StrictlyconfidentialtoSebia

血紅蛋白檢測基礎

Aboutthehemoglobin

關于血紅蛋白StrictlyconfidentialtoSebiaStrictlyconfidentialtoSebia什么是血紅蛋白?血紅蛋白是由4條珠蛋白肽鏈組成的聚合物，即來自父母成人有4種不同的珠蛋白肽鏈α,β,γ,δ珠蛋白肽鏈如何聚合的？StrictlyconfidentialtoSebia4αgenes

2βgenes2δgenes2γgenesα2β2:HbAα2δ2:HbA2α2γ2:HbF不同時期的珠蛋白鏈合成StrictlyconfidentialtoSebiaHemoglobincompositionforanormaladultblood:正常成人血液中血紅蛋白的組成：HbA≈96%HbA2≈3%HbF<1%AnormalCEprofile正常電泳圖譜StrictlyconfidentialtoSebiaα2β2:HbAα2δ2:HbA2正常電泳圖譜StrictlyconfidentialtoSebiaα2β2:HbAα2δ2:HbA2α2γ2:HbFHbFnotquantifiedherebecauseinaverylowconcentration(<0.1%)

innormaladultbloodHemoglobinopathies

血紅蛋白病Qualitatively性質由于珠蛋白基因的突變而影響血紅蛋白的結構血紅蛋白病（Hb變異體）數量由于珠蛋白基因的突變或缺失影響血紅蛋白的合成Thalassemias地中海貧血變異體或地貧的類型與珠蛋白基因有關：Alpha-，Beta-，等等StrictlyconfidentialtoSebia病理性血紅蛋白的出生率每1,000個出生血紅蛋白病是遍布世界各地的最常見的，常染色體隱性失調的疾病?？側丝诘?%攜帶異常血紅蛋白基因。每年有超過50萬受影響的嬰兒出生。Source:WorldHealthOrganization2008WHO地區總人口(百萬)出生人口(百萬)純合子出生(千)非洲837.032.1234.8美洲929.116.410.0東南亞1807.638.349.1歐洲896.512.22.8東地中海地區592.716.916.2西太平洋(中國)1797.525.518.1合計6860.4141.4332.0全球血紅蛋白病人群負荷Blood,2011;WHOStatistics,2012.常染色體隱性遺傳的遺傳性疾病正?；虍惓；螂s合子(1個異常基因)純合子(2個異常基因)血紅蛋白病理中國南方高發地區人群攜帶率3%-24%BloodRev,2012.

和

地貧廣泛分布于世界熱帶和亞熱帶全球有3.5億人為地中海貧血基因攜帶者(占總人口的2%)血紅蛋白電泳檢查的臨床意義

-地中海貧血

-地中海貧血異常血紅蛋白病醋酸纖維膜電泳

瓊脂糖凝膠電泳毛細管電泳常用血紅蛋白診斷和篩查技術

電泳

高效液相色譜HPLC檢測血紅蛋白的毛細管電泳儀標本的要求EDTA抗凝管≥2mL一周內完成檢測避免溶血正常標本血紅蛋白電泳圖譜HbAHbA2Z15:HbH，HbIZ14:HbNZ13:Hb-JRovigo,HbN-BaltimoreZ12:HbBart’s,HbJ-Providence,HbJ-Mexico,HbJ-baltimore….Z11:DenaturatedHbA,HbKaoshiungZ10:HbHope,HbM-IwateZ9:HbA,HbCamperdown,HbPhnomPenh……Z8:AcetylatedHbF,HbAltanta,HbAthens-GAZ7

:

HbF,

denaturatedHbS,HbPorto-Alegre……..Z6:HbD-Punjab,denaturatedHbE,HbKorle-Bu,HbLepore,HbK?ln….Z5:HbS,HbHasharon,HbHandsworth,denaturatedHbO-Arab.Z4:HbE,denaturatedHbC,HbK?ln,HbA2variants,M-IwateHbA2variantsZ3:HbA2,HbO-ArabZ2:HbC,HbConstantSpring,SetifHbA2variantZ1:HbdA2HbaA2,HasharonHbA2variant,WinnipegHbA2variant……血紅蛋白檢測條帶識別表血紅蛋白變異體數據庫血紅蛋白變異體電泳圖譜自動識別自動定量ALPHA-地貧StrictlyconfidentialtoSebiaAlpha-地貧StrictlyconfidentialtoSebia4αgenes

a-Thal1homozygousa-Thal2homozygousa-Thal1heterozygousa-Thal2heterozygousHbH

Alpha地貧（HbH病）

StrictlyconfidentialtoSebiaα2β2:HbA(↘)α2δ2:HbA2(↘)β4:HbHHbFHbAHbBart’s篩查α-地中海貧血基因類型診斷血常規臨床癥狀血紅蛋白類型αα/αα無HbA

:NHbA2

:N(2-3.5%)-α/ααα-地貧雜合子（靜置型）輕度的小紅細胞MCV:75-80fLMCHC:20-24無HbA&HbA2:NHbBart’s:0-3%出生時-α/-αα-地貧純合子小紅細胞貧血Hb:11-14g/dLMCV:65-75

MCHC:20-24無主要臨床癥狀HbA:NHbA2:Nor

HbBart’s:2-8%出生時--/ααα-地貧雜合子--/-αHbH病小紅細胞貧血Hb:4-12g/dLMCV:55-65MCHC:20-24溶血性貧血脾腫大HbA：

HbA2：(<1.5%)HbBart’s:>5%出生時HbH--/--α-地貧純合子（水腫胎）嚴重貧血Erythroblastsdestruction紅細胞大量破壞嚴重缺氧宮內死亡HbA&HbF：

缺如HbBart’s：80-100%HbPortland：<5%FromIsabelleVINATIER,CERBAα地貧分類alpha變異體StrictlyconfidentialtoSebiaAlpha變異體（雜合子）StrictlyconfidentialtoSebia4αgenes

2βgenes2δgenes2γgenesα2β2:HbAα2δ2:HbA2α2γ2:HbFα*2β2α*2δ2α*2γ2MUTATIONHbG-PhiladelphiaStrictlyconfidentialtoSebiaα2β2:HbAα*2β2α2δ2:HbA2α*2δ2StrictlyconfidentialtoSebiaA/G=2.7A2/G-A2=2.8HbQ-Thailand雜合體beta-地貧StrictlyconfidentialtoSebiaβ珠蛋白缺失β0

β珠蛋白合成減少β+XXXX靜止型

β

地貧

/

+重型β地貧

0/

0輕型β地貧

/

0中間型β地貧

+/

+中間型β地貧β+/β0Xβ-地貧分類及基因情況β珠蛋白基因Beta-地貧StrictlyconfidentialtoSebiaα2β2:HbA(↘)α2δ2:HbA2(↗)篩查β地中海貧血

Anh.Car.A0+A2A1Alc.Ac.NNA2AHbAHbA2StrictlyconfidentialtoSebia基因型診斷血常規臨床癥狀血紅蛋白類型β/β無癥狀HbA

:NHbA2

:N(2-3.5%)β+/βorβ0/βββ-地貧雜合子（靜止或輕型）單純小細胞性貧血血涂片：細胞著色不足無癥狀HbA2:↗(4-5%)HbF:↗(2-7%),30-50%病例β+/β+orβ+/β0中間型β-地貧小細胞性貧血Hb:6-9g/dL更多的臨床癥狀，輸血的需要差異大HbA

HbA2↗HbF

↗β0/β0重癥β-地貧小細胞低色素貧血Hb:<7g/dL貧血發生在出生后的一個月內，不輸血，將致死HbA缺如HbA2:N或↗HbF

↗↗FromIsabelleVINATIER,CERBA

地貧分類beta變異體StrictlyconfidentialtoSebiaBeta變異體（雜合子）StrictlyconfidentialtoSebia4αgenes

2βgenes2δgenes2γgenesα2β2:HbAα2δ2:HbA2α2γ2:HbFα2β*2:HbXMUTATIONHbS雜合子StrictlyconfidentialtoSebiaα2β2:HbAα2β*2:HbSα2δ2:HbA2Beta變異體（純合子）StrictlyconfidentialtoSebia4αgenes

2βgenes2δgenes2γgenesα2β2:HbAα2δ2:HbA2α2γ2:HbFα2β*2:HbXMUTATIONMUTATIONHbS純合子StrictlyconfidentialtoSebiaα2β*2:HbSα2δ2:HbA2α2γ2:HbFHbS純合子StrictlyconfidentialtoSebia無背景=無法判定解決方案：與正常A2混合HbEheterozygous

HbE雜合子StrictlyconfidentialtoSebiaα2β2:HbAα2β*2:HbEα2δ2:HbA2HbC雜合子StrictlyconfidentialtoSebiaα2β2:HbAα2β*2:HbCα2δ2:HbA2HbD雜合子StrictlyconfidentialtoSebiaα2β2:HbAα2β*2:HbDα2δ2:HbA2HbJ-bangkok

雜合體HbNewYork

雜合體臨床實例解疑variantHbA2>8%:可能有變異體遷移至此臨床實例分析臨床資料26歲女未孕血常規參數-Hb 10g/dL-MCV 71fL鐵貯備-血清鐵8μmol/L(N:10-30)-鐵蛋白 8μg/L(N:10-200)

貧血，小細胞性，HbA2低Butirondeficiency!但是鐵缺乏缺鐵性貧血：HbA2減少，補鐵治療后必須再次檢測已知的血紅蛋白變異體:>1500

α

variants

β

variants

γ

variants

δ

variants其他:雙突變，缺失，插入等只有基因測序可以對現有方法檢測到的罕見變異體進行確診血紅蛋白變異體出現變異體的圖譜要認真對待:變異位點α?β?

?異常帶的含量,和異常帶的位置一定要和正常圖譜進行比較血常規籍貫血紅蛋白變異體數據庫:/hbvar/menu.html

血紅蛋白變異體結果解讀建議Delta變異體（雜合子）4α基因

2β基因2δ基因2γ