檢驗標本的采集與保存

臨床檢驗質量控制與技術培訓中心

前言

臨床檢驗的目的是為臨床提供準確可靠的實驗診斷數據，為了保證實驗數據的可靠性，在檢驗醫學中必須堅持全面質量控制(totalqualitycontrol,TQC)，全過程質控包括實驗前、實驗中、實驗后三個階段的質量控制。在實驗誤差中實驗前誤差占總誤差的70%左右，應引起醫務工作者的重視。臨床對檢驗科的要求準確----結果準確，恒定的準確及時---回報和信息反饋及時有用---對治療或診斷有幫助送檢程序驗檢申請標本采集分析前處理申請單提出采樣，運送接收，編排，處理橋梁------紐帶醫，護，技三者關系：醫生護士技師送檢過程（樣本采集）采樣要求：時間，部位，狀況，體位，飲食，容器，添加劑及用量；運送要求：采樣后處理，保存條件，運送條件，送達時間；標本信息：采樣時間，特殊狀況記錄

一生物學因素的影響及其控制

年齡：新生兒，乳酸脫氧酸(LD)、蘋果酸脫氫酶(MD)（成人12-50U/L）異檸檬酸脫氫酶(ICD)（成人：238-686U/L）高于成人2-3倍，以ALP和ACP為例隨年齡增長其結果發生的變化見表1：表1：不同年齡組血清磷酸酶的活性（U/L)年齡ALPACP新生兒35-1053-6一個月70-2506.5-111-3歲70-2106.5-113-10歲70-1803.5-910-16歲100-2753-10成人21-92<5.52.妊娠的影響

妊娠：妊娠期由于胎兒的生長發育影響，其血漿生化指示變化見表2表2：妊娠期主要血漿變化指標及其機制

機制變化血漿運輸蛋白↑血液稀釋體重及代謝增加凝血系統機能↑需要增加造成相對缺乏CRP↑甲狀腺素脂類、銅和鐵蛋白質量↑TP,ALB降低腎小球濾過率、肌酐清除率上升凝血因子活性↑

PT、APTT↓FIB↑鐵、鐵蛋白缺乏血沉加快3.飲食的影響（1）進食：血清中多數酶不受飲食影響，對ALP、AST影響較大，ALP增加20%，AST增加50%，TG增加50%，SB、P增加15%，ALT，K+增加40%，TP、ALB、BUN、Ca、T-ch增加50%左右，尤其是采血的前一天晚上暴飲暴食，對很多結果會產生明顯的影響，主要影響生化儀的比色系統3.飲食的影響（2）饑餓：48小時可使膽紅素升高24%，做糖耐量試驗前3天內，飲食中碳水化合物不得少于300g/日，否則糖耐量曲線可能偏高；還可使TG,TC,TP,apo,BUN降低，Cr,UA升高。3.飲食的影響（3）飲酒：飲酒可引起血清谷氨酸脫氫酶(GLD)、亞鐵氧化酶（CP）AST、ACT、UA,乳酸,r-GT升高，降低GLU;長期大量飲酒使AST升高40%，ALT20%、r-GT52-75%、CK43%。4.運動的影響原因：出汗和激素濃度變化

GLU,WBC,CK,CKMB,UA,Cr升高,可在數日內消失。劇烈運動可使脂肪酸迅速下降，繼爾升高，丙酮酸、乳酸升高300%，PCO2下降，pH升高。而劇烈肌肉運動可使血清中多種酶活性增高，以健康人劇烈運動后，休息時間酶活性變化為例，ALT在2小時最先增高，CK在11小時達到峰值（正常值10-180U/L）增高達116%，CK最高可達7000U/L，持續60小時后才恢復正常，AST在5小時增加41%采血時間的選擇應在何時采樣？上次采樣后多長時間？一天內的什么時間？上次飲食后多長時間？服藥后多長時間？采血時間的選擇K上午比下午低；T3夏季比冬季低；V-D3在夏季較高；SB,Fe清晨最高，血Ca中午最低。表3：部分檢驗指標的晝夜變化

檢驗指標峰值期（H）低值期（H）增加幅度%促腎上腺皮質激素腎上腺皮質激素睪酮促甲狀腺激素催乳素醛固酮血管緊張素血紅蛋白鐵鉀白細胞計數6-105-82-420-25-72-40-

66-1014-1814-1614-200-

421-320-247-1310-1212-1410-1222-242-423-14-10150-200180-20030-505-1580-10060-80120-1408-1550-705-1050-100采血方式的選擇止血帶的使用：止血帶的使用不當，會影響某些指標的濃度；使用時間過長：

Alb,Ca,ALP,AST等↑5~10%，BUN↓；PH↓;細胞內K外移，引起假性增高；病人反復攥拳會使血K上升0.8mmol/L.建議：止血帶使用應少于1分鐘!采血方式的選擇體位的變化

坐位與臥位相比，靜脈滲透壓增加；臥位：血容量相對較大，血液中物質被稀釋，濃度下降。建議：為使檢驗結果具有可比性，應統一采血體位，保證血液相對平衡。對檢驗有影響的治療和操作手術:CRP,Alb,CK,BUN….輸液和輸血:Hb,K,LDH….穿刺，活檢，注射，觸診，全身按摩內窺鏡對檢驗有影響的治療和操作透析體能應激—測力，負荷訓練，心電圖安慰劑，藥品精神緊張:改變激素水平，Alb,GlU,FC,TC↑標本種類血液：全血，血漿，血清；尿液：晨尿，隨機尿，24h尿，餐后尿…體液：腦脊液，胸腹水，胃液…大便：晨便，隨機便…其它…檢驗目的

生化微生物常規特檢免疫對標本的要求，取決于檢驗目的、細胞內外液中化學成份的變化靜脈血與毛細管血的區別：毛細管中葡萄糖高于靜脈血，而乳酸及丙酮酸靜脈血高于毛細血管血。靜脈血葡萄糖可與毛細血管血差別22%，其他變化不明顯。全血與血漿的區別：只有RBC中待測物濃度與血漿中相似時才可以用全血分析，血漿中含水約93%，全血中含水約81%，某些溶于水的物質如GLU、BUN，血漿會比全血高，紅細胞壓積顯著升高者，其差別會更大。血液標本的采集---一般原則1.用血清/選擇合適的抗凝劑；2.避免用溶血標本；3.不用脂血；4.空腹12~14小時；血液標本的采集---5.在輸液和治療前采血/最早在停止輸液后1小時采血；6.盡可能在上午7~9點采樣；7.輸入脂肪乳和營養制劑，應在8小時以后采血；8.在病歷和申請單上記錄樣本采集的準確時間溶血的影響1.細胞內外成分不同；K,LDH,ACP,AST…2.溶血產生的色素干擾測定；特別干擾波長300-500nm物質顯色的測定；3.細胞內某些酶的釋放，參與反應。溶血的分類顯性：

肉眼可見，Hb可達20mg/dl;隱性：

PLT,WBC被破壞，Hb未釋放，可使K,ACP,Mg升高4.臨床化學指標在紅細胞和血漿中濃度的差異項目

單位紅細胞血漿紅細胞/血漿LDACPASTALTKMgCrCO2NaClU/L58000360600U/L2003.067.0U/L10002540.0U/L167256.7mmol/L1004.422.7mmol/L5.02.22.4mmol/L15997.21.6mmol/L19.026.00.78mmol/L16.01400.11mmol/L52.01040.55

溶血的原因

1.采血后血從注射器快速注入試管，2.混勻含添加劑的試管時用力過猛；3.定位不準，采血不順；4.止血帶使用時間過長，血管內溶血；溶血的原因5.血液與抗凝劑比例不當；6.采血點，器具不潔；7.采血過程有空氣進入；8.全血放置時間太長；9.離心力過大。。。。防止溶血的建議

標準化操作

正確和合理使用抗凝劑！脂血的干擾產生原因

高蛋白飲食空腹時間不夠輸入脂肪乳及營養制劑；干擾機制

脂類取代水，濁度干擾，光吸收增加，正確使用抗凝劑目的：需血漿或全血特別注意：

種類劑量比例：多—血球破裂

少---部分凝集不抗凝血標本的采集普通生化

肝炎類激素，腫瘤標志物………血液標本的采集---生化檢驗特殊生化檢測：蛋白電泳---必須用血清---不得反復凍溶；血氨---置于無氨的玻璃器皿中，放于冰水中，快速送檢；乳酸----用全血或血漿，不可用止血帶；血氣分析---采集動脈血2.0ml，肝素抗凝；血液標本的采集---生化檢驗特殊生化檢測糖耐量：按要求抽5次—空腹，30‘，60’，120‘，180’---普通管肌酐廓清：留24小時尿，同時抽血2.0ml。選擇合適的抗凝劑

血常規：EDTA-Na2/EDTA-K2：靜脈采血2.0ml;血沉：枸櫞酸鈉抗凝，采血1.6ml.(蔗糖水試驗同）酸溶血(Ham’s)試驗：普通管2ml.（查狼瘡細胞，24小時血塊退縮同）堿性磷酸酶（AKP)積分：送化驗單！選擇合適的抗凝劑

血凝及血栓分析(包括D-二聚體）：枸櫞酸鈉/檸檬酸鈉—空腹采血4.0ml,4小時內測定；血流變：肝素抗凝，空腹采血4.5ml,2小時內作完；細菌培養：取靜脈血5~10ml，以無菌手續立即注入專用培養瓶，輕輕搖勻，立即送檢—保溫！選擇合適的抗凝劑

流式細胞項目

一般要求：EDTA-K3抗凝，采血0.5~2ml;6h內測完----冷藏保存。活化血小板分析：不扎止血帶，棄去前1.0ml血，輕搖勻后立即送檢。標本的保存及運輸標本處置不當，可因血細胞的代謝，蒸發，化學反應，微生物降解，滲透壓改變，氣體逸散等，使某些指標發生變化；

Glu,CO2:降低；K,TP,Cl:升高；SB,CK被光分解。正確保存及運送標本1.減少標本在室溫下的放置時間—不超過一小時；2.及時送檢；3.選者合適的存放/運輸條件---低溫或室溫；4.盡量避光；5.避免劇烈碰撞或搖動。尿液標本的收集

1.尿常規：晨尿/飯后2~3小時尿—不超過2小時；2.尿沉渣：晨尿！不得少于10ml.3.培養：留取晨尿中段尿—無菌-專用管！4.尿生化定量：24小時尿，記尿量；5.尿液蛋白分析：晨尿。表5：尿液常規檢驗標本的采集：標本類型檢查內容應用理由

晨尿蛋白質長時間濃縮標本、陽性率高鏡檢尿液的濃度及滲透壓高，細胞形態保存好細菌、亞硝酸鹽、葡萄糖消耗試驗尿液中膀胱內停留時間長，細菌有足夠的生長時間，能充分對亞硝酸鹽和糖起作用隨意尿下午2-4小時尿留24小時尿留12小時尿空腹尿餐后尿尿常規尿膽原代謝物定量aDIS計數葡萄糖葡萄糖方便、實用臨床意義大避免尿液成分的時間差別尿沉渣定量糖尿病診斷糖尿病診斷尿液標本的收集

防污染：特別注意：

容器清潔停止用藥3天~1周；計量準確！尿液細菌培養標本的采集：A：標本的收集：需在應用抗菌藥物之前或停用抗菌藥5d之后留取標本，尿液在膀胱內停留6-8h以上。（1）清潔排尿法：女性患者用肥皂或碘優清洗外陰，然后以清水沖洗尿道口周圍，擦干并排出前段尿液后，留取中段尿；男性患者應翻轉包皮沖洗，用2%紅汞或1：1000新潔爾滅消毒尿道口。

（2）膀胱穿刺法：穿刺時膀胱應充盈，皮膚嚴格消毒后用19號或20號針頭的注射器在恥骨聯合距臍1/3處穿刺。膀胱穿刺適應癥有：有尿路感染的臨床癥狀，但中段尿細菌總數很低，又難確定感染源；嬰幼兒新生兒不能用導管者；懷疑有厭氧菌感染。糞便的留取新鮮，足量，防污染！留取有粘液，膿液的部分—常規，細菌培養；疑有2號病者，糞便培養取液樣部分，并立即送檢以便及時接種，不能延誤。痰及上呼吸道標本的采集：

A：標本的采集：自然咳痰，要求患者清晨留取，留取前用清水漱口3次，之后用力咳出。咳痰困難者用霧化蒸氣吸入以利痰液咳出。幼兒可以用手指輕叩胸骨柄上方以誘發咳痰；要求：1.在用抗菌藥前采集；2.上呼吸道標本：通常采用無菌棉拭子。

B：氣管穿刺法：僅用于昏迷患者，由臨床醫師進行。

C：纖維支氣管鏡抽吸：通常用于在給患者行纖維支氣管鏡檢查時順便抽取。

D：胃液抽取法：多用于可疑患有肺結核的患者在有可能將痰液咽下的情況時采取。血液培養1.采集時間：一般在發熱初期或發熱高峰時采集，原則上選擇在抗菌藥物應用之前，對已用藥而因病情不允許停藥的患者，也應在下次用藥前采集；血液培養2.采集的部位和采集頻率：增加采樣頻率和多部位采樣，可提高陽性率，至少24小時內不同部位采集3次或更多次；3.標本采集的容量：采血量以每瓶8~10ml為宜，兒童和嬰幼兒，分別采集樣本3~5mL和1~2mL不等，骨髓采集量一般為1~2