標準解讀
GB/T 17494-1998是一項關于馬傳染性貧血病(Equine Infectious Anemia, EIA)檢測的技術規范,具體聚焦于間接酶聯免疫吸附試驗(Indirect Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, iELISA)方法。該標準為確保實驗的準確性和可比性提供了詳細的指導原則和操作流程。
標準概覽
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范圍:規定了使用間接ELISA技術檢測馬血清或血漿中針對馬傳染性貧血病毒(EIAV)抗體的方法。適用于馬屬動物EIA的診斷篩查及流行病學調查。
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規范性引用文件:列出了實施本標準時應參考的其他相關國家標準或國際標準,確保試驗所用試劑、設備及操作符合既定質量要求。
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術語和定義:明確了關鍵術語,如間接ELISA、陽性對照、陰性對照等,幫助讀者理解標準中的專業詞匯。
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試劑與材料:詳細描述了所需試劑如抗原、酶標抗體、底物等的制備、保存條件及來源要求,以及實驗所需的儀器設備標準。
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樣本采集與處理:規定了采樣方法、樣本類型(血清或血漿)、采集后的處理步驟及儲存條件,確保樣本質量滿足檢測要求。
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試驗步驟:
- 包括了從微孔板的準備、樣本與試劑的加入順序、孵育條件、洗滌步驟到顯色反應及終止的全過程,每一步都有具體的操作指導和時間控制。
- 強調了實驗過程中應控制的變因,如溫度、濕度等,以減少實驗誤差。
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結果判斷:基于吸光度值(OD值),制定了判斷樣本陽性和陰性的臨界值確定方法,包括陰陽性對照的設置及結果解釋準則。
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精密度與準確性:通過重復性試驗和再現性試驗評估方法的精密度,確保不同實驗室間結果的一致性,并提供了驗證方法準確性的途徑。
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試驗報告:要求記錄實驗的所有細節,包括樣本信息、實驗條件、結果數據及最終結論,以便追溯和審核。
實施意義
此標準旨在為獸醫診斷實驗室提供一套統一、標準化的iELISA檢測流程,以提高馬傳染性貧血病診斷的可靠性和效率。通過遵循這些嚴格的標準操作程序,可以有效監控并控制EIA的傳播,保護馬匹健康,同時為馬業的可持續發展提供科學依據。
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文檔簡介
ICS.11.220B41中華人民共和國國家標準GB/T17494-1998馬傳染性貧血病間接ELISA技術規程RulesofindirectELISAtechniqueforequineinfectiousanemiadisease1998-08-31發布1999-01-01實施國家質量技術監督局發布
中華人民共和國國家標準馬傳染性貧血病間接ELISA技術規程B/T17494—1998中國標準出版社出版發行北京西城區復興門外三里河北街16號郵政編碼:100045電話:63787337、637874471999年1月第一版2005年1月電子版制作書號:155066·1-15412版權專有侵權必究舉報電話:(010)68533533
GB/T17494-1998麗馬傳染性貧血病(簡稱馬傳貧,下同)的流行,曾給我國養馬業造成巨大的經濟損失。經過多年的防制,在全國范圍內取得顯著成效,已達到控制標準。為消滅馬傳貧,提供一個先進有效、特異敏感、反應快速、操作方便、易于推廣的檢測方法,是十分必要的。為此制定馬傳染性貧血病間接ELISA技術規程。馬傳貧間接ELISA技術自1983年建立以來,已在全國主要養馬省區推廣應用十余年之久,在馬傳貧防制工作中發揮了重要作用。特別是研制的試劑實現了標準化、商品化,并以低耗優質的產品質量,為該方法推廣應用奠定了基礎,在這方面我們已走在世界前列。本標準的附錄A、附錄B、附錄C都是標準的附錄。本標準由中華人民共和國農業部提出。本標準由中華人民共和國農業部畜牧獸醫司歸口。本標準由中國農業科學院哈爾濱善醫研究所負責起草。本標準起草人:戴玉坤。
中華人民共和國國家標準馬傳染性貧血病間接ELISA技術規程GB/T17494-1998RulesofindirectELISAtechniqueforequineinfectiousanemiadisease范圍本標準規定了馬傳染性貧血病間接ELISA技術規程的測定原理、儀器設備、試劑、配制溶液、操作步驃、結果判定。本標準適用于檢測馬血清中的馬傳貧疫毒抗體。可用于生產和經營馬匹者對未注射馬傳貧疫苗馬匹的檢疫,馬傳貧病馬的定性,也可用于對注射馬傳貧疫苗馬匹的免疫狀態進行測定、2引用標準下列標準所包含的條文,通過在本標準中引用而構成為本標準的條文。本標準出版時,所示版本達為有效。所有標準都會被修訂,使用本標準的各方應探討使用下列標準最新版本的可能性。NY127一1987馬傳貧酶聯免疫吸附試驗(ELISA間接法)抗原、酶標記抗體制造及檢驗試行規3測定原理用特制的馬傳貧病毒抗原(NY127),包被聚苯乙烯微量板孔,使免疫反應在固相載體上進行。當被檢血清中有馬傳貧病毒抗體存在時,則與孔壁上的抗原形成抗原-抗體復合物,再與酶標記的抗體(抗馬免疫球蛋白)反應,最后通過測定酶作用底物催化后的產物,進行定性、定量抗體測定。4儀器設備吸管:1mL、5mL、10mLi量桶:50mL、100mL、1000mL;燒杯:50mL、100mL;玻璃滴管:每滴體積約20~30kL;血清稀釋板:20孔板每孔容積為1mL;定量加液器:1mL分裝定量;微量吸液器:50KL、100L;分析天平:感量0.001g:托盤天平;
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