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文檔簡介

第16 細胞計數：取對數生長期的單層培養細胞，用0.25%胰蛋白酶消化并吹打成單個細10%胎牛血清的培養液中。用細胞計數板人工計數或者以取細胞懸液0.3mL，加入0.9mL結晶紫(或臺盼至)染液，混勻后再計0.02%B0.05%的苯胺(根據增殖能力)接種于培養皿中。一般分每皿50、100、200個細胞的梯度密度分別接種含37℃預溫375CO22～3固定：棄去培養上清液，用PBS小心浸洗2次。加純甲醇或1:3醋酸/甲醇5mL，固定15分鐘。然后去固定液，加適量Giemsa染色液染10～30分鐘，然后使用帶網格的透明片疊在培養皿上，肉眼計數，或在低倍鏡下計數大于50個細胞3次獨立重復的數據都分析完后進行統計分析并繪制柱狀圖。平使用帶網格的透明片疊在培養皿上，肉眼計數，或在低倍鏡下計數大于50個細胞3次獨立重復的數據都分析完后進行統計分析并繪制柱狀圖。平

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