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文檔簡介

熒光光度分析法測定維生素B對同一物質而言，若εbC＜1（＜0.05），即溶液的組成量度極稀時，熒光強度F與溶液的組成量度C有以下關系：

F=2.303ФI0εbC

Ф：熒光效率I0：入射光強度ε:熒光物質的摩爾吸光系數b：樣品池的厚度

＜

I0和b當固定時，

F=K’C0FCC樣品

F=K’C

F樣品VB2的C（HAc）=0.1mol/L溶液在紫外光照射下，發出黃綠色熒光，可直接進行熒光測定。pH=2.9,λ激發370nm，467nmλ發射

527nmVB2，核黃素PROCEDURE1

維生素B2系列標準溶液的配制0.1mol/LHAc準確吸取VB2貯備液(125g/ml)

0.50ml定容50.0ml搖勻1.25g/mlVB2

操作液編號123456VB2

操作液(ml)0.002.004.006.008.0010.00用0.1mol/LHac稀釋至(ml)25.00熒光強度F相對熒光強度F’2待測溶液的配制取樣品溶液

5.00ml

0.1mol/LHAc定容25.0ml搖勻待測溶液3

標準曲線繪制1）儀器預熱（激發光波長360nm，熒光波長510nm）。2）以系列標準液6號液為標準，調節熒光強度F為90左右。3）固定熒光測定條件不變。分別測定下列標準液1~6號液（由稀倒濃）的熒光強度F，并記錄。4）以溶液組成量度C為橫坐標，相對熒光強度F’，為縱坐標，繪制標準曲線。0F’C(g/ml)4樣品測定1）在相同的熒光測定條件下，測定樣品液的熒光強度F。2）從標準曲線上查出對應的組成量度，再乘以5，得試樣中維生素B2的組成量度。C待測0F’C(g/ml)DATA

編號

1234567VB2

操作液(ml)0.002.004.006.008.0010.005.00樣品用0.1mol/LHac稀釋至(ml)25.00VB2標準溶液組成量度(g/ml)熒光強度F相對熒光強度F’實驗結果：CVB2=QUESTION

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