HIV抗體篩查試驗體會和經驗交流HIV抗體篩查試驗體會和經驗交流第1頁首都醫科大學宣武醫院艾滋病防治工作制度工作小組及工作職責（一）工作小組組長:主管院長副組長:門診部主任、保健科主任組員:皮膚性病科主任、婦產科主任、泌尿外科主任、檢驗科主任、醫院感染管理科（副）主任、健康教育科責任人、門診部護士長（二）工作職責負責我院艾滋病防治管理工作。督導艾滋病診療、登記、匯報、試驗室初篩、宣傳教育、專業培訓等工作落實。HIV抗體篩查試驗體會和經驗交流第2頁檢驗科初篩HIV陽性保健科接到檢驗科通知標本送至市CDC門急診初篩陽性病人住院初篩陽性病人市CDC確證HIV陽性皮膚性病科流調、告知簽字保健科協助病房流調、告知簽字檢驗科到市CDC取報告、復印報告保健科接到檢驗科通知門急診確證陽性病人住院確證陽性病人病房主管醫生填報傳染病卡通知病人取確證報告保健科填報傳染病卡（非皮科）皮膚性病科填報傳染病卡通知所有門診病人取確證報告保健科統一網報宣武醫院HIV抗體初篩陽性流調通知及確證陽性匯報步驟圖HIV抗體篩查試驗體會和經驗交流第3頁樣品初篩試驗一陰一陽均陽性反應報告陰性確證試驗復檢試驗報告陰性均陰性反應陽性反應原有試劑＋另一不同原理（或廠家）試劑或另外兩種不同原理（或廠家）試劑選用篩查試劑陰性反應HIV抗體篩查檢測步驟圖HIV抗體篩查試驗體會和經驗交流第4頁HIV篩查試驗室SOP文件人類免疫缺點病毒抗原抗體（萬泰）檢驗標準操作程序（SOP）人類免疫缺點病毒抗體（麗珠）檢驗標準操作程序（SOP）XD711酶標分析儀標準操作程序（SOP）ThermoWellwash4MKⅡ型自動洗板機標準操作程序（SOP）生物安全手冊艾滋病試驗室安全防護和職業暴露預防程序(SOP)HIV抗體篩查試驗體會和經驗交流第5頁HIV標本接收樣本接收:每個檢測標本都有唯一電子條碼標識,經檢驗科掃碼確定接收,信息經過LIS系統編輯,自動生成HIV檢測信息名單,并在信息中心有備份。信息包含患者姓名,年紀,科室等,本篩查試驗室已經取消手工登記,可隨時打印電子版。HIV抗體篩查試驗體會和經驗交流第6頁HIV抗體篩查檢測試劑盒HIV抗體初篩試劑盒萬泰四代試劑盒HIV抗體復檢試劑盒麗珠三代試劑盒HIV抗體快速檢測試劑雅培金標試劑僅用于HIV初篩質評萬泰金標試劑HIV抗體篩查試驗體會和經驗交流第7頁HIV初篩試劑盒（萬泰四代）HIV抗體篩查試驗體會和經驗交流第8頁HIVAg檢測:HIVAg固相

血清/血漿結合物1/結合物2HIV1Ab: 抗p24單克隆抗體………..…生物素標記的抗HIV單克隆抗體過氧化物酶標記的親和素

TMB/H2SO4P在同一孔中同時檢測HIVAb:IgG,IgA,IgM固相

血清/血漿結合物1HIV1Ag: gp160重組抗原

………………..

過氧化物每標記的gp41肽段

f功能性保守肽段

….過氧化物每標記的f功能性保守肽段HIV2Ag: gp36肽段

…………………..過氧化物每標記的gp36肽段TMB/H2SO4P第四代HIV酶免試劑試驗原理HIV抗體篩查試驗體會和經驗交流第9頁HIV酶免四代診療試劑窗口期<infectivity3rdgen1st-2ndgenHIVantigenIgMabIgGabDetectionlimit<=window4th3周2周1個月HIV抗體篩查試驗體會和經驗交流第10頁HIV抗原抗體聯合檢測（萬泰四代）1.按照所需數量在板架上放好酶標板條.2.設3孔陰性對照，2孔質控，1型、2型、抗原陽性對照共3孔3.每孔加入20ul生物素試劑.4.每孔加入100ul樣品、對照或質控，輕輕震蕩.4.37℃孵育60分鐘.5.洗板5次.拍干.6.加入100ul酶標記物.7.37℃孵育30分鐘.8.洗板5次.拍干.9.每孔加入顯色劑A、B各50ul，輕輕震蕩混勻10.37℃孵育30分鐘.11.每孔加入50ul終止液，10分鐘內測結果12.在450nm/620nm雙波長下讀數.13.計算界限值:界限值(Cut-off)=陰性對照平均值+0.1214.判斷結果：大于等于界限值判為陽性,小于界限值判為陰性.HIV抗體篩查試驗體會和經驗交流第11頁HIV抗體檢測（麗珠）試驗程序1.按照所需數量在板架上放好酶標板條,撕去封條.2.設陰性對照3孔，HIV-1陽性對照2孔，HIV-2陽性對照2孔,質控1孔3.加入50ul樣品、對照或質控.4.37℃孵育60分鐘.5.洗板6次.6.每孔加入50ul酶標記物7.37℃孵育30分鐘.8.棄去孔內液體，洗板6次9.加入底物緩沖液50ul，再加入底物液50ul，振蕩混勻，37℃孵育30分鐘10.加入終止液50ul9.在450nm/620nm波長下讀數.10.計算界限值：界限值(Cut-off)=陰性對照平均值+0.15，陰性對照平均值小于0.08按0.08計算11.判斷結果：大于等于界限值判為陽性,小于界限值判為陰性.HIV抗體篩查試驗體會和經驗交流第12頁HIV抗體初篩陽性患者信息查詢依據北京市CDC預防控制中心所下發新版HIV抗體復檢化驗單要求（7月1日開始實施）,愈加好配合流行病學調查,填寫HIV抗體初篩陽性患者信息經過信息中心制作軟件,輸入患者就診卡號,有權限查詢,姓名,性別,年紀,身份證號,籍貫,現住址,電話等。HIV抗體篩查試驗體會和經驗交流第13頁送檢單位首都醫科大學宣武醫院檢驗科送檢日期2012年3月5日送檢標本血清所屬人群內科門診患者姓名李XX性別男年齡29職業不詳身份證號碼220204198302061XXX手機號碼1352238XXX現住址吉林省吉林市船營區桃源路60-3-45號戶籍所在地吉林國籍或民族漢既往病史不詳初篩試驗復檢試驗第一次第二次檢測日期2012-03-052012-03-052012-03-05檢測方法ELISAELISAELISA試劑廠家萬泰（四代）萬泰（四代）珠海麗珠批號H20111211H201112112011040908有效期201212082012120820120412ELISA法OD值空白雙波長無空白雙波長無空白雙波長無空白陰性對照均值0.0010.0080.005陽性對照3.1292.6273.12臨界值0.1210.1280.23送檢標本2.1632.3522.964結果陽性√陰性□陽性√陰性□陽性√陰性□復檢結論HIV抗體待確認√陰性□檢測者（簽字）：審核者（簽字）：送檢單位（公章）電話：83198361郵編:100053備注：HIV抗體復檢化驗單

秘密 編號030501 HIV抗體篩查試驗體會和經驗交流第14頁HIV陽性上報統計表萬泰四代酶免試劑進行初篩,發覺初篩陽性標本后,先用相同試劑反復試驗,結果如為陽性,再用麗珠酶免試劑反復試驗,如結果仍為陽性,則應先通知保健科,然后填好《HIV初篩陽性送檢單》,由醫務處聯絡專車送市CDCHIV確證試驗室進行確證試驗。送到后領取回執,并按回執上取匯報時間,盡可能由送檢人領取確證匯報。取回后通知保健科,門診病人由病人本人或監護人領取確證匯報,病房病人可由責任醫生領取,其她人不得領取確證匯報。HIV抗體篩查試驗體會和經驗交流第15頁病人資料初次試驗結果復檢結果二次復檢結果送檢時間送檢人取報告人取報告時間確證試驗結果領取人簽名HIV抗體檢測陽性上報統計表HIV抗體篩查試驗體會和經驗交流第16頁HIV抗體檢測質量控制感染性疾病血清標志物系列C（衛生部室間質評)每年三次北京市艾滋病篩查試驗室質控考評每年兩次HIV抗體檢測室內質控每批次/每日HIV抗體檢測月質控圖（總結表）HIV抗體篩查試驗體會和經驗交流第17頁HIV抗體檢測室內質控試劑盒內陰性、陽性對照質控品外部質控品選擇:萬泰康徹思坦有限企業HIV弱陽性質控品規格0.5NCU/ml,1ml/支天天每一批次都做質控條帶包含3個陰性對照,兩個質控,三個陽性（HIV-1,HIV-2,P24）對照HIV抗體篩查試驗體會和經驗交流第18頁ELISA定性試驗室內質控統計表日期Level1（陰性對照）Level2（弱陽性對照）Level3（陽性對照）ODS/CO定性ODS/CO定性ODS/CO定性1

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項目:HIV抗體質控批號:日期:HIV抗體篩查試驗體會和經驗交流第19頁HIV抗體檢測室內質控規則室內質控圖是Levey-Jennings質控圖外部對照質控品平均值和標準差采取試驗室常規使用方法對質控品反復測定最少20次基礎上,取得最少20個數據.以光密度值（OD）與臨界值(CUTTOFF)商(S／C0)為統計值。計算平均值(χ)和標準差(s),定出控制限。以χ±2s為警告限(2s),以χ±3s為失控限(3s),做成質控框架圖。以后每次外部對照質控品測定值,點入質控圖。質控規則13S;22S;1