷丙轉氨酶并不升高。因此肝功效損害需要綜合其它狀況來判斷。天門冬氨酸氨基轉移酶(AST)測定辦法：酶偶聯法測定原理：（3）臨床意義：天冬氨酸氨基轉移酶在心肌細胞中含量最高，但肝臟損害時也可使其血清濃度升高，臨床常作為心肌梗死和心肌炎的輔助檢查。天冬氨酸氨基轉移酶(AST)的正常值為0~40U/L，當丙氨酸氨基轉移酶(ALT)明顯升高，(ALT/AST)比值不不大于l時，就表達肝臟發生了實質性損害。四、堿性磷酸酶ALP（1）測定辦法：持續監測法（2）測定原理：在pH=10的環境中，ALP催化磷酸二苯鈉的水解，生成苯酚和磷酸氫二鈉，苯酚與4-氨基安替比林反映生成色素原，該色素原經鐵氰化鉀氧化生成紅色醌亞胺衍生物。測定紅色物質的吸光度就能夠計算酶活力的大小。臨床意義：臨床上測定ALP重要用于骨骼、肝膽系統疾病的診療和鑒別診療，特別是黃疸的鑒別診療。對于不明因素的高ALP血清水平，可測定同工酶以協助明確其器官來源。生理性增高。小朋友在生理性的骨骼發育期，堿性磷酸酶活力可比正常人高1～2倍。處在生長久的青少年，以及孕婦和進食脂肪含量高的食物后均能夠升高。2.病理性升高（1）骨骼疾病如佝僂病、軟骨病、骨惡性腫瘤、惡性腫瘤骨轉移等；（2）肝膽疾病如肝外膽道阻塞、肝癌、肝硬化、毛細膽管性肝炎等；（3）其它疾病如甲狀旁腺機能亢進。3.病理性減少見于重癥慢性腎炎、小朋友甲狀腺機能不全、貧血等。乳酸脫氫酶LDH測定辦法：持續監測法、比色法、熒光法。測定原理：乳酸脫氫酶(LDH)在輔酶I的遞氫作用下，使乳酸脫氫而生成丙酮酸。氧化型輔酶I（NAD+）還原成還原型的輔酶I（NADH），引發340nm處吸光度的變化，其吸光度的增加速率與標本中LDH濃度成正比。臨床意義：用于AMI和亞急性MI的輔助診療：AMI后8～18小時開始升高，peaktim為24～72小時，持續時間6～10天。AMI時LD的升高倍數多為5～6倍，個別可高達10倍。由于LD特異性低，普通可用于觀察與否存在組織、器官損傷。如LD持續正常，可除外組織、器官損傷；如LD總酶活性升高，可能有組織、器官損傷，慣用于廣泛性癌癥化療時的監測醫學教育`網收集整頓。多個疾病的急性時相、\o"血液病"血液病（巨幼細胞性貧血、溶血性貧血、惡性貧血）、心肺疾患（AMI、肺梗塞）、肝膽疾患（肝炎、肝硬化、阻塞性黃疸、心力衰竭和心包炎時肝淤血）、惡性腫瘤、腎疾患、腦血管病變、肌病、休克等LD及其病變部位對應優勢的同工酶含量均可增高。谷氨酰轉肽酶γ—GT測定辦法：速率法測定原理：γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺+甘氨酰甘氨酸----γ-谷氨酰甘氨酰甘氨酸+5-氨基-2-硝基苯甲酸。生成的5-氨基-2-硝基苯甲酸在410nm波優點有吸取峰，其形成的速率與血清中γ-GT活性成正比，故通過測定吸光度增加的速率即可測出γ-GT的活性臨床意義：(1)原發性或轉移性肝癌時，血中GGT明顯升高。其因素是癌細胞產生的GGT增多和癌組織本身或其周邊的炎癥刺激作用，使肝細胞膜的通透性增加，以致血中GGT增高(2)阻塞性黃疸、急性肝炎、慢性肝炎活動期、膽道感染、肝硬化等都可使GGT升高。(3)其它疾病如心肌梗塞、急性胰腺炎及某些藥品等均可使血中GGT升高。谷氦酰轉肽酶（y-GT），正常值為50單位。急性乙肝時可升高，但持續1個月左右就會下降；如果長久升高不降，可能會向慢性肝炎轉化。慢性乙肝有時可達200單位或更高，且不容易消失，現在還缺少特效使其下降其它如酒精性肝病、脂肪肝、膽石病、肝內膽管結石等也能夠升高；黃疸長久不消退（膽汁淤積）時也會升高。要注意的是，若發生肝癌時，y-GT的上升值可達正常值的10倍以上，對其升高者一定要結合臨床其它資料加以綜合分析。膽堿酯酶CHE測定辦法：紙片法測定原理：丁酰硫代膽堿被ChE水解，生成硫代膽堿和丁酸；所釋放的硫代膽堿與二硫代硝基苯甲酸反映生成黃色的硝基苯甲酸衍生物，在405nm波長下檢測吸光度變化的速率就能夠檢測ChE的活性。臨床意義：急性病毒性乙肝：乙肝患者血清膽堿酯酶減少與病情嚴重程度有關，與黃疸程度不一定平行，若持續減少，常提示預后不良。

慢性乙肝：慢性遷延型乙肝患者此酶活力變化不大，慢性活動性乙肝患者此酶活力與急性乙肝患者相似。

肝硬化：若處在代償期，血清膽堿酯酶多為正常，若處在失代償期，則此酶活力明顯下降。

亞急性重型乙肝：亞急性重型乙肝患者特別是肝昏迷患者，血清膽堿酯酶明顯減少，且多呈持久性減少。

肝外膽道梗阻性黃疸：患者血清膽堿酯酶正常，若伴有膽汁性肝硬化則此

酶活力下降。

急慢性肝炎、肝硬化、肝功效不全時膽堿酯酶明顯減少，慢性膽道疾患，

肝癌合并肝硬化時膽堿酯酶減少。

有機磷中毒、營養不良、感染及貧血也可使膽堿酯酶減少。脂肪肝、腎臟病變、肥胖則出現血清膽堿酯酶增高。腺苷脫氨酶ADA測定辦法：Kaplan法奈氏顯色法、Kalckar氏法PNP法測定原理：ADA催化腺嘌呤核苷脫氨轉變為次黃嘌呤核苷，再經嘌呤核苷磷酸化酶（PNP）作用生成次黃嘌呤，次黃嘌呤經次黃嘌呤氧化酶（XOD）作用轉變為尿酸和過氧化氫（H2O2）。H2O2在過氧化物酶（POD）存在的狀況下，可與N-乙醛-N-（2-羥基-3-硫丙基）-3-甲基苯胺（EHSPT）和氨基安替比林（4-AA）生成醌染料，醌染料生成速率與ADA含量有關。臨床意義：1、急性肝炎時ADA僅輕中度增高；在慢性活動性肝炎和肝硬變時，ADA活性的陽性率可達90%左右，增高程度也較明顯；重癥肝炎時，ALT不高，但ADA常明顯升高；在阻塞性黃疸時，ADA活性升高極少。2、測定胸腹水及腦脊液標本中的ADA活性，有鑒別診療價值。結核性胸腹水中ADA活力明顯高于癌癥及炎癥胸腹水中ADA活力，對早期診療結核性胸、腹膜炎有較高的敏感性和一定的特異性。3、腦脊液ADA檢測可作為中樞神經系統疾病診療和鑒別診療的重要指標，結核性腦膜炎ADA活性升高，病毒性腦膜炎不升高。總膽紅素TBil測定辦法：重氮鹽法測定原理：血清中結合膽紅素可直接與重氮試劑反映產生偶氮膽紅素，因此稱為直膽，因此重氮法又稱1min膽紅素測定法，非結合膽紅素測定時要以咖啡因-苯甲酸鈉為加速劑破壞膽紅素氫鍵再與重氮試劑反映，抗壞血酸破壞剩余重氮試劑，加入堿性酒石酸鈉使最大吸光度由530nm轉到598nm，非膽紅素的黃色色素及其它紅色與棕色色素產生的吸光度降至可無視不計，使敏捷度和特異性升高，最后形成的綠色是由蘭色的堿性偶氮膽紅素和咖啡因與對氨基苯磺酸之間形成的黃色色素混合而成臨床意義：增高見于（1）肝臟疾患：急性黃疸型肝炎、急性黃色肝壞死、慢性活動性肝炎、肝硬化等。總膽紅素測定試劑盒（2）肝外的疾病：溶血型黃疸、血型不合的輸血反映、新生兒黃疸、膽石癥、肝癌、胰頭癌等。減少見于：總膽紅素偏低的因素[5]有可能是由于缺鐵性貧血，缺鐵性貧血是由于體內缺少鐵質而影響血紅蛋白合成所引發的貧血。缺鐵性貧血的癥狀就是面色微黃或蒼白，但與否缺鐵性貧血還要做進一步檢查，紅細胞形態、血清鐵、血清鐵蛋白檢查。厭食的人如果缺鋅，也會引發總膽紅素偏低。直接膽紅素DBIL測定辦法:重氮鹽法測定原理：膽紅素呈黃色，在450nm附近有最大吸取峰。膽紅素氧化酶(BOD)催化膽紅素氧化，隨著膽紅素被氧化，A450nm下降，下降程度與膽紅素被氧化的量有關。在pH8.0條件下，未結合膽紅素及結合膽紅素均被氧化，因而檢測450nm吸光度的下降值可反映總膽紅素含量；加入SDS及膽酸鈉等陰離子表面活性劑可增進其氧化。

在pH3.7～4.5緩沖液中，BOD催化單葡萄糖醛酸膽紅素(mBc)、雙葡萄糖醛酸膽紅素(dBc)及大部分δ膽紅素氧化，非結合膽紅素(Bu)在此pH條件下不被氧化。用配制于人血清中的二牛磺酸膽紅素(ditaurobilirubin，DTB)作原則品，檢測此條件下450nm吸光度的下降值可反映結合膽紅素的含量臨床意義：血清直接膽紅素超出4.5mg/L有臨床意義。正常血清中結合膽紅素僅占總膽紅素的4%-5%，其濃度普通<1mg/L，上限不超出3mg/L。正常血清內測的直接膽紅素基本上不反映與葡萄糖醛酸相結合的膽紅素，而在黃疸時，則基本反映后者的水平。膽汁瘀積性黃疸時，由于結合膽紅素不能從肝細胞和細毛膽管排出，使血清直接膽紅素明顯升高，在總膽紅素中所占比值升高明顯；肝細胞性黃疸時，由于同時有肝細胞攝取、結合、排泄障礙，以致血清直接膽紅素/總膽紅素比值也升高，但升高幅度不及膽汁瘀積性黃疸。在肝細胞性黃疸時比值>40%，而膽汁瘀積性黃疸時常在60%以上，最高的可達90%，有一定鑒別診療價值。血漿總蛋白TP測定辦法：化學法、物理法、染料結正當。測定原理：運用蛋白質中相對恒定的含氮量（16%），芳香族氨基酸上苯環共軛雙鍵含有吸取紫外光的性質，酸性下與某些帶負電荷染料特異結合臨床意義：(1)血漿總蛋白生理性波動：直立體位由于體液分布因素，血液相對濃縮，而長久臥床者血液較直立體位稀。因而久臥床者血清總蛋白比直立活動時約低3-5g/L。新生兒血清總蛋白可比成人低5-8g/L。60歲以上的老人約比成人低2g/L。(2)血漿總蛋白增高：①血液濃縮造成總蛋白濃度相對增高：嚴重腹瀉、嘔吐、高熱時急劇失水，血清總蛋白濃度可明顯升高。休克時，由于毛細血管通透性增加，血液中水分滲出血管，血液發生濃縮。慢性腎上腺皮質功效減退的患者，丟失鈉的同時隨著水的丟失，血漿也能夠出現濃縮現象。②血漿蛋白質合成增加：重要見于球蛋白合成增加，如多發性骨髓瘤患者。(3)血漿總蛋白減少：①血液稀釋造成總蛋白濃度相對減少：如靜脈注射過多低滲溶液獲多個因素引發的鈉、水潴留。②攝入局限性和消耗增加：食物中長久缺少蛋白質或慢性胃腸道疾病引發的消化吸取不良，均可造成血清蛋白濃度減少。③蛋白質丟失：嚴重燒傷時大量血漿滲出，大量失血，腎病綜合癥大量蛋白尿等，均可使血清總蛋白濃度減少。白蛋白ALB測定辦法：鹽析法，免疫法，染料結正當測定原理：清蛋白在pH4.2的緩沖液中帶正電荷，可與帶負電荷的染料（BCG）結合形成藍綠色復合物，630nm波優點有吸取峰。臨床意義：增高：重要由于血液濃縮而致相對性增高減低：見于肝硬變合并腹水及其它肝功