第一章概論1.血液生理概要2.血液標本的采集、送檢、保存與處理3.血液標本的抗凝4.血涂片的制備5.血細胞常用的染色方法第一章概論1.血液生理概要第一節血液生理概要§血液的組成§血液主要理化性質§血液功能第一節血液生理概要血液的組成血漿=血清+凝血因子血液的組成血漿=血清+凝血因子臨床檢驗——概論課件血液理化性質血量：占體重6%-8%，小兒>成人，男性>女性，女性妊娠期間可增加23%-25%(血漿增加量大于紅細胞增加量)。顏色：紅色（血紅蛋白），動脈鮮紅色（HbO2高），靜脈暗紅色（Hbred高），脂血乳白色，嚴重貧血患者顏色變淺。CO或氰化物中毒血液櫻紅色。懸浮穩定性：紅細胞表面唾液酸根帶負電荷，形成Zeta電位使紅細胞相互排斥。粘滯性：主要取決于紅細胞比容和血漿粘度，粘度受血漿中纖維蛋白原、球蛋白等大分子影響，其濃度越高，粘度越高。凝固性：數分鐘內自行凝固。比密和滲透濃度pH7.35-7.45血液理化性質血量：占體重6%-8%，小兒>成人，男性>女性，考點2血液的功能§運輸功能運送氧氣、營養（葡萄糖、氨基酸、礦物質）、代謝產物（CO、尿素）§協調功能激素、酶§維護機體內環境穩定水電解質平衡、酸堿平衡、體溫穩定§防御功能白細胞、抗體、補體、細胞因子、血小板、凝血因子考點2血液的功能§運輸功能運送氧氣、營養（葡萄糖、氨基第二節

血液標本采集一、血液標本種類：全血=血細胞+血漿，用于：臨床血液學分析血漿=全血-血細胞，用于：臨床生化

凝血因子測定

血清=血自然凝固后析出的液體用于：臨床生化臨床免疫學分析第二節血液標本采集一、血液標本種類：二、采血方法靜脈采血法F:\臨檢視屏\靜脈采血1.flv動脈采血法皮膚采血法采血方法二、采血方法靜脈采血法F:\臨檢視屏\靜脈采血1.flv采血（一）靜脈采血法1、適用：適用于絕大多數臨床檢驗2、部位：體表的淺靜脈均可肘部靜脈——最常用手背靜脈內踝靜脈股靜脈頸外靜脈靜脈采血部位（一）靜脈采血法1、適用：適用于絕大多數臨床檢驗肘部靜脈——3、器材：①注射器：不同型號（5~10ml）②容器：硅化處理玻璃試管塑料試管③壓脈帶④消毒碘酒棉球4、優點：可滿足絕大部分檢驗需要3、器材：①注射器：不同型號（5~10ml）4、優點：可滿足臨床檢驗——概論課件5、注意：①注射器和容器必須干燥②抽血不宜過快，以免產生氣泡或溶血③要拔掉針頭再徐徐注入容器④若遇病人暈厥時勿驚慌，可采取：平臥休息嗅芳香氨酊指按“人中”“合谷”等穴位措施5、注意：措施（二）皮膚采血法（毛細血管采血法）1、適用：需血微量的檢查2、部位：手指耳垂指足跟WHO推薦：左手無名指指端內側（二）皮膚采血法（毛細血管采血法）1、適用：需血微量的檢查23、器材：①采血針：一次性采血針②75%酒精棉球和消毒干棉球③微量吸管(20微升)3、器材：4、優缺點：

優點：方便，快捷末梢循環受多種因素影響(血液末梢循環、溫度、采血情況、局部感染)標本混有組織液采血量受限疼痛明顯缺點4、優缺點：末梢循環受多種因素影響缺點5、注意：1.穿刺部位消毒酒精干后方可穿刺2.燒傷病人應選擇皮膚完整處采血3.拭去第一滴血液4.血流不暢時，自采血部位遠端向指尖稍加壓力，切勿用力擠壓皮膚，防止組織液混入5.一人一針5、注意：（三）動脈采血法1、適用：用于血氣分析2、部位：股動脈等3、器材：專用采血器4、注意：采血后立即封閉針頭，避免與空氣接觸，及時送檢，最好在30分鐘內檢測（三）動脈采血法（四）真空采血法（負壓采血法）1、適用：適用絕大多數臨床檢驗尤其適宜于病房和野外流動采血2、部位：全身淺靜脈①真空采血裝置套筒式頭皮靜脈式②真空采血管：③壓脈帶④消毒碘酒棉球3、器材（四）真空采血法（負壓采血法）①真空采血裝置套筒式3真空采血裝置套筒式頭皮靜脈式真空采血裝置套筒式頭皮靜脈式真空采血管真空采血管臨床檢驗——概論課件4、優點：①封閉：減少醫務人員感染減少容器間轉移減少交叉污染保護環境②減少溶血③保證標本質量4、優點：【方法學評價】皮膚采血法＜開放式靜脈采血法＜真空采血法【方法學評價】【質量控制】要注意影響標本質量的因素(qualitycontrol)1.患者飲食、運動和精神狀態（結果假性偏高）2.勿擠壓皮膚3壓脈帶使用時間應少于1分鐘(濃縮、瘀滯、缺氧)4.避免溶血（AST、K+）5.一側手臂靜脈輸液時應從對側手臂取血6.二側手臂同時進行靜脈輸液，應選擇輸液穿刺點的遠心端取血【質量控制】(qualitycontrol)1.患者飲食、臨床檢驗——概論課件5、血標本處理：盡快檢驗、生物安全唯一標識、接收拒收合適的條件保存（一般置于4℃，1個月（-20℃），3個月以上（-70℃），標本存放需加塞，防止水分揮發）6、實驗結果分析：影響因素結合臨床及時與臨床溝通5、血標本處理：盡快檢驗、生物安全6、實驗結果分析：影響因素鞏固血漿與血清區別？嚴重貧血從血外觀怎樣辨認？靜脈采血最常用采血部位？末梢采血最常用采血部位？皮膚采血法缺點？末梢采血時為什么切勿用力擠壓？靜脈采血時為什么避免溶血？靜脈采血時為什么不能在輸液端采血?鞏固血漿與血清區別？思考？為什么末梢采血推薦左手無名指指尖內側？思考？為什么末梢采血推薦左手無名指指尖內側？松馳的琴弦，永遠奏不出時代的強音。謝謝大家松馳的琴弦，謝謝大家第三節抗凝劑選擇常用的抗凝劑有EDTA草酸鹽肝素枸櫞酸鹽抗凝——用物理或化學方法除去或抑制血液中的某些凝血因子的活性，阻止血液凝固。抗凝劑——能夠阻止血液凝固的物質。第三節抗凝劑選擇常用的抗凝劑有EDTA抗凝——用臨床檢驗——概論課件1）抗凝原理：與血中鈣離子結合成螯合物，使Ca2+失去凝血作用，從而阻止血液凝固。1、乙二胺四乙酸鹽（EDTA-Na2,EDTA-K2）1）抗凝原理：1、乙二胺四乙酸鹽2）應用：①適用：多項血液學檢查，尤其是血小板計數特別適用于全血細胞分析血細胞比容測定②不適用：凝血象檢查和血小板功能檢查

因為：EDTA影響血小板聚集

2）應用：2、草酸鹽1）抗凝原理：溶解后解離的草酸根與血中鈣離子結合成草酸鈣沉淀，使Ca2+失去凝血作用。2）應用：溶解度好、價廉①適用：一般血液學檢查

②不適用：凝血象檢查

因為：▲對凝血V因子保護差

▲形成的草酸鹽沉淀影響自動凝血儀

2、草酸鹽3、肝素1）抗凝原理：抗凝機制復雜

①與ＡT-Ⅲ結合抑制凝血活酶的形成②抑制血小板聚集與釋放反應③滅活絲氨酸蛋白酶,抑制凝血酶形成

2）應用：①適用：適用于絕大多數檢查（不影響細胞體積,不易溶血）尤其是細胞培養和紅細胞滲透脆性實驗②不適用：不適合血液學一般檢查因為：▲易引起白細胞聚集▲血涂片羅氏染色有藍色背景3、肝素4、枸櫞酸鹽1）抗凝原理：與鈣離子結合成螯合物，從而阻止血液凝固。2）應用：①適用：血沉測定（1:4）凝血功能測定（1:9）輸血保養液4、枸櫞酸鹽①含有K+、Na+的抗凝劑不能用于測定K+、Na+的標本；②EDTA、氟化物、草酸鹽等不能用于測定Ca2+的標本，因為Ca2+可與它們形成不溶性物質。5、使用抗凝劑應注意：①含有K+、Na+的抗凝劑不能用于測定K+、Na+的標本；5嚴格掌握抗凝劑與血液的比例血液和抗凝劑的比例過高或過低都會影響標本的質量。血液比例過高時(采血過量)，由于抗凝劑相對不足。血漿中出現微凝血塊的可能性增加，阻塞檢驗儀器，影響檢驗指標血液比例過低

(采血不足)，抗凝劑相對過剩對許多檢驗指標會造成嚴重影響嚴格掌握抗凝劑與血液的比例血液和抗凝劑的比例過高或過低都會影

第四節血液涂片制備和細胞染色一、血液涂片制備F:\臨檢視屏\末梢采血、血涂片制備.flv臨檢視屏\末梢采血、血涂片制備.flv二、血液細胞染色F:\臨檢視屏\血涂片染色.flv臨檢視屏\血涂片染色.flv第四節血液涂片制備和細胞染色一、血液涂片制備一、血液涂片制備厚薄要適宜，頭體尾要明顯，細胞分布要均勻，血膜邊緣要整齊，并留有一定的空隙。一、血液涂片制備引起血涂片分布不均的主要原因：推片邊緣不整齊，用力不均勻，載片不清潔。引起血涂片分布不均的主要原因：染料堿性染料：為陽離子染料，能接受質子，與細胞內酸性成分結合，染成藍色。主要用于細胞核染色。如美藍/亞甲藍、天青酸性染料：為陰離子染料，能釋放質子，與細胞內堿性成分結合，染成紅色。主要用于細胞質染色。如伊紅染料堿性染料：為陽離子染料，能接受質子，與細胞內酸性成分結合二、血液細胞染色(一)瑞氏染色法(Wright'sstain)1．瑞氏染料（復合染料）酸性染料伊紅(E-)堿性染料亞甲藍(M+，又名美藍)美藍容易氧化為一、二、三甲基硫堇等次級染料(即天青)瑞士染液放置越久，染色效果越好。原因：越多亞甲藍轉化為天青B.甲醇的作用：①溶解美藍和伊紅，解離為M+和E-；②脫水作用，固定細胞形態，增強染色效果。二、血液細胞染色(一)瑞氏染色法2．染色原理是染料透入被染物并存留其內部的一種過程，①物理的吸附作用，②化學的親和作用，嗜酸性顆粒——堿性——與酸性染料——粉紅色；細胞核蛋白——酸性——與堿性染料——紫藍色或藍色；中性顆粒——等電狀態——與伊紅和美藍——染淡紫紅色。(一)瑞氏染色法瑞士染色原理pI蛋白質pH+伊紅(E-)pH-亞甲藍(M+)3pH值的影響:細胞各種成分均屬蛋白質（兩性電解質）最適pH（6.4-6.8）瑞士染色原理pIpHpH3pH值的影響:細胞各種成3pH值的影響:染色所用玻片必須清潔，無酸堿污染。配制瑞氏染液必須用優質甲醇，稀釋染液必須用緩沖液，沖洗用水應近中性。新鮮配制的染料偏堿，須在室溫貯存一定時間，貯存時間愈久，染色效果愈好。原因：越多亞甲藍轉化為天青B.DeamGilliland等采用吸光度比值作為瑞氏染液的質量規格。3pH值的影響:

(二)吉姆薩染色法吉姆薩染液由天青、伊紅組成。對細胞核和寄生蟲(如瘧原蟲等)著色較好胞質和中性顆粒則染色較差。復合染色法(二)吉姆薩染色法

[質量控制]

1．血涂片制備血膜由厚到薄逐漸過度；血膜的體尾交界部位，紅細胞分布均勻，既不重疊又互相緊靠相連。2．血液細胞染色[質量控制]鞏固針對血細胞比容高、血粘度高/貧血患者應該怎樣制備血涂片？瑞士染液中甲醇的作用？瑞士染液pH范圍？血涂片染色后最佳觀察位置是？鞏固針對血細胞比容高、血粘度高/貧血患者應該怎樣制備血涂片？種子牢記著雨滴獻身的叮囑，增強了冒尖的勇氣

Thankyou種子牢記著雨滴獻身的叮囑，Tha

第一章概論1.血液生理概要2.血液標本的采集、送檢、保存與處理3.血液標本的抗凝4.血涂片的制備5.血細胞常用的染色方法第一章概論1.血液生理概要第一節血液生理概要§血液的組成§血液主要理化性質§血液功能第一節血液生理概要血液的組成血漿=血清+凝血因子血液的組成血漿=血清+凝血因子臨床檢驗——概論課件血液理化性質血量：占體重6%-8%，小兒>成人，男性>女性，女性妊娠期間可增加23%-25%(血漿增加量大于紅細胞增加量)。顏色：紅色（血紅蛋白），動脈鮮紅色（HbO2高），靜脈暗紅色（Hbred高），脂血乳白色，嚴重貧血患者顏色變淺。CO或氰化物中毒血液櫻紅色。懸浮穩定性：紅細胞表面唾液酸根帶負電荷，形成Zeta電位使紅細胞相互排斥。粘滯性：主要取決于紅細胞比容和血漿粘度，粘度受血漿中纖維蛋白原、球蛋白等大分子影響，其濃度越高，粘度越高。凝固性：數分鐘內自行凝固。比密和滲透濃度pH7.35-7.45血液理化性質血量：占體重6%-8%，小兒>成人，男性>女性，考點2血液的功能§運輸功能運送氧氣、營養（葡萄糖、氨基酸、礦物質）、代謝產物（CO、尿素）§協調功能激素、酶§維護機體內環境穩定水電解質平衡、酸堿平衡、體溫穩定§防御功能白細胞、抗體、補體、細胞因子、血小板、凝血因子考點2血液的功能§運輸功能運送氧氣、營養（葡萄糖、氨基第二節

血液標本采集一、血液標本種類：全血=血細胞+血漿，用于：臨床血液學分析血漿=全血-血細胞，用于：臨床生化

凝血因子測定

血清=血自然凝固后析出的液體用于：臨床生化臨床免疫學分析第二節血液標本采集一、血液標本種類：二、采血方法靜脈采血法F:\臨檢視屏\靜脈采血1.flv動脈采血法皮膚采血法采血方法二、采血方法靜脈采血法F:\臨檢視屏\靜脈采血1.flv采血（一）靜脈采血法1、適用：適用于絕大多數臨床檢驗2、部位：體表的淺靜脈均可肘部靜脈——最常用手背靜脈內踝靜脈股靜脈頸外靜脈靜脈采血部位（一）靜脈采血法1、適用：適用于絕大多數臨床檢驗肘部靜脈——3、器材：①注射器：不同型號（5~10ml）②容器：硅化處理玻璃試管塑料試管③壓脈帶④消毒碘酒棉球4、優點：可滿足絕大部分檢驗需要3、器材：①注射器：不同型號（5~10ml）4、優點：可滿足臨床檢驗——概論課件5、注意：①注射器和容器必須干燥②抽血不宜過快，以免產生氣泡或溶血③要拔掉針頭再徐徐注入容器④若遇病人暈厥時勿驚慌，可采取：平臥休息嗅芳香氨酊指按“人中”“合谷”等穴位措施5、注意：措施（二）皮膚采血法（毛細血管采血法）1、適用：需血微量的檢查2、部位：手指耳垂指足跟WHO推薦：左手無名指指端內側（二）皮膚采血法（毛細血管采血法）1、適用：需血微量的檢查23、器材：①采血針：一次性采血針②75%酒精棉球和消毒干棉球③微量吸管(20微升)3、器材：4、優缺點：

優點：方便，快捷末梢循環受多種因素影響(血液末梢循環、溫度、采血情況、局部感染)標本混有組織液采血量受限疼痛明顯缺點4、優缺點：末梢循環受多種因素影響缺點5、注意：1.穿刺部位消毒酒精干后方可穿刺2.燒傷病人應選擇皮膚完整處采血3.拭去第一滴血液4.血流不暢時，自采血部位遠端向指尖稍加壓力，切勿用力擠壓皮膚，防止組織液混入5.一人一針5、注意：（三）動脈采血法1、適用：用于血氣分析2、部位：股動脈等3、器材：專用采血器4、注意：采血后立即封閉針頭，避免與空氣接觸，及時送檢，最好在30分鐘內檢測（三）動脈采血法（四）真空采血法（負壓采血法）1、適用：適用絕大多數臨床檢驗尤其適宜于病房和野外流動采血2、部位：全身淺靜脈①真空采血裝置套筒式頭皮靜脈式②真空采血管：③壓脈帶④消毒碘酒棉球3、器材（四）真空采血法（負壓采血法）①真空采血裝置套筒式3真空采血裝置套筒式頭皮靜脈式真空采血裝置套筒式頭皮靜脈式真空采血管真空采血管臨床檢驗——概論課件4、優點：①封閉：減少醫務人員感染減少容器間轉移減少交叉污染保護環境②減少溶血③保證標本質量4、優點：【方法學評價】皮膚采血法＜開放式靜脈采血法＜真空采血法【方法學評價】【質量控制】要注意影響標本質量的因素(qualitycontrol)1.患者飲食、運動和精神狀態（結果假性偏高）2.勿擠壓皮膚3壓脈帶使用時間應少于1分鐘(濃縮、瘀滯、缺氧)4.避免溶血（AST、K+）5.一側手臂靜脈輸液時應從對側手臂取血6.二側手臂同時進行靜脈輸液，應選擇輸液穿刺點的遠心端取血【質量控制】(qualitycontrol)1.患者飲食、臨床檢驗——概論課件5、血標本處理：盡快檢驗、生物安全唯一標識、接收拒收合適的條件保存（一般置于4℃，1個月（-20℃），3個月以上（-70℃），標本存放需加塞，防止水分揮發）6、實驗結果分析：影響因素結合臨床及時與臨床溝通5、血標本處理：盡快檢驗、生物安全6、實驗結果分析：影響因素鞏固血漿與血清區別？嚴重貧血從血外觀怎樣辨認？靜脈采血最常用采血部位？末梢采血最常用采血部位？皮膚采血法缺點？末梢采血時為什么切勿用力擠壓？靜脈采血時為什么避免溶血？靜脈采血時為什么不能在輸液端采血?鞏固血漿與血清區別？思考？為什么末梢采血推薦左手無名指指尖內側？思考？為什么末梢采血推薦左手無名指指尖內側？松馳的琴弦，永遠奏不出時代的強音。謝謝大家松馳的琴弦，謝謝大家第三節抗凝劑選擇常用的抗凝劑有EDTA草酸鹽肝素枸櫞酸鹽抗凝——用物理或化學方法除去或抑制血液中的某些凝血因子的活性，阻止血液凝固。抗凝劑——能夠阻止血液凝固的物質。第三節抗凝劑選擇常用的抗凝劑有EDTA抗凝——用臨床檢驗——概論課件1）抗凝原理：與血中鈣離子結合成螯合物，使Ca2+失去凝血作用，從而阻止血液凝固。1、乙二胺四乙酸鹽（EDTA-Na2,EDTA-K2）1）抗凝原理：1、乙二胺四乙酸鹽2）應用：①適用：多項血液學檢查，尤其是血小板計數特別適用于全血細胞分析血細胞比容測定②不適用：凝血象檢查和血小板功能檢查

因為：EDTA影響血小板聚集

2）應用：2、草酸鹽1）抗凝原理：溶解后解離的草酸根與血中鈣離子結合成草酸鈣沉淀，使Ca2+失去凝血作用。2）應用：溶解度好、價廉①適用：一般血液學檢查

②不適用：凝血象檢查

因為：▲對凝血V因子保護差

▲形成的草酸鹽沉淀影響自動凝血儀

2、草酸鹽3、肝素1）抗凝原理：抗凝機制復雜

①與ＡT-Ⅲ結合抑制凝血活酶的形成②抑制血小板聚集與釋放反應③滅活絲氨酸蛋白酶,抑制凝血酶形成

2）應用：①適用：適用于絕大多數檢查（不影響細胞體積,不易溶血）尤其是細胞培養和紅細胞滲透脆性實驗②不適用：不適合血液學一般檢查因為：▲易引起白細胞聚集▲血涂片羅氏染色有藍色背景3、肝素4、枸櫞酸鹽1）抗凝原理：與鈣離子結合成螯合物，從而阻止血液凝固。2）應用：①適用：血沉測定（1:4）凝血功能測定（1:9）輸血保養液4、枸櫞酸鹽①含有K+、Na+的抗凝劑不能用于測定K+、Na+的標本；②EDTA、氟化物、草酸鹽等不能用于測定Ca2+的標本，因為Ca2+可與它們形成不溶性物質。5、使用抗凝劑應注意：①含有K+、Na+的抗凝劑不能用于測定K+、Na+的標本；5嚴格掌握抗凝劑與血液的比例血液和抗凝劑的比例過高或過低都會影響標本的質量。血液比例過高時(采血過量)，由于抗凝劑相對不足。血漿中出現微凝血塊的可能性增加，阻塞檢驗儀器，影響檢驗指標血液比例過低

(采血不足)，抗凝劑相對過剩對許多檢驗指標會造成嚴重影響嚴格掌握抗凝劑與血液的比例血液和抗凝劑的比例過高或過低都會影

第四節血液涂片制備和細胞染色一、血液涂片制備F:\臨檢視屏\末梢采血、血涂片制備.flv臨檢視屏\末梢采血、血涂片制備.flv二、血液細胞染色F:\臨檢視屏\血涂片染色.flv臨檢視屏\血涂片染色.flv第四節血液涂片制備和細胞染色一、血液涂片制備一、血液涂片制備厚薄要適宜，頭體尾要明顯，細胞分布要均勻，血膜邊緣要整齊，并留有一定的空隙。一、血液涂片制備引起血涂片分布不均的主要原因：推片邊緣不整齊，用力不均勻，載片不清潔。引起血涂片分布不均的主要原因：染料堿性染料：為陽離子染料，能接受質子，與細胞內酸性成分結合，染成藍色。主要用于細胞核染色。如美藍/亞甲藍、天青酸性染料：為陰離子染料，能釋放