實驗環境因素對植物水分狀態的影響第一頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期二選用的實驗教材參考用自編實驗教材相關網絡：/plantphy/

第二頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期二

植物生理學實驗技術基礎

植物組織含水量和組織水勢（小液流法）氣孔狀態觀察（固定、印跡法）硝酸還原酶活性的測定（磺胺比色法）葉綠體色素的測定和分析（Arnon法）萌動種子呼吸速率（小籃子法）快速測定種子活力的方法和比較（TTC等法）植物激素對種子萌發、胚根和胚芽生長影響（生物檢測法）植物細胞膜透性檢測（電導法）第三頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期二

除第1個實驗自學外，第3周開始安排8個實驗,平時實驗及實驗報告成績占50分,期末考試成績50分.第四頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期二實驗題目

實驗目的及原理

實驗步驟

結果與分析

本實驗注意事項

思考題植物生理學實驗報告（獨立完成，交學委）

第五頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期二實驗中的注意事項：1、實驗材料準備及取材2、操作及觀察3、實驗數據記錄與整理4、實驗結果的分析(結合統計分析分清錯誤和誤差)5、思考題6、實驗報告第六頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期二其它注意事項：

合理、安全、在老師指導下使用實驗儀器、設施；實驗前分組查看器皿；實驗后徹底清洗、按實驗前擺放器皿；一旦損壞物品，及時到C1020室登記；嚴禁將任何器皿插入洗液瓶中；每次實驗結束后由班長安排3位同學整體清潔打掃第七頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期二

一、植物組織含水量的測定

二、植物組織水勢的測定實驗二環境因素對植物水分狀態的影響(p105-112)

第八頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期二

植物組織含水量和組織水勢（小液流法）

新鮮和萎蔫植物組織含水量和組織水勢的比較第九頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期二一、植物組織含水量的測定目的：植物組織含水量與組織水勢的關系；植物組織某種成分單位干重水平上的含量比較；原理：x100組織鮮重-組織干重組織鮮重=組織含水量（%）第十頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期二器材：小白菜(新鮮葉片，高溫貯藏萎蔫葉片)；打孔器、橡膠墊；稱樣鋁盒；烘箱、搪瓷盆、棉布手套；天平第十一頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期二鋁盒號1234鋁盒重量W1W2W4W530片葉圓片(避開大葉脈)鮮葉鮮葉干葉干葉鮮重(盒+葉圓片,下同)FW1FW2FW4FW5干重(70-80℃下烘干2h后至恒重)DW1DW2DW4DW5含水量（%）（FWn-DWn）/(FWn–Wn)x100步驟：第十二頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期二實驗步驟取鋁盒4個，依次編號（寫于鋁盒底部）并稱取質量，選取生長一致的待測材料葉片數枚，用打孔器打葉圓片120（避開葉脈位置，新鮮60枚，萎蔫葉60枚），立即裝到上述鋁盒內，蓋上盒蓋稱重，將4個鋁盒（已放入30葉圓片，打開蓋子）放在搪瓷盤上置于105oC烘箱中烘1-2hr至恒重，稱重時需置于干燥器中，待冷卻后稱重，若Wn

＝鋁盒重，FWn＝鋁盒＋葉圓片，DWn＝烘干后的鋁盒＋葉圓片；5.植物組織含水量為：（FWn-DWn）/（FWn-Wn）x100第十三頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期二二、小液流法測定植物組織水勢1.實驗目的1)因陋就簡測定植物組織水勢；2)與含水量進行比較，分析二者關系第十四頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期二將植物組織分別放在一系列梯度濃度溶液中，①植物組織的水勢﹤溶液的滲透勢，組織吸水而使溶液濃度變大；②植物組織的水勢﹥溶液的滲透勢，組織水分外流而使溶液濃度變小；③植物組織的水勢=溶液的滲透勢，外部溶液濃度不變。2.實驗原理

在滲透系統中，水總是從水勢高處流向水勢低處。第十五頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期二用溶液的滲透勢(ψπ)代表植物水勢(ψw)。

ψw＝ψπ＝－iCRT（單位：兆帕，MPa）i：解離系數（蔗糖=1.00;CaCl2=2.60;NaCl=1.80）C：等滲濃度（mol/L)R：氣體常數0.008314L·MPa/（mol

·

K）T：絕對溫度（273+攝氏溫度）

第十六頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期二材料：小白菜（新鮮葉組和萎蔫葉組）儀器設備：注射針頭打孔器,橡膠墊刻度試管（15mlx12支），小試管(12支)試劑：1M蔗糖，純水，甲烯藍粉3.材料、儀器設備與試劑第十七頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期二新鮮葉片萎蔫葉片刻度試管管號123456789101112配制一系列濃度的蔗糖溶液于刻度試管中，體積為10ml

蔗糖溶液c(mol/L)0.10.20.30.40.50.60.10.20.30.40.50.6隨機取相同葉位葉圓片各10片放入小試管中、從刻度試管中取2ml蔗糖溶液移入小試管中，并使葉圓片完全浸沒于溶液中小試管管號123456789101112液滴動態（↑or↓）4.實驗步驟第十八頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期二隨機取相同葉位葉圓片各10片、從刻度試管中取2ml蔗糖溶液，分別放入和移入小試管中，并使葉圓片完全浸沒于溶液中。30分鐘后，回型針尖沾少許甲烯藍入小試管，混勻，然后用清潔注射針頭依次取小試管中的藍色液體，伸入相應標號刻度試管溶液中部，注滴同時觀察并記錄液滴動態。4.實驗步驟第十九頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期二取小試管中的藍色液體第二十頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期二輕捏吸管,放入刻度試管深入溶液中部,擠出小液滴取出吸管觀察液滴升降第二十一頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期二蔗糖溶液濃度(mol/L)0.10.20.30.40.50.6液滴移動方向C=0.3mol/L5.結果分析第二十二頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期二蔗糖溶液濃度(mol/L)0.10.20.30.40.50.6液滴移動方向有錯誤數據第二十三頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期二蔗糖溶液濃度(mol/L)0.10.20.30.40.50.6液滴移動方向C≈(0.3+0.4)/2mol/L第二十四頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期二蔗糖溶液濃度(mol/L)0.10.20.30.40.50.6液滴移動方向有錯誤數據第二十五頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期二蔗糖溶液濃度(mol/L)0.10.20.30.40.50.6液滴移動方向嚴重萎蔫葉片的C可能>0.6第二十六頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期二幼嫩新鮮葉片的C可能<0.1蔗糖溶液濃度(mol/L)0.10.20.30.40.50.6液滴移動方向第二十七頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期二1.計算新鮮和萎焉葉片的含水量,并進行比較分析；2.記錄不同濃度溶液中的液流方向；3.計算兩組葉片的水勢,并結合各自含水量比較分析。

蔗糖溶液濃度(mol·L-1)

0.10.20.30.40.50.6ψw(MPa)新鮮葉萎蔫葉思考題:

增加或減少蔗糖溶液中葉圓片數目是否會影響水勢測定結果,為什么?第二十八頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期二拭干葉表水分和泥漬避開大的葉脈打葉圓片,混合均勻移液管取溶液和純水配制的蔗糖溶液要混勻潤洗移液管和針頭（放回原液）葉圓片浸入溶液中室溫下浸泡30分鐘后再染色盡量少加甲烯藍輕壓膠管使針筒少量吸入染色溶液滴入后，停止擠壓或放松膠管6.注意事項第二十九頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期二液相平衡法：小液流法、稱重法、質壁分離法壓力平衡法：壓力室法

氣相平衡法：露點法

植物組織水勢和滲透勢的測定方法：水勢測定冰點降低法滲透勢蒸氣壓滲透壓計法第三十頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期二三、壓力室法測定植物組織水勢（如果有時間則講解）

植物葉片通過蒸騰作用不斷向環境散失水分，產生蒸騰拉力。導管中的水分由于“內聚力”的作用而形成連續的水柱。因此，對于蒸騰著的植物，其導管中的水柱由于蒸騰拉力的作用，承受著一定的張力或負壓，使水分連貫地向上運輸（圖A）。

當葉片或枝條被切斷時，木質部中的液流由于張力解除迅速縮回木質部（圖B）。第三十一頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期二

將葉片裝入壓力室鋼筒，葉柄切口朝外，逐漸加壓，直到導管中的液流恰好在切口處顯露時，所施加的壓力正好抵償了完整植株導管中的原始負壓。這時所施加的壓力值（通常稱為“平衡壓”）將葉片中的水勢提高到相當于開放大氣中導管中液體滲透勢ψs（sap）的水平（圖C）。第三十二頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期二

由于通過導管周圍完整活細胞半透膜進入木質部導管的汁液，其滲透勢常接近于零（活性溶質含量很低）。因此，下式成立：

P+ψw=ψs≈0→ψw=﹣P

式中：P—平衡壓（正值）；ψw—葉片或枝條的水勢（負值）；ψs—木質部汁液的滲透勢。第三十三頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期二植物材料:梧桐枝條第三十四頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期二操作步驟第三十五頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期二1．裝樣時螺旋環套不要擰得太緊，以免壓傷植物

組織。

2．加壓速度不能太快，接近葉片水勢時加壓速度

要放慢，否則會影響測量精度。

3．注意安全，加壓時不要使臉部處于鋼筒頂蓋正

上方。

4．高壓鋼瓶有危險，搬運或使用時要注意。注意事項：第三十六頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期二思考題：壓力室法測定水勢時，加壓速度過快對結果有何影響？第三十七頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期二四、冰點滲透壓計測定植物水勢實驗原理：水溶液的冰點下降值與溶液的摩爾濃度成正比。

1mol的任何非電解質溶液溶解于1kg的水中，則使水的冰點由0攝氏度降至－1.875攝氏度。因此已知某溶液的冰點下降值，即可由以下公式計算出其滲透勢：Os=t/1.875式中:OS為1000克水中所溶解的溶質顆粒數目,即重量摩爾滲透濃度（osmolarity）;△t為冰點下降數值(度);1.857為水的摩爾冰點下降常數。第三十八頁，共四十二頁，編輯于2023年，星期二被測樣品的溫度變化過程第三十九頁，共四十二頁，