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文檔簡介
實驗須知和分光光度計的使用第一頁,共二十頁,編輯于2023年,星期二一、學生實驗守則實驗前應認真預習,明確實驗目的、步驟,回答老師的提問。
進入實驗室必須保持安靜,不準高聲談笑,注意環境衛生,不準吸煙,不隨地吐痰,不亂拋紙屑雜物,愛護公物。實驗時應嚴肅認真,專心細致,要準確記錄實驗數據,嚴格遵守操作規程,節約水電和試劑,注意安全,愛護實驗儀器設備,如發生事故時,應迅速停止實驗,設法制止事態的擴大,并立即向指導老師報告。第二頁,共二十頁,編輯于2023年,星期二使用精密、貴重儀器,應先了解性能和操作方法,未經老師同意,不得任意操作,違者按有關規定處理。
實驗中不準動用與本實驗無關及他人使用的儀器設備、材料和元件。如損壞丟失儀器、配件、工具等,均應查清原因,及時上報,按已定的賠償辦法辦理;如隱瞞事故不報者,從重處理。實驗后要認真填寫好實驗報告(包括認真分析實驗結果、精確處理數據、圖表),如不符合要求的實驗報告,應退給學生重做。
第三頁,共二十頁,編輯于2023年,星期二實驗完畢,由指導教師負責檢查清點實驗用的儀器、工具。學生應辦好交接手續,做好清潔衛生,及時切斷電源、關好水龍頭,經指導教師同意后方可離開實驗室。
本守則由指導教師和參加實驗的人員共同監督,嚴格執行。
第四頁,共二十頁,編輯于2023年,星期二二、實驗課平時成績評分標準實驗課占期末總評的20%,其中操作考試和平時成績各占10%。
平時成績的得分包括以下六項:實驗態度、實驗紀律、實驗操作、儀器愛護、實驗報告及實驗后清洗。曠課者當次無實驗成績及得分。請假一次扣除40分,二次及以上者每次扣70分,直至平時成績扣完為止。第五頁,共二十頁,編輯于2023年,星期二遲到或早退一次者扣除10分,二次及以上者每次扣除15分,直至平時成績扣完為止。將實驗物品帶離實驗室者,除處以適當罰款外,扣除20分。實驗報告不按時完成者,扣除10分。每次實驗課后由帶教老師評出該次平時成績。第六頁,共二十頁,編輯于2023年,星期二三、酸、堿及苯酚的急救處理(一)酸強酸如硫酸、硝酸、鹽酸、王水(是硝酸與鹽酸的混合物)等(其中硫酸作用最強,鹽酸居末),對皮膚、粘膜的刺激和腐蝕作用極強。皮膚損傷可用大量清水沖洗,或用4%碳酸氫鈉溶液沖洗,再以生理鹽水冼凈,并按灼傷治療。若吸收了強酸立即選服2.5%氧化鎂溶液或鎂乳(75%氫氧化鎂混懸液)、石灰水的上清液(含0.17氫氧化鈣)、極稀的肥皂水、氫氧化鋁凝膠、生蛋清、牛奶等。忌用碳酸氫鈉及碳酸鈉(因可產生大量氣體導致胃穿孔)。第七頁,共二十頁,編輯于2023年,星期二(二)堿強堿包括氫氧化鈉、氫氧化鉀、次氯酸鈉、氧化鈉、氧化鉀以及腐蝕作用較弱的碳酸鈉、碳酸鉀、氫氧化鈣、氧化鈣、氫氧化銨等,具有腐蝕性。皮膚損傷可用大量清水沖洗。若誤吸收了強堿立即內服弱酸溶液如食用醋第八頁,共二十頁,編輯于2023年,星期二(三)苯酚不慎粘在皮膚上,以10%~4O%乙醇或聚乙二醇擦洗受染皮膚,再用清水沖洗至無苯酚味為止。也可用甘油、植物油擦洗皮膚,肥皂水、溫水洗滌,灼傷部用飽和硫酸鈉溶液或5%碳酸氫鈉濕敷。第九頁,共二十頁,編輯于2023年,星期二四、生化四大技術的介紹分光光度法電泳技術層析技術
離心技術第十頁,共二十頁,編輯于2023年,星期二五、分光光度計原理LII0T=I/I0透光率A:吸光度、消光度、光密度第十一頁,共二十頁,編輯于2023年,星期二任何物質對光線都有吸收,而且每種物質都有其特有的吸收光譜。相同物質在同一條件下,其吸收光譜的強度-吸光度(Aabsorb)與該物質的含量成正比例關系。因此把根據物質吸收光譜的特性進行定性或定量分析的方法稱為吸收光譜法或分光光度法。第十二頁,共二十頁,編輯于2023年,星期二朗伯-比爾(Lambert-Beer)定律:A=-logI/I0=-logT=KCLA:光密度,吸光度,消光度。
I:透過光強度。
I0:入射光強度。
T:透光度
K:消光系數。
C:溶液濃度。
L:溶液厚度。吸光度與溶液的濃度和液層的厚度的乘積成正比LII0第十三頁,共二十頁,編輯于2023年,星期二標準液:已知的待測物質濃度。A=KLCA標/A測=KLC標/KLC測C測=C標ⅹA/A標第十四頁,共二十頁,編輯于2023年,星期二空白液溶劑空白液:欲測物有色其他無色。試劑空白液:試劑不加樣品。樣品空白液:不加顯色劑。平行操作空白液:無欲測物。不顯色空白液:控制操作不發生顯色反應褪色空白液:加褪色劑。第十五頁,共二十頁,編輯于2023年,星期二光源單色器狹縫比色杯檢測系統分光光度計構造第十六頁,共二十頁,編輯于2023年,星期二721-E型分光光度計使用步驟2.調到指定波長4.放入黑體對光,調T=0,拿出黑體5.將空白液、標準液、待測液按順序放入比色杯架,空白液置于光路中。6.T=100%;A=07.按Mode至A,關蓋,拉動比色槽,進行記錄8.取出比色杯,清洗9.調Mode至T,比色槽歸位第十七頁,共二十頁,編輯于2023年,星期二分光光度計使用注意事項分光光度計屬精密儀器,應精心愛護使用。防震、防潮、防腐蝕。比色杯里的液體要在2/3~3/4之間,不易過多。放在比色箱里之前要擦干表面液體,以防腐蝕儀器。不可用手、濾紙、毛刷等物擦拭比色杯的光滑面,用手拿時只能拿其磨砂面。比色杯不要放置
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