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實(shí)驗(yàn)一

紙色譜和薄層色譜楊俊致知樓#1574/1531Email:junyang@基礎(chǔ)有機(jī)化學(xué)實(shí)驗(yàn)學(xué)習(xí)色譜法的原理掌握薄層色譜和紙色譜分離和鑒定化合物操作實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>

利用混合物各組分在固定相和流動(dòng)相中的分配平衡常數(shù)的差異進(jìn)行分離。當(dāng)帶有樣品的流動(dòng)相流經(jīng)固定相時(shí)，由于固定相對(duì)各組分的吸附或溶解性能的不同，使吸附力較弱獲溶解度較小的組分在固定相中移動(dòng)速度較快，經(jīng)過多次反復(fù)平衡，將混合物中各組分分離。色譜法的一般原理按操作分：薄層色譜、柱色譜、紙色譜、氣相色譜和高效液相色譜按原理分：吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜和凝膠滲透色譜薄層色譜薄層色譜：薄層色譜(ThinLayerChromatography)，常用

TLC

表示，是一種微量，快速和簡(jiǎn)便的色譜方法。一般是將固定相，如硅膠和三氧化鋁，負(fù)載在一張薄層板上，將樣品置于固定相之后，流動(dòng)相通過毛細(xì)管效應(yīng)從下往上流動(dòng)而使樣品分開。TLC是有機(jī)化學(xué)實(shí)驗(yàn)室中使用的非常多實(shí)驗(yàn)操作，常常用來檢測(cè)反應(yīng)和柱色譜前判斷使用展開劑的極性。薄層色譜實(shí)驗(yàn)藥品和儀器藥品：偶氮苯，蘇丹紅，混合物(自配)，環(huán)己烷/乙酸乙酯=9:1儀器：TLC板，毛細(xì)管，廣口瓶，鉛筆1cm1cm1.準(zhǔn)備TLC板2.展開展開劑：環(huán)己烷/乙酸乙酯=9:13.干燥、顯色自身有顏色有共軛體系的使用紫外燈各種顯色劑4.計(jì)算Rf

值Rf=D1/D25.分析結(jié)果通過比較Rf

值，確定混合物中各組分分別是什么物質(zhì)紙色譜(PaperChromatography)：紙色譜法是以紙作為載體的色譜法。按分離原理屬于分配色譜法的范疇。固定相一般為濾紙纖維上吸附的水分，流動(dòng)相(展開劑)為有機(jī)溶劑。紙色譜實(shí)驗(yàn)藥品和儀器藥品：甘氨酸，亮氨酸，混合物(自配)，展開劑：水/正丁醇/醋酸5:4:1，取上層液體儀器：濾紙，大試管，帶鉤塞子，鉛筆實(shí)驗(yàn)操作類似于TLC展開裝置圖

兩張色譜濾紙，分別點(diǎn)上甘氨酸/

混合物;亮氨酸/混合物使用茚三酮乙醇溶液進(jìn)行顯色

通過比較Rf

值確定混合物中各

組分。薄層板(1)二塊15×3cm玻片，洗凈，控水(2)調(diào)糊：3g硅膠G和8mL0.5%羧甲基纖維素鈉水溶液在小燒杯中攪勻(3)用小勺取適量于玻片上粗鋪平，手指輕彈玻片，反復(fù)數(shù)次，使糊狀物均勻地鋪在玻片上于室溫下晾干，每人鋪二塊(4)活化：將晾干的薄層板放在烘箱中，待烘箱溫度升

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