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實(shí)驗(yàn)二蘆薈粗多糖的提取

實(shí)驗(yàn)性質(zhì)：驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)學(xué)時(shí)數(shù)：3學(xué)時(shí)生物制藥實(shí)驗(yàn)課程【實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c要求】

掌握水提醇沉法提取多糖的原理和方法掌握旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器的使用掌握組織勻漿機(jī)的使用【實(shí)驗(yàn)原理】水提醇沉法（水醇法）系指在中藥水提濃縮液中，加入乙醇使某些藥物成分在醇溶液中溶解度降低析出沉淀，固液分離后使水提液得以精制的方法。一般操作過程是：將中藥水提液濃縮至1︰2，藥液放冷后，邊攪拌邊緩慢加入乙醇使達(dá)規(guī)定含醇量，密閉冷藏24～48h，濾過，濾液回收乙醇，得到精制液。操作時(shí)應(yīng)注意以下問題：①適當(dāng)濃縮，以減少乙醇用量。控制濃縮程度，過濃，有效成分易包裹于沉淀中而造成損失。②濃縮液冷卻后方可加入乙醇，以免乙醇受熱揮發(fā)損失。③選擇適宜的醇沉濃度。一般藥液中含醇量達(dá)50％～60％可除去淀粉等雜質(zhì)，含醇量達(dá)75％以上大部分雜質(zhì)均可沉淀除去。④慢加快攪。應(yīng)快速攪動(dòng)藥液，緩緩加入乙醇，以避免局部醇濃度過高造成有效成分被包裹損失。⑤密閉冷藏。可防止乙醇揮發(fā)，促進(jìn)析出沉淀的沉降，便于濾過操作。⑥洗滌沉淀。沉淀采用乙醇（濃度與藥液中的乙醇濃度相同）洗滌可減少有效成分在沉淀中的包裹損失。【實(shí)驗(yàn)材料、試劑與儀器】試劑：無水乙醇。燒杯、玻璃棒、小刀、紗布、量筒、電子天平、高速冷凍離心機(jī)、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、真空泵、水浴鍋、組織勻漿機(jī)。【實(shí)驗(yàn)方法與步驟】①取蘆薈鮮葉50g，洗凈，去掉葉尖和葉底，在自來水（蒸餾水）中浸泡0.5h，以除去由表皮滲出的黃色液汁。然后切去表皮，將內(nèi)層凝膠置于燒杯中，加入3倍量自來水（蒸餾水），置于55℃恒溫水浴鍋中加熱浸提4h。②浸提液減壓濃縮，用6mol/L的鹽酸調(diào)pH值3.2左右，向經(jīng)過調(diào)酸處理的蘆薈凝膠濃縮汁中緩慢加入6倍量的95%乙醇，邊加邊攪拌大約需要15~30min，室溫下靜置2h，離心分離(2500r/min，7min)得多糖沉淀。依次用乙醇、丙酮和乙醚洗滌，然后真空干燥，最終得到的沉淀即為蘆薈多糖粗品。或：減壓濃縮至原來的1/3,向濃縮汁中緩慢加入6倍體積冷的無水乙醇，邊加邊攪拌大約需要15~30min，室溫下靜置2h，得粗多糖沉淀。【注意事項(xiàng)】加入乙醇沉淀多糖時(shí)要邊加邊攪拌，時(shí)間要長(zhǎng)一些;注意儀器的規(guī)范使用；實(shí)驗(yàn)結(jié)果與記錄:記錄實(shí)驗(yàn)條件、過程和實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象。【思

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