＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿第3頁共3頁文件名稱車間潔凈區沉降菌檢驗操作規程文件編號JB-QA-015-A編制人編制日期年月日復制份數審核人審核日期年月日頒發部門質量管理部批準人批準日期年月日生效日期分發部門質檢科、質保科、生產科、固體制劑車間、前處理提取車間編訂依據《藥品生產質量管理規范》1998年版目的：建立固體制劑車間前處理提取車間潔凈區沉降菌測試規程。范圍：固體制劑車間潔凈區及前處理提取車間收膏潔凈間。責任：檢驗員、QA監控員、質檢科長、質保科長、車間主任、車間工藝員。內容：l測試方法：1.1方法概述：本測試方法采用沉降法，即通過自然沉降原理收集在空氣中的生物粒子于培養基平皿，經若干時間，在適宜的條件下讓其繁殖到可見的菌落進行計數，以平板培養皿中的菌落數來評定潔凈環境內的活微生物數，并以此來評定潔凈室(區)的潔凈度。1.2所用的儀器和設備：1.2.1高壓滅菌鍋：使用時應嚴格按照儀器說明書操作。1.2.2恒溫培養箱：必須定期對培養箱的溫度計進行檢定。1.2.3培養皿：一般采用由90mm×15mm的玻璃培養皿。1.2.4培養基：藥典認可的培養基。1.3測試步驟：1.3.1采樣方法：將已制備好的培養皿放置于采樣點，打開培養皿蓋，使培養基表面暴露0.5h，再將培養皿蓋蓋上后倒置。1.3.2培養1.3.2.1全部采樣結束后，將培養皿倒置于恒溫培養箱中培養。1.3.2.2在30℃一35℃培養箱中培養，時間不少于48h1.3.2.3培養應作對照培養。1.3.3菌落計數1.3.3.1用肉眼直接計數，標記或在菌落計數器上點計，然后用5—10倍放大鏡檢查，有否遺漏。1.3.3.2若培養皿上有2個或2個以上的菌落重疊，可分辨時仍以2個或2個以上菌落計數。1.4注意事項：

文件名稱車間潔凈區沉降菌檢驗操作規程文件編號JB-QA-015-A1.4.1測試用具要作滅菌處理，以確保測試的可靠性、正確性。1.4.2采取一切措施防止人為對樣本的污染。1.4.3由于細菌種類繁多，差別甚大，計數時一般用透射光于培養皿背面或正面仔細觀察，不要漏計培養皿邊緣生長的菌落，并須注意細菌菌落與培養基沉淀物的區別，必要時用顯微鏡鑒別。1.4.4采樣前應仔細檢查每個培養皿的質量，如發現變質、破損或污染的應剔除。2測試規則：2.1測試狀態：2.1.1沉降菌測試前，被測試潔凈室(區)的溫濕度須達到規定的要求，靜壓差、換氣次數、空氣流速必須控制在規定值內。2.1.2沉降菌測試前，被測試潔凈室(區)已經過消毒。2.1.3測試狀態有靜態和動態兩種，測試狀態的選擇必須符合生產的要求，并在報告中注明測試狀態。2.2測試人員2.2.1測試人員必須穿戴符合環境潔凈度級別的工作服。2.2.2靜態測試時，室內測試人員不得多于二人。2.3測試時間

在凈化空調系統正常運行不少于30min后開始。

2.4沉降菌計數

2.4.1采樣點數目及其布置

2.4.1.1最少采樣點數目

1)房間面積≥100m2，采樣點不少于5個。

2)房間面積<100m2，采樣點不少于2個。2.4.1.2采樣點的位置1)工作區采樣點的位置離地0.8m—1.5m左右(略高于工作面)。2)在關鍵設備或關鍵工作活動范圍處進行采樣。3結果計算3.1用計數方法得出各個培養皿的菌落數。3.2平均菌落數的計算，見下式：M1+M2+……………Mn平均菌落數M＝————————

n式中M——平均菌落數：

Ml——1號培養皿菌落數；文件名稱車間潔凈區沉降菌檢驗操作規程文件編號JB-QA-015-AM2——2號培養皿菌落數：

Mn——n號培養皿菌落數；n——培養皿總數。4結果評價