蔬果中有機(jī)磷及氨基甲酸酯類農(nóng)藥的殘留量測(cè)定摘要農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)儀的原理是酶抑制法，本文借助廣州瑞森生物科技有限公司的RS-PR-18農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)儀為基礎(chǔ)，依據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T5009.199-2003，能快速檢出蔬菜、水果、糧食、茶葉、水及土壤中有機(jī)磷和氨基甲酸脂類農(nóng)藥殘留，適用于各級(jí)農(nóng)業(yè)檢測(cè)中心、工商部門、生產(chǎn)基地、農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)、超市、衛(wèi)生、環(huán)保、學(xué)校等領(lǐng)域。【關(guān)鍵詞】蔬菜、有機(jī)磷、氨基甲酸酯類、農(nóng)藥殘留、農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)儀

一.前言十八屆三中、四中全會(huì)，中央農(nóng)村工作會(huì)議的召開(kāi)，注重講述有關(guān)農(nóng)產(chǎn)品的質(zhì)量安全，2015年就已經(jīng)發(fā)生了西瓜、茶葉等農(nóng)藥殘留事件，人們對(duì)舌尖上的安全問(wèn)題愈發(fā)重視。本文使用廣州瑞森生物科技有限公司的PS-PR-18農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)儀，遵照中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《GB/T5009.199-2003蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的快速檢測(cè)》提供的方法，檢測(cè)蔬菜中有機(jī)磷及氨基甲酸酯類農(nóng)藥的殘留量。二.試劑及儀器設(shè)備材料：油麥菜試劑：緩沖液、底物、顯色劑、膽堿酯酶、甲胺磷標(biāo)準(zhǔn)液儀器設(shè)備：PS-PR-18農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)儀、5ml可調(diào)移液槍、100μl6通道移液槍（檢測(cè)儀配備）、200ml單通道可調(diào)移液槍、電子天平、剪刀、錐形瓶、鑷子。三.實(shí)驗(yàn)方法在一定條件下，有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對(duì)膽堿酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率與農(nóng)藥的濃度正相關(guān)。正常情況下，酶催化神經(jīng)傳導(dǎo)代謝產(chǎn)物（乙酰膽堿）水解，其水解產(chǎn)物與顯色劑反應(yīng)，產(chǎn)生黃色物質(zhì)，用農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)儀在412nm處測(cè)定吸光度隨時(shí)間的變化值，計(jì)算出抑制率，通過(guò)抑制率可以判斷出樣品中是否有高劑量的有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥存在。實(shí)驗(yàn)步驟檢測(cè)結(jié)果樣品檢測(cè)對(duì)照實(shí)驗(yàn)樣品預(yù)處理儀器預(yù)熱檢測(cè)結(jié)果樣品檢測(cè)對(duì)照實(shí)驗(yàn)樣品預(yù)處理儀器預(yù)熱樣品預(yù)處理選取有代表性的蔬菜樣品（本實(shí)驗(yàn)用白菜作為樣品），洗去白菜樣品表面的泥土，剪成1～2cm左右的放碎片。每個(gè)樣品稱取2g于燒杯或提取瓶中（共六個(gè)樣品），各加入5ml緩沖溶液，振蕩1～2min，倒出提取液，靜止3～5min，待用。對(duì)照溶液測(cè)試于對(duì)照通道放入比色皿，加入2.5ml緩沖液，再加入100μL酶液，100μL顯色劑，用專用移液器吸打3-5次混勻，并按對(duì)照按鈕（讓其在37℃環(huán)境下放置15min）；加入100μL底物噴打均勻，蓋上蓋子，按反應(yīng)計(jì)時(shí)按鈕讓其反應(yīng)環(huán)境溫度的離散程度小。酶在非最適反應(yīng)溫度時(shí)的作用效果不穩(wěn)定，導(dǎo)致相同條件下每個(gè)通道的酶活也有較大的差異，而且反應(yīng)效率偏低，表現(xiàn)為抑制率相對(duì)增大；酶在最適反應(yīng)溫度時(shí)作用效果穩(wěn)定且效率最高，檢測(cè)結(jié)果也就越準(zhǔn)確。4.反應(yīng)溫度為37℃下6通道移液槍跟單通道移液槍加樣比較反應(yīng)溫度為37℃下，對(duì)甲胺磷標(biāo)準(zhǔn)品分別用6通道移液槍跟單通道移液槍兩種情況做檢測(cè)試驗(yàn)，結(jié)果如表5、表6所示：表56通道移液槍通道透射比ΔA抑制率ΔAcC.Vt（min）10.8233.3%0.85121.37%5020.8094.9%30.8243.2%40.8085.0%50.8.75.2%60.8193.8%表6單通道移液槍通道透射比ΔA抑制率ΔAcC.Vt（min）70.8223.3%0.85148.71%6580.8124.6%90.75311.5%100.76110.6%110.72215.2%120.74212.8%采用6通道移液槍對(duì)6個(gè)樣品進(jìn)行檢測(cè)，總用時(shí)50min，減去反應(yīng)時(shí)間和檢測(cè)時(shí)間的36min，每個(gè)樣品的試劑添加時(shí)間為2min；采用單通道移液槍對(duì)6個(gè)樣品進(jìn)行檢測(cè)，總用時(shí)65min，減去反應(yīng)時(shí)間和檢測(cè)時(shí)間的36min，每個(gè)樣品的試劑添加時(shí)間為4min,。采用6通道槍添加試劑的時(shí)間比單通道添加試劑的時(shí)間減少一半，試驗(yàn)時(shí)間明顯縮短，更為符合快速檢測(cè)。而且，從變異系數(shù)（C.V）來(lái)看，單通道移液槍組數(shù)據(jù)差異較6通道大，6通道加樣的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)平行性好，控制差距在0.05以內(nèi)。5.對(duì)實(shí)際樣品的檢測(cè)以經(jīng)甲胺磷特殊處理的蔬菜進(jìn)行檢測(cè)，并對(duì)檢出抑制率≥50%的18份樣品用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（GC/MS）進(jìn)行復(fù)檢。結(jié)果表明對(duì)于這18份樣品，RS-PR-18農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)儀的檢測(cè)結(jié)果與氣象色譜法檢測(cè)的結(jié)果符合率為89.6%。

五.農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)儀的應(yīng)用領(lǐng)域農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)儀由于操作簡(jiǎn)單、檢測(cè)速度快、適用于現(xiàn)場(chǎng)等特點(diǎn)，廣泛應(yīng)用于工商局、技術(shù)監(jiān)督局稽查大隊(duì)、衛(wèi)生疾控等執(zhí)法部門。農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)儀可以配置于食品安全檢測(cè)車，將實(shí)驗(yàn)室轉(zhuǎn)移到現(xiàn)場(chǎng)，可以在各類農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)、專業(yè)批發(fā)市場(chǎng)、超市、副食品商場(chǎng)、學(xué)校食堂、酒店等場(chǎng)所流動(dòng)檢測(cè)，真正實(shí)現(xiàn)了流通領(lǐng)域農(nóng)藥殘留的動(dòng)態(tài)監(jiān)管。六.總結(jié)RS-PR-18農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)儀準(zhǔn)確度高，平行性好，重復(fù)性好，完全符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T5009.199-2003所規(guī)定的技術(shù)要求指標(biāo)，而且該儀器由于操作簡(jiǎn)單、檢測(cè)速度快、體積小等特點(diǎn)特別適用于現(xiàn)場(chǎng)，尤其適用于各級(jí)農(nóng)業(yè)檢測(cè)中心、工商部門、生產(chǎn)基地、農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)、超市、衛(wèi)生、環(huán)保、學(xué)校等領(lǐng)域，實(shí)現(xiàn)流通領(lǐng)域的動(dòng)態(tài)監(jiān)管。

附錄：1、RS-PR-18農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)儀相關(guān)特性1）技術(shù)特點(diǎn)1、多通道測(cè)試技術(shù)，可同時(shí)檢測(cè)18個(gè)樣品。2、7.0寸大屏幕全中文液晶顯示。3、超高亮LED光源，具有節(jié)能、環(huán)保、省電、壽命長(zhǎng)、響應(yīng)速度快的優(yōu)點(diǎn)；硅半導(dǎo)體作為信號(hào)接收系統(tǒng)。4、內(nèi)置熱敏打印機(jī)，打印測(cè)試結(jié)果。5、具有自動(dòng)保存檢測(cè)結(jié)果，能存儲(chǔ)5000組以上數(shù)據(jù)，并能查詢保存的記錄。6、帶有顯色時(shí)間和反應(yīng)時(shí)間設(shè)定功能。7、內(nèi)置加熱恒溫模塊，自動(dòng)恒溫達(dá)到最佳反應(yīng)溫度，無(wú)需另外配置恒溫箱。8、配置6通道專用移液器，實(shí)現(xiàn)通道間無(wú)差異化加樣，避免加樣反應(yīng)時(shí)間差對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果帶來(lái)的誤差，同時(shí)能有效提高工作效率、減輕實(shí)驗(yàn)負(fù)擔(dān)。9、配置USB接口，可與電腦進(jìn)行連接，實(shí)現(xiàn)數(shù)據(jù)存儲(chǔ)，分析，上傳等功能。2）技術(shù)參數(shù)1、光源波長(zhǎng)：410±2nm2、透射比準(zhǔn)確度