微生物與外界環境第1頁，共36頁，2023年，2月20日，星期四教學目標1、熟悉細菌在正常微生物群和條件致病微生物的概念2、掌握消毒、滅菌、防腐、無菌操作的概念以及區別3、掌握常用消毒滅菌方法第2頁，共36頁，2023年，2月20日，星期四第一節消毒與滅菌1、消毒：殺死物體上病原微生物的方法。（不包括細菌芽胞）消毒劑：用以消毒的化學藥物。一般常用濃度，只對繁殖體有效。2、滅菌：殺滅物體上所有微生物的方法。（包括細菌的芽孢）第3頁，共36頁，2023年，2月20日，星期四3、無菌：物體上沒有活的微生物存在。無菌操作：防止微生物進入機體或物體的操作技術。-外科手術、醫療技術操作及微生物實驗過程等均需嚴格的無菌操作。4、抑菌：抑制人體內部或外部微生物生長繁殖的方法，第4頁，共36頁，2023年，2月20日，星期四5、防腐：防止或抑制微生物生長繁殖的方法。防腐劑：用于防腐的化學藥物。用于延長生物制品及口服制品的保存期。許多化學制劑在低濃度時防腐劑，在高濃度時則為消毒劑。第5頁，共36頁，2023年，2月20日，星期四消毒、滅菌的方法一般可分為：物理學方法熱力滅菌法紫外線與電離輻射滅菌法濾過除菌法化學方法第6頁，共36頁，2023年，2月20日，星期四一、物理消毒滅菌法（一）熱力滅菌法濕熱滅菌法1）高壓蒸氣法2）煮沸法3）流通蒸氣法4）5）干熱滅菌法6）焚燒法7）燒灼法8）干烤法巴氏消毒法間歇滅菌法第7頁，共36頁，2023年，2月20日，星期四分濕熱和干熱同一溫度下，濕熱滅菌效果比干熱好。原因：①穿透力強，較快提高滅菌物品內部溫度；②易吸收水分，使菌體蛋白質易于凝固變性。③熱蒸汽接觸被滅菌物品時變為液態，可放出大量潛熱，能迅速提高滅菌物品的溫度。第8頁，共36頁，2023年，2月20日，星期四1、濕熱滅菌法：（1）高壓蒸汽滅菌法：最常用、最有效密閉的蒸汽鍋技術參術：壓力103.4kPa(1.05kg/c㎡)，溫度可達121.3℃經15-30分鐘，殺死所有細菌繁殖體和芽胞。用途：耐高溫、不怕潮濕的物品--手術器械、敷料、一般培養基等。要求：須將鍋內冷空氣排盡，物品不宜放置緊密。第9頁，共36頁，2023年，2月20日，星期四（2）煮沸法：水溫100℃5分鐘殺死細菌繁殖體。殺滅芽胞需煮沸1-3小時。若在水中加入2%碳酸氫鈉，可提高沸點105℃，優點：促進殺滅芽胞，防止金屬器械生銹。高原每海拔增加300m，應延長2分鐘。用途：食具、刀剪、注射器、生理鹽水等消毒。第10頁，共36頁，2023年，2月20日，星期四（3）流通蒸汽法：蒸籠或阿諾蒸鍋溫度≦100℃，15-20分鐘可殺死細菌繁殖體。間歇滅菌法：把流通蒸汽加熱的物品放置37℃孵箱過夜，芽胞→繁殖體，次日再經流通蒸汽加熱，如此重復3次，達到滅菌目的。用途：不耐高溫的營養豐富的培養基滅菌、外科器械、注射器、食具等。第11頁，共36頁，2023年，2月20日，星期四（4）巴氏消毒法：用較低溫度殺滅液體中的病原菌或特定微生物，延長食品的貯存時間，不影響營養成分及香味。溫度：61.1－62.8℃30分鐘或71.7℃15－30秒．用途：不耐高溫食品---牛奶、酒類、飲料等。第12頁，共36頁，2023年，2月20日，星期四第13頁，共36頁，2023年，2月20日，星期四2、干熱滅菌法：通過脫水干燥和使大分子變性的作用進行滅菌。（1）焚燒與燒灼：廢棄的物品或尸體實驗用的接種環、試管口、瓶口等可通過火焰燒酌滅菌。（2）干烤：用電熱干烤箱滅菌，通常加熱至160-170℃維持2小時，可達到滅菌的目的。用途：高溫下不變質、不損壞、不蒸發的物品--玻璃、瓷器。第14頁，共36頁，2023年，2月20日，星期四第15頁，共36頁，2023年，2月20日，星期四第16頁，共36頁，2023年，2月20日，星期四（二）紫外線與電離輻射滅菌法1、日光與紫外線：日曬是有效的殺菌方法，殺菌作用主要靠紫外線。波長在200-300nm時，具有殺菌作用，其中以265-266nm殺菌力量最強。（此波長與DNA吸收波峰一致，易被細菌DNA吸收，干擾DNA的復制與轉錄，導致細菌的死亡或變異。）第17頁，共36頁，2023年，2月20日，星期四缺點：穿透力弱，玻璃、紙張、塵埃等均能阻擋紫外線。用途：手術室、病房、實驗室等的空氣消毒及物品的表面消毒。人工紫外線燈，2-3米，1-2小時。注意：對人體皮膚、眼睛有損傷作用。第18頁，共36頁，2023年，2月20日，星期四2、電離輻射：包括高速電子、Ｘ射線和γ射線等。機理：足夠劑量時，輻射粒子與某些分子撞擊后，可激發這些分子產生離子或其他活性分子和游離基，破壞DNA。用途：一次性醫用塑料制品。也可用于食品的消毒，而不破壞營養成分。3、微波：波長為1mm-1m左右多用于非金屬器械、食品用具及其他用品的消毒。第19頁，共36頁，2023年，2月20日，星期四（三）濾過除菌法是用物理阻留的方法將液體或空氣中的細菌去除，達到無菌的目的。用途：不耐高溫的血清、毒素、抗生素、藥液等的除菌。現代醫院的手術室、燒傷病房及無菌制劑室，已逐步采用高效顆粒空氣濾器以除去空氣中直徑小于0.3μm的微粒，保持室內無菌環境。第20頁，共36頁，2023年，2月20日，星期四（四）超聲波殺菌法不被人耳感受的高于20000Hz的聲波稱為超聲波。G-更為敏感主要用于粉碎細胞，制備抗原第21頁，共36頁，2023年，2月20日，星期四（五）干燥與低溫滅菌法有些細菌的繁殖體在空氣干燥時會很快死亡，如腦膜炎奈瑟菌等。干燥法通常用于保存食物，如濃鹽或糖漬食品。低溫可以使細菌的新陳代謝減慢，常用作報存細菌菌種。在低溫狀態下真空抽去水分，此法稱為冷凍真空干燥法。第22頁，共36頁，2023年，2月20日，星期四二、化學消毒滅菌法（一）化學消毒劑的種類、性質與用途消毒劑對細菌和人體細胞都有毒性作用用途：人體體表和醫療器械、周圍環境的消毒。常用化學藥物的種類有：第23頁，共36頁，2023年，2月20日，星期四第24頁，共36頁，2023年，2月20日，星期四第25頁，共36頁，2023年，2月20日，星期四常用消毒劑的選用：第26頁，共36頁，2023年，2月20日，星期四（二）常用消毒劑的作用機制第27頁，共36頁，2023年，2月20日，星期四（三）影響消毒滅菌效果的因素1、消毒劑的性質、濃度、和作用時間理化性質不同，對微生物的作用大小也不同。表面活性劑對G+菌的殺菌效果要比對G-菌強。一般：濃度越高，作用時間越長，消毒效果愈強（醇類例外）。第28頁，共36頁，2023年，2月20日，星期四2、細菌的種類、數量、與狀態芽胞比繁殖體抵抗力強；有莢膜的細菌抵抗力強；幼齡菌比老齡菌對消毒劑敏感；數量越大，所需消毒時間越長。第29頁，共36頁，2023年，2月20日，星期四3、環境因素的影響：病原菌隨同排泄物、分泌物一起存在，對細菌有保護作用，并與消毒劑發生化學反應，影響消毒效果。4、溫度和酸堿度升高溫度可提高消毒劑的殺菌效果，如2%戊二醛殺滅104個/炭疽芽胞桿菌，20℃時需15分鐘；40℃時需要2分鐘。。第30頁，共36頁，2023年，2月20日，星期四ＰＨ影響：戊二醛本身呈中性，其水溶液呈弱酸性，不具有殺芽胞的作用，只有在加入碳酸氫鈉后才能發揮殺菌作用。其他影響因素:濕度、穿透力及拮抗物質等第31頁，共36頁，2023年，2月20日，星期四（四）防腐劑低濃度的消毒劑可作防腐劑。在生物制品中，如疫苗、類毒素等常加入防腐劑，以防雜菌生長。常用:0.01%硫柳汞、0.5%苯酚、0.1-0.2%甲醛等。第32頁，共36頁，2023年，2月20日，星期四一、正常微生物群及生理作用（一）正常微生物群正常人體的體表及與外界相通的腔道粘膜上存在著不同種類和一定數量的細菌，通常對人體是無害的，稱為正常菌群。第二節正常微生物群與微生態平衡第33頁，共36頁，2023年，2月20日，星期四（二）正常菌群的生理意義1、生物拮抗作用：競爭營養、產生細菌素等方式拮抗病原菌，構成防止外來細菌侵入與定居的生物屏障。2、營養作用：參與物質代謝、營養轉化和合成。有的能合成宿主所必須的維生素。第34頁，共36頁，2023年，2月20日，星期四3、免疫作用：有免疫原性、促免疫細胞分裂作用，刺激機體產生抗體，促進機體免疫系統的發育和成