標準解讀

《GB/T 34750-2017 副豬嗜血桿菌檢測方法》是一項國家標準，主要針對副豬嗜血桿菌（Haemophilus parasuis）的實驗室檢測提供了規(guī)范化的指導。該標準適用于豬只及其相關(guān)樣本中副豬嗜血桿菌的分離、鑒定以及分子生物學檢測。

標準首先介紹了副豬嗜血桿菌的基本背景信息，包括其作為引起豬多發(fā)性漿膜炎和關(guān)節(jié)炎的主要病原之一的重要性。接著，對所需實驗材料與設(shè)備進行了詳細說明，如培養(yǎng)基的選擇（例如巧克力瓊脂）、生物安全柜等實驗室設(shè)施要求，還有用于PCR擴增的相關(guān)試劑配置等。

在樣品采集部分，《GB/T 34750-2017》規(guī)定了從活體動物或死亡病例中正確獲取組織樣本的方法，并強調(diào)了采樣過程中需要注意的安全防護措施。對于細菌分離培養(yǎng)，則給出了具體的步驟指導，包括如何處理樣本以促進細菌生長，以及如何通過形態(tài)學特征初步識別疑似菌落。

關(guān)于鑒定環(huán)節(jié)，本標準不僅包含了基于生化反應(yīng)的傳統(tǒng)鑒定技術(shù)，還引入了更為準確快速的分子生物學手段——聚合酶鏈式反應(yīng)(PCR)。其中，PCR法能夠直接從DNA水平上確認是否存在目標微生物，極大地提高了檢測效率與準確性。此外，標準也提到了使用特異性引物設(shè)計來進行基因序列分析的重要性。


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....

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  • 現(xiàn)行
  • 正在執(zhí)行有效
  • 2017-11-01 頒布
  • 2018-05-01 實施
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文檔簡介

ICS11220

B41.

中華人民共和國國家標準

GB/T34750—2017

副豬嗜血桿菌檢測方法

Detectionmethodsforhaemophilusparasuis

2017-11-01發(fā)布2018-05-01實施

中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局發(fā)布

中國國家標準化管理委員會

GB/T34750—2017

前言

本標準按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標準由中華人民共和國農(nóng)業(yè)部提出

。

本標準由全國動物衛(wèi)生標準化技術(shù)委員會歸口

(SAC/TC181)。

本標準起草單位河南省動物疫病預(yù)防控制中心河南省農(nóng)業(yè)科學院畜牧獸醫(yī)研究所河北農(nóng)業(yè)大

:、、

學動物科技學院山東省農(nóng)業(yè)科學院畜牧獸醫(yī)研究所

、。

本標準起草人吳志明閆若潛張健趙明軍趙雪麗宋勤葉徐引弟王東方王淑娟安春霞

:、、、、、、、、、、

劉梅芬張盼盼謝彩華高鳳山方先珍吳家強拜廷陽王一劉淑敏

、、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T34750—2017

副豬嗜血桿菌檢測方法

1范圍

本標準規(guī)定了副豬嗜血桿菌的分離與鑒定巢式檢測和實時熒光檢測方法

、PCRPCR。

本標準適用于對豬的肺臟心臟腦等組織胸腔腹腔心包積液或關(guān)節(jié)液抗凝血細菌培養(yǎng)物等

、、,、、,,

樣品中副豬嗜血桿菌的檢測

。

2縮略語

下列縮略語適用于本文件

。

堿基對

bp:(BasePair)

脫氧核糖核酸

DNA:(DeoxyribonucleicAcid)

脫氧核糖核苷三磷酸

dNTPs:(DeoxyribonucleosideTriphosphates)

小溝結(jié)合

MGB:(MinorGrooveBinder)

煙酰胺腺嘌呤二核苷酸

NAD:(NicotinamideAdenineDinucleotide)

磷酸鹽緩沖液

PBS:(PhosphateBufferSolution)

聚合酶鏈式反應(yīng)

PCR:(PolymeraseChainReaction)

Taq酶Taq聚合酶Taq

:DNA(DNAPolymerase)

緩沖液

TE:Tris-EDTA(Tris-EDTABuffer)

胰蛋白胨大豆瓊脂

TSA:(TrypticSoyAgar)

胰蛋白胨大豆肉湯

TSB:(TrypticSoyBroth)

3儀器

31生物安全柜

.。

32恒溫培養(yǎng)箱

.。

33光學顯微鏡

.。

34全自動微生物鑒定儀

.。

35擴增儀

.PCR。

36高速冷凍離心機g以上

.(12000×)。

37核酸電泳儀和水平電泳槽

.。

38恒溫水浴鍋

.。

39單道微量移液器

.(0.5μL~10μL;2μL~20μL;20μL~200μL;100μL~1000μL)。

310組織勻漿器或研缽

.。

311凝膠成像系統(tǒng)或紫外投射儀

.()。

312實時熒光定量

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