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實(shí)用標(biāo)準(zhǔn)文案尿液干化學(xué)檢測(cè)(一)檢驗(yàn)?zāi)康膶?duì)泌尿系統(tǒng)疾病、肝膽疾病、糖尿病等疾病進(jìn)行輔助診斷與療效觀察,對(duì)安全用藥進(jìn)行監(jiān)護(hù),以及評(píng)估健康狀態(tài)。(=)測(cè)定方法以及體系干化學(xué)試帶法:包括尿液分析儀,分析儀試劑帶;尿的干化學(xué)試帶可檢測(cè)pH值等。快速敏感的干化學(xué)試帶技術(shù)和自動(dòng)化分析技術(shù)在尿液檢查中得到普遍應(yīng)用,上述指標(biāo)的檢測(cè)極為簡(jiǎn)便,而且提高了檢驗(yàn)質(zhì)量,為尿液化學(xué)檢查開(kāi)拓了更廣闊的領(lǐng)域。(三)檢測(cè)原理及干擾因素尿液分析儀檢測(cè)原理:尿液中相對(duì)的化學(xué)成分使尿多聯(lián)試帶上各種含特聯(lián)試帶置于尿液分析儀比色進(jìn)樣槽,各模塊依次受到儀器光源照射并產(chǎn)生不I理器由下列公式計(jì)算山各測(cè)試項(xiàng)目的反射率,然后與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較后校正為測(cè)定值,最后以定性或半定量方式自動(dòng)打印出結(jié)果。用于對(duì)尿液進(jìn)行定性和半定量檢測(cè)。葡萄糖檢測(cè)原理:尿糖形成的原因和機(jī)制為:當(dāng)血中葡萄糖濃度大于8.8mml/L時(shí),腎小球?yàn)V過(guò)的葡萄糖量超過(guò)腎小管重吸收能力即可出現(xiàn)糖尿。葡萄糖在葡萄糖氧化酶的作用下生成葡萄糖酸和過(guò)氧化氫,過(guò)氧化氫在過(guò)氧化物精彩文檔實(shí)用標(biāo)準(zhǔn)文案酶的作用下釋放新生態(tài)氧[0],新生態(tài)氧[O]再還原碘化鉀,發(fā)生顏色變化。(2)干擾因素:本實(shí)驗(yàn)對(duì)葡萄糖豹檢測(cè)是特異性的,大量維生素c可使實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)假陰性結(jié)果;高比重堿性尿,亦可造成糖檢出偏低,使低糖濃度尿呈陰性。膽紅素檢測(cè)原理:直接膽紅素在酸性條件下與二氯苯胺重氮鹽偶聯(lián),生成偶氮染料。干擾因素:標(biāo)本必須新鮮,以免膽紅素在陽(yáng)光照射下成為膽綠素;尿液中含高濃度維生素C定呈假陰性;產(chǎn)物時(shí)呈假陽(yáng)性。酮體檢測(cè)原理:乙酰乙酸、丙酮在堿性條件下與亞硝基鐵氰化鈉反應(yīng).生成紫紅色化合物。干擾因素:和結(jié)果偏低;分析結(jié)果有差異。比重檢測(cè)原理:采用多聚電解質(zhì)離子解離法。尿中以鹽類形式存在的電解質(zhì)(MX)精彩文檔實(shí)用標(biāo)準(zhǔn)文案中的M陽(yáng)離子(以Na為主)與離子交換體反應(yīng)置換出氫離子,氫離子與酸堿其他方法較低的讀數(shù)。(1g/L一原理:血紅蛋白具有過(guò)氧化物酶樣活性,可使過(guò)氧化物分解釋放出新生態(tài)氧,使鄰甲苯胺變成鄰甲聯(lián)苯胺,出現(xiàn)顏色變化。干擾因素:造成儀器法與鏡檢法有差異;c酸堿度:采用酸堿指示劑法(1)原理:尿液酸度即尿的pH值,反映腎臟調(diào)節(jié)體液酸堿平衡的能力。正常人在普通膳食的條件下尿液pH值為46~8O。pH值廣泛試帶是多種指示劑混合的試帶,靈敏度約為pH值0.05,試帶與標(biāo)準(zhǔn)色板比較可知尿液的pH值近似值。干化學(xué)試帶的測(cè)試模塊中含甲基紅和溴麝香草酚藍(lán),兩種指示劑適量配合可測(cè)試尿液酸堿度。(2)干擾因素:尿pH值受飲食種類影響很大,如進(jìn)食蛋白質(zhì)較多,則由尿排H{的磷酸鹽和硫酸鹽增多,尿pH值較低,而進(jìn)食蔬菜多時(shí)尿pH值常大于6。當(dāng)每次進(jìn)食后,由于胃黏膜在分泌多量鹽酸以助于消化,為保證有足夠的氫離子,精彩文檔實(shí)用標(biāo)準(zhǔn)文案和氯離子進(jìn)入消化液,則尿液泌H‘減少和cL一的重吸收增加,而使尿pH值增加,呈堿性c如運(yùn)動(dòng)、饑餓、出汗等生理活動(dòng),夜間入睡后吸收變慢,體內(nèi)酸性代謝產(chǎn)物可使尿pH值降低。藥物、不同疾病等多種因素亦影響尿液pH值。細(xì)菌繁殖尿樣可影響pH值,使尿液呈堿性。影響尿液pH值常見(jiàn)因素見(jiàn)表10。表10影響尿液pH值常見(jiàn)因素表影響因素酸性尿液堿性尿液腎功能腎小球?yàn)V過(guò)增加,腎小管保堿能力正常腎小球?yàn)V過(guò)正常,腎小管保存堿能力喪失食物肉類含硫、磷及混合性食物蔬菜、水果、含鉀、鈉生理活動(dòng)劇烈運(yùn)動(dòng)、大汗、應(yīng)激狀態(tài)、饑餓飯后、消化高潮疾病酸中毒、腎炎、糖尿病、饑餓狀態(tài)、尿堿中毒、膀胱炎、腎盂腎炎、尿路草酸鹽、酸鹽或胱氨酸結(jié)石磷酸鹽或碳酸鹽結(jié)石藥物氯經(jīng)鈣、氯化銨、氯化鉀、稀鹽酸等小蘇打、碳酸鉀、碳酸鎂、枸櫞酸鈉、酵母制劑等其他尿內(nèi)含酸性磷酸鹽尿內(nèi)混入多量膿、血、細(xì)菌污染、分解尿素等pHpH5~9的變異范圍,基本能滿足臨床對(duì)尿pH蛋白質(zhì)檢測(cè)原理:本法是利用指示劑的蛋白質(zhì)誤差原理(即pH值指示劑離子因與白蛋白攜帶電荷相反而結(jié)合,故使其反應(yīng)顯示的pH值產(chǎn)生顏色變化,這種pH值顏色改變的幅度與白蛋白含量成正比)。該法有簡(jiǎn)便快速等優(yōu)點(diǎn),適用于人群普查,還可以用于尿液分析儀。以減少誤差。不同廠家、不同批號(hào)試劑帶顯色有差異,因此應(yīng)強(qiáng)調(diào)采用經(jīng)嚴(yán)格標(biāo)準(zhǔn)化的試帶。干擾因素:對(duì)于高度緩沖的堿性尿.有可能得到假5如果尿樣被銨鹽類化合物及某些防腐劑或清洗劑污染也會(huì)導(dǎo)致假精彩文檔實(shí)用標(biāo)準(zhǔn)文案陰性。尿膽原檢測(cè)原理:尿膽原在強(qiáng)酸性條件下,與重氮鹽偶聯(lián)生成紫紅色染料。干擾因素:結(jié)果出現(xiàn)假陽(yáng)性;9.亞硝酸鹽檢測(cè)原理:采用亞硝酸鹽還原法。亞硝酸鹽與芳香族氨基磺胺發(fā)生重氮反應(yīng),生成重氮化合物,而重氮化合物與四氫苯并喹啉3一酚偶聯(lián),生成紅色偶氮染料。亞硝酸鹽的檢出率受三個(gè)因素影響:干擾因素:(1)尿路感染的細(xì)菌是否含有硝酸鹽還原酶;(2)食物中是否含有硝酸鹽;4小時(shí)以上。符合以上三個(gè)條件,此試驗(yàn)的檢出率為80白細(xì)胞檢測(cè)原理:采用白細(xì)胞酯酶法。吡咯酚酯在中性粒細(xì)胞中酯酶的水解作用下,產(chǎn)生游離酚,游離酚與苯基重氮鹽偶聯(lián),生成紫紅色偶氮染料。干擾因素精彩文檔實(shí)用標(biāo)準(zhǔn)文案結(jié)果。的測(cè)試結(jié)果則表明是臨床的蛋白尿癥。蛋白試紙用于尿液中白蛋白的檢測(cè)。試紙對(duì)黏蛋白和球蛋白的敏感度較低,一般在60mg/d1或者更高才能被檢測(cè)出來(lái)。肉眼可見(jiàn)的【II【尿(5mg/d1)也可能出現(xiàn)假陽(yáng)性反應(yīng)。抗壞血酸檢測(cè)原理:采用還原法。抗壞血酸具有1,2一烯二醇還原性基團(tuán),在堿性條件巾,將氧化態(tài)藍(lán)色的2,6一二氯酚靛酚染料還原為無(wú)色的2,6一二氯二對(duì)酚胺。干擾因素:當(dāng)尿中含有氧化劑時(shí)(如高錳酸鉀、次氯酸鹽等)會(huì)影響本檢驗(yàn)的靈敏度(見(jiàn)表11)。參干擾因素檢測(cè)項(xiàng)目參干擾因素檢測(cè)項(xiàng)目反應(yīng)原理靈敏度考范圍假陽(yáng)性假陰性標(biāo)本久置后,細(xì)菌繁殖或CO2丟失,pH值↑↓酸堿度4.6(pH酸堿指示劑法4.5~9.0~值)精彩文檔8.0實(shí)用標(biāo)準(zhǔn)文案對(duì)白蛋白敏感(70~pH值指示劑蛋100mg/L),對(duì)陰白質(zhì)誤差法球蛋白、黏蛋性白、本周蛋白對(duì)白蛋白敏感(70~pH值指示劑蛋100mg/L),對(duì)陰白質(zhì)誤差法球蛋白、黏蛋性白、本周蛋白敏感性差(PRO ) 季銨類消毒劑 等非電解質(zhì)蛋白葡萄糖(GLU)
葡萄糖氧化酶 法乙酰乙酸:50~
陰 高VitC、乙酰乙酸,L-多性 過(guò)氧化物、強(qiáng)氧化劑污染 巴代謝物,高比密低pH尿酮體(KET)亞硝酸基鐵氰化鈉法酮體(KET)亞硝酸基鐵氰化鈉法100mg/L;丙酮:400~700mg/L;與β-羥丁酸不反應(yīng)隱血(BLD)過(guò)氧化物酶法Hb0.3~0.5mg/L;RBC<10/ul性 苯丙酮、多巴代謝物 舊尿膽紅素(BIL)尿膽原
偶氮法
5mg/L
陰 肌紅蛋白、易熱性觸酶性 氧化劑和菌尿陰 吩噻嗪類藥性陰性
VitC、蛋白尿、糖尿VitC、亞硝酸鹽、光照(UBG)亞硝酸
偶氮法或Ehrich反應(yīng)
10mg/L 或弱陽(yáng)性
吩噻嗪類藥物、膽色素原、亞硝酸鹽、光照、重氮藥膽紅素、吲哚 物pH值<5,尿量過(guò)多、食鹽(NIT)(LEU/WBC)
偶氮法中性粒細(xì)胞酯
0.5~0.6mg/L
陰 陳舊尿、亞硝酸鹽或偶氮試劑污染、食物硝酸鹽性 量豐富陰 甲醛、氧化劑、膽紅素、
物硝酸鹽含量過(guò)低、尿在膀胱內(nèi)停留<4小時(shí)、非含硝酸鹽還原酶細(xì)菌感染、VitC、亞硝酸鹽以淋巴或單核細(xì)胞為主、酶法25ul 酶法25ul 性呋喃類藥蛋白、慶大霉素1.0多聚電解質(zhì)中03H+解離量與離子濃度相關(guān)1.010~1.030 ~1.0電解質(zhì)性尿蛋白致SG↑堿性尿致SG↓3維生素C(VitC
酸性環(huán)境中還 原染料
陰 巰基化合物、胱氨酸、內(nèi) 堿性性 源性酚精彩文檔實(shí)用標(biāo)準(zhǔn)文案))(四)標(biāo)本要求標(biāo)本采集:見(jiàn)標(biāo)本采集手冊(cè)。2小時(shí),沒(méi)有按規(guī)定使用潔凈、干燥的容器以及低于10ml的尿液。標(biāo)本保存:應(yīng)在2(五)設(shè)備和試劑設(shè)備。尿液分析儀,尿液分析儀通常由機(jī)械系統(tǒng)、光學(xué)系統(tǒng)、電路系統(tǒng)三部分組成。試劑。與尿液分析儀配套試紙條,在25±5℃干燥環(huán)境內(nèi)貯存。試帶以濾紙為載體,將各種括碘酸鹽層和試劑層,碘酸鹽層可破壞Vitc等干擾物質(zhì),試劑層與尿液所測(cè)定物質(zhì)發(fā)生化學(xué)反最后一層選取尿液不浸潤(rùn)的塑料片作為支持體。有些試帶無(wú)碘酸鹽層,但相應(yīng)增加了1塊檢測(cè)Vitc精彩文檔實(shí)用標(biāo)準(zhǔn)文案在。8保存。每周對(duì)尿液分析儀做維護(hù)保養(yǎng)。每月應(yīng)進(jìn)行尿液分析儀之間比對(duì),取當(dāng)日新鮮尿液陽(yáng)性標(biāo)本41份陰性標(biāo)本,比對(duì)合格后寫(xiě)出比對(duì)報(bào)告,若不合格,檢查原因,維護(hù)儀器,校準(zhǔn)儀器,合格后再進(jìn)行比對(duì),并寫(xiě)校準(zhǔn)、比對(duì)報(bào)告留檔。(六)檢測(cè)步驟(18~25℃),上下顛倒幾次混勻,擰開(kāi)瓶蓋后,直接將質(zhì)控液滴在試紙上(多余的質(zhì)控液不要吸人瓶中,在吸水紙蘸干),用尿液分析儀測(cè)試。儀器操作步驟見(jiàn)使用說(shuō)明書(shū).原始測(cè)定數(shù)據(jù)應(yīng)粘貼留檔保存。審核者。(七)結(jié)果報(bào)告精彩文檔實(shí)用標(biāo)準(zhǔn)文案(八)注意事項(xiàng)不得使用超過(guò)效期或變質(zhì)的試紙條;試紙的變質(zhì)會(huì)使反應(yīng)區(qū)的顏色變淺或變深。能使用一次。為保護(hù)試劑的反應(yīng)活性必須隔絕周圍環(huán)境中的潮氣、光和熱。不要觸摸試紙條的反應(yīng)區(qū),避免陽(yáng)光直射。狀態(tài)、人員操作等,糾正后,室內(nèi)質(zhì)控合格,方可檢測(cè)臨床標(biāo)本。(九)質(zhì)量控制分析前的質(zhì)量控制正確留取標(biāo)本,并在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)進(jìn)檢,運(yùn)輸時(shí)應(yīng)避免陽(yáng)光直射。vitc本久置,葡萄糖被細(xì)菌或細(xì)胞酶分解,可引起假陰性。了解檢驗(yàn)對(duì)象可能影響尿化學(xué)檢測(cè)的進(jìn)食及使用藥物的情況。尿樣保存:尿樣收集后應(yīng)在2腐劑并冷藏保存。注意準(zhǔn)確有效地標(biāo)記尿標(biāo)本。分析中的質(zhì)量控制(1)用尿液質(zhì)控品(陰性和陽(yáng)性)監(jiān)控儀器的工作狀態(tài);(2)嚴(yán)格、規(guī)范、正確的實(shí)驗(yàn)操作;(3)應(yīng)使用與尿液分析儀配套的專用試帶,注意試帶的效期,注意防潮,避免變色后干擾實(shí)驗(yàn)。精彩文檔實(shí)用標(biāo)準(zhǔn)文案分析后的質(zhì)量控制分析檢驗(yàn)結(jié)果的相關(guān)性,如有不符應(yīng)及時(shí)復(fù)檢,如表12表12檢驗(yàn)結(jié)果的相關(guān)性分析化學(xué)分析結(jié)果潛血陰性潛血陽(yáng)性WBC陰性WBC陽(yáng)性蛋白質(zhì)陰性
鏡檢結(jié)果多量RBC不見(jiàn)或少量RBC多量WBC不見(jiàn)或少量RBCWBCRBC管型增多
可能原因藥物或其他物質(zhì)RBC破碎藥物干擾或慢性炎癥其他物質(zhì)干擾出現(xiàn)假陽(yáng)性其他物質(zhì)干擾出現(xiàn)假陰性化學(xué)分析亞硝酸鹽為陽(yáng)性,而尿蛋白質(zhì)和白細(xì)胞均為陰性,可能因攝食含硝酸鹽豐富的食物有關(guān)而造成的假陽(yáng)性。糖尿病檢驗(yàn)對(duì)象尿糖檢測(cè)陰性,而VitC含量很高,會(huì)出現(xiàn)假陰性。檢測(cè)結(jié)果有異議時(shí)應(yīng)了解檢驗(yàn)對(duì)象可能影響尿化學(xué)檢測(cè)的進(jìn)食和用藥情況。尿化學(xué)分析結(jié)果與鏡檢不一致,應(yīng)進(jìn)一步查明原因。參考范圍的認(rèn)可:尿干化學(xué)分析儀檢測(cè)白細(xì)胞、紅細(xì)胞出現(xiàn)“假陰性”時(shí),應(yīng)以鏡檢為準(zhǔn);c精彩文檔實(shí)用標(biāo)準(zhǔn)文案細(xì)胞破壞,中性粒細(xì)胞酯酶釋放到尿中,導(dǎo)致儀器分析(+),鏡檢反而(一);②紅細(xì)胞:腎病檢驗(yàn)對(duì)象尿巾紅細(xì)胞常破壞而釋出血紅蛋白或某些患者尿巾有高活性不耐熱的觸酶時(shí)均可導(dǎo)致儀器分析(+),鏡檢卻為(一)。尿液煮沸冷卻后再測(cè)試可排除不耐熱的觸酶造成的假陽(yáng)性。其他情況要結(jié)合臨床實(shí)踐,不能一概否定或肯定儀器檢測(cè)結(jié)果,更不能隨意調(diào)節(jié)改變儀器的靈敏度。(十)生物參考區(qū)間及臨床意義pH值:隨機(jī)尿pH值為2.比重:成人:1.003一l.030;新生兒:l.002~l.004。時(shí)比重增高,常見(jiàn)于糖尿病;有價(jià)值,慢性腎功能不全呈低比重尿。3.白細(xì)胞:陰性。陽(yáng)性結(jié)果提示泌尿系及鄰近器官有感染性病變?nèi)缂薄⒙阅I盂腎炎、膀胱炎、尿道炎等;急性腎小球腎炎也可出現(xiàn)短期的白細(xì)胞尿。4.潛血:陰性。增加常見(jiàn)于腎小球腎炎、泌尿系結(jié)石、結(jié)核或惡性腫瘤。蛋白質(zhì):陰性。病理性蛋白尿:可分為腎前性、腎性及腎后性蛋白尿。道的炎癥、腫瘤、結(jié)石等。精彩文檔實(shí)用標(biāo)準(zhǔn)文案亞硝酸鹽:陰性。陽(yáng)性多見(jiàn)于由大腸埃希菌引起的尿路感染。糖及精神激動(dòng)等也可致陽(yáng)性反應(yīng)。服用大量維生素c娠劇吐、長(zhǎng)期饑餓、營(yíng)養(yǎng)不良、劇烈運(yùn)動(dòng)后也可呈陽(yáng)性反應(yīng)。對(duì)象的尿中,一般不見(jiàn)膽紅素。尿膽原。正常人為弱陽(yáng)性反應(yīng),尿液稀釋20塞性黃疸。屎膽原增加常見(jiàn)于溶血性疾患及肝實(shí)質(zhì)性病變?nèi)绺窝讜r(shí)。抗壞血酸(維生素陰性。尿微量白蛋白:陰性。當(dāng)尿液中出現(xiàn)微量
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