藥品生物檢定技術(shù)是指利用生物體（微生物、細(xì)胞、離體組織或動(dòng)物）對(duì)藥物的特定藥理、毒理作用，來(lái)測(cè)定生物藥品的效價(jià)、檢查藥品中的有害物質(zhì)以及對(duì)制劑進(jìn)行微生物限度或無(wú)菌檢查的技術(shù)方法1藥品生物檢定技術(shù)7/23/2023無(wú)菌檢查微生物限度檢查抗生素效價(jià)的微生物檢定法生化藥物效價(jià)的生物測(cè)定法藥品的安全性檢查2藥品生物檢定技術(shù)7/23/2023第一節(jié)

無(wú)菌檢查3藥品生物檢定技術(shù)7/23/2023概述無(wú)菌檢查法系用于檢查藥典要求無(wú)菌的藥品、醫(yī)療器具、原料、輔料及其他品種是否無(wú)菌的一種方法。將藥品或材料，在嚴(yán)格的無(wú)菌操作條件下，接種于適合各種微生物生長(zhǎng)的不同培養(yǎng)基中，置于不同的適宜溫度下培養(yǎng)一定的時(shí)間，逐日觀察微生物的生長(zhǎng)情況，并結(jié)合陽(yáng)性和陰性對(duì)照試驗(yàn)的結(jié)果，判斷供試品是否無(wú)菌。包括薄膜過(guò)濾法和直接接種法兩種方法4藥品生物檢定技術(shù)7/23/2023一、常規(guī)技術(shù)要求1.應(yīng)在環(huán)境潔凈度10000級(jí)以下的局部潔凈度100級(jí)的單向流空氣區(qū)域內(nèi)或隔離系統(tǒng)中進(jìn)行檢查。2.全過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作，防止微生物污染。3.單向流空氣區(qū)、工作臺(tái)面及環(huán)境應(yīng)定期按《醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）懸浮粒子、浮游菌和沉降菌的測(cè)試方法》的現(xiàn)行國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行潔凈度驗(yàn)證。5藥品生物檢定技術(shù)7/23/2023二、培養(yǎng)基（一）培養(yǎng)基的種類(lèi)：7種硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基（需氧菌、厭氧菌培養(yǎng)基）改良馬丁培養(yǎng)基（真菌培養(yǎng)基）選擇性培養(yǎng)基0.5%葡萄糖肉湯培養(yǎng)基（用于硫酸鏈霉素等抗生素的無(wú)菌檢查）營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基

6藥品生物檢定技術(shù)7/23/2023二、培養(yǎng)基（二）培養(yǎng)基的適用性檢查證明：培養(yǎng)基無(wú)菌，且能保證細(xì)菌生長(zhǎng)良好1.無(wú)菌性檢查無(wú)菌性檢查每批培養(yǎng)基隨機(jī)取不少于5支（瓶），培養(yǎng)14天，應(yīng)無(wú)菌生長(zhǎng)7藥品生物檢定技術(shù)7/23/2023二、培養(yǎng)基（二）培養(yǎng)基的適用性檢查2.靈敏度檢查靈敏度檢查方法：取每管裝量為12ml的硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基9支，分別接種小于100cfu的金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌、生孢梭菌各2支，另1支不接種作為空白對(duì)照，培養(yǎng)3天；取每管裝量為9ml的改良馬丁培養(yǎng)基5支，分別接種小于100cfu的白色念珠菌、黑曲霉各2支，另1支不接種作為空白對(duì)照，培養(yǎng)5天。逐日觀察結(jié)果。結(jié)果判斷：空白對(duì)照管無(wú)菌生長(zhǎng)，加菌培養(yǎng)基管均生長(zhǎng)良好，判該培養(yǎng)基的靈敏度檢查符合規(guī)定8藥品生物檢定技術(shù)7/23/2023二、培養(yǎng)基（二）培養(yǎng)基的適用性檢查適用性檢查的菌種：金黃色葡萄球菌銅綠假單胞菌枯草芽孢桿菌生孢梭菌白色念珠菌黑曲霉圖片取自青島海博生物技術(shù)有限公司9藥品生物檢定技術(shù)7/23/2023三、方法驗(yàn)證試驗(yàn)建立產(chǎn)品的無(wú)菌檢查法時(shí)，應(yīng)進(jìn)行方法的驗(yàn)證證明所采用的方法適合于該產(chǎn)品的無(wú)菌檢查排除供試品是否具有抑細(xì)菌和抑真菌作用避免假陰性結(jié)果方法：薄膜過(guò)濾法、直接接種法10藥品生物檢定技術(shù)7/23/2023四、無(wú)菌檢查法（一）檢驗(yàn)數(shù)量及檢驗(yàn)量《中國(guó)藥典》現(xiàn)行版附錄批出廠產(chǎn)品最小檢驗(yàn)數(shù)量表液體制劑最小檢驗(yàn)量及上市抽驗(yàn)樣品的最少檢驗(yàn)數(shù)量表固體制劑最少檢驗(yàn)量及上市抽驗(yàn)樣品的最少檢驗(yàn)數(shù)量表11藥品生物檢定技術(shù)7/23/2023四、無(wú)菌檢查法（二）對(duì)照試驗(yàn)1.陽(yáng)性對(duì)照必須長(zhǎng)菌，用以證明微生物確實(shí)可在應(yīng)用的試驗(yàn)條件下生長(zhǎng)根據(jù)供試品特性選擇陽(yáng)性對(duì)照菌無(wú)抑菌作用和抗革蘭陽(yáng)性菌為主的供試品，以金黃色葡萄球菌為對(duì)照菌抗革蘭陰性菌為主的供試品，以大腸埃希菌為對(duì)照菌抗厭氧菌的供試品，以生孢梭菌為對(duì)照菌抗真菌的供試品，以白色念珠菌為對(duì)照菌陽(yáng)性對(duì)照管培養(yǎng)48～72小時(shí)應(yīng)生長(zhǎng)良好12藥品生物檢定技術(shù)7/23/2023四、無(wú)菌檢查法（二）對(duì)照試驗(yàn)2.陰性對(duì)照不得長(zhǎng)菌，用以檢查試驗(yàn)過(guò)程中使用的溶劑、稀釋液、沖洗液等對(duì)微生物生長(zhǎng)及存活無(wú)影響13藥品生物檢定技術(shù)7/23/2023四、無(wú)菌檢查法（三）檢查方法1.薄膜過(guò)濾法通過(guò)濾膜過(guò)濾，將供試品中可能存在的微生物富集于濾膜上，再?zèng)_洗掉濾膜上的抑菌成分后，在薄膜過(guò)濾器濾筒內(nèi)加入培養(yǎng)基，在所需溫度下培養(yǎng)，觀察是否有菌生長(zhǎng)14藥品生物檢定技術(shù)7/23/2023四、無(wú)菌檢查法（三）檢查方法2.直接接種法3.培養(yǎng)及觀察將含培養(yǎng)基的容器在規(guī)定的溫度培養(yǎng)14天，逐日觀察并記錄是否有菌生長(zhǎng)。必要時(shí)可轉(zhuǎn)種及涂片15藥品生物檢定技術(shù)7/23/2023五、無(wú)菌檢查結(jié)果判斷（三）檢查方法1.陽(yáng)性對(duì)照管應(yīng)生長(zhǎng)良好，陰性對(duì)照管不得有菌生長(zhǎng)。否則，試驗(yàn)無(wú)效。2.若供試品管顯澄清，或雖顯渾濁但經(jīng)確證無(wú)菌生長(zhǎng)，判供試品符合規(guī)定。3.若供試品管中任何一管顯渾濁并確證有菌生長(zhǎng)，判供試品不符合規(guī)定，除非能充分證明試驗(yàn)結(jié)果無(wú)效，即生長(zhǎng)的微生物非供試品所含。4.試驗(yàn)若經(jīng)確認(rèn)無(wú)效，需依法重試。16藥品生物檢定技術(shù)7/23/2023第二節(jié)

微生物限度檢查17藥品生物檢定技術(shù)7/23/2023微生物限度檢查法系檢查非規(guī)定滅菌制劑及其原料、輔料受到微生物污染程度的方法，檢查項(xiàng)目包括細(xì)菌數(shù)、霉菌數(shù)、酵母菌數(shù)及控制菌檢查。微生物限度檢查成為非規(guī)定滅菌制劑保證藥品質(zhì)量的重要檢查內(nèi)容，也是綜合評(píng)價(jià)藥品生產(chǎn)各環(huán)節(jié)衛(wèi)生狀況的一個(gè)依據(jù)。18藥品生物檢定技術(shù)7/23/2023一、常規(guī)技術(shù)要求及檢驗(yàn)量（一）技術(shù)要求1.檢查應(yīng)在環(huán)境潔凈度10000級(jí)下的局部潔凈度100級(jí)的單向流空氣區(qū)域內(nèi)進(jìn)行。檢驗(yàn)全過(guò)程必須嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作，防止再污染。2.單向流空氣區(qū)域、工作臺(tái)面及環(huán)境應(yīng)定期按《醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）懸浮粒子、浮游菌和沉降菌的測(cè)試方法》的現(xiàn)行國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行潔凈度驗(yàn)證。3.供試品檢查時(shí)，如果使用了表面活性劑、中和劑或滅活劑，應(yīng)證明其有效性及對(duì)微生物無(wú)毒性。4.細(xì)菌培養(yǎng)溫度為30～35℃；霉菌、酵母菌培養(yǎng)溫度為23～28℃；控制菌培養(yǎng)溫度為35～37℃。5.檢驗(yàn)結(jié)果以1g、1ml、10g、10ml或10cm2為單位報(bào)告，特殊品種可以最小包裝單位報(bào)告。19藥品生物檢定技術(shù)7/23/2023一、常規(guī)技術(shù)要求及檢驗(yàn)量（二）檢驗(yàn)量一次試驗(yàn)所用的供試品量(g、ml或cm2)。除另有規(guī)定外，一般供試品的檢驗(yàn)量為10g或10ml；膜劑為100cm2；貴重藥品、微量包裝藥品的檢驗(yàn)量可以酌減。要求檢查沙門(mén)菌的供試品，其檢驗(yàn)量應(yīng)增加20g或20ml。檢驗(yàn)時(shí)，應(yīng)從2個(gè)以上最小包裝單位中抽取供試品，膜劑還不得少于4片。一般應(yīng)隨機(jī)抽取不少于檢驗(yàn)用量（兩個(gè)以上最小包裝單位）的3倍量供試品。20藥品生物檢定技術(shù)7/23/2023二、樣品供試液的制備《中國(guó)藥典》現(xiàn)行版附錄中提供了液體供試品、固體、半固體或黏稠性供試品以及需用特殊方法制備供試液的供試品的供試液制備方法。需用特殊方法制備供試液的供試品有：非水溶性供試品、膜劑供試品、腸溶及結(jié)腸溶制劑供試品、氣霧劑、噴霧劑供試品及具抑菌活性的供試品。21藥品生物檢定技術(shù)7/23/2023三、菌種及培養(yǎng)基（一）菌種1.細(xì)菌、霉菌、酵母菌計(jì)數(shù)檢查的對(duì)照試驗(yàn)菌種大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、白色念珠菌、黑曲霉2.控制菌檢查的對(duì)照菌種大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、乙型副傷寒沙門(mén)菌、銅綠假單胞菌、生孢梭菌、白色念珠菌22藥品生物檢定技術(shù)7/23/2023三、菌種及培養(yǎng)基（二）培養(yǎng)基1.細(xì)菌、霉菌及酵母菌計(jì)數(shù)檢查常用的培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基、改良馬丁培養(yǎng)基、改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基、玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基、酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。2.控制菌檢查常用的培養(yǎng)基用于菌液制備的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基等常規(guī)培養(yǎng)基膽鹽乳糖培養(yǎng)基、曙紅亞甲藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基等20余種用于培養(yǎng)基適用性檢查、方法驗(yàn)證試驗(yàn)及供試品檢查的培養(yǎng)基。23藥品生物檢定技術(shù)7/23/2023三、菌種及培養(yǎng)基白色念珠菌玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基大腸埃希菌曙紅亞甲藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基24藥品生物檢定技術(shù)7/23/2023四、方法的驗(yàn)證試驗(yàn)建立微生物限度檢查法時(shí)，應(yīng)先進(jìn)行方法驗(yàn)證：確認(rèn)所采用的方法適合于該藥品的細(xì)菌、霉菌、酵母菌的菌落計(jì)數(shù)測(cè)定或控制菌的檢查。選擇法定試驗(yàn)菌按照規(guī)定的方法及要求進(jìn)行。25藥品生物檢定技術(shù)7/23/2023五、藥品的微生物限度檢驗(yàn)方法（一）細(xì)菌、霉菌及酵母菌計(jì)數(shù)檢測(cè)的是藥物在單位質(zhì)量或體積內(nèi)所存在的活菌數(shù)量評(píng)價(jià)生產(chǎn)過(guò)程中原輔料、設(shè)備、器具、工藝、環(huán)境及操作者的衛(wèi)生狀況26藥品生物檢定技術(shù)7/23/2023五、藥品的微生物限度檢驗(yàn)方法（一）細(xì)菌、霉菌及酵母菌計(jì)數(shù)1.計(jì)數(shù)方法的驗(yàn)證用以保證方法中供試液沒(méi)有抗菌活性、培養(yǎng)條件適宜細(xì)菌、霉菌及酵母菌生長(zhǎng)、制備過(guò)程中稀釋劑未受微生物干擾、供試液稀釋級(jí)選擇適宜。驗(yàn)證試驗(yàn)包括試驗(yàn)組、菌液組、供試品對(duì)照組及稀釋劑對(duì)照組判斷指標(biāo):各試驗(yàn)菌每次試驗(yàn)的菌數(shù)回收率27藥品生物檢定技術(shù)7/23/2023五、藥品的微生物限度檢驗(yàn)方法（一）細(xì)菌、霉菌及酵母菌計(jì)數(shù)2.供試品檢查方法（1）平皿法根據(jù)菌數(shù)報(bào)告規(guī)則取相應(yīng)稀釋級(jí)的供試液1ml，置直徑90mm的無(wú)菌平皿中，注入15～20ml溫度不超過(guò)45℃的溶化的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基（細(xì)菌）或玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基（霉菌）或酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（酵母菌），混勻，凝固，倒置培養(yǎng)。每稀釋級(jí)每種培養(yǎng)基至少制備2個(gè)平板。平皿法以培養(yǎng)后細(xì)菌、霉菌或酵母菌在瓊脂平板上形成的獨(dú)立可見(jiàn)的菌落為計(jì)數(shù)依據(jù)，按照菌數(shù)報(bào)告規(guī)則進(jìn)行報(bào)告。同時(shí)取試驗(yàn)用的稀釋液1ml，同法操作，作為陰性對(duì)照試驗(yàn)。每種計(jì)數(shù)用的培養(yǎng)基各制備2個(gè)平板，均不得有菌生長(zhǎng)。28藥品生物檢定技術(shù)7/23/2023營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基取相應(yīng)稀釋級(jí)的供試液1ml置無(wú)菌平皿中玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基陰性對(duì)照試驗(yàn)細(xì)菌、霉菌計(jì)數(shù)試驗(yàn)用的稀釋液1ml29藥品生物檢定技術(shù)7/23/2023細(xì)菌、霉菌計(jì)數(shù)圖片截取自原中國(guó)藥品生物制品檢定所《無(wú)菌檢查和微生物檢查操作規(guī)范》視頻30藥品生物檢定技術(shù)7/23/2023五、藥品的微生物限度檢驗(yàn)方法（一）細(xì)菌、霉菌及酵母菌計(jì)數(shù)2.供試品檢查方法（2）薄膜過(guò)濾法所用濾膜孔徑不大于0.45μm，直徑一般為50mm。取相當(dāng)于每張濾膜含1g、1ml或10cm2供試品的供試液（或適宜稀釋級(jí)的供試液1ml），加至適量的稀釋劑中，混勻，過(guò)濾。用pH7.0無(wú)菌沖洗液沖洗濾膜后，取出濾膜，菌面朝上貼于營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基或玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基或酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板上培養(yǎng)，培養(yǎng)條件和計(jì)數(shù)方法同平皿法。每種培養(yǎng)基至少制備一張濾膜。根據(jù)菌數(shù)報(bào)告規(guī)定計(jì)數(shù)，如超過(guò)規(guī)定限量即可認(rèn)定不合格。同時(shí)取試驗(yàn)用的稀釋液1ml同法操作，作為陰性對(duì)照，陰性對(duì)照不得有菌生長(zhǎng)。31藥品生物檢定技術(shù)7/23/2023五、藥品的微生物限度檢驗(yàn)方法（二）控制菌檢查檢查非規(guī)定滅菌制劑中是否存在有可疑的致病菌控制菌檢查項(xiàng)目包括大腸埃希菌、大腸菌群、沙門(mén)菌、銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌、梭菌及白色念珠菌。32藥品生物檢定技術(shù)7/23/2023五、藥品的微生物限度檢驗(yàn)方法（二）控制菌檢查1.適用性檢查適用性檢查項(xiàng)目包括促生長(zhǎng)能力、抑制能力及指示能力的檢查促生長(zhǎng)能力檢查用以保證在相應(yīng)控制菌檢查規(guī)定的培養(yǎng)溫度及最短培養(yǎng)時(shí)間內(nèi)，試驗(yàn)菌生長(zhǎng)良好（液體培養(yǎng)基）、菌落大小、形態(tài)特征與對(duì)照菌一致（固體培養(yǎng)基）抑制能力檢查用以保證其他試驗(yàn)菌無(wú)法生長(zhǎng)指示能力檢查用以保證培養(yǎng)基上試驗(yàn)菌的生長(zhǎng)情況（液體培養(yǎng)基）、菌落大小、形態(tài)特征（固體培養(yǎng)基）、指示劑反應(yīng)情況等與對(duì)照培養(yǎng)基一致33藥品生物檢定技術(shù)7/23/2023五、藥品的微生物限度檢驗(yàn)方法（二）控制菌檢查2.方法驗(yàn)證試驗(yàn)控制菌檢查方法的驗(yàn)證試驗(yàn)用以保證方法中供試液沒(méi)有抗菌活性、所采用方法適合于該產(chǎn)品的控制菌檢查34藥品生物檢定技術(shù)7/23/2023五、藥品的微生物限度檢驗(yàn)方法（二）控制菌檢查3.陽(yáng)性對(duì)照試驗(yàn)和陰性對(duì)照試驗(yàn)試驗(yàn)菌的陽(yáng)性對(duì)照試驗(yàn)：應(yīng)檢出相應(yīng)的控制菌稀釋液的陰性對(duì)照試驗(yàn)：應(yīng)無(wú)菌生長(zhǎng)35藥品生物檢定技術(shù)7/23/2023五、藥品的微生物限度檢驗(yàn)方法（二）控制菌檢查4.控制菌檢查法（1）大腸埃希菌檢查法：取供試液在膽鹽乳糖培養(yǎng)基的培養(yǎng)物0.2ml，接種至含5ml4-甲基傘形酮葡糖苷酸（MUG）培養(yǎng)基的試管內(nèi)，培養(yǎng)，于5小時(shí)、24小時(shí)在366nm紫外線下觀察，同時(shí)用未接種的MUG培養(yǎng)基作本底對(duì)照。若管內(nèi)培養(yǎng)物呈現(xiàn)熒光，為MUG陽(yáng)性；不呈現(xiàn)熒光，為MUG陰性。觀察后，沿培養(yǎng)管的管壁加入數(shù)滴靛基質(zhì)試液，液面呈玫瑰紅色，為靛基質(zhì)陽(yáng)性；呈試劑本色，為靛基質(zhì)陰性。本底對(duì)照應(yīng)為MUG陰性和靛基質(zhì)陰性。

36藥品生物檢定技術(shù)7/23/2023五、藥品的微生物限度檢驗(yàn)方法（二）控制菌檢查4.控制菌檢查法

（2）大腸菌群在乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基管中，分別加入1∶10、1∶100、1∶1000的供試液1ml，用稀釋劑1ml作為陰性對(duì)照，均培養(yǎng)18～24小時(shí)，觀察結(jié)果37藥品生物檢定技術(shù)7/23/2023五、藥品的微生物限度檢驗(yàn)方法（二）控制菌檢查4.控制菌檢查法（3）沙門(mén)菌檢查法：取供試液在營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中的培養(yǎng)物1ml，接種于10ml四硫磺酸鈉亮綠培養(yǎng)基中，培養(yǎng)18～24小時(shí)后，劃線接種于膽鹽硫乳瓊脂（或沙門(mén)、志賀菌屬瓊脂）培養(yǎng)基和麥康凱瓊脂（或曙紅亞甲藍(lán)瓊脂）培養(yǎng)基平板上，根據(jù)培養(yǎng)后平板上有無(wú)菌落生長(zhǎng)、或生長(zhǎng)的菌落形態(tài)特征，判斷是否檢出沙門(mén)菌。如菌落形態(tài)特征相符或疑似，還應(yīng)通過(guò)用三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基高層斜面進(jìn)行斜面和高層穿刺接種試驗(yàn)做進(jìn)一步判斷。38藥品生物檢定技術(shù)7/23/2023五、藥品的微生物限度檢驗(yàn)方法（二）控制菌檢查4.控制菌檢查法（4）銅綠假單胞菌檢查法：取供試液在膽鹽乳糖培養(yǎng)基的培養(yǎng)液，劃線接種于溴化十六烷基三甲銨瓊脂培養(yǎng)基平板上，根據(jù)培養(yǎng)后平板上有無(wú)菌落生長(zhǎng)、或生長(zhǎng)的菌落形態(tài)特征，判斷是否檢出銅綠假單胞菌。如菌落形態(tài)特征相符或疑似，還應(yīng)通過(guò)氧化酶試驗(yàn)及綠膿菌素試驗(yàn)做進(jìn)一步判斷39藥品生物檢定技術(shù)7/23/2023五、藥品的微生物限度檢驗(yàn)方法（二）控制菌檢查4.控制菌檢查法（5）金黃色葡萄球菌檢查法：取供試液在亞碲酸鈉（鉀）肉湯（或營(yíng)養(yǎng)肉湯）培養(yǎng)基的培養(yǎng)液，劃線接種于卵黃氯化鈉瓊脂培養(yǎng)基或甘露醇氯化鈉瓊脂培養(yǎng)基平板上。根據(jù)培養(yǎng)后平板上有無(wú)菌落生長(zhǎng)、或生長(zhǎng)的菌落形態(tài)特征，判斷是否檢出金黃色葡萄球菌。如菌落形態(tài)特征相符或疑似，還應(yīng)通過(guò)血漿凝固酶試驗(yàn)做進(jìn)一步判斷40藥品生物檢定技術(shù)7/23/2023第三節(jié)

抗生素效價(jià)的微生物檢定法41藥品生物檢定技術(shù)7/23/2023抗生素微生物檢定法在適宜條件下，根據(jù)量反應(yīng)平行線原理設(shè)計(jì)，通過(guò)檢測(cè)抗生素對(duì)微生物的抑制作用，計(jì)算抗生素活性（效價(jià)）的方法?！吨袊?guó)藥典》現(xiàn)行版：管碟法和濁度法42藥品生物檢定技術(shù)7/23/2023一、檢定原理標(biāo)準(zhǔn)品溶液和供試品溶液量反應(yīng)平行線原理：在相同試驗(yàn)條件下，標(biāo)準(zhǔn)品溶液和供試品溶液對(duì)試驗(yàn)菌所得的量反應(yīng)曲線，在一定劑量范圍內(nèi)互相平行檢定方法管碟法：二劑量法、三劑量法濁度法：二劑量法、三劑量法、標(biāo)準(zhǔn)曲線法43藥品生物檢定技術(shù)7/23/2023二、試驗(yàn)菌管碟法試驗(yàn)菌：枯草芽孢桿菌、短小芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、藤黃微球菌、大腸埃希菌、啤酒酵母菌、肺炎克雷伯菌、支氣管炎伯德特菌。濁度法試驗(yàn)菌：金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、白色念珠菌44藥品生物檢定技術(shù)7/23/2023三、管碟法利用抗生素在瓊脂培養(yǎng)基內(nèi)的擴(kuò)散作用，比較標(biāo)準(zhǔn)品與供試品兩者對(duì)接種的試驗(yàn)菌產(chǎn)生抑菌圈的大小，以測(cè)定供試品效價(jià)的一種方法。國(guó)際上抗生素藥品檢定的經(jīng)典方法?！吨袊?guó)藥典》法定方法：二劑量法和三劑量法45藥品生物檢定技術(shù)7/23/2023三、管碟法46藥品生物檢定技術(shù)7/23/2023四、濁度法利用抗生素在液體培養(yǎng)基中對(duì)試驗(yàn)菌生長(zhǎng)的抑制作用，通過(guò)測(cè)定培養(yǎng)后細(xì)菌濁度值的大小，比較標(biāo)準(zhǔn)品與供試品對(duì)試驗(yàn)菌生長(zhǎng)抑制的程度，以測(cè)定供試品效價(jià)的一種方法?！吨袊?guó)藥典》現(xiàn)行版法定方法：標(biāo)準(zhǔn)曲線法、二劑量法和三劑量法。47藥品生物檢定技術(shù)7/23/2023第四節(jié)

生化藥物效價(jià)的生物測(cè)定法48藥品生物檢定技術(shù)7/23/2023生化藥品采用生物化學(xué)方法，從生物材料中分離、純化、精制而成的用以治療、預(yù)防和診斷疾病的藥品如氨基酸、肽、蛋白質(zhì)、酶類(lèi)劑量以效價(jià)（單位）表示《中國(guó)藥典》現(xiàn)行版正文下列入【效價(jià)測(cè)定】多采用生物檢定技術(shù)測(cè)定效價(jià)49藥品生物檢定技術(shù)7/23/2023名稱(chēng)效價(jià)檢定指標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品檢定用生物體升壓素血壓升高的程度垂體后葉標(biāo)準(zhǔn)品成年雄性大鼠肝素延長(zhǎng)新鮮兔血或兔、豬血漿凝固時(shí)間的作用肝素標(biāo)準(zhǔn)品新鮮兔血或兔、豬血漿絨促性素對(duì)幼小鼠子宮增重作用絨促性素標(biāo)準(zhǔn)品雌性幼小鼠的子宮縮宮素引起離體大鼠子宮收縮的作用垂體后葉或合成縮宮素標(biāo)準(zhǔn)品成年雌性大鼠的子宮胰島素引起小鼠血糖下降的作用胰島素標(biāo)準(zhǔn)品成年小鼠血精蛋白鋅胰島素注射液降低家兔血糖的作用胰島素標(biāo)準(zhǔn)品健康家兔血50藥品生物檢定技術(shù)7/23/2023名稱(chēng)效價(jià)檢定指標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品檢定用生物體硫酸魚(yú)精蛋白延長(zhǎng)新鮮兔血或豬、兔血漿凝結(jié)時(shí)間的程度肝素標(biāo)準(zhǔn)品新鮮兔血或兔、豬血漿卵泡刺激素對(duì)幼大鼠卵巢增重的作用尿促性素標(biāo)準(zhǔn)品雌性幼大鼠卵巢黃體生成素對(duì)幼大鼠精囊增重的作用尿促性素標(biāo)準(zhǔn)品雄性幼大鼠精囊降鈣素