關于天然產物的提取分離第一頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期日天然藥物活性成分的研究程序第二頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期日提取化學成分的兩種情況1

已知成分2

對有效成分的性質一無所知第三頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期日溶劑法

水蒸氣蒸餾法升華法分餾法沉淀法提取天然產物的常用方法第四頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期日一、溶劑法

根據相似相溶原則，按極性化合物易溶于極性溶劑，非極性化合物易溶于非極性溶劑來選擇溶劑。

1.原理：

溶劑提取法是根據天然產物中各種成分在溶劑中的溶解性質，選用對活性成分溶解度大，對不需要溶出成分溶解度小的溶劑，而將有效成分溶解出來的方法。第五頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期日石斛：有一定解熱鎮痛作用，能促進胃液分泌,助消化，有增強新陳代謝、抗衰老等作用。

第六頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期日

2、常用溶劑的極性

環己烷,石油醚,苯,氯仿,乙醚,乙酸乙酯,正丁醇,丙酮,乙醇,甲醇小————大親脂性：大

————

小

親水性：小

————

大

極性：第七頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期日3.化學成分的極性特點

分子越小,取代基極性越強,極性基團數目越多則極性越大，親水性越強,為親水性成分（如:單糖）反之,則親脂性越強,為親脂性成分（如:揮發油）取代基的極性順序：-COOH>-OH>-NH2>-SH>-CHO>>C=O>-COOR>-OR>-CH=CH->-CH2-CH2-第八頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期日例：下列三個化合物極性最小的是：C第九頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期日4、溶劑提取法

浸漬法滲漉法煎煮法回流提取法第十頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期日浸漬法：浸漬法是將天然產物粉末或碎塊裝人適當的容器中，加入適宜的溶劑（如乙醇、稀醇或水），浸漬藥材以溶出其中成分的方法。滲漉法：滲漉法是將天然產物粉末裝在滲漉器中，不斷添加新溶劑，使其滲透過藥材，自上而下從滲漉器下部流出浸出液的一種浸出方法。第十一頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期日煎煮法：煎煮法是我國最早使用的傳統的浸出方法。所用容器一般為陶器、砂罐或銅制、搪瓷器皿，不宜用鐵鍋，以免藥液變色。直火加熱時最好時常攪拌，以免局部藥材受熱太高，容易焦糊。回流提取法：應用有機溶劑加熱提取，需采用回流加熱裝置，以免溶劑揮發損失。此法提取效率較冷浸法高，大量生產中多采用連續提取法。

第十二頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期日二、

水蒸氣蒸餾法

適于隨水蒸汽蒸餾而不被破壞的成分。將油層分出后，再以石油醚、乙醚萃取。此類化合物沸點多在100oC以上；與水不互溶或僅微溶；在100oC有一定的蒸汽壓。液體就開始沸騰，水蒸氣將揮發性物質一并帶出。例如:揮發油、某些小分子生物堿的提取。第十三頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期日三、升華法

優點：簡便易行缺點：成分分解；焦油狀物不易除去第十四頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期日四、影響提取效果的因素

原料的粉碎程度：一般而言粒度以20~60目為適。

浸出溫度：一般浸出溫度控制在60~100℃。

濃度差:濃度差越大，擴散推動力越大，越有利提高浸出效率。

浸提時間:熱提1~3h，乙醇加熱回流提取1~2h。

第十五頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期日天然產物有效成分的分離與精制

根據物質溶解度差別進行分離

根據物質在兩相溶劑中的分配系數不同進行分離

根據分子的大小不同進行分離

第十六頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期日一、根據物質溶解度差別進行分離

1、結晶原理：利用混合物中各成分在溶劑中的溶解度不同來達到分離提純的目的。結晶溶劑的選擇：（1）不與有效成分發生反應（2）對欲結晶成分的溶解度隨溫度的不同而有明顯差別。（3）對欲去除的雜質冷熱時溶解度均大或均小第十七頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期日制備結晶操作：略結晶純度的判定：化合物的結晶都有一定的結晶形狀、色澤、熔點和熔距，一可以作為鑒定的初步依據。

第十八頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期日2、溶劑沉淀：

在溶液中加入另一種溶劑以改變混合溶劑的極性，使一部分物質沉淀析出，從而實現分離。

3、沉淀劑沉淀：（1）金屬離子沉淀；（2）酸堿沉淀；（3）非離子型聚合物沉淀；（4）均相沉淀。4、鹽析沉淀

第十九頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期日二、根據物質在兩相溶劑中的分配比不同進行分離

一、液-液萃取法基本原理

分配定律利用不同化合物分配系數的不同，達到分離的目的K相差越大，越易分離第二十頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期日3、萃取方式分次萃取實驗室用分液漏斗，3-4次注意以下幾點：1）先用小試管猛烈振搖約1分鐘，觀察萃取后二液層分層現象。如果容易產生乳化，大量提取時要避免猛烈振搖，可延長萃取時間。2）一般萃取3～4次即可。3）

溶劑與水溶液應保持一定量的比例，第一次提取一般為水提取液的1/3，以后的用量可以少一些，一般1/4-1/6。

第二十一頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期日4、超臨界流體萃取技術

超臨界流體萃取是以某一介質作為萃取劑，在其臨界溫度和臨界壓力之上的條件下，從液體或固體物料中萃取出待分離的組分的一種方法。

第二十二頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期日3液液分配色譜柱

將兩相溶劑中的一相涂覆在硅膠等多孔載體上,作為固定相,填充在色譜管中,然后加入與固定相不相混溶的另一相溶劑

(流動相)沖洗色譜柱。這樣,物質同樣可在兩相溶劑中相對作逆流移動,在移動過程中不斷進行動態分配而得以分離。這種方法稱之為液-液分配柱色譜法。

正相色譜與反相色譜第二十三頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期日三、根據物質分子大小差別進行分離

凝膠過濾法（Gelfiltration）

凝膠過濾法也叫凝膠滲透色譜排祖色譜，是利用分子篩分離物質的一種方法。其中所用載體，如葡聚糖凝膠，是在水中不溶、但可膨脹的球形顆粒，具有三維空間的網狀結構。出柱順序：按分子由大到小順序先后流出并得到分離。

第二十四頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期日色譜分離方法薄層層析（ThinLayerChromatography,TLC）1、原理吸附、分配2、展開劑低沸點有機溶劑，選擇原則同吸附柱層析第二十五頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期日（1）化合物結構與Rf值的關系在色譜中一個化合物所移動的距離與溶劑前沿的距離之比.(0.01<Rf<0.99)

吸附薄層層析：化合物極性小，Rf值大展開劑極性越大，同一化合物Rf值大第二十六頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期日

若大部分斑點近于起始線，表明溶劑極性太小，應加大極性溶劑的比例。某化合物用10ml氯仿作展開劑,薄層色譜后其Rf值很小,接近于起始線,該如何處理?

加大展開劑的極性:改變組成:如氯仿-丙酮，氯仿-甲醇，改變配比:如9:1,8:2,5:5第二十七頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期日(2)展開劑的選擇不與樣品起化學反應對顯色劑無不良影響組分恒定,不因溫度的變化而變化被分離物的Rf值在0.05~0.85,二種成分的Rf值之差大于0.05，以免斑點重疊。鑒定單一化合物Rf值在0.4~0.6，斑點圓而集中，界線清晰，分布適中。第二十八頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期日（3）展開形式單向,雙相和連續展開第二十九頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期日

廣譜方法：碘：揮干溶劑，置于碘缸，許多物質與碘產生棕色點噴灑稀硫酸，加熱

UV燈下觀察熒光第三十頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期日（5）樣品洗脫：色帶割下，溶劑洗脫7、TLC法的特點

分離多種類型的化合物簡便、高效、快速（幾分鐘-十幾分鐘）、靈敏（g級）定性：Rf值，與已知物對照定量：測量斑點面積，割下斑點洗脫或TLC掃描儀為柱層析選擇條件制備：分離、純化缺點：處理的量少第三十一頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期日四、干柱層析干柱：填充劑干法裝（一）原理與TLC相同（二）填充劑與TLC相同易分離樣品（ΔRf>0.1），粗顆粒（150-200目）難分離樣品（ΔRf<0.1），細顆粒（200-300目）（三）展開劑

TLC選擇，各斑點ΔRf相差大，斑點圓，數量多第三十二頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期日（四）實驗操作

1、裝柱堅實、平整、無縫隙尼龍筒或塑料薄膜袋2、加樣（1）拌樣加樣法（2）溶液加樣法迅速、蓋滿柱頂，輕拍，趕走氣泡，保持柱頂整齊3、展開展開至柱底第三十三頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期日（五）特點1、廣泛應用于植化成分的制備性分離2、效果優于濕法3、分離條件可用TLC探索4、熒光或有色物質可在UV下分離切開，避免交叉5、設備簡單、消耗溶劑少、省時缺點：裝柱不當，效果不如濕法第三十四頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期日天然藥物活性成分的結構研究方法一、程序1、初步推斷化合物類型1）根據樣品在提取、分離中的行為

2）測定有關理化性質：定性反應、PH、溶解度及熔沸點等

3）結合文獻調研2、測定分子式、計算不飽和度

1）元素定量分析+分子量測定

2）同位素峰法

3）HIMS4）計算不飽和度3、確定分子中官能團、或結構片段或基本骨架

1）官能團定性、定量分析