臨床免疫學(xué)質(zhì)控方案臨床免疫學(xué)檢驗指基于物質(zhì)的化學(xué)或物理特性將其識別或分類的一組操作。免疫學(xué)檢驗包括：①任何利用抗體與某物質(zhì)作用而檢測該物質(zhì)的實驗室方法。②利用特異性抗原或抗體能夠綁定到分析物的配體-綁定實驗。定性試驗是指只提供兩種反應(yīng)結(jié)果的檢測方法(即陽性/陰性或者是/否),陽性結(jié)果只說明分析信號超過了分析閾值(檢出限)或臨界值(臨界值的設(shè)定給出簡要的敏感性和特異性組合),無論檢測方法本身是定性或定量的技術(shù)。定性試驗大多涉及感染性疾病標(biāo)志物、自身抗體等項目。本章只要求參照臨床化學(xué)執(zhí)行。(一)新員工檢驗人員上崗前需經(jīng)過培訓(xùn)，熟練掌握本專業(yè)如下幾個方面4.正確使用移液器的方法和加樣的注意事項。6.定性試驗室內(nèi)質(zhì)控的方法、質(zhì)控記錄的保存及失控處理。對新進(jìn)員工在見習(xí)期應(yīng)定期考核和能力評審，保存評審記錄。某些特殊項目的檢測如抗HIV等需經(jīng)有關(guān)部門組織的專門培訓(xùn)(二)老員工對老員工的評審至少每年進(jìn)行一次，保存評審記錄。當(dāng)職責(zé)變更時，或離崗6個月后再上崗時，應(yīng)對員工進(jìn)行再培訓(xùn)和再評審。未通過評審的人員應(yīng)經(jīng)再培訓(xùn)和再評審，合格后才可繼續(xù)上(三)評審內(nèi)容1.通過筆試和提問考核員工的基礎(chǔ)知識。2.直接觀察員工檢測常規(guī)標(biāo)本的能力，如標(biāo)本采集、處理和3.監(jiān)控員工對檢測結(jié)果的記錄和報告，包括危急值的報告(如果合適的話)。4.直接觀察員工保養(yǎng)和維護(hù)酶標(biāo)儀、洗板機(jī)等儀器的能力，以及驗證儀器性能的能力。5.審查質(zhì)控記錄、PT結(jié)果和維護(hù)記錄。6.通過檢測過往標(biāo)本或PT標(biāo)本來評估員工的檢測能力。7.評價員工解決問題的能力，如與臨床和患者溝通的能力。在能力評審時，可根據(jù)開展的檢測選擇或增加合適的評審二、儀器免疫學(xué)實驗室需要定期校準(zhǔn)的儀器有酶標(biāo)儀、洗板機(jī)、移液(一)酶標(biāo)儀離離心機(jī)和振蕩器等儀器。為了保證酶標(biāo)儀的穩(wěn)定性能，在初次使用前和使用過程中都要對其性能進(jìn)行驗證。本部分內(nèi)容適用于1.標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)驗證過程需要用到以下兩種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。(1)光譜中性濾光片：吸光度標(biāo)示值分別是0.2、0.5、1.0和1.5(不確定度≤0.01)。(2)酶標(biāo)分析儀用靈敏度溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：該標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)以0.05mol/L硫酸為基體，用重鉻酸鉀純物質(zhì)配制而成的質(zhì)量濃度為5mg/L的溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(不確定度≤0.01)。2.驗證內(nèi)容及方法(1)示值穩(wěn)定性：選用492nm波長或儀器特有的專一波長，將吸光度標(biāo)稱值1.0的光譜中性濾光片平放在微孔酶標(biāo)板的空架上，以空氣為參比，測量并記錄儀器的初始示值A(chǔ)初始，5分鐘后記錄儀器示值一次，10分鐘后再次記錄儀器示值。求出后兩次的示值最大值A(chǔ)最大，然后計算示值穩(wěn)定性r=A最大一A初始，其偏差不超過±0.005。(2)波長示值誤差：使用波長示值誤差優(yōu)于±0.5nm的分光光度計，檢測儀器所附干涉濾光片在各標(biāo)稱波長λ下的透射比(干涉濾光片平面需與入射光束垂直),繪制波長-透射比特性曲線，求得最大透射比時的波長m。干涉濾光片峰值波長誤差△λ=λm一(3)吸光度示值誤差：依次選用405nm,450nm,492nm,620nm波長或儀器特有的專一波長，將吸光度標(biāo)稱值分別為0.2、0.5、1.0和1.5的四塊光譜中性濾光片同時放在微孔酶標(biāo)板的空板架上，以空氣為參比，連續(xù)測量3次，依次記錄儀器示值，并計算平均值。對于吸收池固定的儀器，先用空吸收池調(diào)整儀器零點，再重復(fù)上述檢測。吸光度示值誤差△A按下列公式計算，△A不應(yīng)超過士0.03。A;:第i次測量的吸光度值；A,:吸光度標(biāo)準(zhǔn)值。(4)吸光度重復(fù)性：選用450nm波長或儀器特有的專一波長，將吸光度標(biāo)稱值為0.5或1.0的光譜中性濾光片平放在微孔酶標(biāo)板的空架上，以空氣為參比，于固定的某一孔重復(fù)測量6次，記錄儀器示值，并計算平均值x,按公式14-2計算實驗結(jié)果的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差值(RSD)。用RSD表示儀器的吸光度重復(fù)性，RSD不應(yīng)超過1.0%。X;:第i次測量結(jié)果；n:測量次數(shù)；X:n次測量結(jié)果的吸光度平均值。(5)靈敏度：選用450nm波長或儀器特有的專一波長，在未包被抗原或抗體的微孔酶標(biāo)板的某一孔中準(zhǔn)確加入350μl濃度值為5mg/L的酶標(biāo)分析儀用靈敏度溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，測量吸光度值，靈敏度應(yīng)≥0.01L/mg。(6)通道差異：多通道酶標(biāo)儀需驗證通道差異，可選用450nm波長或儀器特有的專一波長，將吸光度標(biāo)示值為1.0的光譜中性濾光片平放在微孔酶標(biāo)板的空架上，先后置于多個通道的相應(yīng)位置，以空氣為參比，測量并記錄每一通道的至少6次吸光度值，多個通道的差異結(jié)果用全部測量數(shù)據(jù)的極差值表示，按公式14-3計算通道差異δ,◎不應(yīng)超過0.03。A最大：多個通道中測量結(jié)果的吸光度最大值；A最小：多個通道中測量結(jié)果的吸光度最小值。3.驗證周期新酶標(biāo)儀初次使用前需要對儀器進(jìn)行驗證；使用過程中至少一年驗證一次；維修后或?qū)z測結(jié)果有疑問時應(yīng)及時驗證。4.校準(zhǔn)及校準(zhǔn)驗證如果酶標(biāo)儀不符合要求則需要按照廠商說明書對儀器進(jìn)行校準(zhǔn)，該過程只能由專業(yè)技術(shù)人員完成。校準(zhǔn)完成后逐列進(jìn)行校準(zhǔn)驗證。在酶標(biāo)儀板架上放置一塊干凈的空板，然后讀數(shù)，如果每一列讀數(shù)的平均值無差異，說明校準(zhǔn)完成，否則繼續(xù)校準(zhǔn)和校準(zhǔn)驗證。(二)移液器實驗室要根據(jù)用途和使用頻率來確定校準(zhǔn)周期，不過至少要每一年校準(zhǔn)一次。如果每天都使用，建議每3個月校準(zhǔn)一次。校準(zhǔn)時要按照生產(chǎn)商的說明書進(jìn)行操作。(三)洗板機(jī)餾水清洗洗板機(jī)通道內(nèi)的洗液，清洗完成后可將探針頭浸入蒸餾水中直至下次使用。建議每天在使用前驗證：①注液體積；②探針頭間注液量的一致性；③殘液量。如果不滿足說明書所標(biāo)示的(四)水浴箱如果水浴箱或溫箱只在檢測程序中使用，只需在使用當(dāng)天監(jiān)(五)離心機(jī)多數(shù)血清離心機(jī)和定時器不需要頻繁的校準(zhǔn)。在維修或引進(jìn)新檢測技術(shù)后需要對其進(jìn)行檢查，并且以后要定期檢查。根據(jù)離心機(jī)以往的穩(wěn)定性確定檢查頻率，但是至少每6個月進(jìn)行一次。度、CutOff值等的性能驗證，某些特殊項目進(jìn)行分析特異性的1.檢出限值檢出限值是指可以在規(guī)定的可能性條件下檢出的標(biāo)本中分析物的最小量，雖然也許尚不能被量化為實際的值。檢出限值是定性試驗的重要性能指標(biāo)，真實陽性的標(biāo)本將有95%等可能會使檢出限值發(fā)生變化。例如，由于試劑的改變使檢出限值升高，具有可檢出水平分析物的標(biāo)本會得到低于判斷限的結(jié)果，從而會增加假陰性結(jié)果的比率。因此，確定檢出限值對許多定性試驗的質(zhì)量很重要。2.分析特異性測量系統(tǒng)的能力，用指定的測量程序，對一個或多個被測量給出的測量結(jié)果互不依賴也不依賴于接受測量的系統(tǒng)中的任何其他量。調(diào)查分析特異性時需要考慮干擾因素(如血紅蛋白、脂質(zhì)、膽紅素和蛋白濃度)和交叉反應(yīng)(如異嗜性抗體、生物學(xué)相關(guān)的微生物)兩個方面的內(nèi)容。3.符合率陽性或陰性結(jié)果中真實值的比例。如果待驗證的方法與金標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較時，符合率反映的是待驗證方法的正確度。當(dāng)與其他驗證過的方法比較時，符合率反映的是兩個方法間4.CutOff值對于使用CutOff值區(qū)別陰陽性結(jié)果的定性試驗，應(yīng)按照制造商的說明或定義定期評審CutOff臨界值或閾值。CutOoff驗證值有以下兩種用途：(1)灰區(qū)的設(shè)定(血站可只關(guān)心下限；臨床則上下限均關(guān)注)。(2)Levey-Jennings質(zhì)控圖的控制限確定。建議在更換試劑批號時進(jìn)行驗證，實驗室為適應(yīng)這樣的要求可以調(diào)整訂購試劑的習(xí)慣，盡量在較長一段時間內(nèi)使用同一批號5.精密度在規(guī)定條件下，對同一或相似被測對象重復(fù)測量得到測量示值或測得量值間的一致程度。測量精密度通常以數(shù)字?jǐn)?shù)。定性試驗應(yīng)該評估CutOff值附近分析物濃度的方法不精密度。不宜使用陰性值過低或強(qiáng)陽性的標(biāo)本來驗證定性試驗的不精實驗室應(yīng)選用有國家批準(zhǔn)文號的試劑，特殊項目如艾滋病抗體初篩試劑應(yīng)有批批檢定合格證書。應(yīng)保留制造商提供的試劑性1.比對新批號試劑和(或)新到同批號試劑應(yīng)與之前或現(xiàn)在放置于設(shè)備中的舊批號、舊試劑平行檢測以保證患者結(jié)果的一致性。比對方案應(yīng)至少利用一份已知陽性和一份已知陰性的患者2.有效期對于生產(chǎn)商沒有提供有效期的試劑，實驗室必須指定一個有效期。指定的有效期應(yīng)該根據(jù)已知的穩(wěn)定性、使用頻校準(zhǔn)是指在特定的條件下建立試劑/儀器系統(tǒng)的響應(yīng)量與對應(yīng)分析物的濃度/活性之間關(guān)系的一系列操作。本部分內(nèi)容只適用于真正給出定量結(jié)果的分析，用質(zhì)量/單位體積(如mg/L或mg/ml)表示、或使用的單位可以溯源到用質(zhì)量/單位體積校準(zhǔn)的一個參考制劑或標(biāo)準(zhǔn)品。如果不符合這些標(biāo)準(zhǔn)，那么檢測就不是(一)校準(zhǔn)品校準(zhǔn)品一般由分析系統(tǒng)廠商提供。如果第三方提供的校準(zhǔn)品(二)校準(zhǔn)方法按照分析系統(tǒng)廠商提供的校準(zhǔn)程序進(jìn)行校準(zhǔn)。(三)校準(zhǔn)周期檢驗項目校準(zhǔn)及校準(zhǔn)驗證周期應(yīng)遵照生產(chǎn)商建議的時間，至少每6個月一次。在更換了試劑批號或儀器的重要部件后以及失控處理后應(yīng)做項目校準(zhǔn)。(四)校準(zhǔn)驗證如果分析系統(tǒng)廠商提供了校準(zhǔn)確認(rèn)或驗證過程，應(yīng)該去遵照。其他方法包括：①將當(dāng)前方法的校準(zhǔn)物作為未知標(biāo)本來分析，以驗證能否得到正確的靶值；②分析具有靶值的物質(zhì)，這些物質(zhì)的基質(zhì)必須適合于該方法。用于校準(zhǔn)驗證的物質(zhì)除了無基質(zhì)效應(yīng)外，其靶值也要適合于1.用于校準(zhǔn)分析系統(tǒng)的校準(zhǔn)物。2.分析系統(tǒng)廠商提供的用于校準(zhǔn)驗證的物質(zhì)。3.以往檢測過的患者/就診者的標(biāo)本(未經(jīng)稀釋、濃縮或變質(zhì)4.基質(zhì)特征和靶值適合于檢測系統(tǒng)的一級或二級標(biāo)準(zhǔn)或參5.基質(zhì)特征和靶值適合于檢測系統(tǒng)的PT物質(zhì)或PT驗證過的物質(zhì)。除非檢測系統(tǒng)生產(chǎn)商做了明確說明，通常常規(guī)質(zhì)控物不適合于校準(zhǔn)驗證。如果校準(zhǔn)驗證結(jié)果符合了實驗室預(yù)先設(shè)定的可接受限值，說明校準(zhǔn)是有效的；如果校準(zhǔn)驗證結(jié)果超出了實驗室預(yù)先設(shè)定的可接受限值，說明校準(zhǔn)無效，需要重新校準(zhǔn)和校準(zhǔn)驗證。六、室內(nèi)質(zhì)控(一)質(zhì)控品的選擇質(zhì)控品的種類繁多，實驗室在選擇合適的質(zhì)控品時應(yīng)注意以下幾點：1.基質(zhì)應(yīng)盡量選擇人血清基質(zhì)。由于人體內(nèi)有大量的異嗜性抗體的存在，工程菌或動物源性的基質(zhì)，引起非特異性或中和反應(yīng)造成假失控。稀釋液也應(yīng)選用人血清，凍干品復(fù)溶可以使用生理鹽水，避免使用動物源性的小牛血清等。2.穩(wěn)定性室內(nèi)質(zhì)控需要觀察一段時間，一般選擇在規(guī)定的條件下如2～8℃或-20℃可以保存6個月以上的質(zhì)控物。要特別注意開瓶有效期和凍干質(zhì)控物復(fù)溶后分裝瓶的有效期與原裝瓶有效期的區(qū)別，通常前兩者的有效期要短許多。3.質(zhì)控品數(shù)量、實驗位置和頻次質(zhì)控品的數(shù)量應(yīng)滿足一個批號至少半年的實驗量。每分析批至少安排一個弱陽性和一個陰性質(zhì)控，檢測位置應(yīng)隨機(jī)放置。試劑盒所設(shè)的陰、陽性內(nèi)對照是用來計算CutOff值或閾值的，也有相應(yīng)的有效性判斷標(biāo)準(zhǔn)，但只能在同批號試劑內(nèi)使用，不能作為質(zhì)控指標(biāo)，質(zhì)控必須是可以監(jiān)控到不同試劑批號間的變化的外對照。4.濃度范圍分析方法或試劑盒的靈敏度和特異性等性能是由CutOff值確定的，因此，質(zhì)控品的濃度應(yīng)圍繞該值選擇。一般建議陽性質(zhì)控品濃度為2×CutOff值左右，陰性質(zhì)控品濃度為0.5×CutOff值左右。高值或超高值陽性血清是用來監(jiān)控“HOOK效應(yīng)”的，應(yīng)該在引進(jìn)分析方法或試劑盒時評價，不需要長期監(jiān)控，同時其測定值遠(yuǎn)高于CutOff值對邊緣結(jié)果的監(jiān)控也5.滅活盡管所有的制造商或生產(chǎn)者均聲明對已知的經(jīng)血不徹底以及其他未知的傳染性，實際工作中應(yīng)按生物安全防護(hù)的6.冰凍血清的融化和凍干品復(fù)溶免疫活性的質(zhì)控血清一使用的質(zhì)控血清可置于37℃水浴或孵箱中快速融化，輕柔地顛倒混勻5次以上；融化的血清應(yīng)置于4～8℃保存，禁止反復(fù)凍融。復(fù)溶凍干質(zhì)控品時，按說明書要求準(zhǔn)確量取(應(yīng)保證每瓶操作的一致性)生理鹽水(非蒸餾水，除非有特殊說明)加至質(zhì)控品容器中，蓋蓋后輕柔地顛倒混勻10次以上，以保證充分溶解；安瓿瓶應(yīng)先輕掉落在銳器盒中，加樣器加生理鹽水后反復(fù)抽吸10次以上。所有操作應(yīng)避免氣泡產(chǎn)生。復(fù)溶后的質(zhì)控品置4～8℃保存，也可分裝小份至-20℃以下保存，只允許凍融一次。融化、復(fù)溶、分裝后的7.自制質(zhì)控品大量的臨床免疫項目無商品化的質(zhì)控品供(1)收集陽性血清(無明顯溶血、黃疸、脂血和污染)到一定量(至少夠本室使用6個月以上的量)。(2)傳染性病原體需經(jīng)56℃、10小時滅活后使用。(3)0.2μm生物膜過濾，去除纖維沉淀物和細(xì)菌。(5)測定值，與定值參考品進(jìn)行對比、求值，無參考品時選擇在2倍CutOff值附近的陽性值。(7)評價穩(wěn)定性及瓶間差：穩(wěn)定性可以用溫箱加速試驗來評價，置37℃一天相當(dāng)于4～8℃保存1.5個月。(二)分析批分析批是指檢測系統(tǒng)的正確度和精密度處于穩(wěn)定狀態(tài)的持續(xù)時間，在這段時間內(nèi)可能會出現(xiàn)不利事件使檢測系統(tǒng)穩(wěn)定性下降，出現(xiàn)誤差的概率增加。為了監(jiān)控檢測系統(tǒng)的性能，每一個分析批都要檢測質(zhì)控物。ELISA等板式試驗應(yīng)該把每塊板視為一個分析批；定量免疫的分析批由檢測系統(tǒng)的批長度決定。(三)批長度批長度是時間長度的概念，該段時間內(nèi)檢測系統(tǒng)能夠?qū)⒂绊懢芏群驼_度的不利事件的發(fā)生風(fēng)險控制在容許水平。生產(chǎn)商可能推薦了檢測系統(tǒng)的批長度，不過由于用戶的操作環(huán)境、檢測負(fù)荷以及檢測程序的用途不同于生產(chǎn)商，所以實驗室需要定義自己的批長度。此外，檢測系統(tǒng)的性能會受儀器磨損、試劑重配、軟件升級和其他一些因素的影響，因此實驗室應(yīng)該周期性地對其進(jìn)行用戶在規(guī)定批長度時需要考慮以下幾點：①檢測程序的穩(wěn)定性；②患者標(biāo)本的檢測量；③失控后重新分析的花費；④工作流程；⑤在下次檢測質(zhì)控物前的這段時間，誤差漏檢對臨床的影響；⑥患者標(biāo)本中分析物的穩(wěn)定性是否允許失控后重新檢測受影響的標(biāo)本。目前尚無建立批長度的標(biāo)準(zhǔn)方法。一般認(rèn)為，批長度較大時有保持較低花費和較高生產(chǎn)率的優(yōu)勢，但是該優(yōu)勢會被因質(zhì)量惡化、誤差漏檢和由誤差引起的檢驗結(jié)果誤判而帶來的花費所抵償。為了解決花費與檢測質(zhì)量之間的矛盾，可以采用工業(yè)模型來進(jìn)行質(zhì)控程序的經(jīng)濟(jì)效益設(shè)計。此外，也可以通過監(jiān)控正常個體或患者標(biāo)本的均值來確定批長度。(四)灰區(qū)灰區(qū)概念：把定量分析的正常值范圍引入定性分析建立灰區(qū)概念，即將CO值上下的一段區(qū)域定為陽性可疑，需復(fù)查或復(fù)檢以確定其陰陽性，如仍落在灰區(qū)范圍內(nèi)則報告弱陽性。灰區(qū)范圍設(shè)定通過CutOff驗證所獲得的值來界定，即灰區(qū)=CutOff±(CutOff-CutOff驗證值),如實驗室乙肝表面抗原ELISA法CutOff驗證值為0.062,CutOff為0.105,則其灰區(qū)范圍為0.062～0.148,吸光度值在此范圍內(nèi)的標(biāo)本需重測復(fù)查(原標(biāo)本雙孔再次檢查)或用確認(rèn)方法復(fù)檢。(五)質(zhì)控方法1.純定性試驗如金標(biāo)試紙、斑點滲濾等，除檢測裝置的內(nèi)對照外，每檢測日或分析批，應(yīng)使用弱陽性和陰性外對照作為質(zhì)控。實驗室應(yīng)定義自己的質(zhì)控批長度。陰、陽性質(zhì)控的檢測結(jié)果2.根據(jù)滴度或稀釋度判定陰陽性結(jié)果的試驗如凝集試驗，每檢測日或分析批，應(yīng)使用弱陽性和陰性外對照作為質(zhì)控。實驗室應(yīng)定義自己的質(zhì)控批長度。陽性質(zhì)控結(jié)果在均值上下一個滴度或稀釋度以及陰性質(zhì)控結(jié)果為陰性即為在控，否則為失控。3.用數(shù)值判定結(jié)果的項目如ELISA、發(fā)光技術(shù)等可使用效期，質(zhì)控品生產(chǎn)商名稱、批號和有效期。橫坐標(biāo)(x軸)每個點表所示標(biāo)(y軸)用吸光度值或含量點圖。質(zhì)控物批號改變時應(yīng)重新繪制新的質(zhì)控圖，不應(yīng)隨試劑批號的改變而繪制新質(zhì)控圖(六)判定規(guī)則質(zhì)控判定規(guī)則可以使用下列規(guī)則之一：1.純定性規(guī)則陰、陽性質(zhì)控的檢測結(jié)果分別為陰性和陽性2.Westgard質(zhì)控規(guī)則至少利用其多規(guī)則中一個偶然誤差及一個系統(tǒng)誤差規(guī)則。陰、陽性質(zhì)控的檢測結(jié)果必須分別為陰性3.Westgard改良法繪制中心線和上下失控限三條線；中心線為質(zhì)控物測量均值；利用臨界值驗證值確定上下失控限。超出失控限為失控。應(yīng)制定程序?qū)κЭ剡M(jìn)行分析并采取相應(yīng)的措施，應(yīng)檢查失控對之前患者標(biāo)本檢測結(jié)果的影響。七、室間質(zhì)評實驗室應(yīng)使用相同的檢測系統(tǒng)檢測質(zhì)控標(biāo)本與患者標(biāo)本；應(yīng)由從事常規(guī)檢驗工作的人員實施能力驗證/室間質(zhì)評標(biāo)本的檢測；應(yīng)有禁止與其他實驗室之間核對上報能力驗證/室間質(zhì)評結(jié)果的規(guī)定；應(yīng)保留參加能力驗證/室間質(zhì)評的結(jié)果和證書。(一)方案1.發(fā)放質(zhì)控物進(jìn)行調(diào)查定期發(fā)放質(zhì)控物至各實驗室，實驗室在規(guī)定的日期進(jìn)行檢測，并將結(jié)果報至組織者(部、省、市臨檢中心)。組織者通過統(tǒng)計分析，再將評價結(jié)果反饋給實驗室，使其了解工作質(zhì)量，發(fā)現(xiàn)問題，提高質(zhì)量。其缺點為由于各實驗室互通信息修改結(jié)果而達(dá)不到預(yù)期的評價效果。2.現(xiàn)場調(diào)查事先不通知，臨時派出人員到各實驗室，規(guī)定采用常規(guī)方法，檢測一組標(biāo)本，進(jìn)行評價。這種方法可以解決實際問題，進(jìn)行現(xiàn)場指導(dǎo)，組織者常因人力、物力的原因而不能經(jīng)常進(jìn)行。(二)合格標(biāo)準(zhǔn)1.定性試驗檢驗結(jié)果與預(yù)期結(jié)果一致，記為“符合”,否則某項目的PT得分=該項目符合項數(shù)/批號數(shù)×100總PT得分=所有項目符合項數(shù)/總項數(shù)×100得分<80為不合格，得分≥80為合格。2.定量試驗同常規(guī)生物化學(xué)等定量檢測的評價方案。實驗室應(yīng)對“不滿意”和“不合格”的能力驗證/室間質(zhì)評結(jié)果進(jìn)行分析并采取糾正措施，并記錄。實驗室負(fù)責(zé)人或指定負(fù)責(zé)人應(yīng)監(jiān)控能力驗證/室間質(zhì)評的結(jié)果，并在結(jié)果報告上簽字。(三)外部比對對沒有開展能力驗證/室間質(zhì)評的檢驗項目，實驗室應(yīng)通過與其他實驗室(如已獲認(rèn)可的實驗室或其他使用相同檢測方法的配套系統(tǒng)的同級別或高級別醫(yī)院的實驗室)比對的方式判斷檢驗結(jié)1.規(guī)定比對實驗室的選擇原則。2.標(biāo)本數(shù)量至少5份，包括正常和異常水平。3.頻率至少每年2次。4.判定標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)有≥80%的結(jié)果滿足要求。5.當(dāng)實驗室間比對不適用時，實驗室應(yīng)建立評估檢驗結(jié)果與臨床診斷的一致性的程序，判斷檢驗結(jié)果的可接受性。每年評價不少于2次，并記錄。(四)內(nèi)部比對應(yīng)至少每年1次進(jìn)行實驗室內(nèi)部比對，包括人員和不同方法/檢測系統(tǒng)間的比對，至少選擇10份陰性標(biāo)本(需有4份以上其他標(biāo)志物陽性的陰性標(biāo)本)、10份陽性標(biāo)本(至少含弱陽性5份、強(qiáng)陽性1份)進(jìn)行比對，評價比對結(jié)果的可接受性。比對記錄應(yīng)由實驗室負(fù)責(zé)人審核并簽字，并應(yīng)保留至少3年。(一)結(jié)果的審核實驗室在發(fā)布檢測結(jié)果之前，須由專業(yè)主管或經(jīng)過培訓(xùn)的專業(yè)技術(shù)人員對結(jié)果進(jìn)行審核。審核的目的是為了發(fā)現(xiàn)和糾正數(shù)據(jù)輸入錯誤(筆誤)、分析錯誤和異常檢測結(jié)果。實驗室必須有現(xiàn)行的文件體系用于結(jié)果的審核。比如，可利用計算機(jī)系統(tǒng)自動“捕錯誤(筆誤)、分析錯誤和異常實驗室結(jié)果的系統(tǒng)實時審核和糾正錯誤。對于發(fā)完報告后檢出的錯誤，必須采取合適的糾正措施。可采取的糾正措施有：及時告知臨床醫(yī)生；重新檢測(如果需要的話);如果臨床醫(yī)生已經(jīng)根據(jù)結(jié)果進(jìn)行了臨床處理，需要評估對患者的影響；記錄錯誤發(fā)生的原因及采取的糾正措施。實驗室要為檢測過程的每一環(huán)節(jié)列出可能會導(dǎo)致分析結(jié)果出錯的原因，還要有應(yīng)對處理的明確方案。(二)結(jié)果的報告根據(jù)臨床應(yīng)用的價值，將定性免疫實驗分為篩查試驗和確認(rèn)1.篩查試驗用來檢測全體人群或人群亞群一個特征的出現(xiàn)(如感染原或相關(guān)抗體的出現(xiàn))。一般要求趨向兩個極端：①有高的臨床敏感性(即超過95%的臨床檢出率),檢測結(jié)果保證陰性篩選結(jié)果具有高可能性的沒有這些特征，而陽性結(jié)果可能需要做進(jìn)一步的確證試驗。血站系統(tǒng)的傳染病篩查屬于此類。②有高的特異性，檢測結(jié)果保證陽性篩選結(jié)果具有高可能性的具有這些特征。2.確認(rèn)試驗獲得篩選或診斷試驗陽性結(jié)果后，增加的試驗用于證明和確認(rèn)此人前面的陽性結(jié)果。在這種情況下，主要考慮的性能常常是特異性和陽性預(yù)測值，而不是敏感性和陰性預(yù)測值；特異性應(yīng)該超過98%～99%。確證試驗可以是非免疫化學(xué)的(如培養(yǎng)或脫氧核糖核酸研究)或免疫化學(xué)的(包括免疫印跡和抗原或抗體中和試驗)。如果篩選試驗已具有高的特異性和陽性預(yù)測值，則不需要確證試驗。案例1.乙型肝炎表面抗原(HBsAg)檢測：酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELSIA)存在“灰區(qū)”,低水平的檢測值無法避免假陽性和假陰性。當(dāng)檢測值落在“灰區(qū)”時需要做中和試驗：患者血清和中和抗體(可以利用室內(nèi)質(zhì)控用的抗HBsAg質(zhì)控物)分別按1:0,1:1和1:2的比例混合得到三份混合標(biāo)本，按照HBsAg檢測程序完成檢測，如果三份標(biāo)本的吸光度值按比例呈下降趨勢，則可報告“HBsAg陽性”,如吸光度值三孔無變化則為非特異反應(yīng)，報告“HB