標準解讀

GB/T 17999.5-1999是一項中華人民共和國國家標準，全稱為《SPF雞酶聯免疫吸附試驗》。該標準規定了使用酶聯免疫吸附試驗（ELISA）方法對無特定病原體（Specific Pathogen Free, 簡稱SPF）雞進行檢測的詳細操作流程、要求及判定標準，旨在確保實驗結果的準確性和可比性，適用于SPF雞群中特定抗原或抗體的檢測。

標準內容概覽：

  1. 范圍：明確了本標準適用的對象是SPF雞，以及采用ELISA技術檢測的目標，包括但不限于病毒、細菌等病原體的特異性抗體或抗原。

  2. 規范性引用文件：列出了實施本標準時需要參考的其他相關標準和文獻，這些文件對于理解與執行測試至關重要。

  3. 術語和定義：解釋了在標準中使用的專業術語，如酶聯免疫吸附試驗（ELISA）、無特定病原體雞（SPF雞）等，確保讀者對基本概念有共同的理解。

  4. 試劑與材料：詳細說明了進行ELISA測試所需的各種試劑、抗體、酶標板、洗液等的規格要求和質量控制標準，確保實驗材料的可靠性和一致性。

  5. 儀器設備：列舉了實施ELISA測試所必需的儀器設備，如酶標儀、洗板機、離心機等，并對其性能指標提出了具體要求。

  6. 樣品采集與處理：規定了如何從SPF雞采集血樣或其他樣本，以及樣本預處理的步驟，確保樣品的代表性且不影響檢測結果。

  7. 試驗步驟：詳述了ELISA測試的操作流程，包括固相載體的準備、樣本和標準品的稀釋、加樣、孵育、洗滌、加入酶標抗體、底物顯色、讀取吸光度等關鍵步驟。

  8. 結果判斷：提供了判斷陽性或陰性的標準曲線制作方法、臨界值確定原則以及結果解讀規則，確保檢測結果的科學性和準確性。

  9. 精密度與準確度：描述了如何評估試驗重復性、再現性以及與參考方法比較的準確性，以驗證實驗方法的可靠性。

  10. 試驗報告：規定了試驗報告應包含的信息，如樣品信息、試驗條件、結果數據、結論及必要的解釋等，確保信息的完整性和透明度。


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  • 被代替
  • 已被新標準代替，建議下載現行標準GB/T 17999.6-2008
  • 1999-11-10 頒布
  • 2000-04-01 實施
?正版授權
GB/T 17999.5-1999SPF雞酶聯免疫吸附試驗_第1頁
GB/T 17999.5-1999SPF雞酶聯免疫吸附試驗_第2頁
GB/T 17999.5-1999SPF雞酶聯免疫吸附試驗_第3頁
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GB/T 17999.5-1999SPF雞酶聯免疫吸附試驗-免費下載試讀頁

文檔簡介

TCS.65.020.30B41中華人民共和國國家標準GB/T17999.5-1999SPF雞酶聯免疫吸附試驗SPFchickennzyme-linkedimmunosorbentassay1999-11-10發布2000-04-01實施國家質量技術監督局發布

GB/T17999.5-1999酶聯免疫吸附試驗(ELISA)是國外監測SPF雞淋巴白血病病毒感染的通用方法。我國建立的淋巴白血病ELISA方法敏感性高、特異性強、重復性好,已廣泛用于商品種雞場淋巴白血病的凈化和SPF雞場淋巴白血病病毒感染的監測,本標準在此基礎上.規定了SPF雞酶聯免疫吸附試驗。SPF雞微生物學質量控制國家系列標準.包括SPF雞微生物學監測總則和9種SPF雞微生物學檢測方法。本標準為《SPF雞酶聯免疫吸附試驗》。SPF雞微生物學檢測方法還包括以下部分：GB/T17999.1—1999SPF雞紅細胞凝集抑制試驗;GB/T17999.2-1999SPF雞血清中和試驗；GB/T17999.3—1999SPF雞血清平板凝集試驗；GB/T17999.4—1999SPF雞瓊脂擴散試驗；GB/T17999.6—1999SPF雞旺敏感試驗;GB/T17999.7—1999SPF雞雞白痛沙門氏菌檢驗：GB/T17999.8—1999SPF雞試管凝集試驗；GB/T17999.9—1999SPF雞間接免疫熒光試驗。本標準由中華人民共和國農業部、國家科學技術部提出本標準由農業部畜牧獸醫司歸口。本標準起草單位：農業部實驗動物研究中心。本標準主要起草人：陳德威、張冰、趙立紅、黃進、李軍。

中華人民共和國國家標準GB/T17999.5—-1999SPF雞酶聯免疫吸附試驗SPFchicken--Enzyme-linkedimmunosorbentassay1范圍本標準規定了酶聯免疫吸附試驗所用試劑、材料,操作程序及結果判定等本標準適用于SPF雞感染淋巴白血病病毒后的群特異性抗原的監測。2原理檢測SPF雞蛋清中禽白血病病毒主要群特異性抗原P27的方法為雙抗體夾心酶聯免疫吸附試驗先用抗P27抗體包被酶標板，然后與蛋清作用，蛋清中的P27與包被抗體結合，洗去未結合的物質。再加人日RP-兔抗P27抗體，作用后洗去未結合的酶標物。加入底物溶液，出現顏色變化。顏色變化的速度及程度與樣品中P27的含量有關。3試劑和器材3.1試劑3.1.1包被抗體(免抗P27IG）.3.1.2陽性抗原(P27)。3.1.3陰性抗原。3.1.4被檢蛋清。3.1.5HRP-兔抗P27。3.1.6包被液：0.05mol/L、pH9.6碳酸鹽緩沖液配制：碳酸鈉1.59g·碳酸氫鈉2.93g.蒸水加至1000mL3.1.7洗滌液：H7.4.PBS-TWeen20配制：0.01mol/L、pH7.4PBS1000ml,吐溫-200.5mL。3.1.8底物溶液；H5.0磷酸鹽-檸檬酸緩沖液-OPD-H.O。配制：0.2mol/L磷酸氫二鈉溶液25.7mL.0.1mol/L檸檬酸溶液24.3mL·蒸雷水50mL·鄰苯二胺(OPD)40mg.30%H.O.0.15mL.3.1.9終止液：2mol/L硫酸。3.2器材3.2.1酶標板3.2.2移液器3.2.3恒溫培養箱3.2.4ELISA讀數儀。保作程

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