工業(yè)生產(chǎn)上滅菌方法有加熱滅菌、化學(xué)藥劑滅菌、射線滅菌等。化學(xué)藥劑滅菌、射線滅菌用于無(wú)菌間、培養(yǎng)室及車間空氣滅菌。

干熱滅菌：火焰滅菌、烘箱滅菌加熱滅菌濕熱滅菌：巴氏滅菌、間歇滅菌、高壓蒸汽滅菌二、濕熱滅菌原理

致死溫度：指殺死微生物最低溫度。滅菌和無(wú)菌空氣的制備第1頁(yè)致死時(shí)間：在致死溫度下殺死全部微生物所需要時(shí)間。1.微生物熱阻

熱阻：微生物對(duì)熱抵抗力。

微生物對(duì)濕熱相對(duì)抵抗力微生物名稱大腸桿菌細(xì)菌芽孢霉菌孢子病毒相對(duì)抵抗力13×1062～101～5滅菌和無(wú)菌空氣的制備第2頁(yè)2.微生物熱死規(guī)律——對(duì)數(shù)殘留定律

100℃時(shí)不一樣時(shí)間微生物存活數(shù)時(shí)間（min）存活數(shù)（個(gè)/mL)時(shí)間（min）存活數(shù)（個(gè)/mL)0679119×1071.2×1078×1065×1063×106152025301×1062×1052×104≈0滅菌和無(wú)菌空氣的制備第3頁(yè)菌死亡率（活菌降低率）:與任何時(shí)候殘留活菌數(shù)N成正比。對(duì)數(shù)殘留定律：N—?dú)埩艋罹鷶?shù)（個(gè)）t—受熱時(shí)間（min)K—反應(yīng)速度常數(shù)（min-1)8/22/20234發(fā)酵工藝原理滅菌和無(wú)菌空氣的制備第4頁(yè)將上式積分得：兩邊取對(duì)數(shù)：對(duì)數(shù)殘留規(guī)律公式：

—開始滅菌時(shí)原有活菌數(shù)（個(gè)）—經(jīng)過(guò)t時(shí)間滅菌后殘留菌數(shù)（個(gè)）滅菌和無(wú)菌空氣的制備第5頁(yè)3.反應(yīng)速度常數(shù)k

在相同溫度下，k值愈小，則此微生物愈耐熱。同一個(gè)微生物在不一樣溫度下，k值也不相同，滅菌溫度愈低，k值愈小，溫度愈高，k值愈大。

121℃一些細(xì)菌芽孢k

值細(xì)菌芽孢名稱K值min-1枯草芽孢桿菌FS5230硬脂嗜熱芽孢桿菌FS1518硬脂嗜熱芽孢桿菌FS617產(chǎn)氣梭狀芽孢桿菌PA36793.8～2.60.772.91.8滅菌和無(wú)菌空氣的制備第6頁(yè)4．培養(yǎng)基滅菌溫度選擇試驗(yàn)測(cè)定：加熱溫度每升高10℃

物質(zhì)化學(xué)反應(yīng)1.5～2芽孢熱死反應(yīng)5～10微生物營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞熱死反應(yīng)35

滅菌和無(wú)菌空氣的制備第7頁(yè)結(jié)論：溫度升高，菌死亡速率大于培養(yǎng)基成份破壞速率。不一樣溫度滅菌時(shí)間及培養(yǎng)基破壞情況

在實(shí)際生產(chǎn)中為了既到達(dá)滅菌目標(biāo)又很好地保留營(yíng)養(yǎng)成份，最好采取高溫快速滅菌法。溫度（℃）滅菌時(shí)間（min)營(yíng)養(yǎng)成份破壞（%）溫度（℃）滅菌時(shí)間（min)營(yíng)養(yǎng)成份破壞（%）1001101151204003015499.36750271301401500.50.080.0182＜1滅菌和無(wú)菌空氣的制備第8頁(yè)三、影響培養(yǎng)基滅菌其它原因1．培養(yǎng)基成份

2．PH值

pH值對(duì)滅菌時(shí)間影響溫度（℃）孢子數(shù)（個(gè)/mL)滅菌時(shí)間（min）pH6.1pH5.3pH5.0pH4.7pH4.5120115110100100001000010000100008257074072565720512351803133015031324150滅菌和無(wú)菌空氣的制備第9頁(yè)3．培養(yǎng)基中顆粒

4．泡沫

四、工業(yè)滅菌方法

1．連續(xù)滅菌（連消）(Continuoussterilization):

是采取專一滅菌設(shè)備—-連消塔，在高溫下對(duì)液體培養(yǎng)基進(jìn)行短時(shí)間加熱滅菌。優(yōu)點(diǎn)：（1）培養(yǎng)基受熱時(shí)間短（可在20～30s到達(dá)預(yù)定滅菌溫度），營(yíng)養(yǎng)成份破壞少；（2）質(zhì)量均勻；（3）適合用于自動(dòng)控制。適用條件：大規(guī)模生產(chǎn)，培養(yǎng)基中不含有固體顆粒或泡沫較少。滅菌和無(wú)菌空氣的制備第10頁(yè)滅菌和無(wú)菌空氣的制備第11頁(yè)滅菌和無(wú)菌空氣的制備第12頁(yè)滅菌和無(wú)菌空氣的制備第13頁(yè)滅菌和無(wú)菌空氣的制備第14頁(yè)2.分批滅菌(實(shí)消):(Batchsterilization)

指培養(yǎng)基在發(fā)酵罐中滅菌。優(yōu)點(diǎn)：無(wú)