標(biāo)準(zhǔn)解讀

《GB/T 31790-2015 馬鈴薯紡錘塊莖類病毒檢疫鑒定方法》是一項(xiàng)國家標(biāo)準(zhǔn)，主要針對(duì)馬鈴薯紡錘塊莖類病毒（PSTVd）的檢測和鑒定提供了技術(shù)指導(dǎo)。該標(biāo)準(zhǔn)適用于進(jìn)出口、國內(nèi)調(diào)運(yùn)以及生產(chǎn)過程中馬鈴薯及其繁殖材料中PSTVd的檢疫鑒定工作。

標(biāo)準(zhǔn)詳細(xì)描述了從樣品采集到最終結(jié)果分析的一系列步驟。首先，在樣品采集方面，明確了不同用途下應(yīng)選擇的樣本類型及數(shù)量要求，確保能夠代表整體情況的同時(shí)減少誤檢率。接著，對(duì)于樣品處理，規(guī)定了具體的前處理流程，包括但不限于清洗、切割等操作，目的是為了提高后續(xù)檢測環(huán)節(jié)的效果。

在檢測方法上，《GB/T 31790-2015》推薦使用RT-PCR法作為主要手段來識(shí)別PSTVd的存在與否。此方法通過反轉(zhuǎn)錄將RNA轉(zhuǎn)化為cDNA后進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)，再利用特定引物對(duì)目標(biāo)片段進(jìn)行特異性擴(kuò)增，從而實(shí)現(xiàn)病毒核酸的定性檢測。此外，還介紹了其他輔助性或替代性的檢測技術(shù)，如電鏡觀察、免疫學(xué)檢測等，供實(shí)驗(yàn)室根據(jù)實(shí)際情況選用。

最后，標(biāo)準(zhǔn)中也給出了結(jié)果判定的原則與報(bào)告編寫的要求。陽性結(jié)果意味著樣品中含有PSTVd，需按照相關(guān)法律法規(guī)采取相應(yīng)措施；陰性則表示未檢出該病毒。同時(shí)強(qiáng)調(diào)了實(shí)驗(yàn)記錄的重要性，要求完整準(zhǔn)確地記錄每一步驟的信息，以保證數(shù)據(jù)可追溯性。


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....

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  • 現(xiàn)行
  • 正在執(zhí)行有效
  • 2015-07-03 頒布
  • 2015-11-27 實(shí)施
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文檔簡介

ICS6502001

B16..

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T31790—2015

馬鈴薯紡錘塊莖類病毒檢疫鑒定方法

DetectionandidentificationofPotatospindletuberviroid

2015-07-03發(fā)布2015-11-27實(shí)施

中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布

中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

中華人民共和國

國家標(biāo)準(zhǔn)

馬鈴薯紡錘塊莖類病毒檢疫鑒定方法

GB/T31790—2015

*

中國標(biāo)準(zhǔn)出版社出版發(fā)行

北京市朝陽區(qū)和平里西街甲號(hào)

2(100029)

北京市西城區(qū)三里河北街號(hào)

16(100045)

網(wǎng)址

:

服務(wù)熱線

:400-168-0010

年月第一版

20158

*

書號(hào)

:155066·1-49510

版權(quán)專有侵權(quán)必究

GB/T31790—2015

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別這些專利的責(zé)任

。。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國植物檢疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)提出并歸口

(SAC/TC271)。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位中國檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院中華人民共和國黑龍江出入境檢驗(yàn)檢疫局中華人民

:、、

共和國廈門出入境檢驗(yàn)檢疫局中華人民共和國福建出入境檢驗(yàn)檢疫局黑龍江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物脫毒

、、

苗木研究所中華人民共和國甘肅出入境檢驗(yàn)檢疫局中華人民共和國山東出入境檢驗(yàn)檢疫局

、、。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人張永江劉洪義劉忠梅辛言言陳慧陳紅運(yùn)馬潔呂典秋沈建國廖富榮

:、、、、、、、、、、

文朝慧張成標(biāo)吳興海

、、。

Ⅰ

GB/T31790—2015

馬鈴薯紡錘塊莖類病毒檢疫鑒定方法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了基于寄主植物癥狀及基因組特征的馬鈴薯紡錘塊莖類病毒檢疫鑒定方法

。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于可能攜帶有馬鈴薯紡錘塊莖類病毒的馬鈴薯組織材料的檢疫鑒定

。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法

GB/T6682

馬鈴薯種薯

GB/T18133

進(jìn)境馬鈴薯種薯檢疫操作規(guī)程

SN/T2481

3儀器設(shè)備用具及試劑

、

31儀器設(shè)備

.

電子分析天平垂直電泳槽小型離心機(jī)臺(tái)式冷凍離心機(jī)普通儀實(shí)時(shí)熒光

(0.001g)、、、、PCR、PCR

儀電泳系統(tǒng)計(jì)凝膠成像系統(tǒng)冰箱超凈工作臺(tái)超低溫冰箱高壓滅菌鍋制冰機(jī)

、、pH、、4℃、、-80℃、、、

渦旋振蕩器微波爐等

、。

32用具

.

可調(diào)移液器吸頭離心管及研

(2.5μL、10μL、20μL、100μL、1000μL)、、(0.2mL、0.5mL、1.5mL)

缽等

。

33試劑

.

除有特殊說明外所有試驗(yàn)用試劑均為分析純或生化試劑

,。

試劑見附錄試劑見附錄實(shí)時(shí)熒光試劑見附錄

RB;RT-PCRC;RT-PCRD。

4檢測方法

41樣品制備

.

411脫毒苗制樣對(duì)脫毒苗要逐株制樣在無菌條件下從脫毒苗上剪下長的莖段放于小研缽

..:,,2cm,

中用于提取核酸并進(jìn)行后續(xù)檢測把取樣的脫毒苗放回試管中封好管口并編號(hào)以便根據(jù)檢測結(jié)果決

,;,,

定取舍

。

412種薯制樣在隔離種植前對(duì)種薯塊莖進(jìn)行癥狀檢查對(duì)有明顯癥狀的薯塊直接取癥狀部位

..:,,0.2g~

用于核酸提取并進(jìn)行后續(xù)檢測對(duì)于無明顯癥狀的薯塊進(jìn)行隔離種植

0.5g;。

413隔離種植植株制樣種薯隔離種植按

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