原料藥無(wú)菌工藝風(fēng)險(xiǎn)與驗(yàn)證

提綱

一無(wú)菌原料藥法規(guī)背景二無(wú)菌原料藥的工藝概述及風(fēng)險(xiǎn)分析三無(wú)菌原料藥的兩個(gè)關(guān)鍵驗(yàn)證

1）無(wú)菌工藝模擬驗(yàn)證設(shè)計(jì)與實(shí)施2）原料藥的除菌過濾工藝驗(yàn)證無(wú)菌原料藥法規(guī)背景

無(wú)菌藥用化學(xué)品或無(wú)菌原料藥

Bulkpharmaceuticalschemicals將無(wú)菌藥用化學(xué)品（BPCs）定義為由化學(xué)或生物合成并最終包裝在大包裝容器中的無(wú)菌物料。它可以是有活性的藥物API（原料藥）、賦形劑、溶劑、反應(yīng)物、洗滌劑、緩沖液或工藝助劑。

常見的無(wú)菌藥用化學(xué)品PenicillinsCephalosporinsPenemsMonobactamsOtherantibioticsCorticosteroidsArginineHClSodiumCarbonateSodiumCitrateBiologicalintermediatesOtherAPI’s青霉素頭孢菌霉素青霉烯單環(huán)β-內(nèi)酰胺類其它抗生素皮質(zhì)類固醇鹽酸精氨酸碳酸鈉檸檬酸鈉生物中間體其它原料藥GuidanceDocuments/指南文件FDA:GuidelinetoInspectionofSterileDrugSubstanceManufacturers,July1994PhRMAPositionPaper:SterileBulkPharmaceuticalChemicals,PharmaceuticalTechnology,August,1995FDAGuidanceforIndustry:Manufacture,ProcessingorHoldingofActivePharmaceuticalIngredients,August1996CEFIC:ManufactureofSterileActivePharmaceuticalIngredients:,December1999FDAGuidanceforIndustry:SterileDrugProductsProducedbyAsepticProcessing-CurrentGoodManufacturingPractice,September2004PDATR22:ProcessSimulationsforAsepticallyFilledProducts,currentrevisionPDATR44:QualityRiskManagementforAsepticProcessing,2008FDAGuidanceforIndustry:PrinciplesofProcessValidation,January2011FDA21CFR210/211EuropeanUnionEMAGMPSAnnex1–SterileMedicinalProductsTechnicalreportsfromPDA

PDAtechnicalreport26:liquidfiltration

液體過濾

PDAtechnicalreport27:finalcontainerintegritytesting

最終容器的密閉性驗(yàn)證

PDAtechnicalreport28:ProcessSimulationTestingforSterileBulkPharmaceuticalChemicals

無(wú)菌藥用化學(xué)品的工藝模擬Globalexpectationis:Non-sterilemanufacturingprocesstobevalidatedperbulkAPIguidanceSterile(aseptic)processingtobevalidatedperexpectationsforasepticallyfilleddosageforms.DespitethesedifficultiesFDAislargelyinflexiblewithregardtoexpectationsinthisarea國(guó)際上的期望/要求：非無(wú)菌工藝可按原料藥GMP指南要求驗(yàn)證注：將它們作為制劑來(lái)管理，而不是作為原料來(lái)管理-PDA最新講座原料藥的無(wú)菌工藝要按無(wú)菌灌裝制劑的要求來(lái)實(shí)施盡管無(wú)菌BPC模擬有許多困難，F(xiàn)DA的要求并無(wú)靈活性。8CriticalityValidationRiskSterileDrugProductSamplingBuffers/IntermediatesSterileBDSValidationRiskSterileDrugProductSamplingBuffers/IntermediatesSterileBDSCriticalityPDA給出的例子盡管有這么多的困難，但FDA對(duì)工藝模擬的要求并無(wú)靈活性。1有一家公司將一個(gè)階段的產(chǎn)品全部報(bào)廢，因?yàn)轵?yàn)證用殘留倒流進(jìn)入了生產(chǎn)鏈，培養(yǎng)基的殘留超過了標(biāo)準(zhǔn)（達(dá)不到無(wú)菌的要求）。2為了去除從工藝模擬中微量對(duì)照品，另一個(gè)工廠不得不為此停產(chǎn)進(jìn)行處理。3有幾家公司不得不停產(chǎn)，以安排FDA要求的半年一次的模擬試驗(yàn).FDAwarningletter不恰當(dāng)?shù)拇_認(rèn)和驗(yàn)證的后果：來(lái)自美國(guó)FDA的警告信。2006年美國(guó)一家原料藥和藥品廠家收到的一封警告信中包括：“…為確保自動(dòng)化的、機(jī)械的或電子化的設(shè)備完好運(yùn)行的書面程序不恰當(dāng)…例如{SOPXYZ},生產(chǎn)設(shè)備的檢查與測(cè)試，是應(yīng)用于在…..的設(shè)備的測(cè)試與檢查所有作業(yè)的，安裝確認(rèn)（IQ）生產(chǎn)設(shè)備表沒有完整描述設(shè)備確認(rèn)的要求，包括設(shè)備操作的環(huán)境條件、為操作所需的任何輔助設(shè)備、要求的日常維護(hù)。沒有運(yùn)行確認(rèn)方法的要求…”“…沒有充分的證據(jù)表明無(wú)菌工藝的驗(yàn)證過程是經(jīng)過精心準(zhǔn)備的…..”1999年為下列原因發(fā)給原料藥廠家警告信，在其它缺陷中：“采用不適合的水系統(tǒng)來(lái)進(jìn)行工藝和設(shè)備清洗。特別是：…水系統(tǒng)沒有驗(yàn)證…在去離子水…系統(tǒng)的裝置系統(tǒng)圖中沒有任何管道，缺乏對(duì)用于原料藥工藝和設(shè)備清洗的水供應(yīng)系統(tǒng)的監(jiān)控程序。”2000年為下列原因發(fā)給中國(guó)原料藥廠家的警告信:“…設(shè)備清洗記錄是不完整的，并且清洗設(shè)備程序沒有經(jīng)過驗(yàn)證…”在后續(xù)跟進(jìn)過程中對(duì)同一家廠家發(fā)出的警告信：“…針對(duì)一個(gè)API的無(wú)菌工藝驗(yàn)證不恰當(dāng)，沒有按照書面方案來(lái)執(zhí)行。關(guān)鍵工藝參數(shù)沒有得到說明，且放大…步驟并沒有包括在驗(yàn)證研究中…”國(guó)內(nèi)法規(guī)與指南GMP及無(wú)菌附錄及原料藥附錄列有無(wú)菌檢測(cè)項(xiàng)目的制劑和原料藥無(wú)菌工藝需求影響的產(chǎn)品藥品GMP指南無(wú)菌藥品分冊(cè)原料藥分冊(cè)中國(guó)藥典2010無(wú)菌原料藥生產(chǎn)的典型

生產(chǎn)工藝與風(fēng)險(xiǎn)分析1無(wú)菌原料藥主要生產(chǎn)工藝介紹CrystallizationSeparationPurificationDryingMillingBlendingBulkpackagingCompoundingandformulationlyophilization結(jié)晶分離純化干燥粉碎混合分裝混合與配液凍干16凍干，，結(jié)晶，輻照，熱滅菌？?jī)龈稍纤?7*凍干法實(shí)例-青蒿琥酯流程示意

裝盤凍干收集稱量無(wú)菌分裝料液無(wú)菌液

0.2μ過濾

無(wú)菌工藝非無(wú)菌工藝真空上料頭孢溶解泵一二級(jí)過濾脫炭過濾溶解中轉(zhuǎn)結(jié)晶晶種除菌過濾下道操作無(wú)菌操作非無(wú)菌操作模擬的起點(diǎn)將此操作后移頭孢工藝流程示意結(jié)晶法實(shí)例-頭孢工藝流程示意終點(diǎn)外包三合一機(jī)(過濾洗滌干燥)螺帶干燥機(jī)--強(qiáng)化措施粉碎整粒機(jī)中轉(zhuǎn)料桶分裝稱重加塞軋蓋非無(wú)菌操作錐形干燥器結(jié)晶晶種除菌過濾無(wú)菌操作模擬的起點(diǎn)結(jié)晶法實(shí)例--頭孢工藝流程示意-續(xù)請(qǐng)大家合上講義！21封閉與開放系統(tǒng)思考題：什么樣的系統(tǒng)能夠叫作封閉系統(tǒng)？或者說具備哪些條件的系統(tǒng)才能叫作封閉系統(tǒng)。封閉系統(tǒng)與開放系統(tǒng)的比較

封閉式系統(tǒng)

物理隔離或屏障，運(yùn)行條件下防止接觸，能保持完整性/密封性可在線滅菌/SIP，在線過濾封閉式傳輸，與其它封閉式系統(tǒng)相聯(lián)

開放式系統(tǒng)無(wú)物理隔離或屏障，運(yùn)行條件下允許接觸，不能保持完整性/密封性，使用過程系統(tǒng)，可能完整性受損不能在線過濾，用滅菌柜離線滅菌開放式液體傳輸，與其它開放式系統(tǒng)相聯(lián)在線滅菌(SIP)一個(gè)經(jīng)驗(yàn)證的滅菌程序，它可以用適當(dāng)?shù)奈⑸锾魬?zhàn)方法來(lái)證明，確保非無(wú)菌概率低于百萬(wàn)分之一。如不作無(wú)菌操作，此程序能始終保持系統(tǒng)使用前的無(wú)菌狀態(tài)。在線滅菌可采用蒸汽、氣體、干熱、輻射、化學(xué)品或其它可驗(yàn)證的滅菌程序來(lái)實(shí)施。P1T1TransferlineV1V2V3P3P4T3Air/N2P2VentfilterSteamSteamBI周期生產(chǎn)Campaign無(wú)菌原料藥的campaign模式InletpipeBottomDrainTopventvalvePressuresensorPressuresensor開放式系統(tǒng)無(wú)菌原料藥典型工藝風(fēng)險(xiǎn)過濾工藝步驟凍干轉(zhuǎn)運(yùn)步驟結(jié)晶-過濾-洗滌-干燥-轉(zhuǎn)運(yùn)-粉碎-過篩-混合等開放性操作分裝及內(nèi)包裝步驟溶媒結(jié)晶無(wú)菌API的過濾工藝板框三合一罐料液系統(tǒng)氮?dú)庀到y(tǒng)結(jié)晶溶媒劑洗滌液系統(tǒng)清洗劑，酸堿等產(chǎn)品結(jié)晶罐三合一反復(fù)使用，清洗與滅菌，驗(yàn)證困難開放式操作舉例凍干法結(jié)晶法無(wú)菌原料藥無(wú)菌模擬工藝驗(yàn)證的挑戰(zhàn)原料藥模擬驗(yàn)證面臨的困難與解決思路

1模擬方式全工藝模擬/單元操作模擬

液體模擬/粉狀模擬2模擬介質(zhì)選擇

培養(yǎng)基，對(duì)照品還是實(shí)際產(chǎn)品3模擬操作的代表性4結(jié)果評(píng)價(jià)5污染調(diào)查30*1模擬方式A全工藝模擬：按工藝流程，從獲得無(wú)菌物料的第一步開始，直至分裝入容器為止并以此進(jìn)行評(píng)價(jià)的工藝模擬。31全工藝模擬的優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)A）與一系列的小型模擬相比，此模擬方式能更加貼切地按工藝流程進(jìn)行試驗(yàn)B）所需時(shí)間比一系列的小型模擬要短。缺點(diǎn)：A）如果檢出污染，要找出污染源并采取應(yīng)對(duì)措施比單元操作更為困難。B）如果出現(xiàn)失敗，在采取糾正措施后，必須重復(fù)全過程模擬。整個(gè)工藝模擬通常需要用單一的試驗(yàn)材料（液體或固體均可），這樣，在模擬過程中會(huì)引入明顯的差異，模擬中出現(xiàn)的污染也會(huì)與常規(guī)生產(chǎn)不相一致。32#2單元操作模擬包括整個(gè)無(wú)菌工藝的所有步驟的試驗(yàn)–單獨(dú)試驗(yàn)。

如模擬分幾步操作完成，在確立可接受標(biāo)準(zhǔn)時(shí)必須闡明各單元操作在總體標(biāo)準(zhǔn)。因此，也必須考慮整個(gè)工藝檢出微生物的總數(shù)。33B單元操作模擬優(yōu)點(diǎn)針對(duì)性強(qiáng)：如檢出污染，可將糾正措施的重心放在整個(gè)工藝比較少的部分。如一個(gè)單獨(dú)的模擬出現(xiàn)失敗，只有這一個(gè)失敗的部分需要在采取糾正措施后進(jìn)行重復(fù)試驗(yàn)。評(píng)估變化：評(píng)估各種變更對(duì)工藝的影響可限于有限的操作步驟。液固特性：在整個(gè)工藝模擬的不同步驟中，既可用液體，也可用固體試驗(yàn)材料，這樣更加接近實(shí)際生產(chǎn)。34缺點(diǎn)比整體工藝模擬的時(shí)間長(zhǎng)

部分內(nèi)容可能需要一定程度的重疊，以評(píng)價(jià)整個(gè)工藝在每一個(gè)單獨(dú)的模擬試驗(yàn)中，需要取大量環(huán)境監(jiān)控的樣品352可以選擇的工藝模擬材料A無(wú)材料性模擬或注射用水模擬根據(jù)環(huán)境控制和設(shè)備表面的監(jiān)控注射用水模擬B培養(yǎng)基模擬材料TSB/胰蛋白胨大豆肉湯,A溶液,蛋白胨肉湯培養(yǎng)基等.C對(duì)照品模擬材料甘露醇，乳糖，聚乙二醇等.生產(chǎn)材料模擬

36試驗(yàn)材料的選擇標(biāo)準(zhǔn)…1）抑制微生物生長(zhǎng)的材料不應(yīng)使用2）可根據(jù)單元操作，來(lái)選擇使用液體或粉末材料結(jié)晶步驟的早期可能需要液體材料，結(jié)晶后的各步可能需要粉未材料3）試驗(yàn)材料應(yīng)易于從系統(tǒng)中去除或清潔37優(yōu)點(diǎn)由于不要清潔劑，省去了清潔的的微生物檢查或無(wú)菌檢查,也省去了采用培養(yǎng)基或?qū)φ談┎橄嚓P(guān)的試驗(yàn).便宜/經(jīng)濟(jì)

容易清潔缺點(diǎn)由于取樣方法及檢出率的不確定性，檢出微生物的能力可能受到限止進(jìn)行的準(zhǔn)確而成功的驗(yàn)證，檢出污染可能比較困難.依賴于對(duì)接觸產(chǎn)品的表面的評(píng)價(jià)取樣的困難抑菌的產(chǎn)品殘余問題可能要求打開封閉系統(tǒng)微生物的檢查的回收率方面的問題38A無(wú)材料性模擬A無(wú)材料模擬方法：可采用無(wú)菌工藝中采用的程序、人員、設(shè)備、及無(wú)菌工藝中原先常用的部件，來(lái)進(jìn)行模擬.在生產(chǎn)結(jié)束時(shí)，對(duì)接觸產(chǎn)品的表面及從事生產(chǎn)的人員廣泛地取微生物樣品。

取而代之，或額外地用適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基將工藝鏈走一遍，再取樣

用表面樣的結(jié)果，根據(jù)方案標(biāo)準(zhǔn)設(shè)定的來(lái)確定微生物計(jì)數(shù)或無(wú)菌.依賴于設(shè)備內(nèi)部的環(huán)境監(jiān)測(cè)和/或接觸產(chǎn)品表面的淋洗樣檢測(cè)，可用液體（水、緩沖液等）來(lái)檢查微生物EUGMPannex166.Validationofasepticprocessingshouldincludeaprocesssimulationtestusinganutrientmedium(mediafill).Selectionofthenutrientmediumshouldbemadebasedondosageformoftheproductandselectivity,clarity,concentrationandsuitabilityforsterilisationofthenutrientmedium.無(wú)菌生產(chǎn)過程的驗(yàn)證，要包括利用營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基進(jìn)行的模擬試驗(yàn)。要根據(jù)產(chǎn)品的劑型以及培養(yǎng)基的選擇性、澄明度、濃度和滅菌的適應(yīng)性來(lái)選擇使用培養(yǎng)基。Ｂ培養(yǎng)基模擬介質(zhì)應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品的劑型以及培養(yǎng)基的選擇性、澄清度、濃度和滅菌的適用性選擇培養(yǎng)基。應(yīng)盡可能模擬常規(guī)的無(wú)菌生產(chǎn)工藝41*

培養(yǎng)基的適用性檢查/靈敏度試驗(yàn)/促生長(zhǎng)試驗(yàn)/陽(yáng)性對(duì)照檢查什么時(shí)間做？用什么微生物？結(jié)果如何判定?42*Presentationtitleinfooter|00Month000043培養(yǎng)基質(zhì)量驗(yàn)證Aspergillusniger(ATCC16404黑曲霉菌)Candidaalbicans(ATCC10231白色念珠菌)Growth/Turbiditywithin120hoursat20-25°CCandidaalbicans(ATCC2091白色念珠菌)Bacillussubtilis(ATCC6633枯草芽孢桿菌）Staphylococcusepidermidis(ATCC12228表皮葡萄球菌)Staphylococcusaureus(ATCC25923)金黃色葡萄球菌）Growth/Turbiditywithin72hoursat20-25°CStaphylococcusaureus(ATCC6538金黃色葡萄球菌）Salmonellatyphimurium

(ATCC14028鼠傷寒沙門氏菌)Pseudomonasaeruginosa(ATCC9027)銅綠假單胞菌Bacillussubtilus(ATCC6633枯草芽孢桿菌）(Streptococcuspneumoniae

肺炎鏈球菌ATCC6301)Staphylococcusaureus(ATCC6538金黃色葡萄球菌）Growth/Turbiditywithin24hoursat30-35°CEscherichiacoli(ATCC8739)埃希大腸桿菌）GrowthResponsePresentationtitleinfooter|00Month000044[Days][OpticalDensity]1.2x107CFU/mL2.5x107CFU/mL11x107CFU/mL5.7x106CFU/mLNon-AnimalTSBIrradiatedNon-AnimalTSBTSBIrradiatedTSBFinalConcentration/Titer

InoculumLevel:9CFU IncubationPeriod:5daysat22.5°CAspergillusniger

黑曲霉(ATCC16404)GrowthResponsePresentationtitleinfooter|00Month000045[Days][OpticalDensity]Candidaalbicans白色念珠菌(ATCC10231)1.2x107CFU/mL1.6x107

CFU/mL1.3x107

CFU/mL1.1x107

CFU/mLNon-AnimalTSBIrradiatedNon-AnimalTSBTSBIrradiatedTSBFinalConcentration/TiterInoculumLevel:9CFU IncubationPeriod:5Daysat22.5°CGrowthResponsePresentationtitleinfooter|00Month000046[Days][OpticalDensity]

InoculumLevel:2CFUIncubationPeriod:3daysat22.5°C1.2x107CFU/mL9.8x107CFU/mL9.9x107CFU/mL1.2x108CFU/mLNon-AnimalTSBIrradiatedNon-AnimalTSBTSBIrradiatedTSBFinalConcentration/TiterBacillussubtilis枯草芽孢桿菌(ATCC6633)GrowthResponsePresentationtitleinfooter|00Month000047[Hours][OpticalDensity]InoculumLevel:2CFUIncubationPeriod:24Hoursat35.0°C7.6x108CFU/mL8.5x108CFU/mL6.6x108CFU/mL8.0x109CFU/mLNon-AnimalTSBIrradiatedNon-AnimalTSBTSBIrradiatedTSBFinalConcentration/TiterBacillussubtilis枯草芽孢桿菌(ATCC6633)

GrowthResponsePresentationtitleinfooter|00Month000048[Days]InoculumLevel:12CFUIncubationPeriod:3Daysat22.5°CNon-AnimalTSBIrradiatedNon-AnimalTSBTSBIrradiatedTSB8.1x108CFU/mL1.1x109

CFU/mL1.3x109

CFU/mL1.3x109

CFU/mLFinalConcentration/Titer[OpticalDensity]Staphylococcusaureus金黃色葡萄球菌(ATCC6538)GrowthResponsePresentationtitleinfooter|00Month000049[Hours]InoculumLevel:6CFUIncubationPeriod:24Hoursat35.0°C5.5x108CFU/mL4.3x108

CFU/mL6.0x108

CFU/mL5.2x108

CFU/mLNon-AnimalTSBIrradiatedNon-AnimalTSBTSBIrradiatedTSBFinalConcentration/Titer[OpticalDensity]Staphylococcusaureus金黃色葡萄球菌(ATCC6538)

GrowthResponsePresentationtitleinfooter|00Month000050[h][OD]Inoculum:15cfu/ml[Hours]

InoculumLevel:15CFUIncubationPeriod:24Hoursat35.0°C4.6x108CFU/mL3.7x108

CFU/mL3.7x108

CFU/mL4.2x108

CFU/mLNon-AnimalTSBIrradiatedNon-AnimalTSBTSBIrradiatedTSBFinalConcentration/Titer[OpticalDensity]Pseudomonasaeruginosa

銅綠假單菌(ATCC9027)

GrowthResponsePresentationtitleinfooter|00Month000051InoculumLevel:6CFUIncubationPeriod:24Hoursat35.0°C2.7x108CFU/mL3.4x108

CFU/mL4.0x108

CFU/mL3.3x108

CFU/mLNon-AnimalTSBIrradiatedNon-AnimalTSBTSBIrradiatedTSBFinalConcentration/Titer[Hours][OpticalDensity]Escherichiacoli

埃希大腸桿菌(ATCC8739)GrowthResponseB使用培養(yǎng)基模擬的困難A）形狀：很難用于液體培養(yǎng)基模擬粉未處理用的設(shè)備。由液體轉(zhuǎn)為粉未，往往是工藝模擬是最難的處理點(diǎn)。有必要對(duì)模擬作分割/分段，因?yàn)樵谠S多場(chǎng)合下，必須同時(shí)從事液體及粉未設(shè)備的處理。B）量大：需要大量的培養(yǎng)基

C）滅菌：在工藝模擬以前，滅菌工作量很大，這類滅菌序均需驗(yàn)證

D）培養(yǎng)：對(duì)模擬后大量培養(yǎng)基檢驗(yàn)（液體培養(yǎng)或過濾）極為困難

E）中和：用來(lái)中和青霉素的β-內(nèi)酰胺酶的量也極大WarningLetterPlacebomediumsshouldbeevaluatedfortheirinhibitoryeffectonmicroorganisms.Yourresponsedoesnotindicatethatyourfirmusesbeta-lactamasetoinhibittheeffectofantibioticresidueintheproductionlineduringprocesssimulation.沒有考慮使用內(nèi)酰胺酶消除可能存在的頭孢殘留對(duì)培養(yǎng)基中微生物的影響C對(duì)照品/實(shí)際產(chǎn)品（輔料等）的使用優(yōu)點(diǎn)：A對(duì)照材料能經(jīng)受實(shí)際工藝中所采用的條件.B可選擇適當(dāng)?shù)膶?duì)照材料，以致在模擬結(jié)束以后，能將它們從工藝設(shè)備中容易清除掉.

C對(duì)照材料可能比培養(yǎng)基或產(chǎn)品便宜，這在大生產(chǎn)中是一個(gè)需要考慮的問題.

D有些實(shí)際材料可以用于無(wú)菌工藝模擬。缺點(diǎn)：A無(wú)菌檢測(cè)或微生物計(jì)數(shù)必須要額外進(jìn)行B因?yàn)槭褂昧藢?duì)照品，所以要開發(fā)額外的清潔程序.并驗(yàn)證C對(duì)照品也要考察抑菌性選擇標(biāo)準(zhǔn)無(wú)活性、易滅菌，易溶解，對(duì)培養(yǎng)基促進(jìn)生長(zhǎng)作用無(wú)副作用，易灌裝，流動(dòng)性要好（培養(yǎng)基流動(dòng)性較差）

常用安慰劑聚乙二醇Polyethyleneglycol系列(PEG6000,PEG8000）,甘露醇Mannitol，乳糖Lactose等包裝形式，

滅菌方法，抑菌性溶解性：55*WarningLetterPlacebomediumsshouldbeevaluatedfortheirabilitytosupportgrowth.Theirplacebousedintheprocesssimulationissodiumphosphateindifferentforms(solutionandanhydrous)andsodiumchloridesolution.

培養(yǎng)基灌裝所用的介質(zhì)，沒有評(píng)估其對(duì)微生物的抑菌影響。培養(yǎng)基灌裝所用的材料是磷酸鈉和次氯酸鈉的溶液。WarningLetterGasesusedduringprocesssimulationshouldbeevaluatedfortheirinhibitoryeffectonmicroorganisms.Yourresponsestatesthatthenitrogenusedintheprocesssimulationisremovedbythetestmembraneduringfiltration.沒有評(píng)估模擬過程中使用的氣體（氮?dú)猓?duì)微生物影響。抑菌性與殘余問題工藝：常規(guī)生產(chǎn)工藝采用的溫度及pH，溶媒，它們本身可能抑制微生物生長(zhǎng)

物料：許多無(wú)菌原料藥抑菌性比較強(qiáng)，因此，模擬前須徹底清潔，去除所有生產(chǎn)的殘留物。工藝模擬殘留污染會(huì)導(dǎo)致產(chǎn)品失敗，模擬后應(yīng)須徹底清潔，去除工藝模擬的殘留物。包括所有對(duì)產(chǎn)品的無(wú)菌特性有影響的關(guān)鍵操作，及生產(chǎn)中可能出現(xiàn)的各種干預(yù)和最差條件。最差條件：高于或低于正常范圍的條件限度，與正常生產(chǎn)條件相比最有可能造成工藝或生產(chǎn)失敗的條件。挑戰(zhàn)試驗(yàn)？為什么要模擬最差條件?59*3驗(yàn)證的代表性3驗(yàn)證的代表性A時(shí)間代表性和批量的代表性B操作和運(yùn)行的代表性C包裝容器代表性60*Ａ?xí)r間代表性有限工藝模擬試驗(yàn)只是無(wú)菌工藝系統(tǒng)的能力在某一時(shí)間點(diǎn)上的體現(xiàn)，這包括環(huán)境、設(shè)備、各種規(guī)程和操作人員。它并不能保證在其他時(shí)間生產(chǎn)的無(wú)菌藥用化學(xué)品的微生物特性能保持同一水平。然而，通過相關(guān)工藝過程的驗(yàn)證和控制，例如環(huán)境監(jiān)測(cè)、人員資質(zhì)確認(rèn)、清潔及滅菌程序的驗(yàn)證，有可能使產(chǎn)品保持工藝模擬試驗(yàn)中所展示的無(wú)菌水平。

Ａ?xí)r間與批量的代表性儲(chǔ)存或放置時(shí)間的代表性設(shè)備、部件、儲(chǔ)罐、無(wú)菌物料、藥液在實(shí)際凍干前能夠放置的最長(zhǎng)時(shí)間1.設(shè)備、部件、儲(chǔ)罐、無(wú)菌物料需要再滅菌（除菌）的時(shí)間間隔

用單項(xiàng)驗(yàn)證后確定的最長(zhǎng)保存時(shí)間的設(shè)備部件、儲(chǔ)罐、無(wú)菌物料參與培養(yǎng)基試驗(yàn)2.產(chǎn)品：例如：從無(wú)菌過濾到凍干完成所需要的時(shí)間無(wú)菌過濾后存放在中間儲(chǔ)罐內(nèi)的培養(yǎng)基模擬實(shí)際生產(chǎn)時(shí)產(chǎn)品的最大儲(chǔ)存時(shí)間后再凍干

62*A時(shí)間與批量的代表性

規(guī)生產(chǎn)批次量較小的無(wú)菌原料藥應(yīng)盡可能最大限度模擬實(shí)施大生產(chǎn)產(chǎn)品的批次量，但常規(guī)生產(chǎn)批次量較大的無(wú)菌原料藥，要考慮模擬大生產(chǎn)批次量的可行性和實(shí)際培養(yǎng)的可行性，模擬批次量可比大生產(chǎn)批次量小，只要能充分模擬實(shí)際大生產(chǎn)的各種最差條件即可。實(shí)際模擬時(shí)還需考慮到模擬介質(zhì)的溶解性等因素來(lái)確定批次量。63*分裝過程的模擬

1最保守的設(shè)計(jì)：

在分裝中，模擬生產(chǎn)用時(shí)最長(zhǎng)的批量所需要的時(shí)間，其中包括正常的干擾時(shí)間（換班、設(shè)備維修）。

2其他的設(shè)計(jì)。有代表性的是干預(yù)。

1）在生產(chǎn)完成后接著進(jìn)行分裝實(shí)驗(yàn)

2）為了減少分裝，在每批試驗(yàn)開始、中間及結(jié)束前均分裝操作，其余時(shí)間空運(yùn)行以達(dá)到所需要的時(shí)間，任何干擾操作都應(yīng)在分裝時(shí)進(jìn)行，在正常生產(chǎn)過程中所需的最長(zhǎng)時(shí)間，包括可能發(fā)生的事件，人員的換班等凍干過程的模擬，

3種方式，時(shí)間，真空度，破空64*舉例B容器的代表性應(yīng)該考慮到分裝容器的影響。塑料袋/鋁桶最大的容器最小的容器

65*B容器的代表性當(dāng)有多個(gè)系統(tǒng)時(shí)，用最具有挑戰(zhàn)性的容器及生產(chǎn)線配置最大的容器/貯罐最長(zhǎng)的供料管線最多儀表的系統(tǒng)最復(fù)雜的系統(tǒng)最難滅菌最難保持無(wú)菌66B容器代表性在驗(yàn)證過程中盡量使工藝參數(shù)和實(shí)際情況一致，但是為了使微生物生長(zhǎng)良好，允許選擇的工藝參數(shù)和實(shí)際情況不一致，但是這些參數(shù)不應(yīng)和生產(chǎn)工藝產(chǎn)生重大差別。無(wú)菌原料藥的分裝劑量一般較大，在這種情況下分裝過程中應(yīng)減慢分裝速度，以增加產(chǎn)品暴露的可能，在最差狀況進(jìn)行操作。67*C操作和運(yùn)行代表性應(yīng)模擬包括“最差狀況”的生產(chǎn)條件下進(jìn)行培養(yǎng)基灌裝。（如：最大干預(yù)次數(shù)、模擬的加卸料、可能的生產(chǎn)線停機(jī)的糾正、部件的調(diào)整和更換、人工操作、在線過濾器的更換以及所用人員的數(shù)量等）干預(yù)的次數(shù)應(yīng)該等于或大于正常生產(chǎn)時(shí)發(fā)生的次數(shù)所有干預(yù)都應(yīng)是預(yù)先設(shè)定和進(jìn)行記錄68*C操作和運(yùn)行代表性正常的—每班次都會(huì)發(fā)生（管路連接，稱量調(diào)節(jié)，裝盤，料液注入，凍干機(jī)探頭安裝，出箱，取樣，環(huán)境監(jiān)測(cè)，其他手工操作等）非正常的—非正常情況才會(huì)發(fā)生（設(shè)備故障，拆卸/替換破損的部件）非正常的干預(yù)至少每年模擬一次不允許的行為：SOP中應(yīng)列出哪些干預(yù)是容許的，根據(jù)實(shí)際生產(chǎn)中可能發(fā)生的動(dòng)作或操作來(lái)設(shè)計(jì)培養(yǎng)基分裝的人為干預(yù)。企業(yè)應(yīng)列出可能會(huì)在無(wú)菌加工過程中發(fā)生的、允許和禁止的干預(yù)事件的一覽表，并在試驗(yàn)中進(jìn)行模擬。69*問題1請(qǐng)將以下干預(yù)分類：正常的（必要性干預(yù)）非正常的（糾正性干預(yù)）不允許的行為（違反操作規(guī)程的）列出你所知道的其他干預(yù)，每類3個(gè)請(qǐng)陳述企業(yè)應(yīng)該如何制定模擬驗(yàn)證中的干預(yù)種類與頻次Ａ手工回收結(jié)晶罐底部物料，Ｂ更換管路及軟管Ｃ傳入鋁桶，Ｄ鋁桶破損或材料溢出Ｅ需要重新滅菌Ｆ更換空氣過濾器Ｇ罐裝設(shè)備故障，Ｈ取出卡住的容器Ｉ取走倒下的鋁桶，Ｊ非本操作區(qū)的人員進(jìn)入無(wú)菌區(qū)后的處理Ｋ將管路引入，裝料到凍干機(jī)，Ｌ操作人員進(jìn)入無(wú)菌區(qū)忘帶雙層手套后的退出Ｍ放置熱電偶和真空探頭，Ｎ環(huán)境監(jiān)測(cè)-放置和取走培養(yǎng)皿Ｏ操作人員進(jìn)出及更衣，Ｐ凍干過程故障Ｑ停電故障，Ｒ設(shè)備維修人員進(jìn)入，Ｓ生產(chǎn)中發(fā)現(xiàn)消毒劑過期后的更換71*物料暴露操作的模擬無(wú)菌原料藥的生產(chǎn)工藝具有其自己的特點(diǎn)：設(shè)備種類多、設(shè)備復(fù)雜、管路長(zhǎng)，且不同的生產(chǎn)工藝有不同的特點(diǎn)，根據(jù)各自的特點(diǎn)選擇固體或液體模擬介質(zhì)。雖然，已盡量地減少設(shè)備的內(nèi)部暴露和減少物料產(chǎn)品的暴露，但是不可避免地會(huì)有一些設(shè)備與外界環(huán)境相通，或是物料暴露在環(huán)境中，這些開口處應(yīng)有呼吸器或百級(jí)層流空氣的保護(hù)，更好的是使用隔離器保護(hù)。驗(yàn)證時(shí)，應(yīng)有模擬這些物料暴露的操作。72*WarningLetter

Yourfirmfailedtodesignandperformanadequateasepticprocesssimulation(i.e.,mediafill)baseduponthesamecontrolsusedforroutineproduction.Wenotethatthe(b)(4)wasobserved

(b)(4)

duringactualproduction.However,thisinterventionwasperformedonlyonceduringthemediafillin2009.

公司的培養(yǎng)基灌裝驗(yàn)證未根據(jù)日常生產(chǎn)的控制進(jìn)行設(shè)計(jì)和完成，如在實(shí)際生產(chǎn)中觀察到的一些干預(yù)操作WarningLetterTheprocesssimulations(mediafill)donotrepresentactualproductionoperationsforyoursterileAPI.TheprocesssimulationperformedbyyourfirminJuly2009failedtoincludesimulationoftheroutineinterventionsperformedinatypicalcampaignof13batches.

培養(yǎng)基灌裝驗(yàn)證沒有反應(yīng)實(shí)際無(wú)菌API的生產(chǎn)過程。培養(yǎng)基灌裝驗(yàn)證未能包括連續(xù)生產(chǎn)13個(gè)批次時(shí)的日常干預(yù)的模擬。應(yīng)該注意的抑菌性問題可用一種液體介質(zhì)模擬結(jié)晶過程，讓其流經(jīng)除菌過濾器和所有管路加到結(jié)晶罐中。若結(jié)晶過程有加晶種的操作，模擬過程中也應(yīng)有這樣的操作，晶種也可用模擬介質(zhì)代替。為使晶體粒度均勻，有些結(jié)晶過程需要降溫，在模擬過程中一般不應(yīng)降溫，因在低溫下抑制微生物生長(zhǎng)。離心、洗滌和干燥環(huán)節(jié)一般采用常溫，以免溫度對(duì)微生物的影響。風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)解釋控制方法配制溶液的注射用水溫度高于６０℃高溫會(huì)抑制微生物生長(zhǎng)將配制培養(yǎng)基的注射用水冷卻到室溫，在室溫下（20-25℃）配制正常生產(chǎn)溶液ｐＨ值偏高或偏低酸性或堿性環(huán)境不利于微生物生長(zhǎng)培養(yǎng)基的pH調(diào)整到適合微生物生長(zhǎng)的范圍配制好的溶液在低溫下保存低溫會(huì)抑制微生物生長(zhǎng)培養(yǎng)基在儲(chǔ)存容器中常溫保存抑菌影響分析---物料準(zhǔn)備，儲(chǔ)存過程抑菌因素影響分析風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)解釋控制方法生產(chǎn)過程中使用惰性氣體（如氮?dú)猓┍Ｗo(hù)產(chǎn)品大多數(shù)需氧微生物，惰性氣體有一定的抑菌作用用壓縮空氣或空氣來(lái)代替惰性氣體培養(yǎng)基灌裝量偏少不能接觸到設(shè)備表面提高培養(yǎng)基用量，通過CIP系統(tǒng)循環(huán)抑菌影響分析抑菌因素影響分析風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)解釋控制方法對(duì)設(shè)備的清洗、消毒和滅菌消毒劑會(huì)殺滅微生物對(duì)設(shè)備的清洗、消毒和滅菌在灌裝前后進(jìn)行，灌裝前進(jìn)行消毒要避免設(shè)備上的消毒劑殘留。正常生產(chǎn)時(shí)消毒劑（如噴灑消毒酒精，對(duì)操作人員手部消毒）的使用，消毒劑會(huì)殺滅微生物對(duì)于模擬試驗(yàn)過程中消毒劑（如噴灑消毒酒精）的使用，應(yīng)該注意不能超出正常生產(chǎn)時(shí)的使用頻率，不能將消毒劑直接接觸到培養(yǎng)基上。班次輪換，清場(chǎng)消毒消毒劑會(huì)殺滅微生物對(duì)于兩班次灌裝，中間不進(jìn)行消毒清場(chǎng)。抑菌影響分析---中間過程抑菌因素影響分析風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)解釋控制方法抽真空過低真空度有抑菌作用。過低真空度還會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)基失水。盤子放入凍干機(jī)，放置十小時(shí)以上模擬凍干過程。但不進(jìn)行抽真空的模擬操作，保持凍干機(jī)內(nèi)正常氣壓低溫冷凍低溫會(huì)抑制微生物生長(zhǎng)不進(jìn)行冷凍操作，保持常溫抑菌影響分析---凍干抑菌因素影響分析接近48小時(shí)使用180分鐘25桶4結(jié)果評(píng)價(jià)培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)的首次驗(yàn)證，每班次應(yīng)連續(xù)進(jìn)行3次合格的試驗(yàn)。空氣凈化系統(tǒng)、設(shè)備、生產(chǎn)工藝及人員重大變更后，應(yīng)重復(fù)進(jìn)行培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)。培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)通常應(yīng)按生產(chǎn)工藝每班次半年進(jìn)行1次，每次至少一批。

82*再驗(yàn)證的要求頻率-對(duì)每條生產(chǎn)線，每年進(jìn)行兩次再驗(yàn)證，間隔時(shí)間為5-7個(gè)月。人員-人員至少每年參加一次再驗(yàn)證，以進(jìn)行資格再確認(rèn)。容器規(guī)格-每條生產(chǎn)線輪流使用各種規(guī)格容器。83*增補(bǔ)性培養(yǎng)基灌封試驗(yàn)變更及其評(píng)估-對(duì)產(chǎn)品或生產(chǎn)線的每一種變更，均應(yīng)根據(jù)書面的變更控制系統(tǒng)進(jìn)行評(píng)估。-如果通過評(píng)估認(rèn)為此項(xiàng)變更會(huì)影響到無(wú)菌生產(chǎn)工藝產(chǎn)品的無(wú)菌保證水平，則需要進(jìn)行增補(bǔ)性培養(yǎng)基灌封實(shí)驗(yàn)。84*對(duì)比表初始驗(yàn)證常規(guī)再驗(yàn)證補(bǔ)充性培養(yǎng)基驗(yàn)證觸發(fā)條件新建，5-7個(gè)月，之間情況正常大變更，小變更，批數(shù)３批１批３批，重大變更，１批，小變更85*變更的例子–用Teflon?圈替代Viton?理由無(wú)Viton?o-rings形圈基本原理因?yàn)門eflon?可滅菌，耐用，不反應(yīng)：OK未認(rèn)識(shí)(殘留)的風(fēng)險(xiǎn)擦傷/Scoring膨脹性能不同未預(yù)期的后果通氣性/Aspiration滲漏微生物侵入生產(chǎn)線污染無(wú)菌不合格P1T1TransferlineV1V2V3P3P4T3Air/N2產(chǎn)品延長(zhǎng)變更的例子：進(jìn)料管線加長(zhǎng)培養(yǎng)基灌裝容器的數(shù)量應(yīng)足以保證評(píng)價(jià)的有效性。批量較小的產(chǎn)品，培養(yǎng)基灌裝的數(shù)量應(yīng)至少等于產(chǎn)品的批量。88*模擬試驗(yàn)的目標(biāo)是零污染，應(yīng)遵循以下要求：

1定性法：一種理解：在制劑中填充低于5000單元接受標(biāo)準(zhǔn)為0污染，但是在無(wú)菌原料藥生產(chǎn)中，包裝單位較大，得到的總分裝容器數(shù)一般較小，這使得抽樣測(cè)試和結(jié)果計(jì)算失去統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，又因?yàn)樯a(chǎn)批量是固定的，因此所有產(chǎn)品都應(yīng)被培養(yǎng)，并且所有的陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照都必須合格。若陰性對(duì)照或陽(yáng)性對(duì)照不合格，則無(wú)菌工藝驗(yàn)證失敗需要重新做。若發(fā)現(xiàn)有一個(gè)容器長(zhǎng)菌，就認(rèn)為無(wú)菌生產(chǎn)工藝中有染菌的因素存在，應(yīng)立即停產(chǎn)，調(diào)查產(chǎn)生污染的原因，采取措施后重新做驗(yàn)證。89*定量法可接受標(biāo)準(zhǔn)：FDA2004年無(wú)菌工藝指南NMT0.0001cfu/unit陽(yáng)性結(jié)果為各模擬段結(jié)果的總合使用最小批次量=最大分裝量/最大使用劑量陽(yáng)性率=陽(yáng)性數(shù)量/最小批次量問題最大分裝量為200Kg，最大使用劑量為1g，安慰劑使用量為60kg，最終成本來(lái)自A，B兩條工藝線，并在C工藝合并，A線發(fā)現(xiàn)2cfu,B線發(fā)現(xiàn)3cfu，C工藝發(fā)現(xiàn)2cfu，請(qǐng)計(jì)算污染率及判定結(jié)果。Workshop2最大分裝量為200Kg，最大使用劑量為1g，安慰劑使用量為60kg，最終成本來(lái)自A，B兩條工藝線，并在C工藝合并，A線發(fā)現(xiàn)2cfu,B線發(fā)現(xiàn)3cfu，C工藝發(fā)現(xiàn)2cfu，請(qǐng)計(jì)算污染率及判定結(jié)果。=(2+3+2)cfu/(200000g/1g/unit)=7/20cuf/10000unit=0.35/10000unit5污染調(diào)查

污染調(diào)查原因調(diào)查發(fā)生失敗(污染)時(shí)，應(yīng)盡可能找到最根本的原因。評(píng)估后果

糾偏與預(yù)防

重新試驗(yàn)

當(dāng)糾偏措施實(shí)施后，應(yīng)該進(jìn)行一次新的培養(yǎng)基灌裝試驗(yàn)，以確認(rèn)其有效性。但第一次實(shí)驗(yàn)失敗后，重新作的實(shí)驗(yàn)必須要與第一次實(shí)驗(yàn)的班次相同。

94Filtration&Incubation(xxhat32.5°C±2.5°C)MembranetransferonaliquidcassettewithapadsoakedofstainingsolutionIncubation30minat32.5°C±2.5°C12IlluminationbyLEDsandvisualreading(orCCDcameracapture)3舉例：Quantum+Vitck

orbiolog能夠?qū)ξ⑸镞M(jìn)行計(jì)數(shù)，鑒別（鑒定到種），并與微生物鑒別數(shù)據(jù)庫(kù)比對(duì)。這一點(diǎn)非常重要。各環(huán)節(jié)降低污染的措施96MM產(chǎn)品經(jīng)過除菌過濾滅菌直接包材接觸部0.36-0.54m/sGrade”A”Grade”B”關(guān)鍵點(diǎn)此圖引自張華*污染調(diào)查調(diào)查的范圍應(yīng)包括人：人員操作技術(shù)培訓(xùn)情況人員衛(wèi)生狀況監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)97*來(lái)自人員的污染溫度和濕度的控制要適宜、穿著無(wú)菌衣的操作人員感到舒適、能防止污染和交叉污染等等。來(lái)自人員的污染占整個(gè)生產(chǎn)污染的比例？每個(gè)人每年是否的顆粒有多重？98*第六章人員

第十九條潔凈區(qū)內(nèi)的人數(shù)應(yīng)當(dāng)嚴(yán)加控制，檢查和監(jiān)督應(yīng)當(dāng)盡可能在無(wú)菌生產(chǎn)的潔凈區(qū)外進(jìn)行。關(guān)鍵區(qū)與潔凈區(qū)？所有人員獲得進(jìn)入關(guān)鍵區(qū)域的資格前需經(jīng)過嚴(yán)格的培訓(xùn)，99*人員取樣100隔離柜凍干機(jī)三合一混合滅菌柜容器滅菌設(shè)備

滅菌柜是否具有自動(dòng)監(jiān)測(cè)記錄裝置，其能力是否與生產(chǎn)批量相適應(yīng)；滅菌柜是否定期驗(yàn)證，驗(yàn)證是否包括空載熱分布、滿載熱穿透和生物挑戰(zhàn)性；生產(chǎn)時(shí)的裝載方式是否與驗(yàn)證時(shí)的一樣；第六十五條所有的待滅菌物品均須按規(guī)定的要求處理，以獲得良好的滅菌效果，滅菌工藝的設(shè)計(jì)應(yīng)當(dāng)保證符合滅菌要求。第六十六條應(yīng)當(dāng)通過驗(yàn)證確認(rèn)滅菌設(shè)備腔室內(nèi)待滅菌產(chǎn)品和物品的裝載方式。101*第十一章滅菌工藝

第六十八條應(yīng)當(dāng)有明確區(qū)分已滅菌產(chǎn)品和待滅菌產(chǎn)品的方法。每一車（盤或其它裝載設(shè)備）產(chǎn)品或物料均應(yīng)貼簽，清晰地注明品名、批號(hào)并標(biāo)明是否已經(jīng)滅菌。必要時(shí)，可用濕熱滅菌指示帶加以區(qū)分。第六十九條每一次滅菌操作應(yīng)當(dāng)有滅菌記錄，并作為產(chǎn)品放行的依據(jù)之一。102*熱穿透空氣比水的熱阻還要高。例子1/100英寸厚的氣體層

1/4英寸的水層

12.9英寸的鐵墻冷凝水如何影響滅菌效率滅菌曲線104-101AirremovalSterilisationplateauDryingTemperature-1vacuumpulseSterilisationplateaufinaldryingsteaminjectionHeat–upbysteamcondensationDryingbycondensateevaporationItemhotanddryPressure*污染調(diào)查料：除菌過濾器完好性已滅菌物品的儲(chǔ)存條件105*完整性測(cè)試失敗處理措施替換過濾柱并且退回膜去分析再濕潤(rùn)過濾器，使用兩倍于初次濕潤(rùn)壓或沖洗量或浸泡時(shí)間或者使用高壓差在過濾器兩邊再測(cè)試過濾器是否通過測(cè)試完整性測(cè)試評(píng)估是否改變否是使用前是否邊緣失敗是否你能否重裝過濾柱用標(biāo)準(zhǔn)程序重裝和沖洗過濾器記錄價(jià)值和程序能否再測(cè)試是否使用后測(cè)試在使用前還是使用后是否邊緣失敗沖洗過濾器，使用兩倍沖洗量或者浸泡時(shí)間再測(cè)試過濾器是否通過測(cè)試沖洗過濾器，使用兩倍于初次濕潤(rùn)壓或者使用高壓在過濾器兩邊記錄價(jià)值和程序完整性測(cè)試評(píng)估是否接近規(guī)范值70/30異丙醇潤(rùn)濕，檢測(cè)是否是否否是污染的調(diào)查環(huán)：環(huán)境微生物監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)（Ａ／Ｂ），空氣懸浮粒子監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)高效過濾器檢測(cè)(空氣懸浮粒子水平，過濾器檢漏，風(fēng)速測(cè)量，密封系統(tǒng)檢查，使用年限等氣流方向和設(shè)備影響流型(

FirstAir)107*基于風(fēng)險(xiǎn)的考慮的設(shè)計(jì)環(huán)境監(jiān)控方案應(yīng)用風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的方法確定關(guān)鍵監(jiān)控點(diǎn)給產(chǎn)品構(gòu)成最大風(fēng)險(xiǎn)的位置，如產(chǎn)品暴露位置、直接接觸表面人員按實(shí)際需要選擇合適的監(jiān)測(cè)方法空氣浮游菌沉降菌接觸碟/棉簽法合理制定控制標(biāo)準(zhǔn)體現(xiàn)全面監(jiān)控、動(dòng)態(tài)監(jiān)控清潔與消毒

GMP法規(guī)要求日常常規(guī)消毒周期-每天全面消毒(殺芽孢)周期-1周或2周BacilluscereusBacilluscereus法規(guī)要求現(xiàn)場(chǎng)檢查結(jié)果:

某“消毒工作液”:10,000CFU/mlGMP強(qiáng)調(diào)了對(duì)消毒液的監(jiān)控和保存期限的規(guī)定，避免出現(xiàn)這樣的情況：消毒液都失效染菌了還在使用。使用性–配液是否容易？消毒液濃度過高容易導(dǎo)致：

損害材質(zhì)

毒性/危害性增大

環(huán)境污染

不必要的浪費(fèi)濃度過低容易導(dǎo)致：

無(wú)法徹底殺滅微生物產(chǎn)生耐藥菌株

虛假的“安全感”

清潔效果不理想

系統(tǒng)就位并開始操作照片113污染調(diào)查的難度：先決條件對(duì)相關(guān)的廠房，設(shè)施，人員，消毒、滅菌，微生物檢查方法，水系統(tǒng)，等工藝單獨(dú)地進(jìn)行驗(yàn)證是至關(guān)重要的，例如：藥液的除菌過濾產(chǎn)品的滅菌/去熱原HVAC，工藝設(shè)備，包括接觸產(chǎn)品設(shè)備的滅菌容器的滅菌，包括存放中間產(chǎn)品的容器，以及最終大包裝產(chǎn)品的容器空氣、水或氮等輔助系統(tǒng)的確認(rèn)114結(jié)論即使一個(gè)公司模擬試驗(yàn)是陰性的，也不能完全說明所有產(chǎn)品都沒有被污染，因?yàn)槟M試驗(yàn)要求的頻率太小，沒有統(tǒng)計(jì)意義。一個(gè)可靠的模擬試驗(yàn)對(duì)于工藝驗(yàn)證是十分必要的步驟。

必須實(shí)施全面質(zhì)量保證（HVAC確認(rèn)、清洗程序、衛(wèi)生管理、個(gè)人培訓(xùn)……)，培養(yǎng)基灌裝試驗(yàn)只是其中的一部分。陽(yáng)性污染菌與環(huán)境監(jiān)測(cè)污染菌的鑒別很關(guān)鍵PDA例子115*總結(jié)：模擬驗(yàn)證不是：A挑戰(zhàn)試驗(yàn)?zāi)M不應(yīng)提高或干擾生產(chǎn)工藝；不應(yīng)人為地提高或降低污染的風(fēng)險(xiǎn)，除非設(shè)計(jì)中另有要求B用工藝模擬來(lái)”驗(yàn)證“一個(gè)”不良“的工藝C試車試驗(yàn)無(wú)菌工藝必須正常運(yùn)行后，才能對(duì)它驗(yàn)證D一種培訓(xùn)方法

…只有經(jīng)培訓(xùn)的人員才能參與此項(xiàng)活動(dòng)E無(wú)風(fēng)險(xiǎn)活動(dòng)保護(hù)生產(chǎn)線的特別關(guān)注點(diǎn)--在試驗(yàn)后，去除殘留的培養(yǎng)基，以避免生產(chǎn)中微生物污染風(fēng)險(xiǎn)的增加其它需要特別注意的問題應(yīng)特別注意，在所有常規(guī)操作中增加的模擬步驟必須確保工藝模擬，不給生產(chǎn)工藝帶來(lái)不可接受的風(fēng)險(xiǎn)

如果采用培養(yǎng)基或?qū)φ掌奉惒牧希涀∫M(jìn)行清潔驗(yàn)證必須建立適當(dāng)?shù)慕缦蓿ＷC系統(tǒng)的無(wú)菌。*

取樣系統(tǒng)第四十八條

應(yīng)當(dāng)采取措施保證驗(yàn)證不能對(duì)生產(chǎn)造成不良影響。驗(yàn)證對(duì)生產(chǎn)區(qū)回帶來(lái)哪些負(fù)面影響?污染微生物引入微生物，如果培養(yǎng)基中含有動(dòng)物源性成分，可能導(dǎo)致朊蛋白污染。那么很重要的是，培養(yǎng)基供應(yīng)商能夠提供證明，確認(rèn)相關(guān)物質(zhì)來(lái)源于沒有牛海綿狀腦病（BSE-free）的國(guó)家

。培養(yǎng)基，環(huán)境監(jiān)控，人員，不合適的著裝和咳嗽，粒子人員，不合適的著裝和壓差，化學(xué)來(lái)自消毒劑的污染，交叉污染清場(chǎng)不徹底?殘余容器118*119無(wú)菌生產(chǎn)區(qū)域管道系統(tǒng)凍干機(jī)過程中的微生物泄露培養(yǎng)基的撤出和報(bào)廢應(yīng)當(dāng)采取措施保證驗(yàn)證不能對(duì)生產(chǎn)造成不良影響培養(yǎng)基灌裝結(jié)束后的清場(chǎng)和清洗Presentationtitleinfooter|00Month0000120BSE/TSERisk瘋牛病MycoplasmaRisk支原體1.008001.00550TSB,irradiatedTSBnonanimal,irradiated

1額外的清潔驗(yàn)證要求原來(lái)的清潔驗(yàn)證是否更涵蓋培養(yǎng)基的清潔方法

2模擬介質(zhì)最好具有促進(jìn)細(xì)菌生長(zhǎng)的作用。如果選擇對(duì)細(xì)菌生長(zhǎng)有促進(jìn)作用的固體培養(yǎng)介質(zhì)做驗(yàn)證，對(duì)生產(chǎn)環(huán)境的保護(hù)則特別重要。因?yàn)椋绻行┎僮魇鞘菇橘|(zhì)暴露的，介質(zhì)的塵粒會(huì)飄散到某些較難清洗的地方，如空調(diào)系統(tǒng)的送風(fēng)口和回風(fēng)口附近，給細(xì)菌在該處的滋生創(chuàng)造了條件，所以應(yīng)有措施保護(hù)不易清洗的死角不被介質(zhì)污染。無(wú)菌原料藥模擬分裝在中國(guó)源于國(guó)外審計(jì)起步階段，

不斷探索與嘗試無(wú)菌原料藥除菌工藝驗(yàn)證第七十五條非最終滅菌產(chǎn)品的過濾除菌應(yīng)當(dāng)符合以下要求：

124*（一）可最終滅菌的產(chǎn)品不得以過濾除菌工藝替代最終滅菌工藝。如果藥品不能在其最終包裝容器中滅菌，可用0.22μm（更小或相同過濾效力）的除菌過濾器將藥液濾入預(yù)先滅菌的容器內(nèi)。由于除菌過濾器不能將病毒或支原體全部濾除，可采用熱處理方法來(lái)彌補(bǔ)除菌過濾的不足。（二）應(yīng)當(dāng)采取措施降低過濾除菌的風(fēng)險(xiǎn)。宜安裝第二只已滅菌的除菌過濾器再次過濾藥液，最終的除菌過濾濾器應(yīng)當(dāng)盡可能接近灌裝點(diǎn)。（三）除菌過濾器使用后，必須采用適當(dāng)?shù)姆椒⒓磳?duì)其完整性進(jìn)行檢查并記錄。常用的方法有起泡點(diǎn)試驗(yàn)、擴(kuò)散流試驗(yàn)或壓力保持試驗(yàn)。（四）過濾除菌工藝應(yīng)當(dāng)經(jīng)過驗(yàn)證，驗(yàn)證中應(yīng)當(dāng)確定過濾一定量藥液所需時(shí)間及過濾器二側(cè)的壓力。任何明顯偏離正常時(shí)間或壓力的情況應(yīng)當(dāng)有記錄并進(jìn)行調(diào)查，調(diào)查結(jié)果應(yīng)當(dāng)歸入批記錄。（五）同一規(guī)格和型號(hào)的除菌過濾器使用時(shí)限應(yīng)當(dāng)經(jīng)過驗(yàn)證，一般不得超過一個(gè)工作日。

Process

design過濾設(shè)計(jì)FilterSterilisation過濾器的滅菌Tester

IQOQ檢測(cè)儀的安裝運(yùn)行確認(rèn)Bioburden

Sterility生物負(fù)荷的降低

TrainingEducation培訓(xùn)Bacteria

retention細(xì)菌截留Physicalcharacteristic物理性質(zhì)Adsorption吸附性Product

specific

產(chǎn)品完整性測(cè)試,標(biāo)準(zhǔn)及方法Filter

integrityTest過濾器的完整性檢測(cè)Filter

performance過濾器性能Compatibility兼容性Filter

integritytestoperatorcertification濾器操作者資格證書滅菌過程設(shè)計(jì),標(biāo)準(zhǔn)操作程序的培訓(xùn),Steritestschool無(wú)菌培訓(xùn)

取樣設(shè)備IQOQ

微生物方法驗(yàn)證airsurfacesfluids滅菌過程設(shè)計(jì),標(biāo)準(zhǔn)操作程序的制定,滅菌驗(yàn)證Filterability

studies過濾線的設(shè)計(jì)Engineering施工,RegulatoryCompliance法規(guī)SterilityAssurance無(wú)菌保證

生物負(fù)荷的確認(rèn)預(yù)過濾Extractables析出物溶媒結(jié)晶無(wú)菌API的過濾工藝板框三合一罐料液系統(tǒng)氮?dú)庀到y(tǒng)結(jié)晶溶媒劑洗滌液系統(tǒng)清洗劑，酸堿等產(chǎn)品結(jié)晶罐三合一除菌過濾器驗(yàn)證流程定義工藝條件及流程確定操作條件,指定驗(yàn)證方案完整性檢測(cè)方法析出物，兼容性，吸附微生物挑戰(zhàn)試驗(yàn)，毒性壓力，流速，溫度驗(yàn)證指南,產(chǎn)品使用說明最差條件過濾器驗(yàn)證項(xiàng)目Biological生物性能MicrobialRetention微生物截留Customizedto客戶定制FlowRate流速Throughput產(chǎn)量Processtemperature操作溫度Pressure壓力SystemSize系統(tǒng)尺寸大小Physical物理性能Integrity完整性Product/waterBPratio產(chǎn)品／水起泡點(diǎn)Diffusionratio擴(kuò)散流Binding吸附Chemical化學(xué)性能CompatibilityExtractables兼容性＼析出物CompatibilityTesting

兼容性測(cè)試

過濾器與產(chǎn)品兼容性測(cè)試Isthefiltermembranecompatiblewiththedrugproduct?濾膜與產(chǎn)品兼容嗎？Staticsoakinactualdrugproductforprocesstime將濾膜浸泡在料液中。浸泡時(shí)間不短于生產(chǎn)時(shí)間Inspectforvisiblechanges察看有無(wú)可見的變化Evaluateforphysicalchangein

檢測(cè)物理性能的變化：WaterFlowRate水流速M(fèi)embraneWeight濾膜重量ProductBubblePoint產(chǎn)品起泡點(diǎn)ExtractablesEvaluation析出物評(píng)估過濾器析出物評(píng)估FilterExtractablesevaluationismentionedinbothPDATechnicalReports15and26.在注射劑管理委員會(huì)的15及26號(hào)報(bào)告中描述了過濾器析出物評(píng)估方法。KnowledgeofExtractableslevelisimportantinrelationto: