第一章第一節一、選擇題1．對培養基、培養皿、接種環、實驗操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌或消毒方法依次是()①化學消毒②灼燒滅菌③干熱滅菌④紫外線滅菌⑤高壓蒸汽滅菌⑥巴氏消毒法A．⑤③②①④⑥ B．①②③④⑤⑥C．⑥②③④①⑤ D．③④②①⑥⑤解析：培養基用高壓蒸氣滅菌；培養皿能耐高溫，需用干熱滅菌；接種環可用灼燒滅菌達到迅速徹底的滅菌效果；實驗操作者的雙手可用化學藥劑進行消毒，如用酒精擦拭雙手；空氣可用紫外線消毒；牛奶為不破壞其營養成分可采用巴氏消毒法。答案：A2．有關平板劃線操作的敘述不正確的是()A．第一步灼燒接種環是為了避免接種環上可能存在的微生物污染培養物B．每次劃線前，灼燒接種環是為了殺死上次劃線結束后，接種環上的菌種C．在第二區域內劃線時，接種環上的菌種直接來源于菌液D．劃線結束后，灼燒接種環，能及時殺死接種環上的菌種，避免細菌污染環境和感染操作者解析：在第二區域內劃線時，接種環上的菌種來源于第一次劃線的末端。答案：C3．關于制備牛肉膏蛋白胨固體培養基，敘述錯誤的是()A．操作順序為計算、稱量、溶化、倒平板、滅菌B．將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放入燒杯C．待培養基冷卻至50D．待平板冷卻凝固約5～10min后將平板倒過來放置解析：制備牛肉膏蛋白胨固體培養基的步驟是計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板，不能顛倒。牛肉膏容易吸潮，所以當牛肉膏溶化并與稱量紙分離后，用玻璃棒取出稱量紙。待培養基冷卻至50答案：A4．為了保持菌種的純凈需要進行菌種的保藏，下列有關敘述不正確的是()A．對于頻繁使用的菌種，可以采用臨時保藏的方法B．臨時保藏的菌種一般是接種到試管的固體斜面培養基上C．臨時保藏的菌種容易被污染或產生變異D．對于需要長期保存的菌種，可以采用－4解析：對于需要長期保存的菌種，可采用甘油管藏法，即在3mL甘油瓶中加入1mL甘油后滅菌，將1mL培養的菌液轉移到甘油瓶中，與甘油充分混勻后，放在－20答案：D5．發酵工程的第一個重要工作是從混雜的微生物群體中選擇優良的單一純種，獲得純種的方法不包括()A．根據微生物對碳源需要的差別，使用含不同碳源的培養基B．根據微生物缺乏生長因子的種類，在培養基中增減不同的生長因子C．利用高溫高壓消滅不需要的雜菌D．根據微生物對抗生素敏感性的差異，在培養基中加入不同的抗生素解析：高溫高壓能殺滅一切微生物，故不能用于從混雜的微生物群體中選擇優良的單一純種。答案：C6．獲得純凈培養物的關鍵是()A．將用于微生物培養的器皿、接種用具和培養基等器具進行滅菌B．接種純種細菌C．適宜環境條件下培養D．防止外來雜菌的入侵解析：防止雜菌入侵，是獲得純凈培養物的關鍵。在實驗室培養微生物，一方面要為培養的微生物提供合適的營養和環境條件，另一方面要保證其他微生物無法混入。答案：D7．下列有關平板劃線接種法的操作錯誤的是()A．將接種環放在火焰上灼燒B．將已冷卻的接種環伸入菌液中蘸取一環液C．蘸取菌液和劃線要在火焰旁進行D．劃線時要將最后一區的劃線與第一區的劃線相連答案：D8．牛肉膏蛋白胨培養基中加入瓊脂這一理想的凝固劑，下列關于瓊脂的說法不正確的是()A．不被所培養的微生物分解利用，對所培養的微生物無毒害作用B．在微生物生長溫度范圍內保持固體狀態C．瓊脂凝固點低，利于微生物的生長D．瓊脂在滅菌過程中不會被破壞，透明度好，凝固力強解析：瓊脂作為一種理想的凝固劑，是由其本身的性質決定的，瓊脂不會被微生物利用且對其無毒害作用，在滅菌過程中不會被破壞，透明度好。答案：C9．將接種后的培養基和一個未接種的培養基都放入37℃A．對比觀察培養基有沒有被微生物利用B．對比分析培養基上是否生有雜菌C．沒必要放入未接種的培養基D．為了下次接種時再使用解析：對照說明培養基是否被雜菌所污染。答案：B10．采用干熱滅菌、灼熱滅菌、高壓蒸汽滅菌、紫外線照射等幾種方法，可分別殺死哪些部位的雜菌()A．接種環、吸管、培養基、接種室B．吸管、接種環、培養基、接種箱C．培養基、接種環、吸管、接種箱D．培養皿、吸管、培養基、雙手答案：B11．若大腸桿菌和圓褐固氮菌混合在一起采用下列哪組培養基可將它們分離()A．加食鹽的培養基和蛋白胨培養基B．伊紅——美藍培養基和無氮培養基C．斜面培養基和液體培養基D．加青毒素的培養基和液體培養基解析：大腸桿菌的代謝產物可與伊紅和美藍結合，使菌落呈綠色，并帶金屬光澤，圓褐固氮菌能自行固氮，可用無氮培養基選擇。答案：B12．下列與微生物相關的各項敘述中，正確的是()A．無機氮源可以為某些微生物提供能量B．欲獲得大腸桿菌原生質體，需用纖維素酶處理細胞壁C．控制大腸桿菌抗藥性的基因位于擬核中的DNA上D．流感病毒雖含有簡單的細胞器，但必須在宿主細胞內才能合成多種蛋白質解析：無機氮源如NH3，在氧化成HNO3中釋放的能量，可以作為硝化細菌的能源。大腸桿菌細胞壁中無纖維素；細菌抗藥性基因位于質粒上；病毒無細胞結構。答案：A13．下列關于配制培養基的有關敘述中，正確的是()A．制作固體培養基必須加入瓊脂B．發酵工程中一般用液體培養基C．氮源主要是為微生物提供能量D．牛肉膏只為微生物提供氮元素解析：制作固體培養基時必須加入凝固劑。瓊脂是常用的凝固劑，但不是唯一的凝固劑，例如明膠也可作為凝固劑；發酵工程一般都是用液體培養基，原因是液體培養基便于調節pH、溫度、溶氧等，而且液體培養基還能有利于微生物充分利用營養物質；氮源主要是作為微生物合成蛋白質和核酸的原料；牛肉膏主要為微生物提供糖類、有機氮化合物、磷酸鹽和維生素等。答案：B14．關于滅菌和消毒的不正確理解是()A．滅菌是指殺滅環境中的一切微生物的細胞、芽孢和孢子B．消毒和滅菌的實質是相同的C．接種環用灼燒法滅菌D．常用的消毒方法有煮沸消毒法、紫外線法、化學藥劑法解析：滅菌與消毒是兩個概念。滅菌是指殺滅一定環境中的所有微生物的細胞、芽孢和孢子。根據不同的材料選用不同的滅菌方法，如接種環用火焰燒灼法，培養基用高壓蒸汽滅菌法等。消毒是指使用強烈的理化因素殺死物體內外所有的微生物，包括芽孢和孢子。答案：B15．實驗室用于分離出與大腸桿菌混雜的酵母菌，培養基的要求是(多選)()A．添加瓊脂 B．不加氮源C．添加青霉素 D．pH調節到7．0～8．0答案：AC二、非選擇題16．某自來水可能受到生活污水的污染(國家飲用水標準規定每升飲用水中大腸桿菌不超過3個)，可用伊紅美藍培養基檢測自來水中大腸桿菌的數量。在此培養基上，大腸桿菌菌落呈深紫色。(1)配制伊紅美藍培養基時，除蛋白胨、乳糖、伊紅、美藍等原料外，還需要____________________。在這些成分中，能為大腸桿菌提供氮源的是________。(2)培養基最常用的滅菌方法是________________。滅菌和消毒的區別在于滅菌殺死了全部的____________________。(3)在上圖的系列稀釋操作中，依次將1mL液體移入下一個盛有________mL蒸餾水的試管中。稀釋的目的是________________________________________________________________。(4)過程a所用的接種方法為____________。通過培養，各培養皿中的紫色菌落如上圖所示，則自來水樣本中大腸桿菌超標____________萬倍。答案：(1)水、無機鹽和瓊脂(不答瓊脂不給分)蛋白胨(2)高壓蒸汽滅菌法微生物及其芽孢、孢子(3)9將微生物(大腸桿菌)稀釋成單個細胞，從而能在培養基上形成單個菌落(4)(稀釋)涂布平板法100017．為了獲得純度高的大腸桿菌，需要對大腸桿菌進行培養和分離。培養大腸桿菌一般用牛肉膏—蛋白胨—瓊脂培養基。(1)培養大腸桿菌，配制固體培養基的基本步驟是：計算→稱量→________→________→倒平板。(2)稱量時，由于牛肉膏比較黏稠，可以用________挑取，放在________上稱量。由于牛肉膏和蛋白胨________，稱量時動作要迅速，稱后要及時蓋上瓶蓋。(3)在牛肉膏—蛋白胨—瓊脂培養基上的大腸桿菌能生長，說明培養基含有________________等大腸桿菌生長所需的營養要素。(4)微生物純化培養可以通過多種接種方法如______________和________________等，使大腸桿菌在固體培養基上形成單個________，從而獲得純菌株。解析：考查微生物純化培養的基礎知識。配制牛肉膏蛋白胨培養基的基本步驟是：計算→稱量→溶化→滅菌→倒平板。稱量時，可用玻璃棒挑取，放在稱量紙上稱量，稱量時動作要迅速。牛肉膏蛋白胨培養基中含有大腸桿菌所需要的碳源、氮源、無機鹽、水等營養要素，所以常用來培養大腸桿菌。微生物純化培養的接種方法最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，可使大腸桿菌在固體培養基上形成單個菌落，從而獲得純菌株。答案：(1)溶化滅菌(2)玻璃棒稱量紙容易吸潮(3)碳源、氮源、無機鹽、水(4)平板劃線法稀釋涂布平板法菌落18．為驗證某種中藥牙膏是否像其廣告宣傳的一樣具有較強的抑菌功效，老師帶領生物興趣小組的同學設計了如下實驗(實驗過程符合無菌操作要求)：①用無菌水漱口，向漱口液中加入適量的該中藥牙膏；②配制牛肉膏蛋白胨固體培養基；③將上述樣品接種到培養基上，在適宜條件下進行培養；④一段時間后，對培養結果進行觀察并進行菌落計數。請分析上述實驗過程并回答下列問題：(1)培養基中牛肉膏的作用主要是為微生物生長提供____________________等營養物質；培養基滅菌常用的方法是______________________________________。(2)如何證明所用培養基已經徹底滅菌？________________________________。(3)本實驗樣品接種時最好采用______________________法。培養一段時間后，培養基表面長出菌落，每一個標準菌落來源于樣品中的________。(4)請指出本實驗設計中的一個明顯的錯誤，并加以改正。________________________________。解析：該實驗的目的是檢驗某種中藥牙膏是否有抑菌功效。從實驗的操作中可以看出，該實驗缺乏對照，應該將漱口液分為兩份，一份加牙膏，一份不加牙膏作為對照，其他操作相同。(1)、(2)牛肉膏既是碳源也是氮源，還能為細菌生長提供維生素。