1第五章熒光分析法2熒光分光光度計3熒光分光光度法熒光分光光度法當用紫外光照射某種物質時，這些物質會發(fā)出各種顏色和不同強度的光，當紫外光停止照射時，這種光線也隨之消失。我們這種光線稱為熒光。依據(jù)物質所發(fā)熒光的顏色和強度建立起來的定性和定量的分析方法稱為熒光分光光度法。

1、熒光分光光度法簡介4黃連牛蒡子元胡浙貝母5可用熒光鑒別的中藥黃連：根莖折斷面在紫外光下顯金黃色熒光浙貝母：粉末置于紫外光下呈亮淡綠色熒光元胡：切面或粉末置于紫外光下，亮黃色熒光牛蒡子：粉末，綠色熒光麻黃：縱剖面，邊緣顯亮白色熒光，中心顯棕色熒光甘草：粉末顯黃色熒光黃柏：斷面呈亮黃色熒光6熒光分光光度法

4、熒光分析中常用參數(shù)：

FΛ（nm）1、熒光物質都具有熒光激發(fā)光譜和發(fā)射光譜2、熒光的激發(fā)光譜和發(fā)射光譜是用熒光分析法進行定量和定性分析時的基本參數(shù)和依據(jù)激發(fā)光譜發(fā)射光譜7熒光分光光度法

4、熒光分析中常用參數(shù)Fλ激發(fā)激發(fā)光譜：當改變激發(fā)光波長，測量熒光物質在每一波長(λ)激發(fā)光照射下發(fā)射的熒光強度(F)，以熒光強度(F)為縱坐標，激發(fā)光波長(λ)為橫坐標作圖，得到熒光物質的激發(fā)光譜。λem(max)最大激發(fā)波長常作為入射波長8熒光分光光度法

4、熒光分析中常用參數(shù)Fλ發(fā)射發(fā)射光譜（熒光光譜）：當用最大激發(fā)波長λem(max)照射熒光物質，測量熒光物質在照射下所發(fā)出的對應每一波長(λ)的熒光強度(F)，以F為縱坐標，λ為橫坐標作圖，得到熒光物質的發(fā)射光譜。λex(max)最大發(fā)射波長常作為測定波長9熒光分光光度法

4、熒光分析中常用參數(shù)熒光分析法優(yōu)點：1、靈敏度高檢測限可達10-10-10-12g/mL2、定性更可靠缺點：1、干擾因素較多對實驗條件要求嚴格，測量精密度差2、應用范圍有限但具有特殊重要性能產(chǎn)生熒光的物質較少，但中藥生化物質、致癌物質、天然產(chǎn)物都有熒光現(xiàn)象。10熒光分光光度法

3、熒光分光光度法的優(yōu)缺點3.1、優(yōu)點：

（1）靈敏度高

檢測限可達10-10-10-12g/mL，比紫外可見光度計高出3-4個數(shù)量級。

（2）定性更可靠熒光分析可提供激發(fā)光譜、發(fā)射光譜、熒光強度、總熒光量、峰位、譜帶寬度、量子產(chǎn)率、熒光壽命等參數(shù)。干擾因素較多11熒光分光光度法

3、熒光分光光度法的特點缺點：（3）對實驗條件要求嚴格，測量精密度差（4）應用范圍有限但具有特殊重要性能產(chǎn)生熒光的物質較少，但中藥生化物質、致癌物質、天然產(chǎn)物都有熒光現(xiàn)象。12定量依據(jù)當其他條件固定、熒光物質溶液濃度很稀時，熒光強度(F)和熒光物質溶液濃度(c)成正比，即：

F=Ac，A為常數(shù)1、熒光分析法應在低濃度溶液中進行。2、熒光強度是表示發(fā)射相對強度的物理量，它是最常用的熒光參數(shù)之一。單位為任意單位，表示的是相對強度。13熒光分光光度