第四章

藥物定量分析與分析方法驗證ChinaPharmaceuticalUniversity第四章藥物定量分析與分析方法驗證定量分析樣品前處理方法

定量分析方法特點

藥品質量標準分析方法驗證123一、定量分析樣品前處理方法

Pretreatmentofsampleusedinquantitativeanalysis定量分析樣品前處理方法

概述12

概述磺溴酞鈉三氯叔丁醇酒石酸銻鉀富馬酸亞鐵

概述

概述含金屬有機藥物卡巴胂金屬有機藥物經有機破壞的分析方法濕法破壞

HNO3-HClO4HNO3-H2SO4H2SO4-MSO4金屬以高價態存在干法破壞：無水碳酸鈉或氧化鎂，注意溫度氧瓶燃燒法空心A.燃燒瓶B.鉑絲網C.D.盛固體樣品濾紙及其折疊法E.F.G.稱取液體樣品方法7mm50mm30mm尾部7mm13mm20mm25mm356mm166mm濾紙濾紙AGFEDCB氧瓶燃燒裝置及稱樣方法氧瓶燃燒法樣品吸收液

測定方法含氟有機藥物H2O

pH4.3HAc-NaAc

Buffer茜素氟藍

分光光度法含氯有機藥物NaOH溶液

銀量法汞量法

分光法含溴有機藥物H2O2-NaOH液

或NaOH液-

銀量法分光法

硫酸肼飽和液含碘有機藥物NaOH液-銀量法碘量法硫酸肼飽和液

汞量法分光法二、藥品質量標準分析方法驗證指導原則藥品質量標準分析方法驗證藥物制劑人體生物利用度和生物等效性試驗指導原則藥物穩定性試驗指導原則緩釋、控釋制劑指導原則微囊、微球與脂質體制劑指導原則細菌內毒素檢查法應用指導原則第三節藥品質量標準分析方法驗證

目的：

證明所采用的分析方法適合于相應的檢測要求

效能指標：評價分析方法的尺度

效能指標包括:

精密度,準確度,檢測限,定量限,選擇性,線性與范圍,耐用性(1)準確度（accuracy）：測量值與真實值接近的程度表示:回收率測定方法：回收試驗加樣回收試驗(3)專屬性（specificity）:指有其他成分（雜質、降解物、輔料等）可能存在情況下采用的方法能準確測定出被測物的特性)。(4)檢測限（limitofdetection，LOD）：藥物能被檢出的最低濃度(μg/ml)測定:信噪比法(S:N=3:1)(5)定量限（1imitofquantitation，LOQ）：藥物能被定量測出的最低濃度(μg/ml)測定:信噪比法(S:N=10:1)第三節藥品質量標準分析方法驗證

------------性能指標(6)線性與范圍（linearityandrange）：待測物濃度與響應值成線性關系的濃度范圍線性關系：Y=a+bx（r=0.9999)線性程度：相關系數(7)耐用性（robustness）:

測定條件稍有變動時，對測定結果的影響程度影響因素：被測溶液的穩定性，流動相的組成和pH，商品柱的品牌，柱溫等第三節藥品質量標準分析方法驗證

------------性能指標第四節生物樣品分析的基本步驟1.藥物從蛋白結合或綴合物中釋出⑴蛋白變性：如應用三氯醋酸、HClO4、有機溶劑(乙醇、丙酮、乙腈)使蛋白沉淀⑵鹽酸水解⑶酶消化法：最常使用蛋白水解酶中枯草菌溶素(一種細菌性蛋白分解酶，可在pH7.0~11.0使肽鍵降解)定量分析方法的驗證

----------生物樣品分析（一）特異性 內源性物質不得干擾原藥、代謝物（二）標準曲線 r≥0.9900，至少5個濃度，不許外延（三）精密度和準確度 RSD≤15％、20％ 相對回收率85～115％（80～120％）樣品固相凈化

及反相高效液相色譜法

測定血漿中茶堿伍朝筼等藥學學報,1989,24(10):769~773血漿樣品凈化后空白血漿凈化前空白血漿ColumnZorbaxC185μm2.5cm4.6mm254nmPrecolumnYWG-ODS9-