專題二

細胞工程專題二1一、細胞工程的概念應用細胞生物學和分子生物學的原理和方法，通過細胞水平或細胞器水平上的操作，按照人的意愿來改變細胞內的遺傳物質或獲得細胞產品的一門綜合科學技術。根據操作對象的不同，可分為植物細胞工程和動物細胞工程兩大領域。一、細胞工程的概念應用細胞生物學和分子生物學的2細胞工程的概念理解1.原理和方法：細胞生物學和_____________2.操作水平：___________或細胞器水平3.工程目的：按照人的意愿來改變_________________或______________。4.根據操作對象的不同分類植物細胞工程和_______________。分子生物學細胞水平細胞內的遺傳物質獲得細胞產品動物細胞工程一、細胞工程的概念細胞工程的概念理解分子生物學細胞水平細胞內的遺傳物質獲得細胞3五、動物細胞培養1.概念與操作流程取動物相關組織塊?分散成單個細胞放人適宜培養基?讓細胞生長和增殖?剪碎胰蛋白酶處理?胰蛋白酶處理分瓶培養?組織?單個細胞?細胞懸液?原代培養?傳代培養五、動物細胞培養1.概念與操作流程取動物相關組織塊?分散成單42.條件（1）無菌、無毒：對_____________________無菌處理，添加

________，定期更換培養液以清除代謝產物。（2）營養：除正常的有機和無機營養外，加入____________。（3）適宜的溫度和pH：溫度為___________（哺乳動物），pH

為___________。（4）氣體環境：含____的空氣加_______的混合氣體。3.應用生物制品的生產、檢測__________、醫學研究。培養液和所有培養用具抗生素血清、血漿36.5±0.5℃7.2～7.495%5%CO2有毒物質2.條件培養液和所有培養用具抗生素血清、血漿36.5±0.55六、動物體細胞核移植技術和克隆動物1.動物核移植概念是將動物的一個細胞的________移入一個_______________中，使其重組并發育成一個新的胚胎，這個新胚胎最終發育為_____

______。細胞核去核的卵母細胞動物個體2.過程供體體細胞細胞培養供體細胞核?重組細胞?卵巢卵母細胞去核無核卵母細胞?胚胎?代孕母體生出與供體遺傳物質?基本相同的個體?注人減Ⅱ?中期發育?胚胎移植?細胞融合六、動物體細胞核移植技術和克隆動物1.動物核移植概念細胞核去63.應用（1）加速家畜遺傳改良進程，促進優良畜群繁育。（2）保護__________。（3）生產醫用蛋白。（4）作為異種移植的_____。（5）用于組織器官的_____。【點撥】核移植過程中供體理論上是提供細胞核，但操作過程中可以把整個體細胞注入去核的卵母細胞中去，原因是體細胞體積相對較小，取核難度較大，另外細胞膜對核融合的障礙性較小。

瀕危物種供體移植3.應用瀕危物種供體移植7植物組織培養、動物細胞培養和核移植的比較植物組織培養動物細胞培養核移植過程外植體?愈傷組織根、芽或胚狀體試管苗脫分化再分化動物組織塊細胞懸液原代培養(細胞貼壁生長)胰蛋白酶處理，分瓶繼續培養?傳代培養?少數細胞獲得不死性(癌細胞)剪碎、胰蛋白酶處理放入培養瓶接觸抑制10～50代供體受體體細胞核卵母細胞重組細胞早期胚胎個體導入去核胚胎移植植物組織培養、動物細胞培養和核移植的比較植物組織培養動物細胞8植物組織培養動物細胞培養核移植結果關鍵環節與外植體完全相同的個體相同分化程度的細胞群與供體基本相同的個體細胞的脫分化、再分化、分化細胞分化、細胞癌變核融合、細胞分化植物組織培養動物細胞培養核移植結關與外植體完全相同的個體相同91.動物細胞融合（1）概念：指兩個或多個動物細胞結合形成_________的過程。（2）融合方法：_____________、___________、電激等。（3）意義：突破了______________的局限,使_________成為可能，也為制造____________開辟了新途徑。一個細胞聚乙二醇(PEG)滅活的病毒有性雜交方法遠緣雜交單克隆抗體七、動物細胞融合與單克隆抗體2.單克隆抗體（1）制備：抗原小鼠 多種雜交細胞雜交瘤細胞產生專一抗體的雜交瘤細胞 單克隆抗體。（2）優點：特異性強、___________，可大量制備。（3）用途：作為___________；用于治療疾病和__________。B淋巴細胞骨髓瘤細胞培養、篩選體內、體外培養靈敏度高診斷試劑運載藥物1.動物細胞融合一個細胞聚乙二醇(PEG)滅活的病毒有性雜交10單克隆抗體制備過程單克隆抗體制備過程11植物體細胞雜交動物細胞融合原理過程細胞A、B原生質體A、B融合的原生質體雜種細胞雜種植株去壁融合植物組織培養細胞A、B雜交細胞多個相同雜交細胞融合有絲分裂細胞膜的流動性、細胞的全能性細胞膜的流動性植物體細胞雜交與動物細胞融合的比較植物體細胞雜交動物細胞融合原理過細胞A、B原生質體A、B融合12植物體細胞雜交動物細胞融合相關酶融合方法結果意義纖維素酶和果膠酶胰蛋白酶或膠原蛋白酶物理法:離心、電激、振動;化學法:聚乙二醇等試劑