課題1植物快速繁殖技術

組織培養營養繁殖扦插嫁接壓條

植物組織培養過程示意圖植物組織培養實驗室離體的植物器官、組織、細胞脫分化愈傷組織再分化根芽植物體植物組織培養的基本過程一、細胞的分化與全能性細胞分化：

個體發育中，細胞在形態、結構和生理功能上出現穩定性差異的過程。特定時空下基因的選擇性表達。形成各種組織器官。結果：原因：定義：

植物組織培養的基礎理論――植物細胞的全能性定義：植物細胞具有該植物體全部遺傳的可能性，在一定條件下具有發育成完整植物體的潛在能力。原理：生物體的每一個細胞都包含有該物種所特有的全套遺傳物質，都有發育成為完整個體所必需的全部基因，從理論上講，生物體的每一個活細胞都應該具有全能性。差異：（1）受精卵的全能性最高；（2）受精卵分化后的細胞中，體細胞的全能性比生殖細胞的低。

細胞全能性高低與細胞分化程度有關，分化程度越高，細胞全能性越低，全能性表達越困難，克隆成功的可能性越小。植物細胞全能性高于動物細胞，而生殖細胞全能性高于體細胞，在所有細胞中受精卵的全能性最高。幼嫩的細胞全能性高于衰老的細胞。細胞分裂能力強的全能性高于細胞分裂能力弱的。

看一看：受精卵如何形成人體的思考：細胞分化出錯會怎樣呢？

植物細胞與動物細胞相同，也具有發育為完整個體的潛能，而且植物細胞的全能性要高于動物細胞

外植體：在植物組織培養過程中，用于離體培養的植物器官或組織片段稱為外植體。脫分化：將分化組織的已停止分裂的細胞從植物體部分的抑制性影響下解脫出來，恢復細胞的分裂活性。脫分化的結果是形成了愈傷組織。愈傷組織愈傷組織是通過細胞分裂形成的，其細胞排列疏松而無規則，高度液泡化呈無定形狀態的薄壁細胞。愈傷組織培養

將外植體接種在人工培養基上，由于植物生長調節劑的存在，而其細胞脫分化形成愈傷組織，然后通過再分化形成再生植株。它是最為常見的。

再分化：脫分化形成的愈傷組織，在適當的人工培養基上繼續進行培養又可以重新分化成芽、根等器官，

進而發育成一棵完整的植株，這一過程稱為再分化。

培養基請從課本中找出相關培養基的知識這里提到了兩種激素？激素的用量是怎樣的？經常用于組織培養的培養基我們把它叫做MS培養基。MS培養基是目前使用最普遍的培養基。其具有較高的無機鹽濃度，能夠保證組織生長所需的礦質營養還能加速愈傷組織的生長。由于配方中的離子濃度高，在配制、貯存和消毒等過程中，即使有些成分略有出入，也不會影響離子間的平衡。MS固體培養基可用于誘導愈傷組織，也可用于胚、莖段、莖尖及花藥的培養，其液體培養基用于細胞懸浮培養時能獲得明顯的成功。MS培養基的無機養分的數量和比例比較合適，足以滿足植物細胞在營養上和生理上的需要。因此，一般情況下，不用再添加氨基酸、酪蛋白水解物、酵母提取物及椰子汁等有機附加成分。和其它培養基的基本成分相比，MS培養基中的硝酸鹽、鉀和銨的含量高，這是它的顯著特點。

MS固體培養基成分及比例同微生物培養基相比，MS培養基的配方有哪些明顯的不同？

微生物培養基以有機營養為主。與微生物的培養不同，MS培養基則需提供大量無機營養，無機鹽混合物包括植物生長必須的大量元素和微量元素兩大類。閱讀課文，思考以下問題1.同微生物培養基相比，MS培養基的配方有哪些明顯的不同？2、你認為組織培養過程中，成功的關鍵有哪些？這些步驟的適宜條件是什么？

組織的脫分化及愈傷組織的再分化。

植物組織培養過程中，影響植物細胞脫分化、再分化的最重要因素是植物激素。離體的植物器官、組織、細胞脫分化愈傷組織再分化根芽植物體植物組織培養的基本過程制備MS固體培養基外植體消毒

接種

培養栽培實驗操作

移栽沖洗—酒精—無菌水沖洗—氯化汞—無菌水沖洗至少三次之上三、影響植物組織培養的因素：

不同植物的組織培養難度不同同一種植物的不同組織培養難度不同

大量元素：N、P、K、Ca、Mg、S

微量元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co

有機物：甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等植物激素：生長素、細胞分裂素、赤霉素等1.外植體的選取2.培養基的配制(MS培養基)

3.不同植物激素濃度，使用順序和使用量使用順序實驗結果先生長素，后細胞分裂素有利于分裂但不分化先細胞分裂素，后生長素細胞既分裂也分化同時使用分化頻率提高生長素細胞分裂素比值結果比值高時促根分化，抑芽形成比值