全國臨床檢驗操作規程（第3版）精液檢查一．標本收集1.在3個月內檢查2次至數次，二次之間間隔應>7天，但不超過3周。2.采樣前至少禁欲3天，但不超過7天。3.采樣后1h內送到檢驗科。4.用清潔干燥廣口塑料或玻璃小瓶收集精液，不宜采用避孕套內的精液。某些塑料容器具有殺精子作用，但是否合適應事先做實驗。5.應將射精精液全部送檢。6.傳送時溫度應在20~40℃7.容器必須注明患者姓名和（或）識別號（標本號或條碼），標本采集日期和時間。8.和所有體液一樣，精液也必須按照潛在生物危害物質處理，因為精液內可能含有肝炎病毒、人類免疫缺陷（病毒）和皰疹病毒等。二．一般性狀檢查一般性狀檢查包括記錄精液量、顏色、透明度、粘稠度和是否液化。1.外觀正常精液呈灰白色或乳白色，不透明。棕色或紅色提示出血。黃色可能服用某種藥物。精子濃度低時精液略顯透明。正常精液是一種均勻黏稠的液體，射精后立即凝固，30min后開始液化。若液化時間超過60min考慮為異常，應記錄這種情況。正常精液可含有不液化的膠凍狀顆粒。2.量用刻度量筒或移液管測定。正常一次全部如室溫低于10℃時，應將標本先放入37某些標本試驗前就有尾部卷曲的精子，在HOS試驗前，計算未處理標本中尾部卷曲精子的百分數，實際HOS試驗結果百分率就等于測定值減去未處理標本中尾部卷曲精子百分率。HOS也是精子尾部膜功能試驗。四．精子活力WHO推薦一種無需復雜設備而能進行簡單精子活力（activity）分級的方法。【操作】取10μl標本涂片，連續觀察至少5個視野，對200個精子進行分級，首先計數a級和b級精子，隨后在同一視野內計數c級和d級精子。【結果判斷】根據下述標準把精子活力分為a、b、c、d四級。a級：快速前向運動：37℃時速度≥25μm/s，或20℃時速度≥20μm/s（25b級：慢速或者呆滯的前向運動。c級：非前向運動（＜5μm/s）。d級：不動。【參考區間】正常精液采集后60min內，a級+b級精子達50%以上。五．精子計數【試劑】精子稀釋液：碳酸氫鈉5g，40%甲醛溶液1ml，蒸餾水100ml，待完全溶解過濾后使用。【操作】于小試管內加精子稀釋液0.38ml，吸液化精液20μl，加入稀釋液內搖勻。充分搖勻后，滴入改良Neubauer血細胞計數池內，靜置1~2min，待精子下沉后，以精子頭部作為基準進行計數。如每個中央方格內精子少于10個，應計數所有25個中方格內的精子數。如每個中央方格內精子在10~40個，應計數10個中方格內的精子數。如每個中央方格內精子多于40個，應計數5個中方格內的精子數。【結果判斷】精子數=計數結果*25*1*20*103/ml計數中方格數計數池高度=計數結果*1*5*105/ml計數中方格數計數池高度【參考區間】正常男性≥20*106/ml【附注】收集精液前避免性生活3~7天。收集精液標本后應在1h內檢驗，冬季應注意保溫。出現一次異常結果，應隔1周后復查，反復查2~3次方能得出比較正確的結果。如低倍鏡、高倍鏡檢查均無精子，應將精液離心沉淀后再涂片檢查，如兩次均無精子，報告“無精子”。六．精子形態觀察【試劑】改良巴氏染色液、Shorr染色液、Diff-Quik快速染色液：商品化染色液一般質量均佳，但實驗室也可自行配制。【操作】在載玻片上滴1滴精液，約5~20μl，采用壓拉涂片法或推片法制片。待干后，巴氏染色法用等量95%乙醇和乙醚混合液固定5~15min；Shorr染色法用75%乙醇固定1min；Diff-Quik快速染色法用甲醇固定15s。作改良巴氏、Shorr或Diff-Quik染色，然后在油鏡下觀察。精子頭部頂體染成淡藍色，頂體后區域染成深藍色，中段染成淡紅色，尾部染成藍色或淡紅色，細胞質小滴位于頭部后面或中段周圍，巴氏染色染成綠色。【結果判斷】評估精子正常形態時應采用嚴格標準，只有頭、頸、中段和尾部都正常的精子才正常。精子頭的形狀必須是橢圓形，巴氏染色精子頭部長4.0~5.0μm，寬2.5~3.5μm，長寬之比應在1.50~1.75，頂體的界限清晰，約占頭部的40%~70%。中段細，寬度<1μm，約為頭部長度的1.5倍，且在軸線上緊貼頭部，細胞質小滴應小于正常頭部大小的一半。尾部應是直的、均一的，比中段細，非卷曲，其長約為45μm。所有形態學處于臨界狀態的精子均列為異常。異常精子可有：=1\*GB3①頭部缺陷：大頭、小頭、錐形頭、梨形頭、圓頭、無定形頭、有空泡頭、頂體過小頭、雙頭等；=2\*GB3②頸段和中段缺陷：頸部彎曲、中段非對稱地接在頭部、粗的或不規則中段、異常細的中段等；=3\*GB3③尾部缺陷：短尾、多尾、發卡形尾、尾部斷裂、尾部彎曲、尾部寬度不規則、尾部卷曲等。【參考區間】正常人精液中正常形態者≥30%（異常精子應少于20%，如超過20%為不正常）。七．精子凝集精子凝集是活動精子以各種方式，如頭對頭，尾對尾或頭對尾等彼此粘在一起。以分級方式報告，從“-”（沒有凝集）~“3+”（所有可動的精子凝集到一起）。凝集的存在，提示可能為免疫因素引起不育。八．非精子細胞精液含有的非精子細胞成分，成為“圓細胞”，這些細胞包括泌尿生殖道上皮細胞、前列腺細胞、生精細胞和白細胞。正常人精液中：圓細胞<5*106/ml。正常精液中白細胞，主要是中性粒細胞，數量不應超過1*106/ml。過多提示感染，為白細胞精子癥。九．其他成分精液中可以有結晶體、卵磷脂小體、淀粉樣體、脂滴、脫落上皮細胞等。十．臨床意義1．正常精液呈灰白色，久未排精者可呈淡黃色；離體30min后，完全液化。根據精液檢查結果，臨床上常用于診斷男子不育癥及觀察輸精管結扎術后的效果。2．正常精子活力一般在a級≥25%。如活力a級<25%；a級+b級<50%可成為男性不育的原因。3．精索靜脈曲張癥患者精液中常出現形態不正常的精子。4．血液中有毒性代謝產物、接觸鉛等污染物、應用大劑量放射線及細胞毒藥物等可使精子形態異常。前列腺液檢查標本收集臨床醫師作前列腺按摩術后，采集標本于清潔玻片上，立即送檢。檢查內容記錄液體顏色、是否混有血液、有無膿塊等。濕片鏡檢，高倍鏡下觀察白細胞、紅細胞、卵磷脂小體，其次為上皮細胞、精子、淀粉樣體等。革蘭染色后檢查細菌。報告方式卵磷脂小體報告在高倍視野中分布數量。白細胞、紅細胞報告方式與尿