微生物檢驗(yàn)質(zhì)量控制，包含室內(nèi)質(zhì)量控制和室間質(zhì)量控制評(píng)價(jià)。

室內(nèi)質(zhì)量控制是由試驗(yàn)室內(nèi)部制訂并實(shí)施，是質(zhì)量確保關(guān)鍵和基礎(chǔ)。

室間質(zhì)量控制評(píng)價(jià)是由試驗(yàn)室外部組織或機(jī)構(gòu)對(duì)試驗(yàn)室進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)。微生物檢驗(yàn)質(zhì)控專家講座第1頁(yè)室內(nèi)質(zhì)量控制微生物檢驗(yàn)質(zhì)控專家講座第2頁(yè)（一）人員與組織管理

①經(jīng)過(guò)廣泛基礎(chǔ)訓(xùn)練教育，包含微生物學(xué)、基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)臨床醫(yī)學(xué)知識(shí)學(xué)習(xí)，專業(yè)化試驗(yàn)技能培訓(xùn)。

②參加醫(yī)務(wù)人員繼續(xù)教育。

③配有一名經(jīng)嚴(yán)格訓(xùn)練并長(zhǎng)久從事于微生物檢驗(yàn)技術(shù)人員，全方面負(fù)責(zé)試驗(yàn)室工作。微生物檢驗(yàn)質(zhì)控專家講座第3頁(yè)（二）操作手冊(cè)①各級(jí)人員職責(zé)和權(quán)限；②試驗(yàn)室安全辦法；③標(biāo)本采集和處理指南；④本室開展檢驗(yàn)項(xiàng)目及最低判定要求；⑤培養(yǎng)基和試劑配制方法；⑥質(zhì)量控制方案；⑦慣用參考數(shù)據(jù)；⑧其它制度。微生物檢驗(yàn)質(zhì)控專家講座第4頁(yè)（三）培養(yǎng)基質(zhì)量控制培養(yǎng)基是分離培養(yǎng)微生物必需品。培養(yǎng)基質(zhì)量好壞，直接關(guān)系到分離培養(yǎng)成敗。當(dāng)前大多數(shù)試驗(yàn)室都使用干粉培養(yǎng)基配制或使用成品培養(yǎng)基。對(duì)來(lái)自著名微生物培養(yǎng)基生產(chǎn)企業(yè)培養(yǎng)基，質(zhì)量比較穩(wěn)定。只要按照說(shuō)明書要求貯存，在使用期內(nèi)使用可取得滿意效果。微生物檢驗(yàn)質(zhì)控專家講座第5頁(yè)測(cè)定羊血瓊脂平板性能培養(yǎng)基質(zhì)控菌株判定標(biāo)準(zhǔn)生長(zhǎng)試驗(yàn)金黃色葡萄球菌ATCC25923生長(zhǎng)溶血反應(yīng)肺炎鏈球菌ATCC19615生長(zhǎng)，α溶血化膿性鏈球菌ATCC6305生長(zhǎng)，β溶血桿菌肽敏感（紙片法）化膿性鏈球菌ATCC6305＞10mm，敏感B群鏈球菌＜10mm，耐藥微生物檢驗(yàn)質(zhì)控專家講座第6頁(yè)（四）試劑、抗血清和染色液質(zhì)量控制

①試劑及染色液注明配制日期，有效日期及貯存條件。測(cè)試同時(shí)進(jìn)行陽(yáng)性和陰性對(duì)照試驗(yàn)。

②抗血清質(zhì)量控制起源可靠，依據(jù)使用說(shuō)明使用與保留。凍干制品還應(yīng)注明配成水溶液日期。抗血清應(yīng)澄清。第一次使用時(shí)，應(yīng)用已知菌效價(jià)和特異性進(jìn)行測(cè)定。合格者方可使用。

微生物檢驗(yàn)質(zhì)控專家講座第7頁(yè)（五）抗生素與抗生素紙片抗菌藥品敏感試驗(yàn)是臨床進(jìn)行抗菌治療指導(dǎo)性試驗(yàn)，其結(jié)果正確性直接關(guān)系到抗菌治療成敗。慣用有紙片法和稀釋法，確保結(jié)果準(zhǔn)確性極為主要。微生物檢驗(yàn)質(zhì)控專家講座第8頁(yè)舉例：紙片法質(zhì)量控制①培養(yǎng)基：應(yīng)使用合格MH瓊脂，應(yīng)使用標(biāo)準(zhǔn)菌株、已知藥敏紙片和標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行測(cè)試，符合要求才可使用。②菌懸液濃度標(biāo)準(zhǔn)：為1.5×108CFU／ml。③含藥紙片應(yīng)冷凍保留，－20℃可保留一年。新購(gòu)紙片用標(biāo)準(zhǔn)菌株和培養(yǎng)基，用標(biāo)準(zhǔn)方法測(cè)定，符合要求方可使用。④試驗(yàn)過(guò)程及結(jié)果測(cè)量：菌懸液應(yīng)在15min內(nèi)接種至平板，平放3min，然后將藥品紙片貼到平板上，100mm平皿不超出5張，置35℃孵育18h，測(cè)量準(zhǔn)確度1／10mm。⑤質(zhì)控菌株有：金黃色葡萄球菌ATCC25923；大腸埃希菌ATCC25922等。⑥抑菌環(huán)質(zhì)控范圍：在20個(gè)試驗(yàn)結(jié)果中只能有1個(gè)結(jié)果超出所列范圍。⑦質(zhì)控測(cè)定次數(shù)：每批新MH瓊脂和含藥紙片必須用質(zhì)控菌株進(jìn)行檢測(cè)30日，30個(gè)抑菌環(huán)直徑只有少于3個(gè)結(jié)果超出范圍。到達(dá)要求后，每七天檢測(cè)一次。微生物檢驗(yàn)質(zhì)控專家講座第9頁(yè)（六）儀器①高壓滅菌器和干熱滅菌器最好在滅菌器裝上溫度統(tǒng)計(jì)裝置，以確保整個(gè)滅菌過(guò)程中保持適當(dāng)溫度。為了確保滅菌徹底，可用生物指示劑嗜熱脂肪芽胞桿菌ATCC7953監(jiān)視滅菌效果。②培養(yǎng)箱、冰箱、水浴箱應(yīng)在每日工作開始和結(jié)束時(shí)統(tǒng)計(jì)溫度。③二氧化碳培養(yǎng)箱天天檢驗(yàn)CO2含量。④厭氧罐或厭氧箱美籃為指示劑，無(wú)氧時(shí)應(yīng)無(wú)色。⑤生物安全柜更換濾網(wǎng)由專門技術(shù)人員進(jìn)行。⑥細(xì)菌培養(yǎng)儀對(duì)每批培養(yǎng)瓶進(jìn)行生長(zhǎng)試驗(yàn)。確保在使用期內(nèi)使用。⑦微生物判定儀應(yīng)及時(shí)更新系統(tǒng)操作軟件，使之能識(shí)別最新認(rèn)識(shí)微生物。微生物檢驗(yàn)質(zhì)控專家講座第10頁(yè)（七）標(biāo)本檢驗(yàn)過(guò)程質(zhì)量控制

微生物學(xué)試驗(yàn)室除了上述儀器、試劑、人員等進(jìn)行質(zhì)量控制外，還應(yīng)對(duì)標(biāo)本檢驗(yàn)過(guò)程中包括每個(gè)步驟進(jìn)行全程質(zhì)量控制。包含從標(biāo)本采集，直接涂片檢驗(yàn)，分離培養(yǎng)到判定全過(guò)程。使用自動(dòng)化判定儀或編碼方式判定，必須進(jìn)行查對(duì)以防錯(cuò)誤。微生物檢驗(yàn)質(zhì)控專家講座第11頁(yè)（八）室內(nèi)全方面質(zhì)量控制試驗(yàn)室人員要對(duì)以上各項(xiàng)質(zhì)量控制內(nèi)容進(jìn)行全方面實(shí)施。由個(gè)人負(fù)責(zé)全方面質(zhì)量控制，自我查對(duì)，定時(shí)與參考試驗(yàn)室查對(duì)并接收考評(píng)。微生物檢驗(yàn)質(zhì)控專家講座第12頁(yè)（九）標(biāo)準(zhǔn)菌株起源和保留①標(biāo)準(zhǔn)菌株起源標(biāo)準(zhǔn)菌株是指含有經(jīng)典、穩(wěn)定生理生化特征，并被國(guó)際社會(huì)所認(rèn)可菌株。起源于專門機(jī)構(gòu)，如衛(wèi)生部藥品生物制品判定所菌種保藏中心。②標(biāo)準(zhǔn)菌株保留（1）普通保留法：將菌種于半固體培養(yǎng)基中，35℃培養(yǎng)18h時(shí)后封蓋無(wú)菌石蠟油，置4℃保留。（2）冷凍干燥法：是最可靠菌種保藏方法，它含有不改變菌種性狀和保留時(shí)間長(zhǎng)等優(yōu)點(diǎn)，但需有專門冷凍干燥設(shè)備。

微生物檢驗(yàn)質(zhì)控專家講座第13頁(yè)室間質(zhì)量控制評(píng)價(jià)微生物檢驗(yàn)質(zhì)控專家講座第14頁(yè)（一）機(jī)構(gòu)我國(guó)負(fù)責(zé)臨床微生物學(xué)試驗(yàn)室質(zhì)量控制部門是各級(jí)臨床檢驗(yàn)中心和參考試驗(yàn)室，負(fù)責(zé)定時(shí)或不定時(shí)地經(jīng)過(guò)各項(xiàng)熟練程度考評(píng)和盲點(diǎn)試驗(yàn)檢驗(yàn)各試驗(yàn)室工作質(zhì)量和水平，進(jìn)行總結(jié)和評(píng)定。各級(jí)試驗(yàn)室可同時(shí)接收國(guó)內(nèi)、國(guó)際多個(gè)質(zhì)量控制機(jī)構(gòu)或參考試驗(yàn)室質(zhì)量評(píng)價(jià)。微生物檢驗(yàn)質(zhì)控專家講座第15頁(yè)（二）普通性檢驗(yàn)項(xiàng)目包含有否制訂各種制度及其執(zhí)行情況。①培養(yǎng)基和試劑配制統(tǒng)計(jì)、培養(yǎng)基保留方法、滅菌質(zhì)量、使用期。②室內(nèi)全方面質(zhì)量控制建立，室內(nèi)工作人員熟練程度考評(píng)和盲點(diǎn)試驗(yàn)進(jìn)行情況，細(xì)菌檢驗(yàn)操作手冊(cè)及操作規(guī)范性。③設(shè)備操作卡，操作人員操作水平，設(shè)備使用保養(yǎng)、維修統(tǒng)計(jì)。微生物檢驗(yàn)質(zhì)控專家講座第16頁(yè)（三）熟練程度考評(píng)由質(zhì)控管理機(jī)構(gòu)（檢驗(yàn)中心或參考試驗(yàn)室）發(fā)放模擬標(biāo)本或菌種，接收試驗(yàn)室知道菌株起源、檢驗(yàn)內(nèi)容和時(shí)間。試驗(yàn)室完成判定后在要求時(shí)間內(nèi)將結(jié)果反饋至檢驗(yàn)中心或參考試驗(yàn)室，進(jìn)行評(píng)價(jià)。分析結(jié)果錯(cuò)誤原因，提供相關(guān)教育資料或舉行學(xué)習(xí)班，不停培養(yǎng)和訓(xùn)練技術(shù)人員，提升了處理類似問題技術(shù)水平。但受試試驗(yàn)室通常對(duì)這些菌株尤其重視，采取超出常規(guī)操作標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行判定，使上報(bào)結(jié)果不能準(zhǔn)確反應(yīng)試驗(yàn)室真實(shí)水平。微生物檢驗(yàn)質(zhì)控專家講座第17頁(yè)（四）盲點(diǎn)試驗(yàn)為了準(zhǔn)確反應(yīng)受控試驗(yàn)室日常處理臨床標(biāo)本實(shí)際水平及能力，很好方法是進(jìn)行未知標(biāo)本盲點(diǎn)質(zhì)量控制。由質(zhì)控管理機(jī)構(gòu)將模擬標(biāo)本混入臨床普通標(biāo)本，送人試驗(yàn)室進(jìn)行常規(guī)測(cè)定。試驗(yàn)室主管及試驗(yàn)操作者不知道哪一個(gè)標(biāo)本是來(lái)自質(zhì)控機(jī)構(gòu)。試驗(yàn)結(jié)果由質(zhì)控管理機(jī)構(gòu)負(fù)責(zé)收回，進(jìn)行評(píng)價(jià)。微生物檢驗(yàn)質(zhì)控專家講座第18頁(yè)（五）質(zhì)控結(jié)果分析與評(píng)價(jià)質(zhì)控管理機(jī)構(gòu)對(duì)每次質(zhì)控結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，將每一試驗(yàn)室結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較。依據(jù)參加規(guī)模和判定正確數(shù)，計(jì)算判定正確率及全部參加試驗(yàn)室平均分，以及每個(gè)試驗(yàn)室得分。

世界衛(wèi)生組織對(duì)每一個(gè)正確判定得3分；部分正確但能夠接收判定結(jié)果得2分；判定結(jié)果