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文檔簡介
第七章動物實驗概論第1頁,課件共46頁,創作于2023年2月第一節實驗動物生產供應管理
及使用的特點一、.實驗動物繁殖生產的特點1、難以控制的繁殖規律2、對生活環境的高度依賴3、生產成本高4、管理要求高第2頁,課件共46頁,創作于2023年2月二、實驗動物供應使用的特點
1、可供使用時間短
2、供應使用的規格要求千變萬化
3、供應使用量的峰谷落差大
第3頁,課件共46頁,創作于2023年2月三、實驗動物生產供應的特殊管理要求1、與國際接軌的要求2、國家、地方管理法規的要求3、質量管理要求第4頁,課件共46頁,創作于2023年2月四、醫學研究使用實驗動物的特點醫學院校科研使用實驗動物的通常特點是:規格嚴,要求高,品種多,范圍廣,有諸多制約因素影響動物實驗的順利開展;實驗所需要的動物、品種、數量、規格、質量要求不一;實驗目的、要求、方法不一;實驗人員成份(有教師、醫生、研究生、技術人員)不一;操作技能參差不齊;急性實驗少,慢性實驗多,使用時間或集中或分散,無規律可循;第5頁,課件共46頁,創作于2023年2月主要表現:1、使用時間的不確定性2、臨時計劃多3、計劃可塑性大4、科研經費不足5、多因素的制約
第6頁,課件共46頁,創作于2023年2月第二節實驗動物的使用計劃編制凡涉及使用實驗動物的課題,課題申報者在申報前應主動與實驗動物中心取得聯系,提出擬用實驗動物的品種、等級、數量、規格要求等的預計劃,待課題正式立項后應及時編制實驗動物詳細使用計劃,確定使用實驗動物的日期,交由實驗動物中心安排生產及供應。第7頁,課件共46頁,創作于2023年2月報送計劃的時間為:使用小鼠前3個月,使用大鼠前4個月,使用狗、兔等非自繁動物之前1個月。這樣才能使實驗動物生產供應部門有充裕的時間進行選種選配、繁殖生產或外出采購并按程序進行檢疫和檢驗。計劃一旦落實就必須嚴格執行,任何變動都將造成經濟損失和時間的浪費。第8頁,課件共46頁,創作于2023年2月第三節實驗動物的領取或外購一、實驗動物的領取1、發放實驗動物在每天規定的時間段內進行
2、根據事先所造計劃提前一天通知飼養員,自覺遵守領取時間。
3、領取動物必須遵守有關制度,履行登記、付款手續。第9頁,課件共46頁,創作于2023年2月二、實驗動物的購買1、提出外購申請,經實驗動物中心負責人同意;2、事先與供應單位聯系并確認能夠提供,并問清楚等級、價格、包裝、供應方式,可供應日期;
3、如果系慢性實驗,則必須首先與實驗動物中心簽訂好動物實驗室的使用和代養觀察協議,辦妥有關手續;第10頁,課件共46頁,創作于2023年2月4、購買時要索取實驗動物質量合格證、許可證復印件和其他相關資料;5、選擇最快、最安全、最有效的運輸方式;
6、遵守動物運輸檢驗檢疫法;
7、如需要實驗動物中心協助,應事先支付足額費用。
第11頁,課件共46頁,創作于2023年2月三、實驗動物的運輸
1、運輸容器
運輸容器應能防止微生物污染及承受短暫性的擠壓,保證實驗動物的健康與安全,并能防止動物逃逸運輸無特定病原體(SPF)動物,運輸箱更要加上一層特殊濾帽,以防止外界微生物的污染。運輸籠盒應考慮實驗動物的生理、生態和習性等因素,要特別注意,在同一運輸箱內不能混合不同品種、不同性別或不同等級的動物。
第12頁,課件共46頁,創作于2023年2月2、動物運輸箱的標簽1)、收件人姓名、地址、單位及電話。2)、寄件人姓名、地址、單位及電話(以及緊急聯絡電話號碼)。3)、裝箱時間,運輸日期、時間。4)、動物數量、性別、品種、品系、年齡等相關資料。5)、運輸箱件數。
6)、動物健康證明或相關資料。第13頁,課件共46頁,創作于2023年2月3、運輸工具運輸工具需要有通風和空調設備,以防運輸中出現過熱或過冷引起動物的反應與不適。第14頁,課件共46頁,創作于2023年2月4、驗收動物
主管獸醫或動物飼養管理人員應在對外包裝消毒后小心地打開運輸箱,檢查動物是否有任何死亡或異樣。第15頁,課件共46頁,創作于2023年2月四、進出口檢疫動物出入境必須取得國家出口或進口許可證,來自特定疾病疫區的動物,不能進口。依國際規范,野生獵捕靈長類動物需測試肺結核、皰疹B病毒和其他相關傳染病,確認不攜帶有規定的病原微生物才能引進。每當引進其他國家的實驗動物(嚙齒類)進入國內時,必須經國家檢驗檢疫機構批準,確定符合要求的專門場所進行飼養、檢疫,且要求有健康證明文件(healthcertificate)。動物于檢疫后,必須作定期微生物監測,確認動物健康后,才能用于繁殖生產或長期研究。第16頁,課件共46頁,創作于2023年2月第四節動物實驗準備與實施第17頁,課件共46頁,創作于2023年2月一、動物實驗的概念動物實驗是根據研究目的,恰當地選用標準的符合實驗要求的實驗動物,在設計的條件下,進行各種科學實驗、觀察、記錄動物的反應過程或反應結果,以探討或檢驗生命科學中未知因素的專門活動。動物實驗是人類生存和發展的必要手段。第18頁,課件共46頁,創作于2023年2月二、實驗人員的資質認定動物實驗人員應掌握實驗動物科學基本知識,必須了解國家、省、市及所在單位實驗動物機構有關實驗動物和動物實驗的管理法規和制度,并能夠切實遵照執行。參與動物實驗的人員都必須通過所在省、市科技主管部門組織的實驗動物從業人員上崗考試,并取得科技主管部門統一頒發的上崗資格證書。第19頁,課件共46頁,創作于2023年2月三、動物實驗設計
1、選題的一般原則:①科學性。即選題應具有明確的理論意義和實踐意義,符合科學性的原則。應當在理論學習、技能掌握、文獻檢索、研究積累的基礎上提出假說,設計新的實驗。②創新性。創新性是科學的靈魂,選題能夠探索生命科學中的未知事物或未知過程,或能揭示已知事物中的未知規律,或提出新見解、新技術、新方法。③可行性。指選題應切合研究者的學術水平、技術水平,具備開展實驗的條件,能夠順利得以實施。第20頁,課件共46頁,創作于2023年2月④倫理原則。實驗動物同樣是生命體,同樣需要考慮倫理問題。動物實驗設計應按照“3R”原則進行評估和設計。在滿足研究需要的前提下,盡可能少用實驗動物,或尋找替代方法;實驗應當在動物沒有痛苦的條件下進行,需要手術或其他損傷性實驗時,應當給動物麻醉或鎮靜。實驗后的動物應給予很好的護理。第21頁,課件共46頁,創作于2023年2月⑤統計學考慮。動物實驗設計時應充分考慮統計學原則,即對照、隨機、重復的原則。在分組、例數、采用的指標等方面,都應事先考慮研究結束后的數據統計方法,以及采用這些方法在設計時需要注意的問題。第22頁,課件共46頁,創作于2023年2月2、實驗設計的幾個要素(1)處理因素人為施加不同試驗條件(給受試對象以各種物理、化學或生物學刺激),以揭示生物體的內在規律。控制處理水平(如劑量、時間、強度、頻率等)在合理的范圍。第23頁,課件共46頁,創作于2023年2月(2)試驗對象選擇合適的實驗動物或動物組織和細胞等。必須保證試驗對象的一致性,試驗對象應當對處理因素敏感,并且反應穩定。(3)試驗效應的觀察采用適當的觀察指標,包括定量指標、定性指標和半定量指標,觀察動物對各種試驗施加因子的反應。選擇指標時應當考慮到指標的關聯性、客觀性、靈敏度和可用性,以提高效應觀察的敏感性和特異性。第24頁,課件共46頁,創作于2023年2月3、實驗設計的原則(1)對照性原則同體對照,即同一動物在施加實驗因素前后所獲得的不同結果和數據各成一組,作為前后對照,或同一動物在施加實驗因素的一側與不施加實驗因素的另一側作左右對照;異體對照,即實驗動物均分為兩組或多組,一組不施加實驗因素,另一組或幾組施加實驗因素。沒有對照組的實驗結果往往是難以令人信服的。對照應在同時同地同條件下進行。第25頁,課件共46頁,創作于2023年2月(2)一致性原則一致性原則是指在實驗中,實驗組與對照組除了處理因素不同外,非處理因素基本保證均衡一致。這是處理因素具有可比性的前提。(3)重復性原則重復性原則是指同一處理要設置多個樣本例數。重復的作用是估計試驗誤差,降低試驗誤差,增強代表性,提高精確度。重復的目的就是要保證實驗結果能在同一個體或不同個體中穩定地再現。為此,必須有足夠的樣本數。樣本數過少,實驗處理效應將不能充分顯示;樣本數過多,又會增加工作量,也不符減少實驗動物用量的原則。第26頁,課件共46頁,創作于2023年2月(4)隨機性原則隨機性原則就是按照機遇均等的原則來進行分組。其目的是使一切干擾因素造成的實驗誤差盡量減少,防止實驗者的主觀因素或其他偏性誤差造成的影響。(5)客觀性原則客觀性原則是指所選擇的觀測指標盡可能不帶有主觀成分。所有觀測指標盡可能便于定性定量,結果判斷要以客觀數據為依據。第27頁,課件共46頁,創作于2023年2月四、動物實驗條件的準備1、實驗場所必須持有實驗動物使用許可證必須是標準化的條件,規范化的管理。第28頁,課件共46頁,創作于2023年2月
2、儀器、藥品、試劑儀器要校準,好用、會用;藥品、試劑要提前預定,按照說明書進行配制,特別注意的是,生物試劑要在確認有合格的實驗動物和其它條件都具備的情況下才可配制;各種實驗器械要消毒、配套。第29頁,課件共46頁,創作于2023年2月
3、實驗動物實驗動物是特殊的材料,是有生命的物質。實驗前應了解實驗動物品種、品系、等級、許可證、動物質量合格證情況,進一步提交詳細的使用計劃。對本單位不能提供的實驗動物,則必須聯系購買,購買的程序、要求、運輸等都要認真考慮第30頁,課件共46頁,創作于2023年2月4、實驗人員實驗人員是實驗成敗的關鍵因素。是否取得動物實驗上崗資格證書對實驗內容是否熟悉實驗操作是否熟練時間安排是否有保證第31頁,課件共46頁,創作于2023年2月五、預實驗檢查各項準備工作是否完備實驗方法和步驟是否切實可行測試指標是否穩定可靠可初步了解實驗結果與預期結果的距離,從而為正式實驗提供補充、修正、完善的意見和經驗第32頁,課件共46頁,創作于2023年2月六、動物實驗的實施
動物實驗的實施就是動物實驗按照整個實驗設計的技術路線付諸行動的過程。應對相關人員作出合理分工,明確職責實驗技術人員要認真履行職責,對實驗過程中出現的各種問題要認真分析,及時匯報,提出處理方案。實驗過程中的觀察結果與預期不符時,要及時作出分析和調整,避免人、財、物力的不必要浪費。在實驗過程中,要敢于舍棄原設計中不盡合理的部分,仍要不斷修正和完善實驗方案。要對手術后的動物勤加觀察,精心護理.第33頁,課件共46頁,創作于2023年2月七、實驗記錄與資料整理1、檢查資料:完整性、準確性、及時性、真實性2、設計分組:合理分組、科學分組(質量、數量分組)
3、表格整理:整理、歸納
4、統計分析:統計學原理、應用軟件第34頁,課件共46頁,創作于2023年2月八、動物實驗報告與論文撰寫1、實驗動物種系名稱實驗動物品種、品系名稱必須準確、規范,避免使用通俗稱謂,如SD大鼠不要寫成SD大白鼠,昆明種小鼠應寫成“KM小鼠”(已獲國際認可),BALB/c小鼠不能寫成Balb/c小鼠,更不能寫成B小鼠。2、背景資料動物從何處獲得,遺傳學分類屬于哪一類,微生物等級屬于哪一級,必須交代清楚。實驗動物供應單位的生產許可證編號及合格證情況。避免使用模糊的描述,如將封閉群日本大耳白兔描述成純種大白兔或純種兔等錯誤概念。第35頁,課件共46頁,創作于2023年2月
3、性別和規格應準確描述實驗所使用實驗動物的雌雄性別數量、年齡、體重等。
4、動物實驗條件實驗動物使用許可證編號,實驗動物飼養方式(飼料來源、質量標準、飼喂方式、飲水方式、飼養密度、籠具與墊料種類等),實驗觀察環境的級別,都應作出詳盡的描述。
5、動物的處理方式動物實驗使用的麻醉劑的種類、劑量與方法、給藥途徑與方法、動物的標本采集方式、動物的處死方式等都要盡可能注明。第36頁,課件共46頁,創作于2023年2月例題:綜合題
小張已經完成動物實驗,論文初稿也寫好了,這是其中的部分內容:材料和方法實驗動物:ICR小白鼠共40只,體重20g,購自南通大學實驗動物中心。實驗鼠飼養在本實驗室內,飼喂全價小鼠顆粒飼料,自由采食和飲用自來水。實驗方法:將40只小白鼠分成4組,每組10只*************。實驗第7天,處死動物,******。請你運用所學的實驗動物學知識幫助分析并進行修改。第37頁,課件共46頁,創作于2023年2月例題:簡答題若大鼠表現為情緒暴躁、易咬人,可能的原因是什么?
D2FVBF1是哪一類動物?其含義是什么?在做動物實驗時,一定要在領取實驗動物后,再配制生物試劑,理由是什么?
第38頁,課件共46頁,創作于2023年2月第五節影響動物實驗結果的因素第39頁,課件共46頁,創作于2023年2月一、動物因素
(一)、種屬不同種屬的哺乳動物的生命現象,特別是一些最基本的生命過程,有一定共性,這是醫學研究中應用動物實驗的基礎。但不同種屬的動物在對各種實驗施加因子的反應上,又各有不同:
1.不同種屬動物對同一致病因素的易感性不同。
2.不同種屬動物的基礎代謝率相差很大。
3.不同種屬動物對藥物的反應有明顯差異。
4.不同種屬動物所進行的
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