中藥化學典型實驗多媒體課件湖南中醫(yī)藥大學藥學院中藥化學教研究室中藥化學典型實驗多媒體課件湖南中醫(yī)藥大學藥學院中藥化學教研究1實驗二

虎杖中蒽醌類成分提取、分離、鑒定及含量測定實驗二虎杖中蒽醌類成分2一、教學要求l、掌握梯度pH萃取法分離酸性成分的方法。2、學習脂溶性成分和水溶性成分分離的方法。3、了解蒽醌類化合物的一般性質(zhì)和鑒別反應。

一、教學要求l、掌握梯度pH萃取法分離酸性成分的方法。3二、實驗原理

本實驗是根據(jù)虎杖中的羥基蒽醌類化合物及二苯乙烯類成分均可溶于乙醇，故采用乙醇將它們提取出來。羥基蒽醌類苷元成分能溶于乙醚等弱親脂性溶劑，采用乙醚使苷元和苷類成分分離，又利用羥基蒽醌類化合物酸性強弱不同，用梯度pH萃取法進行分離。二、實驗原理本實驗是根據(jù)虎杖中的羥基蒽醌類化合物及二4三、實驗內(nèi)容(一)虎杖中蒽醌苷元的提取與分離1、虎杖中蒽醌類成分的提取：2、蒽醌苷與苷元的分離：3、不同酸性蒽醌苷元的分離（梯度pH萃取法）

三、實驗內(nèi)容(一)虎杖中蒽醌苷元的提取與分離5流程圖流程圖6虎杖中蒽醌類成分的提取分離鑒定及含量測定ppt課件7（二）鑒定

1、顏色反應(l)、取以上a,b,c少量，分別置于三支試管中，加少量乙醇溶解后，加2％NaOH溶液數(shù)滴，觀察顏色變化。（2）、取以上a,b,c少量，分別置于三支試管中，加少量乙醇溶解后，再滴加1%醋酸鎂的乙醇溶液數(shù)滴，觀察顏色變化。（3）、取以上a,b,c少量，分別置于三支試管中，加少量乙醇溶解后，再滴加1%三氯化鐵的乙醇溶液數(shù)滴，觀察顏色變化。（二）鑒定1、顏色反應8

2、薄層色譜(TLC)：

吸附劑：硅膠G－CMCNa板，用前活化展開劑：石油醚—乙酸乙酯(2：1)樣品：a,b,c乙醇液，大黃素標準品顯色：①先置可見光下觀察色斑，后紫外燈下觀察熒光斑點②再用2%NaOH噴灑顯色結果及計算比移值2、薄層色譜(TLC)：9（三）含量測定虎杖中游離蒽醌的測定1.標準曲線的制備稱取1,8-二羥基蒽醌25mg置于200ml容量瓶中，乙醚溶解并定容，取此溶液0.05~5.00ml，分別置于25ml容量瓶中，水浴上揮去乙醚，加5%氫氧化鋁-2%氫氧化銨混合堿液至刻度，在490nm測定光密度，繪制標準曲線。2.樣品測定取生藥粉末（過40目）0.2g置于索氏提取器中，氯仿回流提取至無色，將氯仿液置于分液漏斗中，以5%氫氧化鋁-2%氫氧化銨混合堿分次提取至無色，合并堿液，用少量氯仿洗滌，堿液調(diào)整至一定體積，堿液若不澄清，垂熔漏斗過濾，濾液在沸水浴中加熱4分鐘，用冷水冷卻至室溫，30分鐘后在490nm比色，由標準曲線計算含量。（三）含量測定虎杖中游離蒽醌的測定10四、實驗討論及注意事項

1.常壓蒸餾回收溶劑之前，應該加入沸石，以免暴沸。2.什么是梯度pH萃取法，適用于哪些物質(zhì)的分離？試解釋本次試驗中pH萃取法應該注意哪些事項？3.兩相萃取時，不可猛力振搖，只能輕輕旋轉(zhuǎn)搖動，以免造成嚴重乳化現(xiàn)象而影響分層。如果出現(xiàn)