細菌學衛生檢驗種類及標準演示文稿1當前1頁，總共34頁。主要內容第一節體液、分泌物及排泄物細菌學檢驗第二節各種環境標本細菌學檢驗及衛生標準（自學）當前2頁，總共34頁。臨床感染性疾病的診斷和治療應用良好的檢測技術和方法，提供準確的結果或報告確定檢查目的和方法正確規范的采集和運送標本臨床檢驗流程第一節體液、分泌物及排泄物細菌學檢驗當前3頁，總共34頁。細菌學鑒定方法1、形態結構檢查2、細菌生長特性檢查如菌落3、生化試驗4、血清學試驗5、藥敏試驗6、細菌毒素檢測7、分子生物學檢測8、噬菌體分型試驗9、動物試驗當前4頁，總共34頁。臨床標本常規細菌學檢驗程序標本選擇標本采集與運送觀察標本、前處理直接涂片快速檢驗分離培養增菌培養可疑菌落血清學鑒定藥物敏感試驗生化反應形態觀察結果報告當前5頁，總共34頁。細菌學檢驗報告原則分級報告一級報告：直接涂片染色結果及培養結果二級報告：分離培養及藥敏結果三級報告：細菌種屬、藥敏結果、結果評價和建議當前6頁，總共34頁。當前7頁，總共34頁。無菌原則正確采樣時間正確采樣部位

足夠樣本量

多樣性采集做好記錄標本采集的一般原則當前8頁，總共34頁。一、血液標本細菌學檢驗二、腦脊液標本細菌學檢驗三、穿刺液和引流液標本細菌學檢驗四、尿液標本細菌學檢驗五、膿液和分泌物標本細菌學檢驗六、痰液標本細菌學檢驗七、生殖道標本細菌學檢驗八、糞便標本細菌學檢驗當前9頁，總共34頁。一、血液標本細菌學檢驗種類常見病原菌G+球菌金黃色葡萄球菌、凝固酶陰性葡萄球菌、肺炎鏈球菌、化膿鏈球菌、草綠色鏈球菌、腸球菌G+桿菌結核分枝桿菌、產單核李斯特菌、陰道加特納菌G-球菌腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌，卡他布蘭漢菌G-桿菌大腸埃希菌、銅綠假單胞苗、克雷伯桿菌、腸桿菌、變形桿菌、沙雷菌、沙門菌、不動桿菌、嗜肺軍團菌、嗜血桿菌真菌念珠菌、曲霉菌、隱球菌、球孢子菌厭氧菌擬桿菌、產氣莢膜梭菌當前10頁，總共34頁。（一）血液標本的采集與送檢1.采樣時間：發熱期、用藥之前、病情發展2.采樣部位及頻率：多部位、高頻率例1：亞急性心內膜炎：24h內在三個不同部位采集3次血標本，兩次間隔不少于15分鐘，如培養陰性，就再采3次血標本。例2：急性膿毒血癥：在10分鐘內在不同部位采2～3次血標本。當前11頁，總共34頁。3.樣本采集的量：成人血量5～10ml，嬰兒1ml～2ml，兒童3ml～5ml；當懷疑為真菌感染時，應采集雙份量，分別作雙相培養(37℃/28℃)。4.樣本的送檢：盡快，室溫5.操作：直接采血注入含増菌肉湯的培養瓶或用不含防腐劑的肝素抗凝管至實驗室接種，需同時做需氧和厭氧培養當前12頁，總共34頁。血培養一級報告二級報告三級報告“檢出***菌”，藥敏試驗結果；7天仍無生長現象，報告為“7天培養無細菌生長”（結核可培養8周報告陰性）當前13頁，總共34頁。（二）細菌學檢驗當前14頁，總共34頁。（一）標本的采集與送檢1.采樣：腰椎穿刺術無菌采集腦脊液3-5ml，床邊接種或放入無菌試管中，立即送檢（采樣到送檢不超過1h）；2.注意保溫，不可置冰箱保存，因為會使病原菌死亡，尤其是腦膜炎奈瑟氏菌、肺炎鏈球菌及流感嗜血桿菌；3、腦膿腫吸出物尚須檢測厭氧菌和寄生蟲培養基選擇：普通血培養瓶、厭氧血培養瓶、血平皿、中國藍平皿、流感嗜血桿菌平皿等。

二、腦脊液標本細菌學檢驗當前15頁，總共34頁。（二）細菌學檢查

1．涂片檢查：革蘭染色：查找一般細菌，尤其腦膜炎奈瑟菌、肺炎鏈球菌和鏈球菌多見?？顾崛旧翰檎医Y核分枝桿菌。墨汁染色：查找新型隱球菌。2．細菌培養：腦脊髓液培養多數需3～4天，在此期間如有細菌生長，經鑒定報告“××菌”，同時報告藥敏試驗結果。

當前16頁，總共34頁。床邊接種離心涂片，同時增菌不染色鏡檢革蘭、抗酸、墨汁染色單菌落涂片染色離心沉淀物或増菌培養物腦脊液報告單當前17頁，總共34頁。三、穿刺液和引流液標本細菌學檢驗（一）標本的采集與送檢1、標本來源：胸腔積液、腹水、心包積液、關節液、膽汁、鞘膜液深部組織液等2、標本量：心包積液、關節液為1-5ml，胸腔積液、腹水為5-10ml3、收集送檢：無菌收集并置于無菌抗凝試管送檢，無法立即送檢可冷藏；標本還可床邊接種或置厭氧運送培養基內送檢，無法立即送檢可室溫保存。當前18頁，總共34頁。（二）細菌學檢查1、標本處理：①漿液離心沉淀物涂片；②膿液直接涂片；③含血細胞，加等量蒸餾水破壞紅細胞后，離心沉淀物涂片2、涂片檢查：這類標本因原部位是無菌的，只要檢出細菌即可診斷感染的類型，故直接涂片很重要。革蘭染色：查找一般細菌?？顾崛旧翰檎医Y核分枝桿菌。3、分離培養及鑒定：離心沉淀物分別接種增菌肉湯、血瓊脂平板、中國藍或麥康凱瓊脂平板、厭氧血瓊脂平板。如有細菌生長，需進一步鑒定和藥敏試驗后報告。

當前19頁，總共34頁。四、尿液標本細菌學檢驗（一）標本的采集與送檢1、采集方法：防止尿液被尿道口菌群污染，采用中段尿采集法、導尿法和膀胱穿刺法采集標本無菌導尿管采集尿液，在排出15ml尿液后收集，有潛在引入尿道菌的危險；留置導尿管采尿，先以75%酒精消毒導管口，用無菌注射器收集10ml；長期留置導尿管患者，應在更換新尿管時留取尿標本。當前20頁，總共34頁。2、采集時間：通常應采集早晨起床后第一次尿液，在抗菌藥物應用之前采集尿液10-15ml

3、送檢：及時送檢，室溫不超過2h；冷藏不超過8h；淋病奈瑟菌和厭氧菌培養應保溫送檢。當前21頁，總共34頁。（二）細菌學檢查1、顯微鏡檢查：離心沉淀物涂片。根據臨床情況選擇染色方法如革蘭染色和呂氏美藍染色（淋球菌）、抗酸染色（結核分枝桿菌）、暗視野顯微鏡直接觀察（鉤端螺旋體）。2、分離培養及鑒定：①必須做傾注培養法計數尿液菌，培養結果才有臨床意義。②離心沉淀物分別接種血瓊脂平板、中國藍或麥康凱瓊脂平板或疑似菌相應培養基，可疑菌落進行涂片、染色、生化鑒定、藥敏等。當前22頁，總共34頁。3、結果報告涂片鏡檢，報告形態特點和染色情況；

尿液細菌計數，如為革蘭陽性菌＞104CFU／m1；如為革蘭陰性菌＞105CFU／m1，可診斷為泌尿系感染。10％的尿路感染者可能在同份尿標本中分離到兩種細菌，并都是病原菌。但當檢出3種或以上不同微生物，認為標本被污染。分離到的細菌，經鑒定及藥敏試驗后，可報告“檢出***菌，藥敏結果是***”；48h無細菌生長，報告陰性。報告“2天培養無細菌生長”。當前23頁，總共34頁。尿液檢查尿液標本離心沉淀涂片可疑菌落血清學鑒定藥物敏感試驗生化反應形態觀察尿液菌落計數接種平板分離培養報告結果當前24頁，總共34頁。（一）標本的采集與送檢拭子采集法、紗布條采集法、注射器抽吸法開放式膿腫封閉式膿腫大面積燒傷瘺管采樣樣品不能及時送檢可冷藏；厭氧培養要床邊接種或厭氧運送。

五、膿液和分泌物標本細菌學檢驗清洗后，棉拭子直接采樣切開排膿時用無菌棉拭子采樣或注射器抽吸可多部位棉拭子采集創面分泌物紗布條塞入瘺管或棉拭子采樣當前25頁，總共34頁。（二）細菌學檢查1、涂片檢查：革蘭染色：可檢查一般細菌，特別注意真菌及放線菌存在?？顾崛旧赫医Y核分枝桿菌(部分奴卡菌也可陽性)2、分離培養及鑒定：分泌物或膿液分別接種血瓊脂平板、中國藍或麥康凱瓊脂平板或疑似菌相應培養基，可疑菌落進行涂片、染色、生化鑒定、藥敏等。3、結果：一般培養2日，以為諾卡菌培養7天，厭氧菌3-5天，報告結果。當前26頁，總共34頁。當前27頁，總共34頁。（一）標本的采集與送檢1、采樣時間及類型：使用抗生素前采集。①用清水反復漱口后取第2或3口的晨痰；②就診時深呼吸后咳出的即時痰；③送痰前一日，晚間咳出的痰液。2、采樣方法自然咳痰法拭子采集法小兒取痰法特殊取痰法呼吸道深部痰，可霧化使痰易排出壓住舌根，棉拭子反復涂抹咽后壁或懸雍垂后側壓舌，棉拭子深入咽部，刺激咳出分泌物胃內采痰法、支氣管鏡等特殊方法

六、痰液標本細菌學檢驗當前28頁，總共34頁。3、送檢：樣品不能及時送檢室溫不超過2h；結核或真菌痰液冷藏。4、標本質量：標本量一般在3-5ml，標本性狀屬于干酪痰、褐色血痰或含少量新鮮血液的血痰、粘液痰者為合格的標本當前29頁，總共34頁。（二）痰液細菌學檢查痰液標本膿性或帶血部分涂片可疑菌落血清學鑒定藥物敏感試驗生化反應形態觀察稀釋后接種平板分離培養報告結果當前30頁，總共34頁。（一）標本的采集與送檢1、采樣方法生殖道分泌物穿刺液標本懷疑梅毒患者前列腺液2、送檢普通細菌、衣原體、支原體淋病奈瑟球菌厭氧菌清洗尿道口外陰，棉拭子深入尿道口2-3cm采集；陰道分泌物在陰窺鏡下采集盆腔膿腫者及子宮分泌物需穿刺采集清洗生殖器，從潰瘍底部擠出少許組織液按摩前列腺后采集

七、生殖道標本細菌學檢驗無法及時送檢可冷藏保存床邊接種或保溫后及時送檢室溫，厭氧送檢或床邊接種當前31頁，總共34頁。（二）細菌學檢驗1、顯微鏡檢查2、分離培養及鑒定3、結果報告當前32頁，總共34頁。（一）標本的采集與送檢1、采樣方法1、常規培養不主張用肛拭子，自然排便后，挑取有膿液、粘液部位的糞便2-3g或液狀糞便1-2ml；2、直腸拭子法：不易獲得糞便時或排便困難的患者及幼兒，可采用直腸拭子方法采集；2、送檢不能及時送檢放入卡-布運送培養基或pH7.0