管口目纖毛蟲的分類研究

管蟲是每周原生動物的重要組成部分。根據Lynn［１］的分類系統,其隸屬于纖毛門(Cilio-phora)、葉咽綱(Phyllopharyngea)、管口亞綱(Cyrto-phoria)。除具有纖毛蟲的普遍性狀外,該類群具有獨特的咽管狀口器,纖毛集中于腹側,且大核具有異質性［２］。近10年的分子系統學研究普遍認為該類群是一個外延清晰的單源發生性分類階元［３－５］。目前管口亞綱已有近150種,但由于前人實驗條件和方法的制約,大部分種類缺失重要的活體信息(如:伸縮泡數目及分布,咽桿數目等)和纖毛圖式資料,急需詳盡的重描述［２，６－７］。本工作為近年我國海洋纖毛蟲多樣性調查的一部分,涉及5種已知種類,其中尖絨毛蟲、阿氏直毛蟲和近岸類偏體蟲均為南海新紀錄種。1昆蟲和培養方法本文所涉纖毛蟲的采樣地和采樣方法較為多樣。乙狀輪毛蟲(Trochiliasigmoides)采于青島棧橋風景區,在退潮后通過軟毛刷輕輕刷取潮間帶巖石表面積水獲得樣品;尖絨毛蟲(Microxysmaacutum)采用懸掛載玻片法［８］于青島小港的水體中取得;阿氏直毛蟲(Orthotrochiliaagamalievi)利用直接采水法采于青島第一海水浴場;近岸類偏體蟲(Agnathodysterialitto-ralis)采自湛江東海島養蝦池;斯雷腹溝蟲(Coeloperixsleighi)采于湛江沿海潮間帶退潮后的積水。樣品采集后,在實驗室內室溫(約20℃)培養2~3d。具體采集、分離、培養及形態觀察的方法見文獻,蛋白銀染色參考文獻,名詞術語參照文獻。2結果與討論2.1纖維色譜圖式2.1.1形態學描述活體大小約(20~28)μm×(15~20)μm,闊卵圓形;左右側扁,寬厚比約1∶2。體左側扁平,右側略隆起,具5~7條明顯的肋紋(見圖1A,F,長箭頭)。體后端具矛狀附著器。伸縮泡2個,位于體前后各1/3處。纖毛長約5μm。纖毛圖式極為穩定:恒有4條右區動基列,其中2條腹前動基列幾乎等長(見圖1B,H);圍口動基列(見圖1B,H,長箭頭)和左前動基列各2條,在口前方呈“八”字形排布(見圖1B,J,短箭頭)。大核橢球形,并列異質,染色后大小約為10μm×5μm。蟲體運動相對緩慢,常于基質上緩慢爬行。2.1.2比較與討論輪毛蟲屬目前已知纖毛圖式的種類僅4種,即小輪毛蟲(Trochiliaminuta)、乙狀輪毛蟲、彼氏輪毛蟲(Trochiliapetrani)和膜泡輪毛蟲(Trochiliaalveolata)。它們的纖毛圖式基本一致:4列右區動基列,2列圍口動基列,2列左前動基列,其區別僅在于活體大小、背面肋紋和表膜泡有無［４，１０］。2.2形態特征在南海的表現2.2.1形態學描述活體大小約(25~45)μm×(15~25)μm,蟲體卵圓形,前端鈍圓,尾端較尖;左右側扁約1∶1.5;背方明顯向外隆起,腹方較平直(見圖1C,K)。胞口位于腹面前端,略向外突起(見圖1M,長箭頭)。矛狀附著器位于尾端(見圖1K,短箭頭)。蟲體無色透明,內含多個食物泡。伸縮泡1枚,位于體前1/3處(見圖1N,短箭頭)。11~12條體動基列,其中腹前動基列恒為2條并延伸到體前端。最左側3條動基列相對較長,約由6~10個毛基粒組成(見圖1D,L,長箭頭),其余動基列短小,僅含3~6個毛基粒。圍口動基列2條,平行排布于胞口前方(見圖1D)。赤道動基列片段約由2~7個毛基粒組成。大核卵圓形,染色后約為10μm×5μm。該種常以附著器附著于菌絲上繞體軸旋轉。2.2.2比較與討論本種為南海新紀錄種,其形態特征同Deroux［１１］的原始描述完全一致,但香港種群同龔駿在2005年報道的青島種群［１０］相比缺少一枚伸縮泡(1vs.2)。通常在僅具1~2個伸縮泡的管口類中,伸縮泡的數目極為穩定。但是考慮到其他特征完全一致,且缺乏分子生物學數據,單純依靠一個性狀無法確定二者是不同種。故暫推斷是種群間的差異。2.3體動列及聚期ma2.3.1形態學描述活體大小約40μm×20μm,染色后約為27μm×15μm,蟲體瘦卵圓形,背腹扁平,前端鈍圓,后端漸窄(見圖2A,E)。2個伸縮泡位于體右側前、后1/3處(見圖2G,長箭頭)。蟲體中央具單枚卵圓形大核(Ma),并列異質,約12μm×7μm大小(見圖2F,短箭頭,G)。體動基列共12~14條,在腹面連續排布。其中腹前動基列2條;其余動基列前端幾乎在胞口下方同一水平。最右側3條體動基列末端向后延伸至體緣并終止于同一水平線,其他動基列后端從右到左急劇縮短。背端動基列片段位于腹前動基列前端附近,約含5個毛基粒。圍口動基列2條,位于胞口前方“八”字排布(見圖2B,J,短箭頭)。蛋白銀染色后,附著器基部常可見毛基粒樣嗜銀顆粒(見圖2K,短箭頭)。2.3.2比較與討論該種為南海新紀錄種,其同直毛蟲屬另一已知種環狀直毛蟲(Orthotrochiliapilu-la)［１２］的區別主要在于體動基列數目(12~14列vs.9列)和口器的咽桿數目(約40vs.6個)。2.4形態、大小及毛細胞的生長2.4.1形態學描述蟲體無色透明,左右側扁,活體大小約為(35~45)μm×(20~30)μm。腹面觀(見圖2M)為長橢圓形,側面觀(見圖2C,E)為近半圓形。胞口圓形,位于腹前1/4處;咽桿恒為6根。附著器矛頭狀,位于腹面末端偏左位置,長約6~8μm(見圖2L)。伸縮泡2個,位于體右側前、后1/3處。單一大核于蟲體前部。纖毛圖式如圖2J~L所示。穩定9條右區動基列,其后端從中間向兩側逐漸縮短,最右側3列前伸超過口區并彎向背方,其他6列前端于胞口后方終止。附著器基部具若干嗜銀顆粒(見圖2K,短箭頭)。2條圍口動基列和1條口前動基列幾乎等長,橫向排于口前(見圖2D,N,短箭頭);左前動基列恒為3條(見圖2D,O,短箭頭)。2.4.2比較與討論本種為南海新紀錄種,在體形、大小和纖毛圖式方面同Deroux［１１］的原始描述基本吻合,僅伸縮泡數目略有差別(2vs.1)。龔駿［１０］于青島也曾采到該種,但同樣伸縮泡僅1枚。考慮到其余性狀完全一致,伸縮泡數目在不同種群間偶爾會存在細微差異(如尖絨毛蟲,見上文),故推斷鑒定無誤。2.5大核螯蝦型蛋白銀染色2.5.1形態學描述活體大小(35~50)μm×(25~35)μm,蟲體卵圓形或腎形。體周邊的橫紋條帶于赤道處分成2段(見圖3B,長箭頭)。咽桿12~16條。2枚伸縮泡,對角線位(見圖3A,D)。大核橢球形,位于體中央。體動基列被口區分為前后兩部分:前部穩定具有4條弧狀體動基列,橫向排布;后部具15或16