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#動(dòng)物實(shí)驗(yàn)基本操作技術(shù)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)是醫(yī)學(xué)研究的基本手段,是藥物安全性評(píng)價(jià)的必經(jīng)途徑。嫻熟的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)和技巧,是順利完成動(dòng)物實(shí)驗(yàn)并取得準(zhǔn)確、可靠的結(jié)果和好的反應(yīng)重復(fù)性的保證。對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)管理人員和獸醫(yī)技術(shù)人員來(lái)說(shuō),動(dòng)物不會(huì)講話,不領(lǐng)人情,具有自衛(wèi)本能,隨時(shí)準(zhǔn)備攻擊獸醫(yī)及其他工作人員,更不會(huì)自動(dòng)地服藥和接受必要的檢查和治療,這無(wú)疑給平時(shí)的飼養(yǎng)管理和獸醫(yī)治療工作增添不少麻煩。所以無(wú)論是飼養(yǎng)人員還是動(dòng)物實(shí)驗(yàn)人員都必須熟練掌握常規(guī)的和一些特殊的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)技術(shù),才能科學(xué)合理地養(yǎng)好實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,規(guī)范熟練地開展動(dòng)物實(shí)驗(yàn),有效地對(duì)患病動(dòng)物進(jìn)行檢查、診斷和治療。同時(shí)也不會(huì)造成動(dòng)物的應(yīng)激反應(yīng)或傷害,也不致給飼養(yǎng)管理和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員自身造成意外的傷害。第一節(jié)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的抓取與固定一、大、小鼠的抓取固定法1.小鼠的抓取固定方法先用右手抓取鼠尾并提起,置于鼠盒的籠蓋或?qū)嶒?yàn)臺(tái)上向后拉,在其向前爬時(shí),用左手拇指和食指抓住小鼠的兩耳和頸部皮膚,將鼠體置于左手心,把后肢拉直,以無(wú)名指按住鼠尾,小指按住后腿。也可用左手小指鉤起鼠尾,迅速以拇指、食指和中指按住其耳后頸背部皮膚亦可,適宜作灌胃,皮下、肌肉、腹腔注射等實(shí)驗(yàn)操作。2.大鼠的抓取固定方法基本上與抓取小鼠相同,輕輕抓住鼠尾根部,將大鼠提起置于鼠盒籠蓋上,迅速用左手拇指和食指捏住鼠耳后下方,固定其頭部,不得讓其轉(zhuǎn)動(dòng),余下二指緊捏鼠背皮膚,置于左掌心,右手即可進(jìn)行腹腔、肌肉、皮下注射與灌胃或各種實(shí)驗(yàn)操作。注意不用襲擊方法抓取大鼠,否則易被咬傷。解剖手術(shù)和心臟采血,可先麻醉動(dòng)物,取背臥位,再用細(xì)繩活結(jié)或大頭針將鼠前后肢分別固定在板上。尾靜脈注射或采血時(shí),可用鼠靜脈注射架固定,先選擇合適固定架,打開鼠筒蓋,將鼠尾提起,鼠身放入固定架,露出尾巴,蓋好筒蓋,即可進(jìn)行尾靜脈注射或尾靜脈采血等操作。二、豚鼠的抓取固定法基本上與大鼠相同,只是由于豚鼠較膽小,易受驚,所以抓取時(shí)必須穩(wěn)、準(zhǔn)和迅速??上扔靡皇盅杆僮プ∈蟊臣珉紊戏?,用力下壓固定后,以拇指和食指環(huán)握頸部,用另一只手托住臀部即可。三、家兔的抓取固定法抓取家兔一般用右手抓住兔頸部的毛皮,并提起,用左手托其臀部或腹部,讓其身體重量的大部分集中在左手上。注意不能用手抓雙耳或腹部,以免損傷動(dòng)物。家兔的固定分為盒式、臺(tái)式兩種。如作兔耳血管注射和兔耳采血時(shí),可用盒式固定;如作呼吸、血壓測(cè)定實(shí)驗(yàn)和手術(shù)時(shí),則可用臺(tái)式固定。其方法是將家兔固定在兔臺(tái)上,四肢用粗棉繩活結(jié)綁住,拉直四肢,將繩綁在兔臺(tái)四周的固定栓上,頭用固定夾固定,或用一根粗棉繩兜住兔的切齒綁在兔保定臺(tái)鐵柱上。四、狗的抓取固定法畢格狗能主動(dòng)配合實(shí)驗(yàn)人員,抓取時(shí)動(dòng)作要溫柔,一般不會(huì)攻擊人。抓取雜種狗時(shí),為了防止其咬人,最好首先讓飼養(yǎng)員幫助綁住狗嘴?;蛳容p輕撫摸其頸背部皮毛,然后用布帶迅速兜住狗的下頜,繞到上頜打一個(gè)結(jié),再繞回下頜打第二個(gè)結(jié),然后將布帶引至頭后,頸項(xiàng)部再打兩個(gè)結(jié),這樣就將狗嘴捆綁住了,注意松緊要適宜。如狗過(guò)于兇猛,則可先用狗頭鉗夾住其頸部,將狗按倒在地,再扎其嘴。狗的固定也可先將狗麻醉后,采用頭部固定和四肢固定法,頭部固定可用一圓鐵圈的狗頭固定器,圈中央有一弓形鐵,與棒螺絲相連,下面有一根平直鐵閂,操作時(shí),先將狗舌拉出,把狗嘴插入固定的鐵圈內(nèi),再用平直鐵閂橫貫于尖牙后部的上下頜之間,然后向下旋轉(zhuǎn)棒螺絲,使弓形鐵逐漸下壓在狗的下頜骨上,把鐵柄固定在實(shí)驗(yàn)臺(tái)的鐵柱上即可。四肢固定法與家兔相同。第二節(jié)性別鑒定動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中,經(jīng)常要涉及雌雄動(dòng)物的鑒別。性成熟后的哺乳類動(dòng)物性別一般易于區(qū)分,因?yàn)樾坌詡€(gè)體睪丸已從腹腔下降至陰囊內(nèi),雌性動(dòng)物的陰道也已開口。除了生殖器官本身外,在某些動(dòng)物中還可以根據(jù)第二性征來(lái)判斷。但是,對(duì)于新生動(dòng)物來(lái)說(shuō),性別鑒定就較為困難。下面介紹一些常用區(qū)分方法。一、哺乳類一般情況下,哺乳類動(dòng)物性別依據(jù)動(dòng)物的肛門與外生殖器(陰莖或陰道)之間的距離加以區(qū)分。雄性要比雌性的距離更長(zhǎng)。1.嚙齒目大鼠、小鼠、沙鼠可用肛門生殖器間距離加以區(qū)分。成年大、小鼠性別極易區(qū)別。雌性生殖器與肛門之間有一無(wú)毛小溝,距離較近。雄性可見明顯的陰囊,生殖器突起較雌鼠大,肛門和生殖器之間長(zhǎng)毛。幼年鼠則主要靠肛門與生殖器的距離遠(yuǎn)近來(lái)判別,近的為雌性,遠(yuǎn)的為雄性。但這種方法對(duì)豚鼠和地鼠則用處不大。豚鼠和地鼠用手壓迫會(huì)陰部,雄鼠有陰莖突起,雌鼠則無(wú),但可見陰道口呈“V”形。另一種方法可以通過(guò)乳頭的出現(xiàn)來(lái)區(qū)分大、小鼠。雌性小鼠2-13日齡可見乳頭的出現(xiàn)。雌性大鼠3日齡就可見乳頭,12到15日齡更明顯,此后兩種鼠的乳頭就被被毛遮掩。對(duì)于成年豚鼠在其肛門-生殖器部位之前施加輕微壓力便可使陰莖伸出。雌性豚鼠有陰道關(guān)閉膜(一種除了發(fā)情和分娩時(shí)外,關(guān)閉陰道口的細(xì)胞結(jié)構(gòu)),用拇指和食指壓迫生殖脊兩側(cè)使其上面部位輕輕張開,則該膜能暴露出來(lái)。當(dāng)放松時(shí),此膜可在肛門和尿道之間形成淺U型皺折。發(fā)情高潮期,陰道關(guān)閉膜呈開孔狀。2.兔形目與豚鼠區(qū)分方法相同。對(duì)初生仔兔及開眼仔兔,可觀察其陰部孔洞形狀和距離肛門遠(yuǎn)近:孔洞扁形、大小與肛門相同,距肛門近者為雌性;孔洞圓形而略小于肛門,距肛門遠(yuǎn)者為雄性。對(duì)幼兔,可用右手抓住兔的頸背部皮膚,左手以食、中指夾住尾巴,大拇指輕輕向上推開生殖器,局部呈“O”形,下為圓柱體者是公兔;局部呈“V”形,下端裂縫延至肛門者為母兔。對(duì)成年兔,可看有無(wú)陰囊。三月齡以上家兔,只要看一眼有無(wú)陰囊,便可區(qū)分公母。3.食肉目新生食肉目動(dòng)物可用肛門-生殖器距離加以區(qū)分。成年公犬睪丸下降于陰囊中,懸于會(huì)陰部下方,陰莖由恥骨下緣朝腹部方向延伸,至后腹壁開口。母犬的尿生殖道開口于肛門下方,較易觀察識(shí)別。公貓的陰莖方向是向后的。4.靈長(zhǎng)目區(qū)分靈長(zhǎng)類動(dòng)物雌雄較為困難。首先應(yīng)檢查其尿道開口,許多雌性動(dòng)物有較大的陰蒂,其腹側(cè)形成溝狀通向尿道口,而雄性動(dòng)物的尿道開口在陰莖頭上。觸摸陰囊內(nèi)是否有睪丸是確定其雌雄的最可靠方法。第三節(jié)年齡的大致判斷一、小鼠一)根據(jù)形態(tài)鑒定日齡小鼠出生后不同日齡的外觀形態(tài)特征見表9-1。表9-1小鼠出生后不同時(shí)間的外觀形態(tài)特征日齡(d)外觀形態(tài)特征1仔鼠裸體鮮紅3耳殼露出表皮4臍帶疤痕脫落5能翻身8能爬行10能聽到聲音9-11全身被上白毛,門齒長(zhǎng)出13-15眼皮張開,能跳躍,能抓取東西18以后能自行采食,獨(dú)立生活(二)根據(jù)體重鑒定日齡小鼠出生后體重與日齡相關(guān),不同品系間有一定差異。以KM小鼠為例,不同日齡小鼠體重見表9-2。表9-2小鼠不同日齡的體重日齡(d)初生51015202530體重(g)1.84.06.011.015.021.021.0二、大鼠18日齡以前大鼠的形態(tài)特征與小鼠基本一致,可根據(jù)形態(tài)特征來(lái)判斷年齡。在無(wú)可靠記錄資料的情況下,可根據(jù)體重來(lái)判斷大致日齡。普通級(jí)SD大鼠不同日齡體重見表9-3。需要指出的是,同一品系大鼠的生長(zhǎng)發(fā)育受窩產(chǎn)仔數(shù)、雌鼠哺乳能力、飼料營(yíng)養(yǎng)水平、管理水平以及個(gè)體差異等多種因素的制約,年齡與體重的關(guān)系不是絕對(duì)的。表9-3不同日齡SD大鼠體重情況日齡(d)初牛1020304050607080體重(g)―6^7——17-25—35—5055—90100—150150—210170—240210—270240—320注:1月齡后,雄鼠取上限,雌鼠取下限。三、豚鼠一般老年豚鼠牙齒和趾爪長(zhǎng),被毛稀疏無(wú)光澤,眼神呆滯,行動(dòng)遲緩。而年輕豚鼠牙齒短白,爪短軟,眼睛圓亮,行動(dòng)敏捷,被毛有光澤,且緊貼身體。同樣,也可根據(jù)體重來(lái)推斷大致年齡,見表9-4。同日齡豚鼠,雌性體重略高于雄性。與大鼠一樣,其體重受多種因素的制約。實(shí)驗(yàn)對(duì)年齡要求比較嚴(yán)格時(shí),必須由卡片記錄提供準(zhǔn)確年齡。表9-4豚鼠的體重與年齡的關(guān)系日齡(d)初生720306090120180體重(g)60—80100—120150—200170—220240—300330—400400—470520—600四、家兔家兔的門齒和爪隨年齡增長(zhǎng)而增長(zhǎng),是年齡鑒別的重要標(biāo)志。青年兔門齒潔白,短小,排列整齊;老年兔門齒暗黃,厚而長(zhǎng),排列不整齊,有時(shí)破損。白色家兔趾小基礎(chǔ)呈紅色,尖端呈白色。一歲家兔紅色與白色長(zhǎng)度相等;一歲以下,紅多于白;一歲以上,白多于紅。還可根據(jù)趾爪的長(zhǎng)度與彎曲度來(lái)區(qū)別。青年兔趾爪較短,直平,隱在腳毛中,隨年齡的增長(zhǎng),趾爪露出于腳毛之外,而且爪尖鉤曲。另外,家兔皮薄而緊,眼神明亮,行動(dòng)活潑的為青年兔;皮厚而松,眼神頹廢,行動(dòng)遲緩的為老年兔。五、犬
犬的年齡主要以牙齒的生長(zhǎng)情況、磨損程度、外形顏色等情況綜合判定。成年犬有42
顆牙齒。齒式:2(13/3C1/lPm4/4M2/3)=42。仔犬在出生后十幾天即開始生出乳齒,兩
個(gè)月以后開始由門齒-犬齒-臼齒順序逐漸更換為恒齒,8-10個(gè)月齒換齊。但犬齒需要1歲半
以后才能長(zhǎng)堅(jiān)實(shí)。飼養(yǎng)場(chǎng)飼養(yǎng)的品種犬,可以根據(jù)記錄,明確了解年齡,而收購(gòu)的雜種犬就
無(wú)法知道確切年齡。實(shí)際中,可根據(jù)犬齒更換和磨損情況,估計(jì)犬的年齡,見表9-5。表9-5不同年齡犬齒更換和磨損情況年齡犬齒更換和磨損情況2個(gè)月以下僅有乳齒(白、細(xì)、尖)2-4個(gè)月更換門齒4-6個(gè)月更換犬齒(白,牙尖圓鈍)6-10個(gè)月更換臼齒1歲牙長(zhǎng)齊,潔白光亮。門齒有尖突2歲下門齒尖突部分磨平3歲上下門齒尖突大部分磨平4-5歲上下門齒開始磨損呈微斜面,并發(fā)黃6-8歲門齒磨成齒根,犬齒發(fā)黃、磨損9-10歲唇部、胡須發(fā)白10歲以上門齒磨損,犬齒不齊全,牙根黃,唇邊胡須全白第四節(jié)妊娠檢查妊娠(pregnancy),又稱“懷孕”是哺乳動(dòng)物所特有的一種生理現(xiàn)象,自卵子受精開始到胎兒發(fā)育成熟后及其附屬膜共同排出母體的復(fù)雜生理過(guò)程。雌性哺乳動(dòng)物排卵后,卵子與精子結(jié)合受精形成合子,雌性的發(fā)情周期即被妊娠期所代替。妊娠期(gestationperiod)是指受精后到分娩當(dāng)天新生命在母體內(nèi)的生活階段。雌性動(dòng)物妊娠后會(huì)發(fā)生一系列的復(fù)雜變化。為了在配種以后能及時(shí)掌握雌性動(dòng)物是否妊娠、妊娠的時(shí)間及胎兒和生殖器官的異常情況,采用臨床和實(shí)驗(yàn)室的方法進(jìn)行檢查,稱之為妊娠檢查,又稱妊娠診斷(pregnancydiagnosis)0通過(guò)妊娠檢查可以及時(shí)地對(duì)雌性動(dòng)物加強(qiáng)護(hù)理或再次配種,以保護(hù)母體和胎兒正常發(fā)育,避免胎兒早期死亡和流產(chǎn)及減少繁育時(shí)間的損失。妊娠檢查不但要求準(zhǔn)確,且及早確診更為重要。目前妊娠診斷的方法,基本上分為臨床檢查法和實(shí)驗(yàn)室檢查法兩大類。臨床檢查法可分為:①檢查由內(nèi)分泌變化所派生的及懷孕有關(guān)的母體變化,如試情法(觀察動(dòng)物是否返情)、陰道檢查法(陰道是否有妊娠變化)、腹部檢查法(觀察雌性動(dòng)物腹部變化)、子宮檢查法(直腸觸診子宮)等。②直接或間接檢查是否有胎兒、胎膜和胎水存在。如直腸檢查法、腹壁觸診法、聽診(胎兒心音)法、超聲波檢查法、X線檢查法等。實(shí)驗(yàn)室診斷法可分為:①檢查與妊娠有關(guān)的母體激素變化,如血液(乳)孕酮的測(cè)定等。②檢查由內(nèi)分泌變化所派生的母體變化,如檢查子宮頸和陰道粘液的理化性狀、利用外源激素檢查雌性動(dòng)物是否產(chǎn)生某種特有反應(yīng)等。③檢查由于胚胎出現(xiàn)而產(chǎn)生的某種特有物質(zhì),如免疫學(xué)診斷。④檢查由于妊娠雌性陰道上皮出現(xiàn)的細(xì)胞學(xué)變化,如陰道活體組織學(xué)檢查等。(一)外部檢查法雌性動(dòng)物交配后若妊娠一般會(huì)表現(xiàn)為發(fā)情周期停止、食欲增進(jìn)、體重會(huì)逐步增加、腹部逐漸膨大。這一現(xiàn)象越到妊娠后期越明顯,早期的體重增加和腹部膨大應(yīng)與生長(zhǎng)和腹脂沉積相區(qū)別。另一種就是采用試情法,如在雌兔配種后第5天,將其放入雄兔籠中,讓雄兔追逐、爬跨母兔,若母兔不愿接受交配夾尾縮伏一角,說(shuō)明有妊娠可能,配種后第16天再進(jìn)行一次試情,同時(shí)結(jié)合觀察動(dòng)物的食欲、體重等變化加以確診。此法過(guò)于消耗時(shí)間,且不能肯定,因而對(duì)其外形觀察只用于后期檢查供參考。(二)摸胎法摸胎法是通過(guò)觸摸雌性個(gè)體腹部子宮內(nèi)胎兒的存在來(lái)進(jìn)行妊娠診斷的方法。適用于兔、犬、貓等及較小的非人靈長(zhǎng)類。如兔在配種后1周即可進(jìn)行。將雌性兔站立固定,兔頭朝向術(shù)者胸部,右手作“八”字形自前向后輕輕沿腹壁后部?jī)膳悦?,腹部柔軟如綿,則是沒有妊娠。若摸到花生米樣(直徑為8mm-10mm)大小能滑動(dòng)的肉球(交配10天-12天為小核桃大小,15天雞蛋黃大?。瑒t可作妊娠判斷。但在7天-10天時(shí),應(yīng)與圓形(多為扁橢圓形)指壓無(wú)彈性、不光滑且分布面積廣而不規(guī)則的糞球相區(qū)分。摸胎時(shí)動(dòng)作要輕,以免造成流產(chǎn)。犬、貓一般在配種后,用手在最后兩對(duì)乳頭上方的腹壁外前后滑動(dòng),看是否有硬物,若妊娠則能摸到早期胎兒(呈卵圓形),若呈彌漫感則未妊娠。犬在20天—35天、貓?jiān)?8天-30天易觸診。(三)陰道檢查法陰道檢查法與發(fā)情周期鑒定的方法相同。觀察雌性動(dòng)物的發(fā)情周期是否消失,結(jié)合觀察陰道粘膜的色澤、干濕狀況、粘液性狀等加以判定。但此法易與假孕及雌性動(dòng)物不正常發(fā)情相混淆,一般僅用陰道涂片作為對(duì)嚙齒類動(dòng)物妊娠診斷的參考。為了某些研究目的,有時(shí)須確切地知道雌性動(dòng)物何時(shí)發(fā)生了交配。對(duì)此除了采用人工交配外;在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中常用陰道涂片法,以觀察雌性動(dòng)物陰道內(nèi)是否存在精子,從而確定是否交配。但這僅能說(shuō)明雌雄動(dòng)物已交配,不能證明動(dòng)物已受孕。大、小鼠可以采用陰道栓檢查法。大鼠和小鼠一般在交配后2小時(shí)-4小時(shí),在雌鼠的陰道內(nèi)有明顯可見的栓狀物。大鼠多在陰道內(nèi)停留12小時(shí)-24小時(shí)即排出,排出物一般很小,呈圓錐狀,奶油色,底面大小約3mm2-5mm2。檢查時(shí)一般采用在大鼠籠的網(wǎng)狀底板下放一張干凈的紙,于第二天檢查是否有陰道栓。若發(fā)現(xiàn)有陰道栓說(shuō)明已發(fā)生了交配。雌性小鼠一般不排出陰道栓,作陰道檢查時(shí)易于發(fā)現(xiàn)。若我們已檢查有陰道栓存在,則大鼠和小鼠的受孕幾率較高。豚鼠交配后會(huì)在陰道內(nèi)留有精子和陰道栓。金黃地鼠在交配后第5天和第9天檢查雌性陰道分泌物,若沒有觀察到奶油色、不透明、能拉長(zhǎng)的粘性分泌物存在,則可判斷已交配。(四)直腸檢查法直腸檢查法適用于較大的非人靈長(zhǎng)類及用于實(shí)驗(yàn)的大動(dòng)物。其方法是將手的食指、中指或手臂通過(guò)直腸伸入雌性動(dòng)物體內(nèi),觸摸動(dòng)物的子宮以檢查胎兒的有無(wú)與大小,從而判定是否妊娠。如獼猴在交配后1月左左,由助手將猴固定,用右手的中指(戴上醫(yī)用手套,涂凡士林油膏)輕輕伸入直腸,隔著腸壁按摸子宮,左手托住下腹部??梢罁?jù)子宮的大小、形狀和軟硬度確定是否妊娠。未孕猴子宮較軟,扁平狀,體重4.5kg-5kg的恒河猴子宮約1.5cmXI.5cm。受孕后30天左右子宮由較硬轉(zhuǎn)為很軟。(五)超聲波檢查法超聲波檢查法是利用超聲可以在機(jī)體內(nèi)定向傳播和遇到不同聲阻抗的組織界面時(shí)能產(chǎn)生反射的原理,將妊娠早期的胎囊、少量胎水、胎體及胎心搏動(dòng)檢測(cè)出來(lái)(A型超聲);或利用多普勒(doppler)效應(yīng)的原理,將子宮動(dòng)脈、胎兒動(dòng)脈以及胎心的搏動(dòng)和血流檢測(cè)出來(lái)(D型超聲);或通過(guò)斷層掃查將子宮和胎體的切面,以圖像顯示出來(lái)B型超聲)。這是直接檢查,診斷可以早而準(zhǔn)。目前較多使用的為B型超聲,又簡(jiǎn)稱“B超”。其檢查分為三步:動(dòng)物固定;探查部位的確定和處理;探查。探查所選用的超聲頻率一般為2.5MHz-5MHz之間。(六)孕酮含量測(cè)定法雌性動(dòng)物配種后,若未妊娠,則血漿孕酮含量因黃體退化而下降,若妊娠則保持不變或上升。測(cè)定一般采用外周血孕酮含量,測(cè)定方法采用放射免疫測(cè)定法(RIA)和酶聯(lián)免疫測(cè)定法(ELISA)。如綿羊配種后20-25天,血漿中孕酮含量大于1.5ng/ml,不孕準(zhǔn)確率為100%,妊娠準(zhǔn)確率為93%。兔用放射免疫測(cè)定血漿孕酮濃度大于7ng/ml為妊娠評(píng)判標(biāo)準(zhǔn),人工授精后第6天即達(dá)此標(biāo)準(zhǔn)。(七)青蛙試驗(yàn)適用于判斷猴的妊娠。受孕猴的尿中含有絨毛膜促性腺激素,能刺激青蛙的睪丸排出大量的精子。試驗(yàn)前應(yīng)檢查確定青蛙的尿液中不含有精子。取被檢猴清晨的尿液,過(guò)濾后取3ml-5m1,注入青蛙的背部或腹部的皮下,經(jīng)2小時(shí)-4小時(shí),檢查青蛙尿液中有無(wú)精子(因雄性青蛙的精管與腎臟相連,所以排精后能在尿液中查到精子)。此法也可用蟾蜍進(jìn)行。除上述一些妊娠診斷方法外,還有免疫學(xué)診斷、X射線法、PMSG生物學(xué)檢查法、子宮頸——陰道粘膜檢查、激素反應(yīng)法、眼球鞏膜血管檢查、腹腔鏡檢查、尿液雌激素檢查、胎兒心電圖檢查等方法。應(yīng)根據(jù)具體實(shí)際能力和條件選擇適合的方法進(jìn)行妊娠檢查。第五節(jié)分組與編號(hào)一、編號(hào)標(biāo)記方法1.體表顏料著色法一般對(duì)短期試驗(yàn)的白色動(dòng)物可用顏料涂搽被毛的方法標(biāo)記。常用的涂染化學(xué)藥品有:紅色:0.5%中性紅或品紅溶液;黃色:3%-5%苦味酸溶液或80%-90%苦味酸酒精飽和液;咖啡色:2%硝酸銀溶液;黑色:煤焦油酒精溶液。用毛筆將苦味酸或中性紅涂在動(dòng)物體表的不同部位,編號(hào)的原則是先左后右,從前到后。即左前腿上部為1,左腰部為2,左后腿為3,頭部為4,背部為5,尾部為6,右側(cè)從前至后依次為7、8、9。用黃色表示個(gè)位數(shù),紅色表示十位數(shù)。此方法可編1-99號(hào),適用于白色大小鼠、豚鼠和家兔。2.個(gè)體耳號(hào)標(biāo)記法用耳號(hào)鉗在耳上打洞或用剪刀在耳邊緣上剪缺口,以耳緣缺口為個(gè)位數(shù),左耳前緣為1,左耳上緣為2,左耳下緣為3,右耳前緣為4,上緣為5,下緣為6。以耳上孔洞為十位數(shù),左耳前緣10,側(cè)緣為20,下緣為30;右耳依次為40,50,60。依據(jù)不同缺口和孔洞位置的組合,可編碼1-99號(hào)。嚙齒類動(dòng)物和豬的編號(hào)常用此法。3.個(gè)體斷趾標(biāo)記法新生仔鼠可根據(jù)前肢4趾,后肢5趾的切斷位置來(lái)標(biāo)記,后肢從左到右表示1-10號(hào),前肢從左到右表示20-90號(hào),11-19號(hào)用切斷后肢最右趾加后肢其它相應(yīng)的1-9號(hào)來(lái)表示。切斷趾時(shí),應(yīng)斷其1段趾骨,不能只斷指尖,以防傷口痊愈后辨別不清。此法亦可編成1-99號(hào),多用于大小鼠。4.耳號(hào)鉗標(biāo)記法此方法是用市場(chǎng)所售的專用耳號(hào)鉗進(jìn)行標(biāo)記,其耳號(hào)鉗有兩種,一種是號(hào)碼針加墨,一種是用固定耳號(hào)牌。前者多用于兔、狗的編號(hào),后者多用于狗、貓、豬、羊等動(dòng)物。使用時(shí),在耳內(nèi)側(cè)無(wú)血管的部位用酒精或碘酒消毒,所編號(hào)碼調(diào)整好加墨后,夾刺耳內(nèi)側(cè)。耳號(hào)牌用專用耳鉗穿夾到耳上。5.掛牌法制作印有不同數(shù)字標(biāo)記的金屬(多為鋁質(zhì)材料)標(biāo)牌,固定于犬、羊的項(xiàng)鏈上,禽類為鋁條號(hào)碼固定于翅膀上,此法清楚,便于觀察,但要防止弄傷動(dòng)物或丟失。第六節(jié)常規(guī)采血方法大、小鼠可通過(guò)頸靜脈、頸動(dòng)脈、股靜脈、股動(dòng)脈、心臟、尾靜脈和眼眶進(jìn)行采血,也可斷頭采血。家兔則可通過(guò)心臟、耳中央動(dòng)脈、耳緣靜脈、外頸靜脈、后肢脛部皮下靜脈、股靜脈等處采血。一、大、小鼠的采血方法(一)大、小鼠的頸靜脈或頸動(dòng)脈采血可將大、小鼠麻醉,固定背部,剪去頸部外側(cè)毛,分離頸靜脈或頸動(dòng)脈,并使其暴露清楚,用注射針抽取即可。也可用鑷子將頸靜脈或頸動(dòng)脈挑起來(lái),用剪刀切斷,直接用注射器或試管吸取流出的血液。(二)大、小鼠的股靜脈或股動(dòng)脈采血將大、小鼠麻醉,固定背部,切開一側(cè)腹股溝的皮膚,作股靜脈和股動(dòng)脈暴露分離術(shù),用注射針取血,如需連續(xù)重復(fù)抽取,取血部位要盡量從遠(yuǎn)心端開始。(三)大、小鼠的心臟采血將大、小鼠仰臥固定于固定板上,剪去心前區(qū)部位的毛,并用碘酒、酒精消毒皮膚,在左側(cè)第3、4肋間,心跳搏動(dòng)最強(qiáng)處用注射器的針頭刺入心腔,血液可借助血壓自動(dòng)進(jìn)入注射器,也可切開胸部,用針頭直接刺入心臟抽取。(四)大、小鼠的尾部采血尾部采血有兩種方法,一種是將大、小鼠尾尖剪掉1-2mm,用手自尾根部向尖端按摩,血就自尾尖流出,但尾尖不能剪去過(guò)多,否則會(huì)不出血。操作前如將鼠尾用45°C-50°C熱水浸泡片刻,或用酒精、乙醚等擦拭,促使血管擴(kuò)張,再剪去尾尖,采血可方便些。另一種方法是采用交替切割尾靜脈方法取血,每次采血時(shí),用一鋒利的刀片在鼠尾切破一段靜脈,靜脈血即由傷口流出,每次可取0.3-0.5ml,3條尾靜脈可交替切割,并自尾尖漸向尾根方向切割。此法在大鼠進(jìn)行采血時(shí),可以在較長(zhǎng)的一段時(shí)間內(nèi)連續(xù)取血,采血量較多。(五)大、小鼠的眼眶采血先將鼠倒持,壓迫頸部,使眼球突出充血,用眼科鑷迅速挾取眼球,眼眶內(nèi)很快流出血液,用玻璃器皿收集血液。此法只適于一次性采血。但也可用毛細(xì)管或塑料管沿眼角插入眼底靜脈叢,血可自然從毛細(xì)管中流出。此法可多次采血。(六)大、小鼠斷頭取血剪掉鼠頭,立即將鼠頸向下,提起動(dòng)物,鼠血很快滴出,用容器收集。如果是采取血漿或全血,收集血的容器內(nèi)須預(yù)先放好抗凝劑。二、豚鼠的采血方法(一)耳緣剪口采血將豚鼠耳廓消毒后,用刀或刀片割破耳緣,在切口邊緣涂抹20%檸檬酸鈉溶液,阻止血凝,血即從切口處自動(dòng)流出,用容器收集。(二)心臟采血方法同大、小鼠。(三)股動(dòng)脈采血方法同大、小鼠。(四)后肢背中足靜脈取血先固定動(dòng)物,將豚鼠右或左后膝關(guān)節(jié)伸直并對(duì)著術(shù)者,術(shù)者用酒精消毒豚鼠腳背面,找出背中足靜脈后,以左手的拇指和食指拉住豚鼠的趾端,右手持注射針頭刺入靜脈,拔出針頭后即出血。采血后用紗布或酒精棉球止血。反復(fù)采血時(shí),兩后肢交替使用。三、家兔的采血方法(一)心臟取血將家兔固定在兔臺(tái)上,用手觸摸到心臟搏動(dòng)處,在第3-4肋間隙、胸骨左緣約3mm處,用注射針垂直刺入心臟,血液即隨心臟收縮而進(jìn)入注射器內(nèi)。此法每次取血不超過(guò)20-25m1,取血須迅速,縮短針頭留在心臟內(nèi)的時(shí)間,以防止血液在注射器內(nèi)凝固。(二)中央動(dòng)脈取血將兔置于兔固定筒內(nèi),取兔耳中央一條較粗、顏色較鮮紅的中央動(dòng)脈,一手固定兔耳,一手持注射器,在動(dòng)脈末端,沿動(dòng)脈平行地向心方向刺入動(dòng)脈,血即流入注射器中,此法一次抽血可達(dá)15ml;取血完畢,用酒精棉球壓迫止血。由于兔耳中央動(dòng)脈易發(fā)生痙攣性收縮,故抽血前必須先讓兔耳充分充血,在動(dòng)脈擴(kuò)張、未發(fā)生痙攣性收縮之前,立即進(jìn)行抽血。抽血針頭不要太細(xì),一般用6號(hào)針頭,針刺部位從動(dòng)脈末端開始;不要在近耳根部取血,因耳根部軟組織厚,血管游離度大,易刺透血管造成皮下出血。(三)耳靜脈采血本法為最常用的取血法之一,常用于反復(fù)取血,因此,保護(hù)耳緣靜脈發(fā)生栓塞特別重要。取血前先將兔的頭部固定(采用固定盒或由助手固定都可以),選耳靜脈清晰的一側(cè),將耳靜脈部位的毛拔去,用75%的酒精局部消毒,用手指輕輕摩擦兔耳,使靜脈擴(kuò)張,用連有5號(hào)針頭的注射器在耳緣靜脈末端刺破血管,待血液漏出取血或?qū)⑨橆^逆血流方向刺入耳緣靜脈取血,取血完畢用棉球壓迫止血。四、狗、貓的采血方法(一)后肢外側(cè)跗外靜脈、內(nèi)側(cè)隱靜脈,前肢內(nèi)側(cè)皮下頭靜脈采血將狗(貓)固定好,在后肢跗關(guān)節(jié)外側(cè)剪毛,找到跗外靜脈或大腿內(nèi)側(cè)找到隱靜脈,用碘酒、酒精消毒皮膚,術(shù)者用左手拇指和食指握緊剪毛區(qū)的上部,使下肢靜脈充盈,右手用連有6-7號(hào)針頭的注射器迅速刺入靜脈,左手放松,將針固定,以適當(dāng)速度抽血,一般每次可采血10-20ml。采集前肢內(nèi)側(cè)皮下的頭靜脈血時(shí),操作方法基本上同后肢靜脈采血。(二)股動(dòng)脈采血將狗(貓)固定在解剖臺(tái)上,使后肢向外伸直,暴露腹股溝三角,在動(dòng)脈搏動(dòng)的部位剪去被毛,消毒后,用左手中、食指探摸股動(dòng)脈跳動(dòng)部位并固定好血管,右手取連有5-6號(hào)針頭的注射器直接刺入血管。若刺入動(dòng)脈,一般可見鮮紅血液流入注射器;若未刺入動(dòng)脈,可微微轉(zhuǎn)動(dòng)一下針頭,見鮮血流出即可,待抽血完畢,用酒精棉球壓迫止血。(三)心臟采血同大、小鼠心臟采血。(四)耳緣靜脈取血同兔耳緣靜脈采血。第七節(jié)麻醉方法實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的麻醉就是用物理的或化學(xué)的方法,使動(dòng)物全身或局部暫時(shí)痛覺消失或痛覺遲鈍,以利于進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。在進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí),用清醒狀態(tài)的動(dòng)物當(dāng)然更接近生理狀態(tài),但實(shí)驗(yàn)時(shí)各種強(qiáng)刺激(疼痛)持續(xù)地傳入動(dòng)物大腦,會(huì)引起大腦皮質(zhì)的抑制,使其對(duì)皮質(zhì)下中樞的調(diào)節(jié)作用減弱或消失,致使動(dòng)物機(jī)體發(fā)生生理機(jī)能障礙影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,甚至因而導(dǎo)致休克或死亡。另一方面,許多實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性情兇暴,容易傷及操作者,需要實(shí)施麻醉。此外,從人道主義角度,麻醉也是動(dòng)物保護(hù)所必須采取的措施。一、麻醉類型與麻醉方法實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的麻醉可分為全身麻醉和局部麻醉兩種類型。兩種類型麻醉的方法各不相同。(一)全身麻醉的方法全身麻醉的方法常用的主要有吸入麻醉和非吸入麻醉。1.吸入麻醉吸入麻醉是將揮發(fā)性麻醉劑或氣體麻醉劑,由動(dòng)物經(jīng)呼吸道吸入體內(nèi)從而產(chǎn)生麻醉效果的方法。吸入麻醉藥物常見的有乙醚、安氟醚、三氟乙烷等。由于乙醚麻醉的優(yōu)點(diǎn)多,如麻醉深度易于掌握,比較安全,而且麻醉后恢復(fù)比較快,所以多選用乙醚作麻醉藥。(1)大鼠、小鼠、豚鼠的乙醚麻醉:將含有乙醚的棉球或紗布放入大燒杯內(nèi),將動(dòng)物放入,用塑料薄膜和繩封口,觀察動(dòng)物的行為。開始時(shí)動(dòng)物出現(xiàn)興奮,繼而出現(xiàn)抑制,自行倒下。當(dāng)動(dòng)物角膜反射遲鈍、肌肉緊張度降低時(shí),即可取出動(dòng)物。如果動(dòng)物逐漸開始恢復(fù)肌肉緊張(重新掙扎),則重復(fù)麻醉一次,待平靜后即可進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若實(shí)驗(yàn)時(shí)間長(zhǎng),可先將動(dòng)物固定在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,將含有乙醚棉球或紗布靠近其鼻部。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,應(yīng)注意動(dòng)物的反應(yīng),適時(shí)追加乙醚吸入量,以維持其麻醉深度和時(shí)間。貓、兔的乙醚麻醉:將乙醚倒在棉花上,放入麻醉瓶?jī)?nèi),然后將動(dòng)物投入,蓋緊瓶塞。經(jīng)過(guò)1-2分鐘左右,從動(dòng)物后腿依次出現(xiàn)麻痹現(xiàn)象,爾后失去運(yùn)動(dòng)能力,這表明動(dòng)物已進(jìn)入麻醉狀態(tài)。約隔4-6分鐘可將動(dòng)物麻醉。當(dāng)發(fā)現(xiàn)其傾斜后仍不能站立而跌倒,則說(shuō)明已進(jìn)入深度麻醉期,立刻取出動(dòng)物。此時(shí)動(dòng)物肌肉松弛,四肢緊張性明顯降低,角膜反射遲鈍,皮膚痛覺消失,可實(shí)施手術(shù)。犬的乙醚麻醉:首先將犬嘴用繩綁牢固,然后根據(jù)犬的大小,選擇合適的麻醉口罩,將紗布置入口罩內(nèi),加上乙醚。一人用手固定犬的前后肢,另外一人用膝頂住犬的胸頸部,一手捏住頭頸(但不能太用力,以防窒息),一手將口罩套在犬嘴上。開始麻醉時(shí),乙醚用量可以多些,之后逐漸減少。犬吸入乙醚后,開始處于興奮狀態(tài),出現(xiàn)掙扎,呼吸不規(guī)則,爾后就會(huì)發(fā)現(xiàn)犬的呼吸逐漸平穩(wěn),肌肉緊張度逐漸消失,角膜反射遲鈍,對(duì)皮膚刺激無(wú)反應(yīng)。這說(shuō)明犬已進(jìn)入麻醉狀態(tài),應(yīng)該除去犬嘴綁繩,開始實(shí)驗(yàn)。吸入乙醚后有時(shí)甚至發(fā)生窒息。如果發(fā)生窒息,應(yīng)暫停吸入乙醚,等呼吸恢復(fù)后再繼續(xù)吸入。隨著吸入乙醚麻醉的加深,犬的呼吸加深,肌肉緊張度增加,這時(shí)要防止吸入過(guò)量的乙醚。防止辦法是:在犬每吸入數(shù)次乙醚后,取下口罩,讓其呼吸一次新鮮空氣。由于用乙醚麻醉在較短時(shí)間內(nèi)可恢復(fù),為維持長(zhǎng)時(shí)間的麻醉,可采取下述方法追加麻醉:準(zhǔn)備一個(gè)輔助麻醉瓶,內(nèi)裝有含乙醚的脫脂棉球,在動(dòng)物麻醉變淺時(shí),可將輔助麻醉瓶套在動(dòng)物口鼻上,使其補(bǔ)吸麻醉劑。麻醉瓶可按以下方法制作:用密封透明的玻璃容器,在麻醉前放入lcm高左右的乙醚,然后投入棉球即可。輔助麻醉瓶也可以自制,可以采用離心管、試管、小燒杯等,放入乙醚、棉球待用。麻醉瓶、輔助麻醉瓶的大小,應(yīng)根據(jù)動(dòng)物的大小而定。犬和豬等大動(dòng)物在作時(shí)間長(zhǎng)的實(shí)驗(yàn)時(shí),可用麻醉機(jī)進(jìn)行氣管插管法吸入安氟醚或乙醚麻醉。2.非吸入麻醉非吸入麻醉是一種既簡(jiǎn)單方便,又能使動(dòng)物很快進(jìn)入麻醉期,而無(wú)明顯興奮期的方法。常采用注射方法,如靜脈注射、肌肉注射、腹腔注射等。靜脈注射、肌肉注射,多用于較大的動(dòng)物,如兔、貓、豬、犬等。腹腔注射多用于較小的動(dòng)物,如小鼠、大鼠、沙鼠、豚鼠等。靜脈注射的部位是:兔、貓、豬由耳緣靜脈注入,犬由后肢靜脈注入,小鼠、大鼠由尾靜脈注入。肌肉注射的部位多選臀部。腹腔注射的部位約在腹部后1/3處略靠外側(cè)(避開肝和膀胱)。由于各種動(dòng)物麻醉劑的作用長(zhǎng)短以及毒性的差別,注射時(shí),一定要控制藥物的濃度和注射量。給藥幾分鐘后動(dòng)物倒下,全身無(wú)力,反應(yīng)消失,表明已達(dá)到適宜的麻醉效果,是手術(shù)最佳時(shí)期。接近蘇醒時(shí),動(dòng)物四肢開始抖動(dòng)。這時(shí)如果手術(shù)還沒完成,就要及時(shí)將麻醉瓶放在動(dòng)物口、鼻處,給予輔助吸入麻醉。手術(shù)中如果發(fā)現(xiàn)動(dòng)物抽搐、排尿,說(shuō)明麻醉過(guò)深,是死亡的前兆,應(yīng)立刻進(jìn)行急救。做完手術(shù)后,要注意保溫,促使其清醒。3.注意事項(xiàng)麻醉前要注意的問(wèn)題:①動(dòng)物宜禁食,大動(dòng)物禁食10-12小時(shí)。②不能使用瀉劑。因?yàn)闉a劑可降低血液的堿儲(chǔ),從而增加血流和組織的酸度,在麻醉和失血狀況下,易發(fā)生酸中毒,從而降低損傷組織的抗感染能力。③用犬做長(zhǎng)時(shí)間實(shí)驗(yàn)前1小時(shí)應(yīng)灌腸,以排除積糞。④檢查麻醉劑質(zhì)量、數(shù)量是否滿足要求,麻醉固定器具是否有破按漏氣或堵塞),對(duì)過(guò)深麻醉的急救器材、藥品,也要準(zhǔn)備齊全。⑤準(zhǔn)確計(jì)算麻醉劑量。由于動(dòng)物存在個(gè)體差異,對(duì)藥物的耐受性不同,體重與所需劑量并不成正比,所以介紹的劑量?jī)H供參考使用。⑥應(yīng)考慮麻醉劑的純度。麻醉劑的純度直接影響麻醉效果,往往使用同種同劑量的麻醉劑,國(guó)產(chǎn)的產(chǎn)品麻醉效果往往不如進(jìn)口的,實(shí)際使用中要注意增加劑量。麻醉時(shí)要注意的問(wèn)題:靜脈注射必須緩慢,同時(shí)觀察肌肉緊張性、角膜反射和對(duì)皮膚疼痛的反應(yīng),當(dāng)這些活動(dòng)明顯減弱或消失時(shí),要立即停止注射,并進(jìn)行搶救。麻醉后注意的問(wèn)題:①采取保溫措施。在麻醉期間,動(dòng)物的體溫調(diào)節(jié)機(jī)能受到抑制,會(huì)出現(xiàn)體溫下降,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。②必須保持動(dòng)物氣道的通暢和組級(jí)眼球、舌、腸等器官)的營(yíng)養(yǎng)。③出現(xiàn)麻醉過(guò)深情況后,應(yīng)立刻采取搶救措施。(二)局部麻醉的方法局部麻醉的方法常用的是浸潤(rùn)麻醉。浸潤(rùn)麻醉是將麻醉藥物注射于皮膚、肌下組織或手術(shù)野深部組織,以阻斷用藥局部的神經(jīng)傳導(dǎo),使痛覺消失。進(jìn)行局部浸潤(rùn)麻醉時(shí),首先把動(dòng)物固定好,然后在實(shí)驗(yàn)操作的局部皮膚區(qū)域,用皮試針頭先作皮內(nèi)注射,形成橘皮樣皮丘。然后換局麻長(zhǎng)針頭,由皮點(diǎn)進(jìn)針,放射到皮點(diǎn)周圍繼續(xù)注射,直至要求麻醉區(qū)域的皮膚都浸潤(rùn)到為止??梢愿鶕?jù)實(shí)驗(yàn)操作要求的深度,按皮下、筋膜、肌肉、腹膜或骨膜的順序,依次注入麻藥,以達(dá)到麻醉神經(jīng)末梢的目的。二、麻醉藥物與麻醉劑用量動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中常用的麻醉藥物有兩類,即揮發(fā)性麻醉劑、非揮發(fā)性麻醉劑。揮發(fā)性麻醉劑揮發(fā)性麻醉劑包括乙醚、氟烷、甲氧氟烷、氯仿等,其中,乙醚常用于全身麻醉中的吸入麻醉。乙醚無(wú)色透明,是揮發(fā)性很強(qiáng)的液體,有特殊氣味,易燃易爆。乙醚與空氣中的氧接觸產(chǎn)生刺激性很強(qiáng)的乙醛及過(guò)氧化物,故應(yīng)該儲(chǔ)存在棕色的玻璃瓶中或鍍銅的金屬容器中,置干燥陰暗的地方。使用時(shí)必須遠(yuǎn)離火焰,用后蓋緊瓶塞,瓶塞宜采用軟木,并牢固封口。乙醚麻醉的機(jī)制主要是抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng)。由于乙醚的局部刺激作用大,引起上呼吸道粘膜分泌增加,通過(guò)神經(jīng)反射還可以擾亂呼吸、血壓和心臟的活動(dòng),易引起窒息,所以使用乙醚作吸入麻醉時(shí),應(yīng)注意使用阿托品來(lái)拮抗這一作用。此外有呼吸道疾病的動(dòng)物禁止使用乙醚麻醉。非揮發(fā)性麻醉劑1.全身麻醉劑巴比妥類:巴比妥類藥物是由巴比妥酸衍生物的鈉鹽組成,是有效的鎮(zhèn)靜及催眠劑。巴比妥類藥物很多,根據(jù)作用的時(shí)限可分為長(zhǎng)、中、短、超短時(shí)作用四大類。長(zhǎng)、中時(shí)作用的巴比妥類藥物多用于動(dòng)物臨床和抗痙藥或催眠劑,作為實(shí)驗(yàn)麻醉所使用的則屬于短、超短時(shí)作用的巴比妥類藥物。巴比妥類藥物主要作用是阻礙沖動(dòng)傳入大腦皮質(zhì),從而對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)起到抑制作用。應(yīng)用催眠劑量,對(duì)呼吸抑制影響很小,但應(yīng)用過(guò)量卻影響呼吸,因?yàn)檫^(guò)量可導(dǎo)致呼吸肌麻痹甚至死亡,同時(shí)也抑制末梢循環(huán),導(dǎo)致血壓降低,并影響基礎(chǔ)代謝,導(dǎo)致體溫降低。巴比妥鈉是最常用的一種動(dòng)物麻醉劑。呈粉狀,安全范圍大,毒性小,麻醉潛伏期短,維持時(shí)間較長(zhǎng)。既可腹腔注射,又可靜脈注射,一般用生理鹽水配制。用該藥麻醉時(shí),中型動(dòng)物多為靜脈給藥,也可腹腔給藥,小型動(dòng)物多為腹腔給藥。一般給藥應(yīng)先一次推入總量的2/3,待觀察動(dòng)物的行為,若已達(dá)到所需的麻醉深度,則不一定全部給完所有藥量。動(dòng)物的健康狀況、體質(zhì)、年齡、性別也影響給藥劑量和麻醉效果,因此,實(shí)際麻醉動(dòng)物時(shí)應(yīng)視具體情況對(duì)麻醉劑量進(jìn)行調(diào)整。氯胺酮:本品為苯環(huán)己哌啶(phencyclidine)的衍生物,其鹽酸鹽為白色結(jié)晶粉末,溶于水,微溶于乙醇,pH3.5-5.5o該麻醉劑注射后很快使動(dòng)物進(jìn)入淺睡眠狀態(tài),但不引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)深度抑制,一些保護(hù)性反射仍然存在,所以,麻醉的安全期相對(duì)高,是一種鎮(zhèn)痛麻醉劑。它主要是阻斷大腦聯(lián)絡(luò)徑路和丘腦反射到大腦皮質(zhì)各部分的路徑,一般多用于犬、貓等動(dòng)物的基礎(chǔ)麻醉和嚙齒類動(dòng)物的麻醉。本品能迅速通過(guò)胎盤屏障,影響胎兒,所以應(yīng)用懷孕的動(dòng)物時(shí)必須慎重。(3)水合氯醛:作用特點(diǎn)與巴比妥類藥物相似,能起到全身麻醉作用,是一種安全有效的鎮(zhèn)靜催眠藥。其麻醉量與中毒量很接近,所以安全范圍小,使用時(shí)要注意。其副作用是對(duì)皮膚和粘膜有較強(qiáng)的刺激作用。2.局部麻醉劑普魯卡因:為對(duì)氨苯甲酸酯,是無(wú)刺激性的局部麻醉劑,麻醉速度快,注射后1-3分鐘內(nèi)就可產(chǎn)生麻醉,可以維持30分鐘-45分鐘。普魯卡因?qū)ζつw和粘膜的穿透力較弱,需要注射給藥才能產(chǎn)生局麻作用,它可使血管輕度舒張,易被吸收入血而失去藥效。為了延長(zhǎng)其作用時(shí)間,常在溶液中加入少量腎上腺素(每100ml加入0.1%腎上腺素0.2-0.5ml)能使麻醉時(shí)間延長(zhǎng)1小時(shí)-2小時(shí)。常用1%-2%鹽酸普魯卡因溶液阻斷神經(jīng)纖維傳導(dǎo),劑量應(yīng)根據(jù)手術(shù)范圍和麻醉深度而定。貓、犬的局部麻醉用0.5%-1%鹽酸普魯卡因注射。普魯卡因的副作用:在大量藥物被吸收后,表現(xiàn)出中樞神經(jīng)系統(tǒng)先興奮后抑制。這種作用可用巴比妥類藥物預(yù)防。利多卡因:常用于表面、浸潤(rùn)、傳導(dǎo)麻醉和硬脊膜外腔麻醉。利多卡因的化學(xué)結(jié)構(gòu)與普魯卡因不同,它的效力和穿透力比普魯卡因強(qiáng)兩倍,作用時(shí)間也較長(zhǎng)。阻斷神經(jīng)纖維傳導(dǎo)及粘膜表面麻醉濃度為1%-2%。的卡因:的卡因化學(xué)結(jié)構(gòu)與普魯卡因相似,能穿透粘膜,作用迅速,1-3分鐘發(fā)生作用,持續(xù)60-90分鐘。其局麻作用比普魯卡因強(qiáng)10倍;吸收后的毒性作用也相應(yīng)加強(qiáng)。三、復(fù)蘇與搶救實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,由于過(guò)量麻醉,可導(dǎo)致一些可見的臨床表現(xiàn),應(yīng)及時(shí)采取復(fù)蘇和搶救措施。呼吸停止可出現(xiàn)在麻醉的任何一期。如在興奮期,呼吸停止具有反射性質(zhì)。在深度麻醉期,呼吸停止是由于延髓麻醉的結(jié)果,或由于麻醉劑中毒時(shí)組織中血氧過(guò)少所致。臨床癥狀呼吸停止的臨床主要表現(xiàn)是胸廓呼吸運(yùn)動(dòng)停止,粘膜發(fā)紺,角膜反射消失或極低,瞳孔散大等。呼吸停止的初期,可見呼吸淺表、頻數(shù)不等而且間歇。治療方法必須停止供給麻醉藥,先打開動(dòng)物口腔,拉出舌頭到口角外,應(yīng)用5%CO2和60%O2的混合氣體間歇人工呼吸,同時(shí)注射溫?zé)崞咸烟侨芤?、呼吸興奮藥、心臟急救藥。呼吸興奮藥此類藥物作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng),對(duì)抗因麻醉過(guò)量引起的中樞性呼吸抑制,常用的有尼可剎米、戊四氮、美解眠等。尼可剎米:尼可剎米又名可拉明,人工合成品。直接興奮呼吸中樞,安全范圍較大,適用于各種原因引起的中樞性呼吸衰竭。每次用量0.25g-0.50g,靜脈注射。大劑量可致血壓升高、心悸、心率失常、肌顫等。戊四氮:戊四氮為延髓興奮藥,能興奮呼吸及血管運(yùn)動(dòng)中樞,對(duì)抗巴比妥類及氯丙嗪等藥物過(guò)量所致的中樞性呼吸衰竭。每次用量0.1g,靜脈注射或心內(nèi)注射。可以重復(fù)使用,但大劑量可導(dǎo)致驚厥。美解眠:美解眠與戊四氮相似,作用較短,安全范圍較戊四氮寬。主要對(duì)抗巴比妥類和水合氯醛中毒。每次用量50mg,靜脈緩慢注射。過(guò)量使用可引起肌肉抽搐和驚厥。心跳停止在吸入麻醉時(shí),麻醉初期出現(xiàn)的反射性心跳停止,通常是由于劑量過(guò)大的原因。還有一種情況,就是手術(shù)后麻醉劑所致的心臟急性變性,心功能急劇衰竭所致。臨床癥狀呼吸和脈搏突然消失,粘膜發(fā)紺。心跳停止的到來(lái)可能無(wú)預(yù)兆。治療方法心跳停止應(yīng)迅速采取心臟按摩,即用掌心(小動(dòng)物用指心)在心臟區(qū)有節(jié)奏地敲擊胸壁,其頻率相當(dāng)于該動(dòng)物正常心臟收縮次數(shù)。同時(shí),注射心臟搶救藥。3.心臟搶救藥腎上腺素:腎上腺素用于提高心肌應(yīng)急性,增強(qiáng)心肌收縮力,加快心率,增加心臟排血量。用于心跳驟停急救,每次0.5mg-lmg,靜脈注射、心內(nèi)或氣管內(nèi)注射。腎上腺素也有一定的復(fù)跳作用,用于治療竇緩、室顫等。氟烷麻醉中毒禁用。碳酸氫鈉:碳酸氫鈉是糾正急性代謝性酸中毒的主要藥物。首次給藥用5%碳酸氫鈉按lml/kg-2ml/kg注射。對(duì)于心臟停跳的動(dòng)物,可于首次注射腎上腺素以后立即靜脈給藥,因?yàn)樗嶂卸镜男募?duì)兒茶酚胺反應(yīng)不良。第八節(jié)給藥途徑與方法在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,應(yīng)根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、?dòng)物種類、藥物類型來(lái)決定動(dòng)物的給藥途徑與方法。動(dòng)物的給藥方法主要分為注射法和投入法兩種,不同方法按給藥途徑又分為很多具體類型。注射法分為:皮下注射、肌肉注射、腹腔注射、腦膜下注射、腦內(nèi)注射、胸腔內(nèi)注射、腰椎內(nèi)注射、靜脈注射、關(guān)節(jié)腔注射和心內(nèi)注射。投入法可分為:鼻腔內(nèi)投入、胃腔內(nèi)投入、腸管內(nèi)投入、氣管內(nèi)投入和經(jīng)口腔投入。以下將各種動(dòng)物的主要給藥途徑和方法作一一介紹。一、嚙齒類動(dòng)物的給藥途徑和方法(一)小鼠的給藥途徑和方法灌胃(i.g.)左手固定小鼠,腹部向上。右手持灌胃器,沿體壁用灌胃針測(cè)量口角至最后肋骨之間的長(zhǎng)度,作為插入灌胃針的深度。然后經(jīng)口角插入口腔,與食管成一直線,再將灌胃針沿上腭壁緩慢插入食管2cm—3cm,通過(guò)食管的膈肌部位時(shí)略有抵抗感。如動(dòng)物安靜呼吸無(wú)異常,即可注入藥液。如遇阻力應(yīng)抽出灌胃針重新插入。一次灌注藥量0.1ml/l0g-0.3ml/l0g體重。操作宜輕柔,防止損傷食管,如藥液誤入氣管內(nèi),動(dòng)物會(huì)立即死亡。灌胃給藥的注意要點(diǎn):①動(dòng)物要固定好;②頭部和頸部保持平展;③進(jìn)針?lè)较蛘_;④一定要沿著口角進(jìn)針,再順著食管方向插入胃內(nèi);⑤決不可進(jìn)針不順就硬向里插。灌胃針可用12號(hào)注射針頭自制,如圖9-1。磨鈍針尖(有條件的話,在針尖周圍點(diǎn)焊成圓突),再稍彎曲,即成灌胃針,針長(zhǎng)5cm-7cm,直徑0.9cm-1.5mm,連接于的注射器上即成灌胃器。皮下注射(s.c)小鼠皮下注射時(shí),通常選用頸背部皮膚。操作時(shí),先用酒精棉球消毒需注射部位的皮膚,再將皮膚提起,使注射針頭與皮膚成一定角度刺入皮下。進(jìn)針時(shí),先沿體軸從頭部方向刺入皮下,再沿體軸方向?qū)⒆⑸溽樛七M(jìn)5mm-l0mm左右。把針尖輕輕向左右擺動(dòng),容易擺動(dòng)則表明已刺入皮下。然后輕輕抽吸,如無(wú)回流物就緩慢注射藥物。注射完畢后,緩慢拔出注射針,稍微用手指壓一下針刺部位,以防止藥液外漏。還有一種注射方法,熟練者可把小鼠放在金屬網(wǎng)上,一只手拉住鼠尾,由于小鼠以其習(xí)慣向前方移動(dòng),在此狀態(tài)下,易將注射針刺入背部皮下,進(jìn)行注射。這種方法可用于大批量動(dòng)物注射。小鼠皮下一次注射量為0.5ml/只-1.0ml/只。皮內(nèi)注射(i.d)此法常用于觀察皮膚血管的通透性變化及觀察皮內(nèi)反應(yīng),多用于接種、致敏實(shí)驗(yàn)等。皮內(nèi)注射通常選用背部脊柱兩側(cè)的皮膚。操作時(shí),先將注射部位及其周圍的被毛剪去,酒精棉球消毒局部。然后用左手將皮膚捏成皺襞,右手持有5號(hào)針頭的注射器,使針頭與皮膚呈30°角刺入皮下,然后將針頭向上挑起并稍刺入,即可注射。注射后,可見皮膚表面鼓起一小丘。注射后5分鐘再拔出針頭,否則藥液會(huì)從針孔漏出。通常小鼠皮內(nèi)一次注射量不超過(guò)0.05m1。雄性動(dòng)物皮膚緊密,皮內(nèi)注射時(shí)較雌性動(dòng)物難度大,這一點(diǎn),實(shí)驗(yàn)者應(yīng)予以注意。肌肉注射(i.m)因小鼠肌肉較少,一般不作肌肉注射。如實(shí)驗(yàn)必須作肌肉注射時(shí),由助手抓住小鼠兩耳和頭部皮膚,并提起。操作者用左手抓住小鼠一側(cè)后肢,右手取連有6號(hào)針頭的注射器,將針頭刺入大腿外側(cè)肌肉,將藥液注入。小鼠一側(cè)藥量不超過(guò)0.1ml。腹腔注射(i.p)左手用沾濕的拇指和食指緊緊抓住頸部背側(cè)的松弛皮膚,手掌成杯狀緊握鼠背使得腹部皮膚伸展,同時(shí)用小指壓住尾根,固定好動(dòng)物。使小鼠腹部抬高,右手將注射器的針頭(5號(hào))刺入皮膚。進(jìn)針部位是距離下腹部腹中線稍向左或右lmm的位置。針頭到達(dá)皮下后,繼續(xù)向前進(jìn)針3mm-5mm,再以45°刺入腹肌,針尖通過(guò)腹肌后抵抗力消失。固定針尖,緩緩注入藥液。如圖9-2。為避免刺破內(nèi)臟,可將動(dòng)物頭部放低,尾部提高,使臟器移向橫膈處。小鼠的一次注射量為0.1ml/l0g體重-0.2ml/l0g體重。靜脈注射(i.v)小鼠一般采用尾靜脈注射法。小鼠尾部血管在背、腹側(cè)及左右兩側(cè)均有集中分布,每側(cè)均由數(shù)對(duì)伴行的動(dòng)、靜脈組成的血管叢。在這些血管中有四根十分明顯:背腹各有一根動(dòng)脈,兩側(cè)各有一根靜脈。兩側(cè)尾靜脈比較容易固定。操作時(shí),先將動(dòng)物固定在固定器內(nèi)或扣在燒杯中,使尾巴外露,尾部用45°C-50°C的溫水浸泡半分鐘或用酒精擦拭使血管擴(kuò)張,并可使表皮角質(zhì)軟化,然后將尾部向左或向右擰90°,使一側(cè)尾靜脈朝上,以左手食指和中指捏住鼠尾上下,使靜脈充盈,用無(wú)名指從下面托起尾巴,以拇指和小指夾住尾巴的末梢,右手持注射器(連5號(hào)細(xì)針頭),使針頭與靜脈平行(小于30°),從尾下四分之一處(約距尾尖2mm-3mm)進(jìn)針,刺入后先緩注少量藥液,如無(wú)阻力,表示針頭已進(jìn)入靜脈,可繼續(xù)注入。一般推進(jìn)速度為0.05ml/秒-0.10ml/秒,一次注射量為0.05ml/l0g體重-0.25ml/l0g體重。注射完畢后把尾巴向注射側(cè)彎曲以止血。如需反復(fù)注射,應(yīng)盡可能從尾末端開始,以后向尾根部方向移動(dòng)注射。腦內(nèi)注射此法常用于微生物學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn),將病原體等接種于被檢動(dòng)物腦內(nèi),觀察接種后的各種變化。給小鼠腦內(nèi)注射時(shí),先將其額部消毒。操作者用左手拇指及食指抓住鼠兩耳和頭皮并固定好動(dòng)物,右手用套有塑料管、針尖露出2mm長(zhǎng)的5號(hào)針頭,直接由額部正中刺入腦內(nèi),注入藥液或接種物。另一種注射方法是,將小鼠用乙醚輕度麻醉,使注射器和額頂顱骨大約保持45°角,在中線外側(cè)2mm處刺入注射針。因該部位顱骨較薄,插入注射針毫不費(fèi)力。一次注射量為0.02ml/只-0.03ml/只。涂布給藥小鼠常采用浸尾方式經(jīng)尾皮給藥,用以定性地判定藥物或毒物經(jīng)皮膚的吸收作用。給藥前先將鼠放入特制的固定盒內(nèi),露出尾巴。然后將小鼠尾巴穿過(guò)小試管軟木塞小孔,插入裝有藥液或受檢液體的試管內(nèi),浸泡2小時(shí)-6小時(shí)(視藥物或毒物的毒性及毒理作用效果而定),并觀察其中毒癥狀。如是毒物,實(shí)驗(yàn)時(shí)要特別注意防止中毒。因此,要將試管的軟木塞塞緊(必要時(shí)可用凡士林或蠟封。亦可在受檢液體表面加上一層液體石蠟)。尾巴通過(guò)的小孔也應(yīng)絕對(duì)嚴(yán)密。還可在通風(fēng)櫥的壁上鉆一個(gè)相當(dāng)于尾根部大小的小孔,將受檢液體置于通風(fēng)櫥內(nèi),動(dòng)物尾巴通過(guò)該小孔,進(jìn)行浸尾實(shí)驗(yàn),整個(gè)尾巴長(zhǎng)度的3/4浸入藥液中,而身體部分仍留在通風(fēng)櫥外。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中小鼠尾部應(yīng)用膠布或其他辦法予以固定。呼吸道給藥呈粉塵、氣體、蒸氣或霧等狀態(tài)存在的藥物或毒氣,均需通過(guò)呼吸道給藥。小鼠呼吸道給藥時(shí),用一體積為20L-25L具磨口瓶塞的廣口瓶,將小鼠放入瓶?jī)?nèi)(每只小鼠肺通氣量為2.5L/h,接觸兩小時(shí),每瓶可放5只小鼠)。然后在瓶中懸掛一滴藥裝置(由三層濾紙串在一起),在第一層濾紙上滴上規(guī)定量的藥物或毒物,迅速蓋上瓶蓋,并用蠟封口,搖勻。接觸2小時(shí),并觀察記錄小鼠的藥物反應(yīng)或中毒癥狀。腳掌注射法小鼠腳掌注射時(shí)一般取后腳掌,因前腳掌需用以取食。注射時(shí),先將小鼠需注射的腳掌消毒,然后將針尖刺入腳掌約5mm,推注藥液。一次最大注射量為0.25ml。注意不要使用福氏完全佐劑,因?yàn)楦J贤耆魟┳⑷肽_掌后會(huì)使腳掌部嚴(yán)重腫脹、潰爛甚至壞死。(二)大鼠的給藥途徑和方法1.灌胃左手按徒手固定方式固定大鼠,使大鼠伸開兩前肢,手掌握住大鼠背。右手持灌胃器,沿體壁用灌胃針測(cè)量口角至最后肋骨之間長(zhǎng)度,約為插入灌胃針的深度。操作時(shí)從大鼠口角插入口腔內(nèi),然后用灌胃針壓其舌部,使口腔與食道成一直線,再將灌胃針沿上腭壁輕輕進(jìn)入食道。注藥前應(yīng)先回抽注射器,證明未插入氣管(無(wú)空氣逆流)方可注入藥液。一次灌胃量為l-2ml/100g體重。大鼠灌胃的注意要點(diǎn):①抓牢動(dòng)物后使其頭部和頸部保持一直線;②一定要沿著口角進(jìn)針,再順著食管方向插入胃內(nèi);③決不可進(jìn)針不順就硬向里插,否則會(huì)造成動(dòng)物死亡。大鼠灌胃器可用5ml-10ml的注射器接長(zhǎng)6cm-8cm、直徑lmm-2mm的灌胃針制成。液體藥物和流汁藥物灌胃時(shí),可用前端點(diǎn)焊成圓突的灌胃針。粉狀藥物灌胃時(shí),可用前端裝有膠囊套管的灌胃針。灌胃前,先將粉狀藥物裝入膠囊,然后將裝有藥物的膠囊塞入套管中灌胃。有些情況下,也可用灌胃管,如圖9-3。慢性試驗(yàn)需長(zhǎng)期給藥,或手術(shù)后不能主動(dòng)進(jìn)食的動(dòng)物,可手術(shù)裝置胃管插管。即以一根約1.27cm長(zhǎng)的4.5號(hào)不銹鋼針頭,一端連接鼻飼管,經(jīng)鼻孔插入胃中,一端以手術(shù)方法埋于鼻梁皮下,延伸至額部連接一橡膠管后由皮內(nèi)穿出,供注入藥物或食物用。該裝置也可用于抽取胃液。2.皮下注射大鼠皮下注射時(shí),通常選在左側(cè)下腹部或后腿皮膚處。操作時(shí),先用酒精棉球消毒需注射部位的皮膚,再將皮膚提起,用注射針頭穿刺入皮下。一般先沿縱軸方向刺入皮膚,再沿體軸方向?qū)⒆⑸溽樛七M(jìn)5mm-10mm左右。若左右擺動(dòng)針尖很容易,則表明已刺入皮下。然后輕輕抽吸,若無(wú)回流物,即可緩緩注入藥物。注射后,緩慢拔出注射針,稍微用手指壓一下針刺部位,以防止藥液外漏。一次注射量不超過(guò)lml/100g體重。3.皮內(nèi)注射大鼠皮內(nèi)注射通常選用背部脊柱兩側(cè)的皮膚。操作時(shí),先將動(dòng)物注射部位及其周圍的被毛用去毛劑去除,酒精棉球局部消毒。然后用左手將皮膚捏成皺襞,右手持有4號(hào)針頭的注射器,將針頭與皮膚呈30°角刺入皮下,然后使針頭向上挑起并稍刺入,即可注射。注射后,可見皮膚表面鼓起一小丘。注射后5分鐘再拔出針頭,否則藥液會(huì)從針孔漏出。大鼠一次注射量為0.1m1。大鼠皮內(nèi)注射通常選擇雌性大鼠進(jìn)行,因雄性大鼠比雌性大鼠皮膚緊密,注射難度較大。4.肌肉注射因大鼠肌肉較少,一般不作肌肉注射。如有必要作肌肉注射時(shí),助手固定大鼠,操作者用5號(hào)針頭的注射器,將針頭刺入大腿內(nèi)側(cè)或外側(cè)肌肉,將藥液注入。大鼠一側(cè)用藥量不超過(guò)0.5m1。肌肉注射一般選擇股二頭肌肉注射,但應(yīng)避免傷及坐骨神經(jīng),否則會(huì)導(dǎo)致后肢癱瘓。5.腹腔注射腹腔注射時(shí),用左手的大拇指、食指和中指從大鼠的前肢和頭部后面抓住大鼠,既要緊又要輕柔,同時(shí)用身體抵住大鼠的兩后肢使之固定,使腹部向上并伸展。右手持注射器(用5號(hào)針頭)在距下腹部腹中線稍左或右1mm的位置將針頭刺入皮膚。針頭到達(dá)皮下后,再向前進(jìn)針3mm-5mm后,再以45°角刺入腹腔,針尖通過(guò)腹肌后抵抗力消失。固定針尖不動(dòng),緩緩注入藥液。為避免刺破內(nèi)臟,可將動(dòng)物頭部稍低,使臟器移向頭部方向。大鼠的一次注射量為lml/100g體重-2ml/100g體重。6.靜脈注射(1)尾靜脈注射:大鼠尾部血管與小鼠情況類似,在背、腹側(cè)及左右兩側(cè)均有集中分布,每側(cè)均由數(shù)對(duì)伴行的動(dòng)、靜脈組成的血管叢。在這些血管中有四根十分明顯:背腹各有一根動(dòng)脈,兩側(cè)各有一根靜脈。兩側(cè)尾靜脈比較容易固定。大鼠尾部皮膚常呈鱗片狀角質(zhì)化,因而將大鼠固定露出尾巴后,需先用酒精棉球強(qiáng)擦,使血管擴(kuò)張,并可使表皮角質(zhì)軟化。然后,將尾部向左或向右擰90°,此時(shí)尾部表面靜脈怒張,以左手拇指和食指捏住鼠尾兩側(cè),用中指從下面托起尾巴,以無(wú)名指和小指夾住尾巴的末梢,右手持注射器(帶5號(hào)針頭),使針頭與靜脈接近平行,從尾下五分之一處(約距尾尖3mm-4mm)處進(jìn)針,此處皮薄易于刺入。先緩注少量藥液,如無(wú)阻力,可繼續(xù)注入。一般推進(jìn)速度為0.05ml/秒-0.1ml/秒,一次注射量為0.5ml/l00g-1.0ml/l00g體重。如需反復(fù)注射,應(yīng)盡可能從末端開始,以后向尾根部方向移動(dòng)注射。陰莖靜脈注射:這是目前大鼠靜脈輸液、給藥的一種常用方法。將雄性大鼠麻醉后仰臥或側(cè)臥,翻開包皮,拉出陰莖,背側(cè)陰莖靜脈非常粗大、明顯,沿皮下直接刺入。淺背側(cè)跖靜脈注射:進(jìn)行左后肢的淺背側(cè)跖靜脈注射時(shí),助手用左手抓住大鼠的頸背部呈仰臥位(拇指按住右前肢,中指按住左前肢,食指抓住頭頸部背側(cè)皮膚,中指、無(wú)名指和手掌抓住背部皮膚),用右手的拇指和食指夾住大鼠的左后肢的大腿部,同時(shí)用右手的中指和無(wú)名指夾住動(dòng)物的尾部。操作者用酒精棉球清洗、消毒左后肢,用注射針對(duì)準(zhǔn)擴(kuò)張的淺背側(cè)跖靜脈血管刺針注射。舌下靜脈注射:大鼠舌下靜脈粗大,可用于給藥。注射時(shí),先麻醉好動(dòng)物,再拉出舌頭,找到舌下靜脈,直接注入藥液。此外,大鼠、豚鼠等小動(dòng)物,以及兔、犬、貓等中型動(dòng)物的靜脈注射,快速給藥可用注射器人工推注藥液而緩慢給藥或連續(xù)給藥時(shí),可用微量注射泵進(jìn)行。微量注射泵具有定時(shí)、定量、定速等功能,使用方便,操作簡(jiǎn)單。微量注射泵國(guó)內(nèi)有生產(chǎn),型號(hào)也有多種。7.腦內(nèi)注射此法常用于微生物學(xué)研究,將病原體等接種于被檢動(dòng)物腦內(nèi),觀察接種后的各種變化。注射時(shí),用左手固定動(dòng)物,對(duì)其額部消毒。右手用套有塑料管、針尖露出2mm長(zhǎng)的6號(hào)針頭,直接由額部正中刺入腦內(nèi),注入藥物或接種物。也可將大鼠用乙醚輕度麻醉,額部消毒后,注射器和額頂顱骨大約保持45°,在中線外側(cè)2mm處刺入注射針。此部位顱骨較薄,插入注射針毫不費(fèi)力。腦內(nèi)注射一次注射量為0.02ml/只-0.03ml/只。8.涂布給藥大鼠涂布給藥采用浸尾方式經(jīng)尾皮給藥。給藥前先將大鼠放入特制的固定盒內(nèi),露出尾巴。然后將大鼠尾巴穿過(guò)小試管軟木塞小孔,插入裝有藥液或受檢液體的試管內(nèi),浸泡2小時(shí)-6小時(shí)(視藥物或毒物的毒性及毒理作用效果而定),并觀察其藥物反應(yīng)。操作方法同小鼠。9.呼吸道給藥將大鼠置于裝置中,由瓶口用氣泵輸入帶有藥物的空氣,氣體由瓶體上部排出。10.鼻內(nèi)給藥將大鼠麻醉后,用左手食指和拇指抓住大鼠雙耳部,翻轉(zhuǎn)大鼠身體置于左手掌中,使其鼻尖朝向操作者。右手持注射器,將接種物逐滴滴入大鼠鼻內(nèi)。一次給藥量為0.05ml/只-0.1ml/只。豚鼠的給藥途徑和方法1.經(jīng)口給藥固體藥物的投入:給固體藥物時(shí),把豚鼠放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,用左手從背部向頭部握緊并固定動(dòng)物,以拇指和食指壓迫左右口角使其口張開。實(shí)驗(yàn)者把藥物放在豚鼠舌根處,使動(dòng)物迅速閉口而自動(dòng)咽下。液體藥物的投入:由助手用左手將豚鼠腰部和后腿固定,用右手固定前腿。實(shí)驗(yàn)者將灌胃管沿豚鼠上腭壁插入食道。也可用木制開口器把導(dǎo)尿管經(jīng)開口器中央孔插入胃內(nèi)。這兩種方法都要先回抽一下注射器,如注射器內(nèi)有氣泡說(shuō)明灌胃管或?qū)蚬懿逶跉夤軆?nèi),必須拔出重插。證實(shí)回抽注射器無(wú)空氣后,再慢慢注入藥液。最后注入生理鹽水2ml,將管內(nèi)殘留的藥液沖出,以保證投藥量的準(zhǔn)確。灌胃管或?qū)蚬懿迦肷疃纫话銥?cm,一次灌胃量為1.6ml/l00g體重-2.0ml/l00g體重。2.皮下注射豚鼠皮下注射一般是選用大腿內(nèi)側(cè)面、背部、肩部等皮下脂肪少的部位,通常在豚鼠大腿內(nèi)側(cè)面注射。操作時(shí),由助手將豚鼠固定在手術(shù)臺(tái)上,操作者左手固定注射側(cè)的后肢,并充分提起皮膚。右手持注射器(帶有6號(hào)針頭)以45°將注射針刺入皮下。確定針在皮下后緩緩注入藥液。注射完畢后,用手指壓住并輕揉刺入部位少許時(shí)間。3.皮內(nèi)注射豚鼠皮內(nèi)注射一般選用背部脊柱兩側(cè)皮膚。進(jìn)行注射前應(yīng)先剪毛,然后用硫化鋇或除毛霜除毛,間隔一天以后進(jìn)行注射。注射時(shí),先用左手將除毛的皮膚提起,右手持帶有5號(hào)針頭的注射器,使針頭與皮膚呈30°角,沿皮膚淺表層刺入皮膚內(nèi),緩緩注入藥液。豚鼠一次注射量為0.1ml。4.肌肉注射注射部位一般是選用后肢大腿外側(cè)肌肉,注射時(shí)先讓助手將豚鼠放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,左手掌將豚鼠從頸部向頭部蒙住頭頸部,右手固定后肢。實(shí)驗(yàn)者用酒精棉球?qū)⒆⑸洳课幌竞?,?號(hào)針頭進(jìn)行肌肉注射。豚鼠一側(cè)用藥量不超過(guò)0.5ml/只。5.腹腔注射腹腔注射時(shí),先固定好豚鼠使其腹部向上并伸展。右手持注射器(用5號(hào)針頭)將針頭刺入皮膚。其部位是從下腹部稍偏左或右處進(jìn)針。針頭到達(dá)皮下后,再向前進(jìn)針5mm-l0mm后,再以45°角刺入腹腔,針尖通過(guò)腹肌后抵抗力消失。固定針尖不動(dòng),緩緩注入藥液。為避免刺破內(nèi)臟,可將動(dòng)物頭部稍低,使臟器移向頭部方向。豚鼠的一次注射量不超過(guò)4ml。6.靜脈注射常用豚鼠靜脈注射部位有:耳緣靜脈、外側(cè)跖靜脈。(1)耳緣靜脈注射:用固定器將豚鼠固定好。然后由助手用拇指和食指夾住其耳翼并壓住豚鼠的頭部,右手按住豚鼠腰部。操作者拔去注射部位的毛,用酒精棉球涂擦耳部邊緣靜脈,并用手指輕彈或搓揉鼠耳,使靜脈充血。然后用左手食指和中指夾住靜脈近心端,拇指和小指夾住耳邊緣部分,以左手無(wú)名指、小指放在耳下作墊,待靜脈充分暴露后,右手持注射器(帶有6號(hào)針頭)盡量從靜脈末端順血管平行方向刺入1cm。刺入靜脈后回抽注射器,見有血后,放松對(duì)耳根處血管的壓迫,固定針頭緩緩注入藥物。注射后用棉球壓迫針眼數(shù)分鐘,以防流血。每只一次注射量不超過(guò)2ml。(2)外側(cè)跖靜脈注射:由助手將豚鼠固定好。操作者從后膝關(guān)節(jié)抓住動(dòng)物肢體,壓迫靜脈,將腿呈伸展?fàn)顟B(tài)。剪去注射部位的毛,酒精棉球消毒后,可見粗大的外側(cè)跖靜脈,用6或7號(hào)針頭沿向心方向刺入血管注射。7.腦內(nèi)注射給豚鼠腦內(nèi)注射時(shí),在兩耳連線及兩眼連線的中間偏一側(cè),即兩眼窩上緣連線偏中線顱骨部位剪毛并消毒皮膚,把皮膚向一方拉緊,用手術(shù)刀切開長(zhǎng)度為lmm-2mm的切口,用穿顱鋼針在頭蓋骨的注射部位打一小孔。鉆孔后用注射器針頭垂直刺入5mm左右,緩慢注入藥物。注射速度一定要慢,避免引起顱內(nèi)壓急驟升高。注射完畢后,涂上碘酒消毒。由于該操作是把皮膚向—側(cè)拉緊切開的,注射后放松皮膚可覆蓋頭蓋骨的小孔,能防止污染。一次注射量為0.02ml/只-0.03ml/只。8.涂布給藥豚鼠經(jīng)皮膚給藥的部位常選用脊柱兩側(cè)的背部皮膚。選定部位后,用脫毛劑脫去被毛,然后洗凈脫毛劑,放回籠內(nèi),待24小時(shí)后才可使用。脫毛過(guò)程中應(yīng)特別注意不要損傷皮膚。次日,仔細(xì)檢查處理過(guò)的皮膚是否有刀傷或過(guò)度腐蝕的切口,以及有無(wú)炎癥、過(guò)敏等現(xiàn)象。如有,應(yīng)暫緩使用,待動(dòng)物完全恢復(fù)。如皮膚準(zhǔn)備合乎要求,便可將動(dòng)物固定好,在脫毛區(qū)覆蓋一面積相仿的鐘形玻璃罩,罩底用凡士林、膠布固定封嚴(yán)。用移液管沿罩柄加入一定劑量的藥物,塞緊罩柄上口。待受檢液與皮膚充分接觸并完全吸收后解開(一般2-6小時(shí)),然后將皮膚表面仔細(xì)洗凈。觀察時(shí)間視實(shí)驗(yàn)需要而定。如果是一般的藥物(如軟膏、化妝品)可直接涂在皮膚上,藥物與皮膚接觸的時(shí)間根據(jù)藥物性質(zhì)和實(shí)驗(yàn)要求而定。9.腳掌注射由助手固定好豚鼠,使其腳掌面向操作者。用棉簽沾水將腳掌洗凈,特別是腳趾之間,再用酒精棉消毒。用7號(hào)針頭刺入腳掌約l0mm,緩慢注入藥液。一次注射量不超過(guò)0.25ml/只。10.眼角膜注射由助手抓住豚鼠,在其左眼角滴入麻醉劑(一般使用2%鹽酸可卡因)。5分鐘后,助手將已麻醉的豚鼠平臥桌面,左眼向上,頭部面對(duì)操作者,固定好動(dòng)物。操作者手持注射器,針頭由眼角鞏膜連接處的眼球頂部斜刺入,用力刺入約3mm深后,暫停(由于眼球的轉(zhuǎn)動(dòng),角膜可能轉(zhuǎn)到下眼瞼內(nèi))。待眼球恢復(fù)原狀后,再用力刺入,達(dá)到實(shí)驗(yàn)要求的深度后緩緩?fù)谱⑺幰骸R淮巫⑷肓繛?“1。若針頭刺入正確,注入的藥液應(yīng)在角膜上形成直徑2mm-3mm的渾濁。拔出針頭后不需作任何處理。11.胭窩淋巴結(jié)注射由助手將豚鼠抓住并將動(dòng)物后肢翻向背側(cè),固定好。操作者用左手將豚鼠后肢膝關(guān)節(jié)部握持在手掌內(nèi),在膝關(guān)節(jié)背側(cè)彎曲窩處,用拇指和食指摸到胭窩淋巴結(jié)并使其固定。用碘酒、酒精棉球消毒后,右手持注射器,用6號(hào)針頭刺入淋巴結(jié),緩緩注入藥液。若藥液注進(jìn)淋巴結(jié),則拇指和食指稍有腫脹感。一次注射量約0.2ml。二、兔、犬的給藥途徑和方法(一)家兔的給藥途徑和方法1.灌胃給家兔灌胃需要兩人合作。助手就坐,將家兔的軀體夾于兩腿之間,左手緊緊抓住雙耳固定頭部,右手抓住兩前肢固定前軀。操作者將開口器橫放在家兔上下頜之間,固定于舌之上,然后將14號(hào)導(dǎo)尿管經(jīng)開口器中央孔(如圖9-4),沿上腭壁慢慢插入食管15cm-18cm。在給藥前先檢驗(yàn)導(dǎo)尿管是否正確插入胃中,可將導(dǎo)尿管外口端放入清水杯中,有氣泡逸出,應(yīng)抽出重插;如無(wú)氣泡逸出,證明已完全插入胃中,可注入藥液。為保證管內(nèi)藥液全部進(jìn)入胃內(nèi),藥液推完后再注入清水10ml,隨后捏閉導(dǎo)尿管外口,抽出導(dǎo)尿管,取出開口器。家兔一次的最大灌胃量為80ml/只-150ml/只。另一種灌胃方法是將兔固定在木制的固定盒內(nèi),左手虎口卡住并固定好兔嘴,右手取14號(hào)細(xì)導(dǎo)尿管,由右側(cè)唇裂(避開門齒),將導(dǎo)尿管慢慢插入。如插管順利,動(dòng)物不掙扎。插入約15cm時(shí),已進(jìn)入胃內(nèi),將藥液注入。2.皮內(nèi)注射在給家兔進(jìn)行皮內(nèi)注射時(shí),一般選用背部脊柱兩側(cè)的皮膚。注射前一天先用剪毛剪將注射部位的被毛剪除,再用除毛劑除毛。第二天用酒精棉球清洗消毒注射部位,然后用左手將皮膚捏成皺襞,右手持帶6號(hào)針頭的注射器,使針頭與皮膚呈30°角,沿皮膚表淺層刺入皮膚內(nèi)。進(jìn)針要淺,避免進(jìn)入皮下。隨之慢慢注入一定量的藥液,注射時(shí)會(huì)感到有很大阻力。當(dāng)藥液進(jìn)入皮內(nèi)時(shí),可見到注射部位皮膚表面馬上會(huì)鼓起,形成小丘疹狀隆起的小包,同時(shí)因注射部位局部缺血,皮膚上的毛孔極為明顯。此小包如不很快消失,則證明藥液注在皮內(nèi),注射正確。為保證藥物不外漏,注射后5分鐘再拔針頭。家兔一次注射量約0.1ml。3.皮下注射家兔的皮下注射一般選用背部和腿部皮膚。注射時(shí),先用酒精棉球消毒需注射部位的皮膚,然后用左手拇指及中指將需注射部位的皮膚提起使成一皺折,并用食指壓皺折的一端,使之成三角形,增大皮下空隙。右手持注射器,用6號(hào)針頭自皺折下刺入。證實(shí)在皮下時(shí),松開皺折,將藥液注入。家兔一次給藥量為1.0ml/只-3.0ml/只。4.肌肉注射家兔的肌肉注射一般適用臀部肌肉。注射時(shí),助手右手抓住兩前肢,左手抓住兩后肢,固定好動(dòng)物。操作者將臀部注射部位被毛剪去,酒精棉球消毒后,右手持帶6號(hào)注射針注射器,使注射針與肌肉成60°角,一次刺入肌肉中。注射藥液之前,要先回抽針?biāo)?,如無(wú)回血?jiǎng)t可注入藥液。5.腹腔注射家兔進(jìn)行腹腔注射時(shí),讓助手固定好家兔,使其腹部朝上、頭低腹高。操作者用酒精棉球消毒注射部位,右手將注射針(5號(hào))在距家兔后腹部的腹白線左側(cè)或右側(cè)離開lcm處刺入皮下,然后再使針頭向前推進(jìn)5mm-10mm,再以45°角穿過(guò)腹肌,固定針頭,緩緩注入藥液。6.靜脈注射家兔一般采用耳緣靜脈注射。注射時(shí),由助手固定好動(dòng)物,操作者將注射部位的毛拔去并用酒精棉球涂擦。用左手食指和中指夾住靜脈近心端,拇指繃緊靜脈遠(yuǎn)端,無(wú)名指及小指墊在下面,再用右手指輕彈或輕揉兔耳,使靜脈充分暴露。然后用右手持裝置6號(hào)針頭的注射器,從靜脈遠(yuǎn)心端刺入血管內(nèi)。如推注無(wú)阻力、無(wú)皮膚隆起發(fā)白,即可移動(dòng)手指固定針頭,緩慢注入藥液。拔出針頭時(shí)要用棉球壓迫針眼并持續(xù)數(shù)分鐘,以防出血。7.腦內(nèi)注射給家兔腦內(nèi)注射時(shí),先將動(dòng)物用乙醚麻醉,剪去額部注射部位的毛并消毒皮膚,然后將皮膚向一方拉緊,用手術(shù)刀切開長(zhǎng)度為1mm-2mm的切口,用穿顱鋼針在頭蓋骨的注射部位開一小孔。再用7號(hào)注射針頭垂直刺入5mm左右,緩慢注入藥物。注射速度一定要慢,避免引起顱內(nèi)壓急驟升高。注射完畢后,涂上碘酒消毒。家兔腦內(nèi)給藥一次注射量為0.2ml/只-0.3ml/只。8.椎管內(nèi)注射將家兔麻醉后作自然俯臥式,盡量使其尾向腹側(cè)屈曲。用剪毛剪剪去第七腰椎周圍被毛并用3%碘酊消毒。干后再用75%酒精將碘酒擦去(操作者的手也應(yīng)消毒)。用腰椎穿刺針頭(6號(hào)注射針)插入第七腰椎間隙(第七腰椎與第一薦椎之間)。當(dāng)針頭到達(dá)椎管內(nèi)時(shí)(蛛網(wǎng)膜下腔),可見到兔的后肢顫動(dòng),即證明穿刺針頭已進(jìn)入椎管。這時(shí)不要再向下刺,以免損傷脊髓。若沒有刺中,不必拔出針頭,以針尖不離脊柱中線為原則,將針頭稍稍拔出一點(diǎn),換個(gè)方向再刺,當(dāng)證實(shí)針頭在椎管內(nèi),固定針頭,將藥液注入。一般注射量為0.5ml/只-1.0ml/只。9.關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射家兔作關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射時(shí),將家兔麻醉后仰臥位固定于兔固定臺(tái)上。剪去關(guān)節(jié)部位被毛,消毒后用左手從下方和兩旁將關(guān)節(jié)固定,在髕韌帶附著點(diǎn)外上方約0.5cm處進(jìn)針。針頭從上前方向下后方傾斜刺進(jìn),直至針頭遇阻力變小為止,然后針頭稍后退,以垂直方向推到關(guān)節(jié)腔中。針頭進(jìn)入關(guān)節(jié)腔時(shí),通常有好像刺破薄膜的感覺,表示針頭已進(jìn)入關(guān)節(jié)腔內(nèi),即可注入藥物。10.椎動(dòng)脈給藥給家兔椎動(dòng)脈注射時(shí),先麻醉動(dòng)物,在其劍突上6cm處從胸骨左緣向外作橫向切口4cm-5cm,分別切斷胸大肌、胸小肌,找出鎖骨下靜脈后進(jìn)行雙線結(jié)扎,于兩線間剪斷靜脈。分離出鎖骨下動(dòng)脈,沿其走向分離出內(nèi)乳動(dòng)脈、椎動(dòng)脈、頸深支、肌皮支動(dòng)脈。除椎動(dòng)脈外,分別結(jié)扎鎖骨下動(dòng)脈分支及其近心端。于椎動(dòng)脈上方結(jié)扎鎖骨下動(dòng)脈遠(yuǎn)心端,在結(jié)扎前選擇適當(dāng)位置(靠近肌皮支動(dòng)脈處為宜)剪一小口,插一腰椎穿刺針直至椎動(dòng)脈分支前,結(jié)扎,固定,給藥。11.直腸給藥操作時(shí),用灌腸用的膠皮管或14號(hào)導(dǎo)尿管,在導(dǎo)尿管或膠皮管頭部涂上凡士林,由助手使兔蹲臥在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以左臂及左腋輕輕按住兔頭及前肢,以左手拉住兔尾,露出肛門,并用右手輕握后肢。操作者將膠皮管或?qū)蚬軐?duì)準(zhǔn)肛門,緩慢插入。深度約為7cm-9cm。如為雌性,注意不要誤插陰道,肛門緊挨尾根。橡皮管插好后,將注射器與橡皮管套緊。藥物灌入后,需抽吸生理鹽水將導(dǎo)尿管內(nèi)的藥液全部沖入直腸內(nèi)。藥液灌完,將導(dǎo)尿管在肛門內(nèi)保留一會(huì),然后再拔出。12.涂布給藥家兔經(jīng)皮膚給藥的部位為脊柱兩側(cè)的背部皮膚,居于軀干的中部,面積視動(dòng)物大小而定,一般兩側(cè)均為2cm2-2.5cm2。操作方法與豚鼠的情況一致。選定部位后,用彎剪小心地剪去長(zhǎng)毛,繼之用脫毛劑均勻地涂在脫毛區(qū)上,過(guò)10-15分鐘后,用扁玻棒輕輕刮去細(xì)毛,并用蘸水棉簽輕輕拭擦,洗凈脫毛劑,然后放回籠中待24小時(shí)(或過(guò)夜)后使用。脫毛過(guò)程中應(yīng)特別注意不要損傷皮膚。次日,開始使用前,應(yīng)仔細(xì)檢查處理過(guò)的皮膚是否有刀傷或過(guò)度腐蝕的切口。若皮膚準(zhǔn)備合乎要求,便可將動(dòng)物固定在特制的固定架上,然后在準(zhǔn)備好的脫毛區(qū)皮膚上,覆以大小與脫毛區(qū)面積相仿的鐘形玻璃罩,罩底四周用凡士林、膠布或萬(wàn)能膠固定封嚴(yán)。繼之,用移液管沿罩柄上口加入受檢液,待受檢液與皮膚充分接觸并完全吸收后解開玻璃罩(一般為2-3小時(shí)),然后將皮膚表面仔細(xì)洗凈、觀察。如是一般的藥物,不一定加蓋玻璃罩,直接涂布皮膚。藥液與皮膚接觸的時(shí)間根據(jù)藥物性質(zhì)和實(shí)驗(yàn)要求而定。(二)犬的給藥途徑和方法(1)液體藥物的投入:可用開口器經(jīng)口灌胃。犬的開口器可用木料制成長(zhǎng)方形,長(zhǎng)約l0cm-15cm,粗細(xì)應(yīng)適合犬嘴,約2cm-3cm,中間鉆一小孔,孔的直徑為0.5cm-1.0cm。灌胃時(shí)將開口器放于動(dòng)物上下門牙之間,用繩將其固定于犬嘴。將帶有彈性的橡皮導(dǎo)管(如導(dǎo)尿管),經(jīng)開口器上的小圓孔插入,沿咽后壁插入食道,注藥前應(yīng)檢查導(dǎo)尿管是否正確插入食道??蓪?dǎo)管外口置于一盛水的燒杯中,如沒有氣泡,則認(rèn)為導(dǎo)尿管已插入胃內(nèi),即可將藥液注入。另一種方法是,將犬拉上固定臺(tái),固定好頭部,嘴用紗布帶綁好(如較馴服的犬可不用綁嘴)。實(shí)驗(yàn)者用左手抓住犬嘴,右手取灌胃管(一般用12號(hào)十二指腸管或?qū)蚬艽?。也可用?nèi)徑0.3cm,長(zhǎng)30cm的軟膠皮管。此種管比導(dǎo)尿管要好,灌胃時(shí)對(duì)咽喉壁刺激較小)。用溫水濕潤(rùn)灌胃管后,右手中指將犬右側(cè)嘴角輕輕翻開,摸到最后一對(duì)大臼齒,齒后有一空隙,中指固定在這空隙下,不要移動(dòng),然后用右手拇指和食指將灌胃管插入此空隙。并順食管方向不斷送入。如遇胃管送入不順或犬劇烈掙扎時(shí),不要再向里插,可拉出再插,如送入很順利,則當(dāng)灌胃管插入約有20cm時(shí),即不要再插,因已進(jìn)入食管下段胃內(nèi)。先用裝有溫水的注射器由灌胃管口試注一下,若水不從犬嘴流出,注射又很通暢,即可將藥液經(jīng)灌胃管慢慢灌入。若插管插入較短,在食道上端時(shí),灌注藥液可見到犬有吞咽動(dòng)作,一次灌藥量不能超過(guò)200m1,不然會(huì)引起動(dòng)物惡心、嘔吐。(2)固體藥物的投入:片劑、丸劑、膠囊給藥時(shí)常徒手經(jīng)口給藥。給藥時(shí),掰開上下頜,用鑷子將固體藥物送入犬的舌根部,合起上下頜,使犬咽下。投藥前以水濕潤(rùn)口腔內(nèi)部,使容易咽下。2.皮下注射犬的皮下注射,一般選用頸部及背部皮下,將注射針頭直接刺入頸部或背部皮膚與肌肉之間。此外,也可注入四肢和腹部的皮下,但這些部位,由于犬的躺臥,容易污染。3.肌肉注射一般選用臀部或大腿部的肌肉。注射時(shí),將被毛剪去,消毒,然后將注射針頭(6號(hào))以60°角插入肌肉中。回抽針?biāo)ǎ鐭o(wú)回血,即可將藥液慢慢注入。注射完畢后,用手輕輕按摩注射部位,幫助藥物吸收。4.腹腔注射進(jìn)行犬腹腔注射時(shí),讓助手抓住動(dòng)物,使其腹部向上。在其臍后腹白線左側(cè)或右側(cè)邊lcm-2cm處,將注射針頭(5號(hào))垂直刺入腹腔,回抽針?biāo)ㄓ^察是否插入臟器或血管。在準(zhǔn)確判定已插入腹腔時(shí),可固定針頭,進(jìn)行注射。5.靜脈注射常用犬靜脈注射部位有:前肢內(nèi)側(cè)頭靜脈、后肢外側(cè)小隱靜脈、前肢內(nèi)側(cè)正中靜脈、后肢內(nèi)側(cè)大隱靜脈、舌下小靜脈和頸外靜脈。前肢內(nèi)側(cè)頭靜脈注射:此靜脈在前肢內(nèi)側(cè)面皮下,靠前肢內(nèi)側(cè)外緣行走,比后肢小隱靜脈還粗一些,而且比較容易固定。因此一般作靜脈注射或取血時(shí)常用此靜脈。注射方法同前述的后肢小隱靜脈注射方法。后肢外側(cè)小隱靜脈注射:此靜脈在后肢脛部下1/3的外側(cè)淺表的皮下。由前側(cè)方向后行走,注射前使犬側(cè)臥,由助手將其固定好,將注射部位被毛剪去,用碘酒、酒精消毒皮膚。用膠皮帶綁在犬股部,或由助手用手握緊股部,可明顯見到此靜脈。右手持連有6號(hào)針頭的注射器,將針頭向血管旁的皮下先刺入,爾后與血管平行刺入靜脈,回抽針筒,如有回血,放松對(duì)靜脈近心端的壓迫,并將針尖順血管再刺進(jìn)少許,然后注射者一手固定針頭,一手慢慢將藥物注入靜脈。此法注射關(guān)鍵是要很好地固定靜脈,因?yàn)榇遂o脈只隔一層皮膚,淺而易滑動(dòng),注射時(shí)針頭刺入不可深,方向一定要與血管平行。前肢內(nèi)側(cè)正中靜脈注射:此靜脈在前肢內(nèi)側(cè)面皮下,正中位置,向上延伸至肱靜脈。此血管位置偏深,注射時(shí)有時(shí)需要切開皮膚。后肢內(nèi)側(cè)大隱靜脈注射:后肢內(nèi)側(cè)大隱靜脈和小隱靜脈一樣,也屬于淺層靜脈。位于后肢內(nèi)側(cè)面皮下,正中位置,向上延伸至股部中段歸于股靜脈。舌下小靜脈注射:將犬四肢固定于手術(shù)臺(tái)上。注射前,將犬嘴打開,用包著紗布的舌鉗把舌頭拉出來(lái)并翻向背側(cè),即可清楚見到很多舌下小靜脈,找一根較粗的作靜脈注射。注射完將針頭拔出時(shí),應(yīng)立即用棉球壓迫止血,或用淀粉海綿等外用止血粉止血。因舌下小靜脈周圍都是軟組織,且血管分布很豐富,如針孔太大,不易止血,因此盡量選用細(xì)針頭。(6)頸外靜脈注射:將犬固定好,用左手大拇指壓迫頸外靜脈入胸部位皮膚,使之怒張,然后將注射針頭朝頭的方向刺入。略回抽(或不回抽)筒塞,看有無(wú)血液回流,如有即說(shuō)明已插入血管,如無(wú)則宜前后將針頭抽動(dòng),這時(shí)仍無(wú)血,則應(yīng)另選適當(dāng)部位,檢查針頭是否堵塞后,再刺入。插入血管之后,松開左手拇指,徐徐將筒塞向前推進(jìn),將藥液注入血管。若需要連續(xù)給藥,可裝置血管留置針。6.小腦延髓池注射小腦延髓池注射通常是在動(dòng)物麻醉情況下進(jìn)行。用3%戊巴比妥鈉(30mg/kg)將犬麻醉后,使犬頭盡量向胸部屈曲,用左手摸到其第一頸椎上方的凹陷(枕骨大孔),固定位置,右手取7號(hào)針頭(將針頭尖端磨鈍),由此凹陷的正中
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