腸桿菌科及檢驗考點總結一、概述（共性）大多數腸道桿菌屬于正常菌群。當機體免疫力降低或侵入腸道外組織時成為條件致病菌而引起疾病。腸桿菌科細菌的種類繁多。主要根據細菌的形態、生化反應、抗原性質以及核酸相關性進行分類。根據《伯杰系統細菌學手冊》（1984年）將腸桿菌科的細菌分為20個屬即埃希菌屬、志賀菌屬、沙門菌屬、枸櫞酸桿菌屬、克雷伯菌屬、腸桿菌屬、沙雷菌屬、哈夫尼亞菌屬、愛德華菌屬、普羅威登斯菌屬、變形桿菌屬、摩根菌屬、耶爾森菌屬等。（二）生物學特性液體培養基：渾濁生長。3.生化反應發酵葡萄糖產酸、或產酸產氣；乳糖發酵試驗：非致病菌+，致病菌-（除外變形桿菌）。觸酶陽性；氧化酶陰性；硝酸鹽還原為亞硝4.抗原構造）：鞭毛H～O變異耐藥性變異生化反應性質的改變6.抵抗力7.腸桿菌科的初步分類1.致病性腸道桿菌：以腸內感染為主，腹瀉為共顯癥狀，引起急慢性腸道感染、食物中毒、旅游者腹2.條件致病菌：為醫院感染主要病原菌，出現移位感染。大腸埃希菌、變形桿菌及克雷伯菌等條件致病菌可引起泌尿生殖道、傷口等部位的感染。（四）微生物檢驗①確定腸桿菌科的細菌，應采用葡萄糖氧化-發酵試驗及氧化酶試驗與弧菌科和非發酵菌加以鑒別；②腸桿菌科細菌的分群，多采用苯丙氨酸脫氨酶和葡萄糖酸鹽試驗，將腸桿菌科的細菌分為三個類群；根據生化反應的結果初步定屬、種，再用診斷血清做凝集反應才能作出最后判斷。二、埃希菌屬臨床最常見的是大腸埃希菌。（一）生物學性狀G-，短桿菌1.0～3.0）μm×（0.4～0.7）μm。多數有周鞭毛，有菌毛，有莢膜或微莢膜。2.培養特性普通營養肉湯：渾濁生長。血瓊脂平板：少數菌株產生β-溶血環。伊紅亞甲藍瓊脂：菌落呈藍紫色并有金屬光澤（發酵乳糖）。麥康凱和SS瓊脂：粉紅色菌落。3.生化反應吲哚、甲基紅、V-P、枸櫞酸鹽試驗（IMViC試驗）為++--。2動力-吲哚-尿素（MIU）培養基為++-。24.抗原結構菌體抗原（O）、表面抗原（K）和鞭毛抗原（H）三種構成。一個菌株的抗原類型由特殊的O、K和H抗原的代碼表示，其血清型別的方式是按O:K:H排列，例如O111:K58:H2。致病物質：主要是侵襲力、內毒素、腸毒素等。1.腸道外感染以泌尿系統感染常見，還有菌血癥，膽囊炎，腹腔膿腫。2.腸道感染（致病性大腸埃希菌）腸產毒性大腸埃希菌（ETEC）：引起霍亂樣腸毒素腹瀉（水瀉）。腸致病性大腸埃希菌（EPEC）：主要引起嬰兒腹瀉。腸侵襲性大腸埃希菌（EIEC）：可侵入結腸黏膜上皮，引起痢疾樣腹瀉（黏液膿血便）。腸出血性大腸埃希菌（EHEC又稱產志賀樣毒素（VT）大腸埃希菌（SLTEC或UTEC其中O157：H7可引起出血性大腸炎和溶血性尿毒綜合征（HUS）。腸黏附性大腸埃希菌（EAggEC新近報道能引起腹瀉。3.CDC將大腸埃希菌O157：H7列為常規檢測項目在北美許多地區，O157：H7占腸道分離病原菌的第二或第三位，是從血便中分離到的最常見6、7、8三個月O157：H7感染的發生率最高。腸道感染可采集糞便；腸道外感染可根據臨床感染情況采集中段尿液、血液、膿汁、膽汁、腦脊液、痰、分泌液等。2.檢驗方法及鑒定最后鑒定：補充系列生化試驗致病性大腸埃希菌◆鑒別試驗：醋酸鈉、葡萄糖銨、粘質酸鹽產酸試驗。血清學試驗三、志賀菌屬人類細菌性痢疾最常見的病原菌，通稱痢疾桿菌。根據生化反應與血清學試驗該屬細菌分為痢疾、福氏、鮑氏和宋內志賀菌四群。我國以福氏和宋內志賀菌引起的菌痢最為常見。（一）生物學特性G-，短小桿菌2～3）μm×（0.5～0.7）μm，無莢膜，無芽胞，無鞭毛，有菌毛。2.培養特性3.生化反應氧化酶試驗陰性，動力陰性，不產生賴氨酸脫羧酶；KIA：K/A，HS（-2IMViC：-、+、-、-。志賀菌屬的細菌分解葡萄糖產酸不產氣，不分解乳糖（宋內志賀菌可遲緩分解乳糖吲哚試驗陰性，H2S4.抗原結構O抗原分群特異性抗原和型特異性抗原兩類。與相應抗血清的凝集作用。加熱100℃、60分鐘可消除K抗原對O抗原的阻斷作用，在一定條件下可產生S-R變異及耐藥性變異。（二）臨床意義致病物質：傳染源為病人和帶菌者，經糞口傳播。盡可能在發病早期及治療前采集新鮮糞便，選擇膿血便或黏液便，必要時可用肛拭子采集。2.檢驗方法及鑒定靛基質賴氨酸黏液酸、醋酸鹽、枸櫞酸鹽 +大腸埃希菌++++ 志賀菌類志賀鄰單胞菌志賀菌傷寒沙門菌-+-+硫化氫-+氧化酶試驗-+A-FO診斷血清-+人工主動免疫用于預防目前尚不理想。預防的主要措施是防止進食被污染的食品、飲料及水，及早發現及早積極治療攜帶者。治療細菌性痢疾一般首選氟喹諾酮類抗生素。播，污染水和食物可引起暴發流行。（一）生物學性狀2.培養特性 3.生化反應數菌株產生H2S，發酵葡萄糖產酸產氣（傷寒沙門菌產酸不產氣）。4.抗原結構表面抗原：已證實沙門菌屬有Vi、M和5抗原三種。5.變異性H～O變異相位變異：具有雙相H抗原（第Ⅰ相為特異相，第Ⅱ相為非特異相）的沙門菌變成只有其中某一相H所致疾病：1.腸熱癥即傷寒與副傷寒病。由傷寒與副傷寒沙門菌所引起的慢性發熱癥狀。為法定傳染病之一。2.食物中毒3.慢性腸炎4.敗血癥5.沙門菌的局部感染如頸部、腰部等。（三）微生物檢驗根據不同疾病采取不同的標本進行分離與培養。食物中毒采集食物與糞便。2.檢查方法及鑒定沙門菌血清學鑒定主要借助于沙門菌O抗原多價血清與O、H、Vi抗原的單價因子血清。血清學診斷——肥達試驗用已知的傷寒沙門菌O、H抗原，副傷寒甲、乙H抗原稀釋后與被檢血清作定量凝集試驗，以檢測患者血清中抗體的含量，來判斷機體是否受沙門菌感染而導致腸熱癥并判別沙門菌的種類。加強飲食衛生，防止污染食品及水源經口感染，攜帶者的積極治療，皮下注射死菌苗或口服減毒活菌這三個屬的細菌為腸道寄居的正常菌群，在一定條件下能引起各種感染，也是醫源性感染的重要條件（一）生物學特性G-，桿菌，兩端鈍圓，有明顯的多形性，呈球狀或絲狀；周身鞭毛（摩根菌屬的部分菌株在30℃以上培養條件下不形成鞭毛無芽胞，無莢膜。2.培養特性需氧或兼性厭氧，營養要求不高，生長溫度10～43℃。營養瓊脂和血瓊脂平板：普通變形桿菌和奇異變形桿菌的大多數菌株呈遷徙擴散生長現象。產黏變形桿菌具有產生黏液狀薄膜層的能力及溶血性質。普羅威登斯菌和摩根菌無遷徙生長現象。含有膽鹽的培養基：菌落呈扁平、圓形、半透明。含有鐵或鉛離子的培養基：產硫化氫菌株菌落中心呈黑色。液體培養基：迅速生長，早期培養物呈渾濁，有部分沉淀。3.生化反應三屬菌共同特點是氧化酶陰性，苯丙氨酸脫氨酶陽性的革蘭陰性桿菌。變形桿菌屬普羅威登斯菌屬摩根菌屬遷徙生長+--硫化氫產生+--液化明膠鳥氨酸脫羧酶枸櫞酸鹽利用++-----++奇異變形桿菌奇異變形桿菌--+產黏變形桿菌 + 普通變形桿菌++-靛基質麥芽糖鳥氨酸脫羧酶產堿普羅威登斯菌產堿普羅威登斯菌斯氏普羅威登斯菌雷氏普羅威登斯菌脲酶 +-+-側金盞花醇+-+普通變形桿菌和奇異變形桿菌引起尿道、創傷、燒傷的感染。普通變形桿菌還可引起多種感染及食物中毒；奇異變形桿菌還可引起嬰幼兒腸炎。產黏變形桿菌尚無引起人類感染的報道。外-斐（Weil-Felix）反應：普通變形桿菌OX、OX、OX的菌體抗原與某些立克次體有共同抗原，是 用以診斷某些立克次體病的依據。2.普羅威登斯菌屬本屬菌可引起燒傷、創傷與尿道感染。3.摩根菌屬本屬細菌為醫源性感染的重要病原菌之一。（三）微生物檢驗2.檢驗方法及鑒定（1）直接涂片瓊脂平板上。變形桿菌屬在血瓊脂上呈遷徙生長，在腸道菌選擇培養基上形成不發酵乳糖菌落，在SS瓊脂上常為有黑色中心的菌落。六、耶爾森菌屬其中鼠疫耶爾森菌、假結核耶爾森菌和小腸結腸炎耶爾森菌與人類致病有關。（一）鼠疫耶爾森菌（一）鼠疫耶爾森菌俗稱鼠疫桿菌，是烈性傳染病鼠疫的病原菌。鼠疫是自然疫源性傳染病，通過直接接觸染疫動物或節肢動物叮咬而感染。（1）形態與染色：有莢膜，無鞭毛，無芽胞。需氧和兼性厭氧。最適生長溫度是28～30℃,培養基最適pH為6.9～7.1。培養16～18h，用顯微鏡觀察可見一層形狀不一，淺灰色小菌落，這是鼠疫耶爾森菌培養初期的菌落特培養24～48h后可形成直徑0.1～0.2mm，圓形，中心突出，透明的淺灰色小菌落。KIA：K（A）/A，HS（-）2MIU：-、-、-2.微生物檢驗標本采集：主要采集血液、痰和淋巴結穿刺液。注：鼠疫耶爾森菌為甲類病原菌，傳染性極強，故應嚴格遵守檢驗操作規程，要求實驗室有隔離設施，直接涂片檢查；分離培養；鑒定；最后鑒定(①噬菌體裂解試驗；②動物試驗；③免疫學方法）。（二）小腸結腸炎耶爾森菌（1）形態與染色菌體大小為（1.0～2.0）μm×（0.5～1.0）μm，25℃培養時形成周鞭毛，呈翻滾旋轉狀運動，37℃培養無動力，無芽胞，無莢膜的革蘭陰性球桿菌。血瓊脂平板上，形成直徑為1～2mm，圓形光滑，凸起的菌落。SS瓊脂板上生長不良。液體培養基中呈渾濁生長，液體表面可形成白色菌膜或有沉淀生成。2.致病性（1）致病因素：侵襲力和腸毒素。小腸結腸炎、末端回腸炎、胃腸炎、闌尾炎和腸系膜淋巴結炎。除腸道感染外尚可發生敗血癥，結節性紅斑及關節炎等。3.微生物檢驗菌落形態→G→氧化酶（-）→初步鑒定→血清學鑒定30℃以下動力（+）脲酶（+）（三）假結核耶爾森菌菌落：圓形，中心凸起，呈顆粒狀，灰黃色，半透明的菌落。在液體培養基中呈均勻渾濁生長者為光滑型菌株，沉淀生長為粗糙型菌株。七、腸桿菌科的其他菌屬在臨床感染標本中具有較高的分離率，大多屬于條件致病菌。枸櫞酸桿菌屬克雷伯菌屬腸桿菌屬沙雷菌屬枸櫞酸桿菌屬包括弗勞地枸櫞酸桿菌、異型枸櫞酸桿菌和無丙二酸鹽枸櫞酸桿菌三個種，屬正常菌群成員。發酵乳糖，在液體培養基中呈渾濁生長。（3）生化反應：靛基質硫化氫丙二酸鹽弗勞地枸櫞酸桿菌-/++-異型枸櫞酸桿菌+-+無丙二酸鹽枸櫞酸桿菌+--2.致病性本菌為條件致病菌，常在一些慢性疾病如白血病、自身免疫性疾病或醫療插管術后的泌尿道、呼吸道中檢出，可引起敗血癥、腦膜炎、骨髓炎、中耳炎和心內膜炎等。3.微生物檢驗（2）檢驗方法及鑒定賴氨酸脫羧酶賴氨酸脫羧酶-+++-／+-枸櫞酸鹽利用++-枸櫞酸桿菌屬沙門菌屬愛德華菌屬2）種的鑒別：根據產生靛基質、硫化氫、丙二酸鹽與否鑒別。（二）克雷伯菌屬伯菌次之。在腸道菌選擇培養基中為乳糖發酵型菌落。觸酶陽性、脲酶陽性、氧化酶陰性、鳥氨酸脫羧酶陰性。其中動力和鳥氨酸脫羧酶陰性是本菌的最大特點。2.致病性肺炎克雷伯菌肺炎亞種引起嬰兒腸炎、肺炎、腦膜炎、腹膜炎、外傷感染、敗血癥和成人醫源性尿道臭鼻克雷伯菌引起臭鼻癥。鼻硬節克雷伯菌引起鼻腔、咽喉和其他呼吸道的硬節病。催娩克雷伯菌可引起呼吸道和泌尿道感染、創傷感染與敗血癥等。-，短而粗的桿菌，有周鞭毛，部分菌株有莢膜，無芽胞。（2）培養特性：需氧或兼性厭氧，最適溫度為30℃,營養要求不高。在普通瓊脂上形成大而濕潤的黏液狀菌落；在血瓊脂板上不溶血；2.致病性癥，引起新生兒腦膜炎。（四）沙雷菌屬臨床標本中以粘質沙雷菌最常見。G-，細小桿菌，有周鞭毛，有些菌種有微莢膜，無芽胞。粘質沙雷菌是最小的細菌。各種沙雷菌株可以產生兩種色素：靈菌紅素（非水溶性）和吡羧酸（水溶性）。2.致病性粘質沙雷菌可導致呼吸道與泌尿道感染。液化沙雷菌存在于植物和嚙齒類動物的消化道中，是人的條件致病菌，主要引（五）哈夫尼亞菌屬營養瓊脂培養基上易生長。（六）愛德華菌屬（七）泛菌屬致病性：成團泛菌是人類的條件致病菌。A.大腸埃希菌B.肺炎克雷伯菌C.陰溝腸桿菌D.銅綠假單胞菌E.傷寒沙門菌『答案解析』大腸埃希菌是超廣譜β-內酰胺酶（ESBLs）的主要產酶株。大腸埃希菌以泌尿系統感染常見，高位嚴重尿道感染與特殊血清型大腸埃希菌有關。發酵葡萄糖，不發酵