發(fā)酵工業(yè)中噬菌體的感染及防護(hù)科三五組第1頁/共13頁我國的傳統(tǒng)發(fā)酵產(chǎn)品醬油、醋、腐乳等享譽(yù)世界我國的釀酒已經(jīng)有4000多年的歷史我國的醬油距今已有3000年的歷史古老的發(fā)酵—天然發(fā)酵第2頁/共13頁微生物發(fā)酵技術(shù)的初創(chuàng)時(shí)期微生物學(xué)家已對(duì)微生物形態(tài)和生理進(jìn)行觀察與研究。純培養(yǎng)技術(shù)的建立有的發(fā)酵過程開始時(shí)采用固體發(fā)酵形式進(jìn)行生產(chǎn)。該時(shí)期生產(chǎn)的發(fā)酵產(chǎn)物都屬于微生物形成的初級(jí)代謝產(chǎn)物發(fā)酵產(chǎn)品以厭氧發(fā)酵居多，如酒精發(fā)酵、乳酸發(fā)酵。發(fā)酵生產(chǎn)與化學(xué)工程結(jié)合，促成了發(fā)酵生產(chǎn)的第一次飛躍第3頁/共13頁微生物發(fā)酵技術(shù)的全盛時(shí)期以微生物生命活動(dòng)為研究中心、設(shè)計(jì)和指導(dǎo)工業(yè)發(fā)酵生產(chǎn)。幾個(gè)里程碑1.青霉素的誕生2.生物轉(zhuǎn)化的興起3.氨基酸的生產(chǎn)4.基因工程技術(shù)的誕生第4頁/共13頁線狀體無尾結(jié)構(gòu)的二十面體有尾結(jié)構(gòu)的二十面體噬菌體的種類第5頁/共13頁發(fā)酵工業(yè)生產(chǎn)菌的噬菌體可以從異常發(fā)酵液和工廠環(huán)境中分離出來,溶源性細(xì)菌也混雜在工廠周圍環(huán)境的細(xì)菌中。這樣,噬菌體極易污染發(fā)酵生產(chǎn),導(dǎo)致發(fā)酵異常,造成嚴(yán)重?fù)p失。（生產(chǎn)環(huán)境中有噬菌體）菌種本身帶噬菌體，特別是溶源性噬菌體，對(duì)這種菌種，一經(jīng)發(fā)現(xiàn)，應(yīng)立即棄去。

噬菌體污染的原因第6頁/共13頁

噬菌體污染的特征發(fā)酵液光密度上升緩慢，甚至下降，肉眼可見發(fā)酵液逐漸變清，鏡檢時(shí)，有大量異常菌體出現(xiàn)；發(fā)酵周期延長，耗糖速度緩慢或停止，發(fā)酵產(chǎn)物生成量少或不增加，發(fā)酵液中殘?zhí)歉撸划a(chǎn)生大量泡末，發(fā)酵液呈粘稠狀；用敏感菌作平板檢查時(shí)，可以看到出現(xiàn)大量噬菌斑。第7頁/共13頁

噬菌體的檢查方法1．雙層瓊脂平板法

檢查有無透明的噬菌斑。

2．液體培養(yǎng)檢查法

將培養(yǎng)基和發(fā)酵菌種及待檢發(fā)酵液三者混合，培養(yǎng)后觀察培養(yǎng)液是否變清。3．斑點(diǎn)試驗(yàn)法

培養(yǎng)后，觀察是否有噬菌斑。4．玻片快速法

經(jīng)短期培養(yǎng)后，在低倍鏡下觀察是否有噬菌斑。

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決不使用可疑菌種；2

清除周圍環(huán)境中存在的噬菌體。能滅菌的滅菌，能消毒的消毒，搞好清潔衛(wèi)生工作；3

選育抗噬菌體菌株4

輪換使用菌株。因?yàn)橐粋€(gè)菌株用的時(shí)間一長，就有可能出現(xiàn)該菌種的噬菌體。5

注意通氣質(zhì)量。取風(fēng)口應(yīng)設(shè)在30~40米的高空，空氣過濾器要保證質(zhì)量；噬菌體污染的防治措施第9頁/共13頁發(fā)酵液污染噬菌體后的搶救措施1．若在發(fā)酵前期污染了噬菌體（1）補(bǔ)加抗性種子，并根據(jù)發(fā)酵液中的營養(yǎng)多少，適當(dāng)補(bǔ)加營養(yǎng)物質(zhì)；（2）

補(bǔ)加約50%的已培養(yǎng)至對(duì)數(shù)期的正常的發(fā)酵液，再進(jìn)行發(fā)酵；（3）

若噬菌體輕度污染，菌體仍能較正常地生長，并積累代謝產(chǎn)物，則可照常進(jìn)行發(fā)酵，若污染嚴(yán)重，則用加熱法（70~80℃）滅活噬菌體，放罐后重消毒。第10頁/共13頁2．若在發(fā)酵中后期污染了噬菌體若情況比較嚴(yán)重，則應(yīng)提前放罐，盡快提取產(chǎn)物。發(fā)酵罐、管道、洗滌水及用具均應(yīng)徹底滅菌，防止噬菌體擴(kuò)散而造成新的污染。并及時(shí)改用抗該噬菌體的生產(chǎn)菌株。

3．對(duì)某些產(chǎn)品可用藥物防治。選擇能特異性地抑制噬菌體而對(duì)生產(chǎn)菌株及其發(fā)酵產(chǎn)物的積累和提取均無影響，又符合衛(wèi)生要求、對(duì)人無毒的藥物。盡可能選活性高（用藥量少）、價(jià)