ICS67.050B04中華人民共和國國家標準GB/T：19495.4-一2004轉基因產品檢測核酸定性PCR檢測方法Detectionofgeneticallymodifiedorganismsandderivedproducts-QualitativePCRmethodsbasedonnucleicacid2004-04-13發布2004-04-13實施中華人民共和國國家質量監督檢驗檢疫總局發布中國國家標準化管理委員會

GB/T19495.4-2004三次前言范圍2規范性引用文件3術語和定義4防污染措施5抽樣和制樣6原理試劑8儀器設備檢測步驃10結果判定·結果表述·12測試報告·附錄A（規范性附錄)物種特異性檢測方法附錄B（規范性附錄)篩選檢測方法·22附錄C（規范性附錄)結構基因特異性檢測方法32附錄D（規范性附錄）品系特異性檢測方法45參考文獻52

GB/T19495.4—2004GB/T19495《轉基因產品檢測》為系列標準：GB/T19495.1—2004轉基因產品檢測通用要求和定義：GB/T19495.2—2004轉基因產品檢測實驗室技術要求：GB/T19495.3—2004轉基因產品檢測核酸提取純化方法；-GB/T19495.4—2004轉基因產品檢測核酸定性PCR檢測方法；GB/T19495.5—2004轉基因產品檢測核酸定量PCR檢測方法；-GB/T19495.6—2004轉基因產品檢測基因芯片檢測方法;GB/T19495.7—2004轉基因產品檢測抽樣和制樣方法；-GB/T19495.8—2004轉基因產品檢測蛋白質檢測方法本部分附錄A、附錄B、附錄C、附錄D為規范性附錄，本部分由國家認證認可監督管理委員會提出并歸口。中華人民共和國上海出入境檢驗檢疫局和中華人民共和國天津出入境檢驗檢疫局負責起草，國家質量監督檢驗檢疫總局動植物檢疫實驗所、中華人民共和國廣州出人境檢驗檢疫局、中華人民共和國遼寧出人境檢驗檢疫局、中華人民共和國江蘇出人境檢驗檢疫局、上海市農業科學院、吉林省農業科學院參加起草。本部分起草人：潘良文、鄭文杰、沈禹飛、劉炬、張舒亞、朱水芳、草文、曹際娟、張大兵、祝長青、蔣原、潘愛虎、張明。本部分系首次發布的國家標準

GB/T19495.4—2004轉基因產品檢測核酸定性PCR檢測方法1范圍GB/T19495的本部分規定了轉基因產品檢測的核酸定性PCR方法。本部分適用于種子、飼料、食品和環境樣品中轉基因成分的定性PCR檢測2規范性引用文件下列文件中的條款通過GB/T19495的本部分的引用而成為本部分的條款。凡是注日期的引用文件.其隨后所有的修改單(不包括勒誤的內容)或修訂版均不適用于本部分，然而，鼓勵根據本部分達成協議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本部介。GB/T19495.1—2004轉基因產品檢測通用要求和定義GB/T19495.2—2004轉基因產品檢測實驗室技術要求GB/T19495.3-2004轉基因產品檢測核酸提取純化方法GB/T19495.5—2004轉基因產品檢測核酸定量PCR檢測方法GB/T19495.7—2004轉基因產品檢測油樣和制樣方法語和定義見GB/T19495.1確立的術語和定義適用于本部分防污染措施按照GB/T19495.2-2004的規定執行5抽樣和制樣按照GB/T19495.7-2004規定的方法執行。原理6.1一般原理定性分析包括對測試樣品目標核酸序列的篩選檢測和(或）特異性檢測在設置合適的對照和在檢測下限的情況下，定性檢測結果要清楚判斷樣品是否為轉基因產品，本檢測方法包括：目標序列的擴增和檢測;擴增片段特異性的確證。6.2PCR擴增目標序列的擴增是在反應緩沖液中,脫氧核糖核酸三磷酸、寡核苷酸引物在DNA聚合酶的作用下進行的催化反應。在反應混合體系中不應存在DNA聚合酶的抑制劑。DNA擴增是一個循環的過程通過加熱使雙螺旋DNA變性成為單鏈核酸；在合適的溫度下引物和目標序列發生退火反應；在合適的溫