現(xiàn)階段我國(guó)魚類育種與苗種培育技術(shù)的進(jìn)展趨勢(shì)魚類育種學(xué)概述-養(yǎng)殖技術(shù)魚類苗種培育及育種技術(shù)是魚類生長(zhǎng)的根本根底,同時(shí)也是促進(jìn)安康養(yǎng)殖的重要環(huán)節(jié)。現(xiàn)通過(guò)分析我國(guó)魚類育種進(jìn)呈現(xiàn)狀及存在的問(wèn)題等,闡述我國(guó)魚類苗種技術(shù)進(jìn)展趨勢(shì),提出加強(qiáng)我國(guó)魚類苗種的培育思路,以期為我國(guó)現(xiàn)代漁業(yè)養(yǎng)殖供給科學(xué)依據(jù)。下面一起來(lái)了解一下：現(xiàn)階段我國(guó)魚類育種與苗種培育技術(shù)的進(jìn)展趨勢(shì)魚類育種學(xué)概述。1、現(xiàn)階段我國(guó)魚類育種、魚苗培育現(xiàn)狀水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的主要環(huán)節(jié)就是要做好水產(chǎn)動(dòng)物育種及苗種培育工作。我國(guó)魚類育種及苗種培育技術(shù)歷史悠久，并且隨著我國(guó)改革開(kāi)放后，大量的資金和人力、物力的投入促進(jìn)我國(guó)水產(chǎn)魚類培育技術(shù)不斷提升1.1有序開(kāi)展水產(chǎn)原良種體系水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)最重要的生產(chǎn)要素就是魚類苗種的培育工作，而優(yōu)質(zhì)的原良種則是高質(zhì)量和浩大數(shù)量苗種的培育前提，優(yōu)質(zhì)原良種能夠?qū)a(chǎn)量提120%—130%。原良種體系構(gòu)造包括良種場(chǎng)、原種場(chǎng)、苗種繁育場(chǎng)、水產(chǎn)引種育種中心及種質(zhì)監(jiān)測(cè)中心等，隨著我國(guó)經(jīng)濟(jì)和科技的快速進(jìn)展壯大，現(xiàn)代遺傳育種技術(shù)不斷更，良種培育方法不斷改進(jìn)，良種掩蓋率得到顯著提升。目前我國(guó)已根本形成水產(chǎn)原良種生2050%。綜上所述，良種體系為我國(guó)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的穩(wěn)定進(jìn)展奠定良好根底1.2有效提升水產(chǎn)苗種生產(chǎn)規(guī)模化程度隨著我國(guó)科學(xué)技術(shù)不斷進(jìn)展進(jìn)步，水產(chǎn)原良種生產(chǎn)體系逐步完善，人工生殖技術(shù)水平顯著提升，目前我國(guó)水產(chǎn)苗種的產(chǎn)量以能夠滿足我國(guó)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的根本需求，并且將我國(guó)淡水魚苗種無(wú)償2023化生產(chǎn)。但目前我國(guó)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)仍以大宗淡水魚為主，苗種生產(chǎn)規(guī)模1.3魚類育種技術(shù)漸漸完善魚類育種技術(shù)包括魚苗和魚種的培育，而做好魚類育種工作的前提就是保證人工生殖技術(shù)成熟及水產(chǎn)良種化。近些年我國(guó)不斷推動(dòng)水產(chǎn)良種化工作，應(yīng)用現(xiàn)代化科技不斷突破創(chuàng)人工生殖技術(shù)，使得魚類育種技術(shù)具備了先進(jìn)的物質(zhì)根底，隨著我國(guó)水產(chǎn)品消費(fèi)市場(chǎng)對(duì)高品質(zhì)經(jīng)濟(jì)水產(chǎn)動(dòng)物的需求和市場(chǎng)經(jīng)濟(jì)的活潑程度增大，越來(lái)越多的水產(chǎn)養(yǎng)殖對(duì)象的育種技術(shù)1.4魚苗培育防控病害技術(shù)漸漸提高在魚類苗種培育進(jìn)展的過(guò)程中，病害有時(shí)會(huì)對(duì)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的經(jīng)濟(jì)效益造成破壞，甚至賜予致命的打擊，而病害的主要來(lái)源通常包括魚塘自身狀況、魚類苗種的選擇、苗種運(yùn)輸、水源等。目前我國(guó)針對(duì)苗種病害防治工作漸漸加大監(jiān)控力度的角度動(dòng)身，對(duì)水源進(jìn)展凈化消毒，確保為魚類供給良好的微生態(tài)環(huán)境，同時(shí)在苗種的選育工作中慎重留神，并具體列舉可能造成苗種病害的事項(xiàng)，定期進(jìn)展檢測(cè)，一經(jīng)覺(jué)察馬上處理，有效降低苗種病害發(fā)生率。22..1體制及水產(chǎn)苗種法律體系隨著我國(guó)資金支持力度及政策扶植力度加大，我國(guó)有關(guān)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)苗種培育和生產(chǎn)的法律法規(guī)漸漸完善，如現(xiàn)原良種的審定標(biāo)準(zhǔn)及審定方法、良種補(bǔ)貼制度等。完善的法律法規(guī)體系及良好的治理機(jī)制為我國(guó)魚類苗種的培育技術(shù)穩(wěn)定進(jìn)展供給牢靠保障和科學(xué)向?qū)А?..2不斷加快水產(chǎn)良種化進(jìn)程將來(lái)我國(guó)水產(chǎn)良種選育工作將更加留意資金、人力資源及科研成果的整合，更加留意優(yōu)良品種、抗逆性狀及抗病的選育工作，通過(guò)吸取引進(jìn)國(guó)際上比較先進(jìn)的育種技術(shù)，綜合應(yīng)用蛋白質(zhì)組學(xué)、數(shù)量遺傳學(xué)等現(xiàn)代生物技術(shù)，漸漸完善我國(guó)水產(chǎn)生殖選育技術(shù)體系，并通過(guò)先進(jìn)的現(xiàn)代化科學(xué)技術(shù)加快良種選育工作進(jìn)程。2..3魚類苗種培育治理制度更加科學(xué)化、系統(tǒng)化今后我國(guó)將加大現(xiàn)代生物技術(shù)在魚類苗種培育工作中的應(yīng)用，提升魚類苗種培育工作的科學(xué)技術(shù)含量，提高魚類苗種的生存質(zhì)量和成活率，緩解我國(guó)目前魚類苗種選育工作上主要依靠生物餌料的現(xiàn)象，促進(jìn)我國(guó)魚類苗種培育工作向規(guī)模化漸漸進(jìn)展，促進(jìn)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的產(chǎn)業(yè)3設(shè)計(jì)多個(gè)環(huán)節(jié)，必需加大對(duì)各環(huán)節(jié)的爭(zhēng)論力度，選育優(yōu)良品種，實(shí)現(xiàn)安康治理，促進(jìn)苗種培育技術(shù)全面開(kāi)展，保證我國(guó)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)長(zhǎng)期穩(wěn)定進(jìn)展。魚類育種學(xué)概述魚類育種的途徑和范圍是格外廣泛的，包括常規(guī)的選擇育種、雜交育種、多倍體育種以及近進(jìn)展起來(lái)的細(xì)胞工程育種和轉(zhuǎn)基因育種。本文就這些方面對(duì)魚類的育種進(jìn)展綜述。魚類育種是對(duì)野生或現(xiàn)有品種進(jìn)展遺傳改造，制造自然界所未有的魚類品種，是對(duì)魚類多樣性和物種進(jìn)化的奉獻(xiàn)。2070類育種與細(xì)胞工程和基因工程等高生物技術(shù)的結(jié)合，使這一爭(zhēng)論領(lǐng)域很快消滅生氣，沖破了多年來(lái)常規(guī)的選擇育種和雜交育種在育種多樣性和快速高效等方面的制約。我國(guó)較大規(guī)模開(kāi)展魚類遺傳育種爭(zhēng)論2020并漸漸形成了多種技術(shù)綜合配套的技術(shù)路線。通過(guò)傳統(tǒng)的育種技術(shù)和現(xiàn)代的育種技術(shù)成功地培育出的魚類品種，如工程鯽、工程鯉等，不斷向社會(huì)推出了很多具有重要經(jīng)濟(jì)價(jià)值的養(yǎng)殖對(duì)象，大大提高了魚類的生產(chǎn)力，豐富了魚類的遺傳多樣性。魚類遺傳多樣性的豐富反過(guò)來(lái)又可增加魚類生產(chǎn)量和改進(jìn)魚類品種，因此，保護(hù)基因多樣性和可持續(xù)的利用是人類維持根本的生命過(guò)程和生命支持系統(tǒng)的根底。1選擇育種選擇育種是育種工作的一個(gè)最根本的手段。轉(zhuǎn)變育種對(duì)象遺另一個(gè)是掌握親本的交配方式，這就是遺傳操作。在魚類生長(zhǎng)發(fā)育的各個(gè)階段，可以有目的地選擇具有優(yōu)良性狀的個(gè)體，淘汰品質(zhì)不良的個(gè)體，這種方法可以避開(kāi)由于魚類人工生殖所產(chǎn)生的近親交配而隨之4的各個(gè)發(fā)育階段都可進(jìn)展；(2親協(xié)作建立家系開(kāi)頭，在其后代中一代一代進(jìn)展高度的近親交配，以累代實(shí)行嚴(yán)格的全同胞交配為根底，依據(jù)個(gè)體表型值，兼顧家系平均(3量而對(duì)親本作出評(píng)價(jià)的個(gè)體選擇方法，依據(jù)后裔鑒定結(jié)果打算對(duì)親本(42交選育雜交選育就是將分類地位在兩個(gè)不同品種以上或種以上兩個(gè)親本個(gè)體之間的交配，分為種內(nèi)雜交和遠(yuǎn)緣雜交。魚類雜交的目的是利用雜交優(yōu)勢(shì)以產(chǎn)生所需的養(yǎng)殖品種20701123532鯉等已通過(guò)鑒定并在生產(chǎn)上推廣應(yīng)用。相對(duì)而言，魚類選育要比農(nóng)作物選育要困難得多。主要是由于魚類生殖周期長(zhǎng)、生活在水中、簡(jiǎn)潔混雜以及不便觀看等客觀條件的限制和影響。盡管如此，我國(guó)在魚類選育方面仍進(jìn)展了大量工作，尤其是在人工生殖技術(shù)成功之后，雜交3單倍體育種單倍體育種魚類的單倍體育種包括人工誘導(dǎo)雌核發(fā)育和人70魚開(kāi)頭的．至于誘導(dǎo)雄核發(fā)育的爭(zhēng)論，國(guó)內(nèi)外都處于初步階段。魚類人工雌核發(fā)育的原理就是模擬自然雌核發(fā)育原理，用遺傳物質(zhì)失活的精子去與成熟卵子“受精”，激活卵子發(fā)育，并通過(guò)誘導(dǎo)使卵子染色體加倍而發(fā)育成個(gè)體。人工雌核發(fā)育不僅能產(chǎn)生單性的后代，且能快速建立純系，對(duì)于魚類雜種優(yōu)勢(shì)利用，選育種及育種根底理論的爭(zhēng)論皆有重要的意義。近二十年來(lái)，我國(guó)在魚類雌核發(fā)育的爭(zhēng)論方面取得了驕人成績(jī)。已弄清了魚類自然雌核發(fā)育的機(jī)理，包括雌核發(fā)育魚類個(gè)體特征、細(xì)胞學(xué)、遺傳學(xué)、生物化學(xué)、免疫學(xué)、種群生物學(xué)等方面草魚、鰱魚、雜交鯉和建鯉等魚類上獲得成功。利用自然雌核發(fā)育的方正銀鯽與興國(guó)紅鯉雄魚。4個(gè)或三個(gè)以上染色體組的個(gè)體110060速度、延長(zhǎng)壽命和改善魚肉質(zhì)等都有效果誘導(dǎo)魚類多倍體的原理與人工誘導(dǎo)雌核發(fā)育有相像之處，主要是利用理化因素破壞紡綞絲、抑制極體的排出或抑制卵裂的進(jìn)展，從而形成三倍體或四倍體魚類。遠(yuǎn)緣雜交也能產(chǎn)生多倍體魚類。我國(guó)在淡水魚類的多倍體育種中進(jìn)展了不懈的摸索。主要承受了溫差處理、水壓處理、藥品處理和種間雜交方法獲得多倍體目前已報(bào)導(dǎo)的多倍體(三倍體和四倍體)魚有：草魚、鰱魚、鳙魚、團(tuán)頭魴、荷包紅鯉、泥鰍、興國(guó)紅鯉×草魚、荷包紅鯉×白鯽、草魚×團(tuán)頭魴、白鯽×紅鯽、草魚×鳙魚、草魚×三角魴等。4.1大多數(shù)魚類為二倍體(2n3多倍體。在魚類中爭(zhēng)論最多的就是三倍體。人工三倍體的誘導(dǎo)可以通過(guò)保存受精卵其次極體來(lái)現(xiàn)。魚卵成熟排出體外，精子進(jìn)入魚卵，卵子正處于其次次減數(shù)分裂的中期假設(shè)以某種措施抑制其次極體的外排，受精卵中就保存了兩套雌核的染色體和一套雄核的染色體而成為三倍體。假設(shè)在正常受精卵處于第一次有絲分裂的中期抑制卵裂，即可獲得四倍體。抑制其次極體的外排或抑制第一次有絲分裂，都可阻擋紡錘絲或細(xì)胞隔膜的形成。4.2人工誘導(dǎo)魚類三倍體的方法人工誘導(dǎo)魚類三倍體的方法很多，概括起受精卵的物理學(xué)處理方法已被廣泛地用來(lái)抑制其次次成熟分裂而獲得三倍體。主要有溫度處理、靜水壓處理、電休克和高鹽高堿法等，溫度處理和靜水壓處理效果較好，是目前人工誘導(dǎo)三倍體最常用的物理學(xué)方法。4．2．1.1一般用略高于或略低于致死溫度來(lái)誘導(dǎo)三倍體．其作用機(jī)制是溫度的變化引起細(xì)胞內(nèi)酶構(gòu)型的轉(zhuǎn)變，不利于酶促反響的進(jìn)展，導(dǎo)致細(xì)胞分裂時(shí)形成紡錘體所需的ATP細(xì)胞不能分裂．溫度休克的關(guān)鍵是開(kāi)頭處理時(shí)間、處理的持續(xù)時(shí)間以及溫度的凹凸．一般來(lái)講，溫度休克敏感性與遺傳背景和卵子的成熟度有關(guān)．為了加強(qiáng)刺激強(qiáng)度，冷水性魚類宜用熱休克，溫水性魚類宜用冷休克，溫度范圍不行超過(guò)該魚致死溫度，最好選用其亞致死溫度進(jìn)展短期處理。swarup(19593min0℃休克1.5—3h，結(jié)果獲得三倍體，而且飼養(yǎng)至性成熟[5]。Ojima等報(bào)道對(duì)受精10min后的鯉魚卵承受0℃休克10mi成魚。尤鋒(1993)曾進(jìn)展單因子梯度試驗(yàn)及正交試驗(yàn)，并作方差分析5min4—5℃水處理10—15mi1720℃[7而PeterF28℃的休克溫度在其受精后10min，持續(xù)10min，結(jié)果得到98％100％的三倍體，相對(duì)存活率達(dá)42％100％[8導(dǎo)率低，而且死亡率較高．所以溫度休克方法在批量生產(chǎn)上不是很實(shí)際，推廣有肯定的難度，不過(guò)作為一種誘導(dǎo)三倍體的方法還是值得爭(zhēng)論4.212650kg／cm用靜水壓法處理誘導(dǎo)魚類多倍體的作用效果主要受處理時(shí)間、壓力強(qiáng)度、處理持續(xù)時(shí)間影響。以水晶彩鯽為例，受精卵的壓力敏感期僅僅4—5min，在此之前為卵子啟動(dòng)期，施加壓力會(huì)破壞卵子的感動(dòng)和修整過(guò)程。造成發(fā)育受阻，其后為壓力不應(yīng)期，此時(shí)其次次減數(shù)分裂趨于明朗，壓力對(duì)保存其次極體失去作用．因此為了獲得水晶4—5min[9等用靜水壓誘導(dǎo)雜合二倍體雌核發(fā)育與三倍體虹鱒也獲得成功，國(guó)外近幾年承受靜水壓誘導(dǎo)三倍體較多[10]LinhartO倍體胚胎。存活率為33．7％±16．9％。雖然靜水壓法需要特地的設(shè)備如水壓機(jī)，本錢較高，樣本室容量小，處理卵數(shù)不多，不適于大規(guī)模生產(chǎn)．但是其處理的最正確條件易于把握，處理程序易于標(biāo)準(zhǔn)化，對(duì)受精卵的損傷比溫度處理小，誘導(dǎo)率高，因而廣受眾多學(xué)者的青睞，是進(jìn)展三倍體誘導(dǎo)的有效方法．4.2．1．3Teskeredjic1993成功．他們覺(jué)察溝通電(AC)誘導(dǎo)三倍體比直流電(DC)更有效．將受精后40min26℃并給以10rain100％的三倍體，而直流電休克和只有熱休克而無(wú)電流休克處理的比照組分別學(xué)方法主要是利用一些能夠抑制細(xì)胞分裂的化學(xué)物質(zhì)．來(lái)干擾細(xì)胞正常的分裂過(guò)程，阻擋其次極體的排出或受精卵的有絲分裂而產(chǎn)生三倍(1)細(xì)胞松弛素B(簡(jiǎn)稱CB胞松弛素是真菌類某些菌種的代謝產(chǎn)物BCBCB裂由微絲構(gòu)成的收縮環(huán)解體，抑制細(xì)胞質(zhì)分裂。阻擋極體的釋放，從CB三倍體，但毒性較大，且有致癌性，水溶性較差，價(jià)格昂貴，不適合需用含DMSOCB〔2)秋水仙素．秋水仙索是從秋水仙器官中提取的一種植物堿，極毒，它能抑制微管的組裝，使已的微管解聚從而阻擋紡錘體的形成或破壞已形成的紡錘體，使細(xì)胞的染色體加倍而不分別．秋水仙素在植物中的應(yīng)用較為廣泛且成功，但在動(dòng)物中應(yīng)用較少，主要是動(dòng)物細(xì)胞經(jīng)過(guò)秋水仙索處理后簡(jiǎn)潔6DMAP)．6DMAP酸激酶作用的嘌呤毒索類似物，通過(guò)作用與特定的酶，破壞微管的聚一DMAPCB化率高于CB(PEG細(xì)胞分別，使染色體加倍也有肯定的作用。必需指出的是化學(xué)誘導(dǎo)劑雖然誘導(dǎo)效果較好，但一般較貴，且具有毒性，再加上所誘導(dǎo)的多倍4．2．33受精卵產(chǎn)生多倍體，這種由于遠(yuǎn)緣雜交染色體自然加倍產(chǎn)生異源三倍體或四倍體的現(xiàn)象，在理論與實(shí)踐上均有重要意義．目前，國(guó)際科技界對(duì)雜交魚三倍體工作甚為重視，其中爭(zhēng)論最多的是鮭科魚類雜交種和鯉科魚類雜交種。Marian(1978)最早覺(jué)察草魚♀×鳙♂之間的雜種是異源三倍體。劉思陽(yáng)(1987)也證明草魚♀×三角魴♂之間的雜種是種間雜交所產(chǎn)生三倍體的機(jī)理比較簡(jiǎn)單，還有待于進(jìn)一步的探究。4.2．3．2人同種或異種動(dòng)物的去核成熟卵內(nèi)的方法。應(yīng)用這一技術(shù)誘導(dǎo)魚類多倍體目前還不太成熟。陸仁厚等(1982)用四倍體的草魚培育細(xì)胞的細(xì)胞核作為供體移植到泥鰍的去核卵內(nèi)，獲得心跳期的四倍體胚胎．隨著這一技術(shù)的逐步完善，將為誘導(dǎo)四倍體魚類供給又一有效途徑。緊連的細(xì)胞融合成一個(gè)細(xì)胞。此種方法主要誘導(dǎo)魚類囊胚細(xì)胞與囊胚細(xì)胞、囊胚細(xì)胞與未受精卵、囊胚細(xì)胞與受精卵或受精卵與受精卵之間的細(xì)胞融合。由于細(xì)胞內(nèi)染色體發(fā)生重排，實(shí)際得到含各種不同數(shù)量染色體的魚類細(xì)胞群，這一技術(shù)為探究改進(jìn)品種供給了可能。生物學(xué)方法除了以上三種直接途徑外，還有一種間接途徑：首先誘導(dǎo)獲得四倍體，待四倍體個(gè)體成熟后再與二倍體個(gè)體自然交配，獲得三倍體．從理論上講。這一途徑有其優(yōu)越之處。一旦獲得四倍體個(gè)體后，就不需要再進(jìn)展物理或化學(xué)誘導(dǎo)，避開(kāi)了誘導(dǎo)過(guò)程對(duì)胚胎的損傷。假設(shè)能建立穩(wěn)定的四倍體品系，獲得三倍體就變成了一件格外簡(jiǎn)潔的事情了，但目前人工誘導(dǎo)的三倍體絕大局部是承受前面幾種方法，這是由于阻擋其次極體外排的方法比較成熟，四倍體的誘導(dǎo)是阻擋第一次卵裂，這比誘導(dǎo)三倍體要困難得多，成功率很低，只在少數(shù)魚類如虹鱒和鯽魚獲得過(guò)成熟的四倍體。55．1205OBRIGGS和KING1963移植技術(shù)。其原理是在解剖顯微鏡下使用微量注射器把一種魚的受精卵(發(fā)育至囊胚期)一個(gè)細(xì)胞注射到另一種魚的去核卵細(xì)胞中，得到核雜交個(gè)體。細(xì)胞核移植的操作主要有供體和受體的預(yù)備、去卵膜、挑去卵核、分別囊胚細(xì)胞和移核等程序。由于核移植技術(shù)能把不同的細(xì)胞核與細(xì)胞質(zhì)魚組在一起，制造的個(gè)體。207O核移植技術(shù)開(kāi)頭應(yīng)用于育種實(shí)踐。但并非全部核質(zhì)雜交種都可以培育成品種，也不是全部的核質(zhì)雜交種都有受體物種的性狀，更不是全部的種間雜交屏障都可以借助細(xì)胞核移植技術(shù)來(lái)突破，因此，該技術(shù)5．21在細(xì)胞與組織培育根底上進(jìn)展起來(lái)的細(xì)胞雜交技術(shù)。我國(guó)于2070精卵融合，獲得細(xì)胞融合魚是細(xì)胞工程育種一大進(jìn)展；應(yīng)用細(xì)胞融合和雜交瘤技術(shù)相結(jié)合，目前在魚類上已獲得了幾種單克隆抗體；動(dòng)物體細(xì)胞融合后，雜種細(xì)胞難以發(fā)育再生為一個(gè)個(gè)體，但借助于細(xì)胞核移植的方法將融合后雜種細(xì)胞的細(xì)胞核移人去核成熟卵內(nèi)，培育的雜種。因此，利用融合技術(shù)與移核技術(shù)相結(jié)合也有可能制造出魚類在適當(dāng)培育基里培育、傳代、再生或快速生殖魚類的育種技術(shù)。水產(chǎn)30611736其中大多來(lái)自淡水魚類或溯河澗游魚類。我國(guó)魚類細(xì)胞培育爭(zhēng)論始于80，草魚腎組織細(xì)胞系CIK，草魚尾鰭組織二倍體細(xì)胞系GCC，硬頭鱒巨噬細(xì)胞株、南方鯰魚上皮型細(xì)胞系等。魚類細(xì)胞培育與細(xì)胞核移植結(jié)合使用，在良種培育中起著重要作用。我國(guó)學(xué)者把鯽魚胚胎的繼代培育細(xì)胞核轉(zhuǎn)移到鯽魚的未受精去核卵中，培育出世界上第15．4作：嵌合體制作是將具有不同遺傳背景的兩種胚胎細(xì)胞混合起來(lái)，獲得具有兩者各自特征的個(gè)體的技術(shù)，也可稱為細(xì)胞群移植法。此技術(shù)不同于細(xì)胞融合。通過(guò)嵌合體制作技術(shù)，人們已經(jīng)獲得了大、小鼠等一些哺乳動(dòng)物的嵌合體。利用制作嵌合體的方法，即使在不能雜交的動(dòng)物之間，也可獲得具有雙親優(yōu)良品質(zhì)的動(dòng)物。魚類已有培育嵌合體的嘗試，主要是通過(guò)胚胎融合和細(xì)胞群移植方法來(lái)實(shí)現(xiàn)。融合法是除去卵膜后，在囊胚期用細(xì)玻璃針將胚盤的一局部刺傷，將另一種魚類胚胎胚盤細(xì)胞塊移植過(guò)來(lái)，使兩者融合發(fā)育成嵌合體。細(xì)胞群移植法是將一個(gè)胚盤分別出的細(xì)胞吸人毛細(xì)管中注射到另一胚盤的內(nèi)部，由6．16．1．1(Microjection)該法由美國(guó)人Gordon[15]制造，其主要步驟包括：①分別、克隆和重組外③將微注射后的受精卵移入假孕母畜的輸卵管連續(xù)發(fā)育。1982Palmiter[16]將帶有小鼠金屬硫蛋白I基因?qū)胄∈蟮氖芫眩@得“巨型小鼠”，在生命科學(xué)領(lǐng)域引起了不小的轟動(dòng)。依據(jù)轉(zhuǎn)基因小鼠的思路，轉(zhuǎn)基因兔、轉(zhuǎn)基因綿羊、轉(zhuǎn)基因豬、轉(zhuǎn)基因山羊都相繼成功。顯微注射方法相對(duì)簡(jiǎn)潔，整合率高，是目前應(yīng)用比較廣泛，效果比較穩(wěn)定的制作轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的方法之一。但該方法的整合位點(diǎn)隨機(jī)，整合一般是多拷貝首尾串聯(lián)相接，不利于612逆轉(zhuǎn)錄病毒載體法6121逆轉(zhuǎn)錄病毒載體感染發(fā)育早期的動(dòng)物胚胎該方法主要利用逆轉(zhuǎn)錄病毒(1ongterminalrepeatLTRs活性以及逆轉(zhuǎn)錄病毒可以直接整合到宿主染色體上的特點(diǎn)，將外源基因連接到LTRsSalter[17]用禽白血病病毒感染早期的雞胚胎制作了轉(zhuǎn)基因雞，Haskell[18]應(yīng)用該方法制作了轉(zhuǎn)基因牛。6．1．2．2MⅡ期的卵胎的方法進(jìn)展了改進(jìn)。他認(rèn)為逆轉(zhuǎn)錄病毒載體介導(dǎo)的基因整合的關(guān)鍵在于細(xì)胞分裂時(shí)消滅核膜分解。有絲分裂時(shí)核膜降解的時(shí)間很短．細(xì)(MⅡ)的卵母細(xì)胞無(wú)核膜的時(shí)間遠(yuǎn)長(zhǎng)于處于有絲分裂M載體介導(dǎo)的基因插入供給了更大的可能性。爭(zhēng)論者利用該方法生產(chǎn)出41O0％。逆轉(zhuǎn)錄病毒載體法導(dǎo)入外源基因的感染率高，宿主范圍廣，而且最重要的是外源基因在宿主染色體上以單拷貝整合，有利于爭(zhēng)論基因的構(gòu)造、功能及表達(dá)調(diào)控。目前，這一特性已被廣泛應(yīng)用于精子載體法該方法由Braekett最早提出，其要點(diǎn)是精子直接與外源DNA入精子頭部，受精后能發(fā)育成轉(zhuǎn)基因動(dòng)物。該方法簡(jiǎn)潔，但其整合率低，已承受脂質(zhì)體包埋法對(duì)其進(jìn)展了改進(jìn)。其改進(jìn)方法是將外源DNA在與精子共同孵育之前用脂質(zhì)體包埋，脂質(zhì)體與DNA質(zhì)體一DNA膜融合，將外源基因?qū)爰?xì)胞并獲得表達(dá)[21]。這二種方法都是通過(guò)人工授精將外源DNAAnthony[22]嘗試了一種方法：預(yù)先將小鼠精子進(jìn)展破膜處理，再與外源基因共1min，然后將精子的頭部顯微注入MⅡ期的小鼠卵母細(xì)胞，在誕生20%以上。該項(xiàng)爭(zhēng)論提醒，精子膜破損后外源DNA6．1．4羊Dolly1997國(guó)PPIIX轉(zhuǎn)導(dǎo)綿羊胎LXG4l8篩選和DNA其中同時(shí)整合了上述兩個(gè)基因的細(xì)胞，以同時(shí)整合了兩個(gè)基因的綿羊3Alexander403體細(xì)胞核移植技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因的目的，并且誕生的后代個(gè)體1O0為轉(zhuǎn)基因個(gè)體。這是由于用作核供體的細(xì)胞是確證整合了某一外源構(gòu)造胚胎干細(xì)胞介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移胚胎干細(xì)胞(EmbryonicStemCells，ES胞)是動(dòng)物早期胚胎(桑葚胚或囊胚)或原始生殖細(xì)胞(PrimordialGermCellPGCsES分化潛能，當(dāng)被注入囊胚腔后可以參與包括生殖腺在內(nèi)的各種組織嵌ES入外源基因的ES6．22070DNA技術(shù)的誕生為基因工程育種供給了理論根底和技術(shù)條件，使利用基因70生理學(xué)和生物化學(xué)方面對(duì)某些激素和功能蛋白進(jìn)展了爭(zhēng)論80獲得了應(yīng)用于魚類育種爭(zhēng)論的一些工程的基因技術(shù)。以魚類作為轉(zhuǎn)基因育種的爭(zhēng)論對(duì)象有很多有利因素，魚類的遺傳可塑性較大，不同種屬、亞種之間的親合協(xié)調(diào)都較簡(jiǎn)潔；魚類的懷卵量大，受精卵易得，1985人將小鼠重金屬螯合蛋白基因啟動(dòng)與調(diào)控挨次和人生長(zhǎng)激素基因的重組DNA促生長(zhǎng)，并通過(guò)性腺傳遞給子代，建立了一個(gè)完整的轉(zhuǎn)基因魚模型。由此證明白基因工程在魚類育種上的可行性。爭(zhēng)論者們承受顯微注射法、精子載體法、電穿孔法等將外源基因送人受體細(xì)胞中，外源基因在受體細(xì)胞中經(jīng)整合進(jìn)入受體基因組中，并能表達(dá)生物學(xué)效應(yīng)，傳遞給后代，可得到遺傳穩(wěn)定的轉(zhuǎn)基因魚種。我國(guó)是世界上第一個(gè)培育出6.3生產(chǎn)經(jīng)營(yíng)風(fēng)險(xiǎn)性大。近幾十年來(lái)，隨著科學(xué)養(yǎng)魚水準(zhǔn)的提高，家養(yǎng)魚類的細(xì)菌性疾病根本上能得到掌握，但對(duì)病毒性疾病缺乏有效防治手段。基因工程育種的興起，有可能選育出抗病力強(qiáng)的品系，如草魚生1997[33]將紅鯉總DNA有人進(jìn)展了人αα1998DNA得了抗病力量強(qiáng)的子代。由于魚類的很多遺傳性狀是由多個(gè)基因掌握的，是一個(gè)協(xié)同表達(dá)系統(tǒng)，承受總DNA品種具有肯定意義，但是由于總DN，從而為后代的選育增加了簡(jiǎn)單性。隨著DNA(hLF)是人類非特異免疫系統(tǒng)中的重要蛋白，具有抑菌、殺菌和提高機(jī)體抵抗病毒的力量；國(guó)外已報(bào)道過(guò)轉(zhuǎn)hLF的人類乳鐵蛋白與鯉魚β，用電脈沖——精子介導(dǎo)轉(zhuǎn)基因轉(zhuǎn)移法，導(dǎo)人草魚受精卵中，爭(zhēng)論hLFNamHRVmRNAcDNAGenBank可見(jiàn)魚類還存在很多未知的抗病毒基因。因此，爭(zhēng)論魚類病毒病的致病機(jī)理、自身抗病機(jī)制、克隆抗病基因、抗病基因的體外表達(dá)及抗病6.4(GH)基因魚的爭(zhēng)論我國(guó)的魚類基因工程育種爭(zhēng)論從“非魚”基因工程魚開(kāi)頭，現(xiàn)已進(jìn)入6.4.1．“非魚”基因工程魚這是指移人受體魚內(nèi)的外源生長(zhǎng)激素(GH)不是魚類的，而是其它動(dòng)物的。如，最初使用的是人GHGHGH為小鼠金屬硫蛋白啟動(dòng)子，后來(lái)是RSV—LTR(勞斯肉瘤病毒——長(zhǎng)末端重復(fù)序列)，SV40(猿猴病毒)。1990MT1因啟動(dòng)挨次與人生長(zhǎng)激素(hGH)基因挨次重組的線性融合基因注射入團(tuán)頭魴、鯉魚的受精卵中，觀看到了受精卵的變化及人生長(zhǎng)激素基因的整合和表達(dá)，證明白人生長(zhǎng)激素基因?qū)κ荏w魚(團(tuán)頭魴、鯉魚)有促生長(zhǎng)效果；并證明白外源基因可通過(guò)性腺細(xì)胞傳遞給子代，對(duì)子代魚亦有促生長(zhǎng)效應(yīng)。孫孝文等(1993，1995)用顯微注射的方法把牛、羊生長(zhǎng)激素轉(zhuǎn)入到鯉魚的受精卵中，得到了同樣的結(jié)果；他們用DNA點(diǎn)雜交與southernBlot整合，并建立了一套簡(jiǎn)潔易行的顯微技術(shù)，確立了外源基因?qū)缩庺~受精卵的最正確時(shí)期。朱作言等將外源生長(zhǎng)激素基因注入鯉魚、銀鯽等的受精卵中，覺(jué)察外源生長(zhǎng)激素基因在原腸胚時(shí)就有轉(zhuǎn)錄本消滅，在1995紅鯉魚F：代的食性進(jìn)展了分析，覺(jué)察它們所攝取的能量用于生長(zhǎng)作用要高于非轉(zhuǎn)基因魚，餌料利用率高；后對(duì)其F因在體內(nèi)存在分子多態(tài)性，與原代轉(zhuǎn)基因魚所用的外源基因一樣的僅18％。但趙浩斌等通過(guò)對(duì)腎細(xì)胞、尾鰭細(xì)胞進(jìn)展核移植，能把極少量的外源基因長(zhǎng)期地培育而不會(huì)喪失，這為獲得同質(zhì)化轉(zhuǎn)基因魚供給了一條有效的途徑。“非魚”轉(zhuǎn)基因魚的外源生長(zhǎng)激素多為哺乳動(dòng)物的生長(zhǎng)激素，啟動(dòng)子多為病毒基因，這類轉(zhuǎn)基因魚的食用安全性讓人擔(dān)擾。閆學(xué)春等把轉(zhuǎn)牛(羊)生長(zhǎng)激素基因的鯉魚喂給貓吃，通過(guò)生理學(xué)、血液學(xué)指標(biāo)、組織中的重金屬含量及外源基因殘存量的測(cè)定，結(jié)果說(shuō)明，轉(zhuǎn)基因魚對(duì)貓不產(chǎn)生任何不良的影響[55]；陳開(kāi)健等用轉(zhuǎn)人一α3O很多“非魚轉(zhuǎn)基因魚雖生長(zhǎng)明顯加快，但覺(jué)察體內(nèi)含外源生長(zhǎng)激素高的并不是生長(zhǎng)最快的魚；有資料說(shuō)明，魚的啟動(dòng)子和構(gòu)造基因重組的基因比哺乳動(dòng)物相應(yīng)的重組基因更有效地在魚體內(nèi)表達(dá)引。因此科學(xué)家們讓建立一種“全魚”轉(zhuǎn)基因魚種。我國(guó)已克隆，了多種魚的生長(zhǎng)激素基因及有關(guān)基因，構(gòu)建了我國(guó)主要淡水魚類的基因文庫(kù)。沈孝宙已獲得鯉魚金屬結(jié)合蛋白基因的啟動(dòng)子，最近朱作言又獲得了具有調(diào)整功能的肌動(dòng)蛋白基因啟動(dòng)子，成功地克隆了鯉魚和草魚的肌動(dòng)蛋白基因、生長(zhǎng)激素基由于“全魚”轉(zhuǎn)基因魚的育出供給了可能。6.4.轉(zhuǎn)基因鯉，從遺傳學(xué)和基因改造方面進(jìn)展了食用安全性評(píng)價(jià)，被認(rèn)為在養(yǎng)分安全方面與普遍鯉魚具有實(shí)質(zhì)等同性.朱作言等(2023)[60]成功地將鯉魚B-肌動(dòng)蛋白基因啟動(dòng)調(diào)控挨次(CA)驅(qū)動(dòng)的gcGHCAgcGH馮浩、曾志強(qiáng)等把含有鯉魚B—action因“全魚”基因pCAgcGHcF。代進(jìn)展了各方面的檢測(cè)，覺(jué)察轉(zhuǎn)基因異源四倍體鯽、鯉中除了生長(zhǎng)速pCAgcGHc草魚激素“全魚”基因的異源四倍體鯽鯉(♂)與日本白鯽(♀)進(jìn)展人工雜交，獲得轉(zhuǎn)基因三倍體湘云鯽，與一般的三倍體湘云鯽相比，降低了餌料系數(shù)，提高了養(yǎng)殖產(chǎn)量。黑龍江應(yīng)用微生物爭(zhēng)論所用顯微注射法把鯉魚生長(zhǎng)激素移入到鯽魚中，通過(guò)PCR魚基因中得到整合，表達(dá)誕生長(zhǎng)的生理效應(yīng)，但其整合率較低。黑龍江水產(chǎn)爭(zhēng)論所把黑龍江野鯉的MT合基因?qū)氲锦庺~和虹鱒的受精卵中，爭(zhēng)論外源全魚基因?qū)κ荏w卵孵化率的影響。上述這些爭(zhēng)論工作為盡快培育出快速生長(zhǎng)的高產(chǎn)養(yǎng)殖品種積存了貴重的資料。6.5動(dòng)物技術(shù)仍有很多需要完善的地方．但其爭(zhēng)論的進(jìn)展速度是特別迅猛的。近些年進(jìn)展起來(lái)的基因剔除(geneknockout)技術(shù)具有整合